鹽酸小檗堿片含量測(cè)定方法的改進(jìn)

張?jiān)角?/p>

【摘要】目的 改進(jìn)鹽酸小檗堿片含量測(cè)定的方法。方法 用流動(dòng)相溶解和改變過(guò)濾方式的方法處理樣品。結(jié)果 經(jīng)過(guò)三種方法的對(duì)比，改進(jìn)方法獲得滿意結(jié)果。結(jié)論 改進(jìn)的兩種方法可靠，可用于鹽酸小檗堿片樣品溶液的制備。

【關(guān)鍵詞】鹽酸小檗堿片；高效液相色譜法；含量測(cè)定

【中圖分類號(hào)】R927.2 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】ISSN.2095-6681.2017.36..02

鹽酸小檗堿片是一種抗菌藥，臨床上主要用于治療腸道感染、如腸胃炎等。鹽酸小檗堿片的含量測(cè)定的方法標(biāo)準(zhǔn)收載于《中國(guó)藥典》2015年版二部[1]中，其含量測(cè)定的方法采用HPLC方法。在檢驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)含量測(cè)定項(xiàng)下由于對(duì)樣品的處理不盡完善，導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果偏低。同時(shí)也有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[2]。因此對(duì)樣品處理方法進(jìn)行了相應(yīng)的改進(jìn)。分別采用流動(dòng)相溶解并超聲的方法和增加微孔濾膜

（0.45 μm）過(guò)濾棄去初濾液的方法。

1 儀器與試藥

Agilent 1260高效液相色譜儀；電子天平（SARTOROUS CP225D）；鹽酸小檗堿對(duì)照品（來(lái)源：中國(guó)藥品生物制品檢驗(yàn)所，批號(hào)：110713-201613，標(biāo)示含量：86.8%）；鹽酸小檗堿片樣品（規(guī)格：0.1 g；市售品；批號(hào)：160613）；色譜純乙腈；水為純化水；其他試劑均為分析純?cè)噭?/p>

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Kromasil C18（4.6×250 mm，5 μm）；流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液[0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液和0.05 mol/L庚烷磺酸鈉溶液（1：1），含0.2%三乙胺，并用磷酸調(diào)節(jié)

pH值至3.0]-乙腈（40：60）；流速：1.0 ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：263 nm；進(jìn)樣量：20 μL；柱溫：35℃；理論塔板數(shù)不低于3000；小檗堿峰與相鄰雜質(zhì)峰分離度大于1.5。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱量鹽酸小檗堿對(duì)照品20 mg，置于50 mL容量瓶中，加沸水使溶解，并稀釋至刻度，搖勻。精密量取

5 mL，置于50 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備

2.3.1 藥典法

取供試品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于40 mg鹽酸小檗堿），置于100 ml量瓶中，加沸水適量使溶解，放冷后用水稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，棄去初濾液（約8 ml），精密量取續(xù)濾液5 ml，置50 ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.3.2 改進(jìn)方法

取供試品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于40 mg鹽酸小檗堿），置于100 ml量瓶中，加流動(dòng)相使溶解，超聲20分鐘，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，棄去初濾液約8 ml，精密量取續(xù)濾液5 ml，置50 ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.4 測(cè)定方法

精密量取20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

2.5 線性范圍

精密稱量鹽酸小檗堿對(duì)照品20 mg，置于100 ml容量瓶中，加沸水溶解，并稀釋至刻度，搖勻；精密量取1 mL、2 mL、4 mL、8 mL、16 mL、32 mL置于50 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度。按照2.1色譜條件，精密量取20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以濃度C（μg/mL）為橫坐標(biāo)，峰面積A為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸。線性方程為

A=192.9C-154.25（R2=0.9996；n=6），表明濃度在4.07～130.27 μg/mL范圍內(nèi)，呈良好的線性關(guān)系。

2.6 精密度實(shí)驗(yàn)

用線性關(guān)系考察中鹽酸小檗堿濃度為32.57 μg/mL的對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)得的RSD為0.63%。

2.7 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

精密稱取同一批號(hào)的供試品5份，按2.3項(xiàng)下方法制備供試品溶液，含量測(cè)定結(jié)果的RSD為0.55%，表明重復(fù)性好。

2.8 回收率實(shí)驗(yàn)

精密稱取含量已知的鹽酸小檗堿片細(xì)粉（約相當(dāng)于鹽酸小檗堿30 mg），分別置100 mL容量瓶中，精密加入對(duì)照品，按照2.3.1方法配制成溶液。進(jìn)樣，記錄色譜圖并計(jì)算加樣回收率，平均回收率為97.75%，RSD為1.3%。測(cè)得結(jié)果見(jiàn)表1。

通過(guò)對(duì)同一批鹽酸小檗堿片采用三種方法同時(shí)3次的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。

結(jié)果表明，改進(jìn)方法1略優(yōu)于藥典法，而改進(jìn)方法2顯著優(yōu)于前兩種方法，更接近于檢驗(yàn)的真實(shí)值。

3 討 論

三種方法相比較，不同的溶解方法和過(guò)濾方式對(duì)鹽酸小檗堿片的測(cè)定結(jié)果影響不盡相同，改進(jìn)后的方法測(cè)得的含量準(zhǔn)確性更高。分析在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，由于溶解方法和過(guò)濾方式的不合理、不完善將導(dǎo)致部分藥品的含量測(cè)定的結(jié)果達(dá)不到國(guó)家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。

因此，建議采用流動(dòng)相超聲溶解并用微孔濾膜

（0.45 μm）過(guò)濾棄去初濾液的方法進(jìn)行含量測(cè)定，可達(dá)到良好效果。

參考文獻(xiàn)

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).《中國(guó)藥典》2015年版二部[M]，北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015.6：875.

[2] 蔣 寧.鹽酸小檗堿片含量測(cè)定方法的改進(jìn)[J].海峽藥學(xué)，2012，24（9）：64-66.

本文編輯：吳 衛(wèi)