人體血液中乙醇測定方法探析

顧亞琴

摘 要：自我國新的刑法修正案頒布實(shí)施將醉酒駕駛機(jī)動(dòng)車納入刑事犯罪以來，機(jī)動(dòng)車駕駛?cè)藛T體內(nèi)血液中乙醇的測定成了此類案件定罪量刑的關(guān)鍵證據(jù)。而人體中乙醇的檢測方法也會(huì)直接影響最終結(jié)論。為此，本文主要探析目前常用的幾種血液中乙醇檢測方法，以期能對(duì)今后人體血液乙醇檢測的研究提供參考和借鑒。

關(guān)鍵詞：乙醇 毒物分析技術(shù) 毒理學(xué) 頂空氣相色譜法

中圖分類號(hào)：R115 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-3791（2018）09（a）-0225-02

乙醇也稱酒精，是各種酒類飲料的主要成分。乙醇在人體內(nèi)主要經(jīng)過胃和小腸代謝，在0.5～3h內(nèi)可完全被人體吸收。乙醇進(jìn)入人體后，95%～98%經(jīng)會(huì)通過肝代謝先被氧化成乙醛，再進(jìn)一步被氧化成乙酸，其余部分2%～5%，主要以原體形態(tài)的由尿液呼氣和汗液排出體外。大量飲用高濃度酒會(huì)造成急性酒精中毒，嚴(yán)重者會(huì)危及生命健康。同時(shí)，飲酒過量也會(huì)對(duì)社會(huì)造成較大危害，如酒后駕車造成的交通事故。

1 化學(xué)法

lieben碘仿反應(yīng)，是有機(jī)分析上常用的化學(xué)反應(yīng)方法。碘仿反應(yīng)常被用來測定新合成的化合物結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和鑒別未知物成分結(jié)構(gòu)的主要方法。碘仿是一種難溶于水的黃色固體，具有特殊臭味，作為鑒別比氯仿和溴仿好并且反應(yīng)非常靈敏。其在為乙醇檢測的原理是在堿性條件，碘可以氧化乙醇。乙醇和碘反應(yīng)生成碘仿，淺黃色沉淀。也可用碘和氫氧化鈉溶液來鑒別乙醛或甲基酮。

此外，還有conway法（微量擴(kuò)散法）在液體檢材中，加入適量飽和碳酸鈉溶液作為乙醇釋放劑，促使檢材中的乙醇揮發(fā)。用重絡(luò)酸鉀——硫酸溶液吸收氣相中的乙醇蒸氣，并把乙醇氧化成乙酸再通過自身吸收劑的顏色反應(yīng)來判斷檢材中是否含有乙醇。此外還有可以作為乙醇定性的檢測方法，如vitali反應(yīng)，主要采用氫氧化鉀和二硫化碳及鉬酸銨溶液的顏色反應(yīng)鑒別，靈敏度為1∶100?；瘜W(xué)法總體操作簡便，成本較低，對(duì)實(shí)驗(yàn)室要求不高，容易普及，但是化學(xué)法靈敏度相對(duì)較低，易受外界環(huán)境因素的影響，準(zhǔn)確性低。

2 酶法

酶法自動(dòng)分析目前已經(jīng)廣泛使用，常用的酶學(xué)測定法有兩種，分別是ADH法及乙醇氧化酶法，其原理為選用三（羥甲基）氨基甲烷-鹽酸作為緩沖體系，乙醇在乙醇脫氫酶催化作用下轉(zhuǎn)化成乙醛，并生成還原型輔酶Ⅰ。用吸光度法檢測340nm波長處的變化，同時(shí)對(duì)照參考值標(biāo)準(zhǔn)得到乙醇的濃度值。乙醇氧化酶法，其試劑組成較為簡易，不足之處是檢測的特異性弱，特別是甲醇對(duì)檢測過程的干擾大，易出現(xiàn)假陽性。ADH法相對(duì)特異， 受到甲醇或異丙醇等物質(zhì)的干擾細(xì)微，并且ADH相對(duì)更容易獲取，成本較低。目前，已有此類商品化試劑盒供應(yīng)，檢測方便快捷。酶法的不足之處在于對(duì)于反應(yīng)溫度條件比較苛刻，易受其他化學(xué)類物質(zhì)的干擾。

