伊維菌素水包油口服液對駱駝寄生蟲的驅(qū)蟲效果試驗

杜 軍

（寧夏大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，寧夏 銀川 750021）

伊維菌素是一種抗生素類高效、廣譜、低毒類抗寄生蟲藥[1]，可用于防治畜禽的多種寄生蟲病，伊維菌素具有安全性能高、藥效期長、滲透性強等優(yōu)點，對體內(nèi)外寄生蟲都具有高效驅(qū)殺和防治作用，特別是對家畜的胃腸道線蟲、體外癢螨等有著強大的殺滅作用[2-6]。但由于伊維菌素幾乎不溶于水，嚴重制約著該類藥物的發(fā)展和使用。由于駱駝飼養(yǎng)方式的特殊（終年草原散牧），在養(yǎng)駝業(yè)的病害中仍以寄生蟲病為主。如何根據(jù)當?shù)丶纳x病情況和感染現(xiàn)狀，因地制宜選用高效、廣譜、低毒的抗寄生蟲藥物，就成為了長期防治駱駝寄生蟲病的主要任務(wù)。驅(qū)蟲藥物療效最確實的給藥方法是注射和口服，但駱駝是散養(yǎng)動物又不用額外補加精飼料，牧民沒有建設(shè)固定的圈舍，無法集中進行注射給藥，所以進行注射和口服給藥的方案在牧區(qū)對駱駝驅(qū)蟲不切合實際。然而牧場缺乏天然水源地，每戶牧民家中都打有深機井，駱駝在草場采食后一般3～5 d要準時回來補充飲水，所以研究在水中加入藥物進行飲水驅(qū)蟲的方法是目前給駱駝驅(qū)蟲的最佳方案。目前，伊維菌素對駱駝體內(nèi)外寄生蟲的驅(qū)殺效果研究較少，同時由于駱駝的復(fù)胃結(jié)構(gòu)與其他反芻動物相差較大，所以口服給藥比其他反芻動物生物利用度高。本研究將伊維菌素制成水包油乳劑，解決了伊維菌素極難溶于水和穩(wěn)定性差的缺點[7-8]，同時降低了傳統(tǒng)油劑毒副作用，通過雙峰駱駝驅(qū)蟲試驗為獸醫(yī)臨床新型駱駝抗寄生蟲藥物新制劑提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗藥物 1%伊維菌素溶液，100 mL/瓶，含伊維菌素10 mg/mL，由本實驗室自制。

1.2 試驗動物 在內(nèi)蒙古阿拉善左旗選擇春季未驅(qū)蟲，自然放牧的雙峰駝4群，共92只。

1.3 試驗方法

1.3.1 1%伊維菌素溶液制備 取吐溫-80、乙酸乙酯、1,2一丙二醇、乙醇、伊維菌素，置于白色三角瓶中，恒溫磁力攪拌器以300～500 r/min攪拌0.3 h，直至伊維菌素完全溶解，體系均一、透明、澄清為止；在攪拌條件下向上述溶液中慢慢滴加純化水，隨純化水加入量的增加，溶液體系先變的比較黏稠，當純化水達到40～50 g時，體系忽然變稀，流動性增大，完全透明，當純化水用量達70 g時，即得伊維菌素含量為2%的O/W型伊維菌素溶液；繼續(xù)在攪拌條件下向上述溶液中慢慢滴加純化水，隨著純化水用量的不斷增加，可得伊維菌素含量在0.1%～2%范圍內(nèi)任何一個濃度的O/W型伊維菌素溶液；也就是在獲得2%的溶液基礎(chǔ)上，可以加入任一體積的純化水，都能得到均勻分散、透明澄清的伊維菌素溶液。將制備2%伊維菌素溶液2倍稀釋后經(jīng)0.22 μm濾膜過濾，分裝，軋蓋，經(jīng)105℃滅菌30 min后，即得1%伊維菌素溶液。