3 氣相色譜法

頂空氣相色譜法是在氣相色譜儀進(jìn)樣口前面增加一個(gè)頂空進(jìn)樣裝置的一種色譜化學(xué)成分檢測分析技術(shù)。常解釋為將頂空進(jìn)樣器與氣相色譜儀聯(lián)用的儀器。用于分析易揮發(fā)的微量成分，如對(duì)甲醇、乙醇等揮發(fā)性有機(jī)溶劑。頂空氣相色譜法目前主要用于我國交通事故駕駛?cè)藛T及肇事人員血液中酒精定性定量確證分析，以及中西醫(yī)藥投入市場前對(duì)其殘留物品的檢測分析、司法案件中有毒氣體和揮發(fā)性毒物的認(rèn)定分析等，它可以將被測樣品 （氣-液和氣-固）加熱平衡后，提取其中揮發(fā)氣體部分進(jìn)入氣相色譜儀。具有操作方法簡單、過程迅速、分析結(jié)果準(zhǔn)確可靠的特點(diǎn)。

采用頂空氣相色譜法，可直接對(duì)血料中的乙醇定性定量檢測。國家公安部司法部已頒布相應(yīng)的檢測技術(shù)規(guī)范，也是現(xiàn)行推廣和使用較多的方法之一。其原理是利用乙醇的易揮發(fā)性，以叔丁醇為內(nèi)標(biāo)，用頂空氣相色譜火焰離子化檢測器進(jìn)行檢測，并與平行操作的乙醇對(duì)照品進(jìn)行比較分析，以保留時(shí)間進(jìn)行定性分析；以峰面積為依據(jù)，用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量分析。色譜法是一種物理或物理化學(xué)分離分析方法。

該方法操作簡單易行，穩(wěn)定性好，雜質(zhì)干擾小。相對(duì)直接氣相色譜法，大幅減少了對(duì)色譜柱的損害，同時(shí)也無需進(jìn)行復(fù)雜的樣品提成與純化，從而大大降低分析的成本，提高精準(zhǔn)度和精密度。但是，在操作過程中也要注意確保頂空平衡溫度及平衡時(shí)間的一致性，這直接關(guān)系到分析測定的準(zhǔn)確可靠性。

4 色-質(zhì)聯(lián)用法

自1957年J.C.Holmes和F.A.Morrell首次實(shí)現(xiàn)氣相色譜和質(zhì)譜聯(lián)用以后，這個(gè)技術(shù)的發(fā)展日新月異。氣質(zhì)聯(lián)用法是同時(shí)將氣-液色譜和質(zhì)譜的特點(diǎn)結(jié)合起來，用于確診被檢樣本中不同物質(zhì)定性和定量的檢測分析途徑，其具有GC的高分辨率和質(zhì)譜的高靈敏度。氣相色譜是把混合樣本中的不同成分，按時(shí)間分離出來，而質(zhì)譜則給出的是每個(gè)組分結(jié)構(gòu)的具體信息。在所有聯(lián)用技術(shù)中氣質(zhì)聯(lián)用（即GC/MS）的發(fā)展最為完善，應(yīng)用最為廣泛?，F(xiàn)在從事化學(xué)分析和毒物分析的實(shí)驗(yàn)室及檢測機(jī)構(gòu)都把GC/MS法作為檢測定性分析的核心技術(shù)手段之一，同時(shí)GC/MS也被用于定量分析。另一方面，目前市面上銷售的有機(jī)質(zhì)譜儀、傅立葉變換質(zhì)譜（FTMS）、離子阱質(zhì)譜，還有飛行時(shí)間質(zhì)譜（TOF），磁質(zhì)譜、四極桿質(zhì)譜等分析儀器，均能和氣相色譜聯(lián)用。還有一些其他的氣相色譜和質(zhì)譜連接的方式，如氣相色譜-燃燒爐-同位素比質(zhì)譜等。當(dāng)前色-質(zhì)聯(lián)用法已經(jīng)成為檢測分析復(fù)雜混合物最為有效的手段之一。氣相色譜和質(zhì)譜由接口相連。氣質(zhì)聯(lián)用法普遍運(yùn)用于藥品的檢測、毒物的分析、生物樣品中藥物與代謝產(chǎn)物定性定量分析及未知樣品成分的確定。氣-質(zhì)譜聯(lián)用法結(jié)合了色譜定量和質(zhì)譜定性的所有優(yōu)秀性能特點(diǎn)，快捷靈敏，特異性強(qiáng)，已普遍運(yùn)用于易揮發(fā)性有機(jī)物的檢測和分析，但是該方法檢出限比不上頂空氣相色譜法而且氣相色譜質(zhì)譜儀比較昂貴，維護(hù)保養(yǎng)麻煩，不能普及使用。

在人體血液中乙醇的測定工作中，由于使用分析設(shè)備檢測方法，檢測人員測量環(huán)境以及被檢樣本的不同，產(chǎn)生得測量結(jié)果通常存在不確定性。因此，仍需要進(jìn)一步的研究和發(fā)展。

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