1.3.2 試驗動物分組 首先對選定的試驗駱駝群體，按照驅(qū)試藥物的劑量高低，本試驗共分為4個試驗組和4個空白對照組，每個試驗組選用不同劑量的伊維菌素水包油口服液進行飲水，空白對照組不用任何驅(qū)蟲藥物，只做空白對照。

1.3.3 糞便蟲卵檢查 驅(qū)蟲試驗開始前對各組的駱駝體重、感染情況、健康狀況進行調(diào)查。各組在給藥前隨機采樣，20%的采集家畜糞便3 g，進行蟲卵檢查并體外寄生蟲感染情況檢查。給藥后注意觀察試驗動物反應(yīng)，從1～30 d不同時間的觀察數(shù)據(jù)。采用飽和蔗糖溶液漂浮集卵，玻片蟲卵計數(shù)。按1:1比例將蔗糖和水加熱溶解配制成飽和糖溶液，放涼待用。稱取采集的糞便3 g，放入乳缽中，用量筒量取30 mL清水，在乳缽中加適量清水研細糞便樣品并混勻，再加少量水混勻，并用糞篩濾去糞渣，糞液收集在250 mL的小燒杯中。用剩余量好的清水反復(fù)沖洗乳缽，直至洗凈，將全部洗液倒入盛有糞液的小燒杯中。用吸管吸取糞液2.5 mL加入到10 mm×130 mm或15 mm×150 mm的試管中，加漂浮液至距試管口1～2 cm處。在管口墊（20～30）mm×（20～30）mm大小的紙片，用拇指墊住管口，用中指和無名指夾住試管，上下顛倒搖勻糞液。用吸管繼續(xù)滴加漂浮液，直到液面高出試管口而不溢出為準，從管口一側(cè)輕輕覆以蓋玻片，靜置漂浮20～60 min。取下蓋玻片放在載玻片上置于顯微鏡下檢查，對發(fā)現(xiàn)蟲卵進行分類計數(shù)。重復(fù)以上步驟2～3次[9]。用上述方法將每個樣品逐個檢查，詳細記錄結(jié)果，計算EPG（每克糞便中蟲卵數(shù)），確定驅(qū)蟲率[10]。

表 1 驅(qū)蟲試驗駱駝分組及用藥情況表Table1 Camel grouping and Medication situation of Deworming test

EPG=蓋玻片蟲卵數(shù)之和/2.5 mL×30 mL/3 g

驅(qū)蟲率=（給藥前蟲卵數(shù)-給藥后蟲卵數(shù)）/給藥前蟲卵數(shù)×100%[11]

2 結(jié)果

2.1 糞便蟲卵檢查結(jié)果 定期進行糞便蟲卵檢查直到30 d后試驗結(jié)束，對檢出蟲卵進行計數(shù)。選擇同群飼養(yǎng)駱駝3峰剖檢，統(tǒng)計消化道線蟲蟲卵檢查結(jié)果。

2.2 按全身蠕蟲剖檢法檢查線蟲種類及數(shù)量 這與糞檢檢驗結(jié)果一致（表2），最多為毛圓線蟲和副柔線蟲，其次為奧斯特線蟲和馬歇爾線蟲及鈍刺細頸線蟲，最少為毛首線蟲[12]。

由表3和表4可見，0.2 mg/kg伊維菌素水包油口服液20 d驅(qū)蟲率均可達100%，對駱駝消化道線蟲蟲卵、網(wǎng)尾線蟲幼蟲轉(zhuǎn)陰率、減少率達94%和97%；隨著劑量的加大，伊維菌素水包油口服液對線蟲蟲卵（幼蟲）轉(zhuǎn)陰率為100%，減少率達98%以上。

2.3 體外驅(qū)蟲結(jié)果 驅(qū)蟲前大多駱駝體外寄生蟲感染比較嚴重，主要表現(xiàn)為劇癢，濕疹性炎癥、脫毛。當劑量為0.2 mg/kg時，給藥后5 d，疥螨的驅(qū)凈率為100%[12]。當劑量為0.4 mg/kg時，硬蜱和毛虱的驅(qū)凈率也明顯提高。

2.4 安全性 伊維菌素水包油口服液各劑量組試驗駱駝，采食、精神、排糞等未見異常反應(yīng)。證明試驗劑量伊維菌素水包油口服液對駱駝使用安全。

3 討論

3.1 內(nèi)蒙古的阿拉善盟素有駱駝之鄉(xiāng)的美譽，駱駝數(shù)量曾高達24萬峰，但下降的非?？?，目前養(yǎng)殖數(shù)量約在7萬峰左右。駱駝極耐干渴，不怕炎熱和寒冷，適于在沙漠和沙山上跋涉，有“沙漠之舟”的美稱。由于草源不足，生態(tài)環(huán)境惡化，使駱駝長期處于饑餓狀態(tài)，營養(yǎng)不良的駱駝，抵抗力降低，蒙受著各種疾病的困擾，使它們更易于死亡。在內(nèi)蒙古駱駝寄生蟲流行病學(xué)調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，該地區(qū)駱駝常常因感染寄生蟲病而死，通過糞便檢查確定感染有大量的各類寄生蟲，特別是消化道線蟲[13]。

表 2 試驗駱駝消化道線蟲蟲卵檢查結(jié)果Table 2 Test results of nematode eggs in digestive tract

表 3 投藥后不同時間寄生蟲EPG與蟲卵減少率Table 3 EPG and reduction rate of eggs at different times after administration

表 4 寄生蟲數(shù)量變化統(tǒng)計表Table 4 The number of parasites change

3.2 試驗結(jié)果表明，由本實驗室研制的伊維菌素水包油口服液各種劑量對駱駝體內(nèi)多種胃腸道寄生線蟲均有極佳的驅(qū)蟲效果，由試驗結(jié)果可看出驅(qū)蟲后5 d即可表現(xiàn)出明顯的效果；0.2 mg/kg劑量對毛圓線蟲、副柔線蟲、奧斯特線蟲和馬歇爾線蟲均能達到較好的驅(qū)蟲率。試驗結(jié)果顯示，該藥物對網(wǎng)尾線蟲的成蟲也有極佳的驅(qū)蟲效果。

3.3 本試驗對其中一組駱駝按高倍劑量（0.8 mg/kg）飲用伊維菌素水包油口服液，給藥后沒有駱駝表現(xiàn)出毒副作用，采食、精神、排糞等未見異常反應(yīng)，各組懷孕駱駝也未發(fā)現(xiàn)異常。由此說明該藥毒性低、安全范圍廣。

3.4 伊維菌素對家畜的胃腸道線蟲、體外寄生蟲有著特殊的療效，目前，伊維菌素對駱駝體內(nèi)外寄生蟲的驅(qū)殺效果研究較少，同時由于駱駝的復(fù)胃結(jié)構(gòu)與其他反芻動物相差較大，所以口服給藥比其他反芻動物生物利用度高。但由于伊維菌素幾乎不溶于水，嚴重制約著該類藥物的發(fā)展和使用。本試驗研制的伊維菌素水包油口服液，可以用任一比例的飲用水對其稀釋，駱駝在飲水過程中就能主動地基本準確地攝入相應(yīng)劑量的藥物，驅(qū)蟲效果良好。同時解決了伊維菌素極難溶于水和穩(wěn)定性差的缺點，降低了傳統(tǒng)油劑毒副作用，伊維菌素水包油口服液以水為基質(zhì)，因此與傳統(tǒng)油劑相比產(chǎn)品的價格更低，溶液的流動性好，臨床應(yīng)用方便，使用時可以加入任一體積的水混合，藥物在溶液中均勻分散，擴大了給藥途徑，方便了使用，試驗結(jié)果表明伊維菌素水包油口服液對駱駝體內(nèi)外寄生蟲有良好的的治療和預(yù)防作用，且使用方便、安全，為獸醫(yī)臨床新型的駱駝抗寄生蟲藥物新制劑提供了科學(xué)依據(jù)。

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