柏瑰珊
摘 要:結(jié)合酶抑制率法檢測(cè)原理,本文對(duì)酶抑制率法在蔬菜水果農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)中的應(yīng)用過(guò)程展開(kāi)了分析,從而對(duì)該技術(shù)的應(yīng)用前景進(jìn)行了探討。
關(guān)鍵詞:酶抑制率法;農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)
中圖分類號(hào):TS255.7 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A DOI:10.11974/nyyjs.20180133042
在蔬菜水果種植過(guò)程中,為確保產(chǎn)品質(zhì)量,普遍需要在果蔬表面噴灑農(nóng)藥。而農(nóng)藥濃度是否過(guò)量,直接關(guān)系到農(nóng)產(chǎn)品食用安全,所以還要采用可靠的檢測(cè)技術(shù)完成蔬菜水果農(nóng)藥殘留的及時(shí)檢測(cè)。就目前來(lái)看,在蔬菜水果農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)中,酶抑制率法得到了有效應(yīng)用。因此,為更好地進(jìn)行農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)管理,還要加強(qiáng)對(duì)酶抑制率法在蔬菜水果農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)中的應(yīng)用前景分析。
1 酶抑制率法應(yīng)用原理
應(yīng)用酶抑制率法進(jìn)行農(nóng)藥檢測(cè),實(shí)際是利用農(nóng)藥抑制昆蟲(chóng)神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿酶活性的原理,通過(guò)確認(rèn)膽堿酯酶抑制率測(cè)定農(nóng)藥濃度。在檢測(cè)過(guò)程中,如果存在有機(jī)磷農(nóng)藥,農(nóng)藥會(huì)與膽堿酯酶結(jié)合,導(dǎo)致乙酰膽堿無(wú)法分解[1]。而乙酰膽堿水解產(chǎn)物會(huì)與顯示劑反應(yīng),生成黃色物質(zhì)。利用分光光度計(jì)測(cè)定樣品吸光度隨時(shí)間變化值,可實(shí)現(xiàn)抑制率計(jì)算,以確認(rèn)藥品中的農(nóng)藥是否超標(biāo)。
2 酶抑制率法在蔬菜水果農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)中的應(yīng)用前景
在水果農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)中,酶抑制率法得到了廣泛應(yīng)用。分析其應(yīng)用過(guò)程,則能進(jìn)一步明確技術(shù)的應(yīng)用優(yōu)勢(shì),從而更好地實(shí)現(xiàn)技術(shù)應(yīng)用前景的判斷。
2.1 速測(cè)準(zhǔn)備
在蔬菜水果農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)中,應(yīng)用酶抑制率法需做好速測(cè)準(zhǔn)備??梢圆捎肳T-51A農(nóng)藥殘留快速測(cè)定儀,并準(zhǔn)備電子天平、刀子、剪子、比色皿、振蕩器、提取瓶、移液槍等配套工具。在試劑準(zhǔn)備上,需按照試劑說(shuō)明書(shū)完成顯色劑、緩沖液、乙酰膽堿酯酶液和底物配置制。配制完成后,需在0~4℃冰箱中保存除緩沖液外的試劑,而緩沖液可在室溫下存放。使用試劑時(shí),需利用手掌將試劑瓶搖勻,并使試劑恢復(fù)到室溫。在檢測(cè)前,需將儀器電源連通,對(duì)主機(jī)進(jìn)行預(yù)熱。在儀器經(jīng)過(guò)8s自檢后,應(yīng)確認(rèn)通道透光度是否達(dá)到100%。儀器預(yù)熱時(shí)間應(yīng)達(dá)到30min,之后需進(jìn)行空白對(duì)照。按照要求,空白對(duì)照溶液檢測(cè)變化值需達(dá)到0.3,否則將判定為酶活性不足或溫度不夠。在更換酶液或重測(cè)時(shí),需完成對(duì)照檢測(cè)。
2.2 取樣檢測(cè)
在蔬菜水果農(nóng)藥檢測(cè)上,針對(duì)葉菜類樣品需對(duì)至少8片葉子的邊緣部位或葉尖進(jìn)行剪取,剪取寬度應(yīng)在1cm左右。針對(duì)甘藍(lán)類樣品,需利用直徑1cm空心不銹鋼鉆頭在不同部位取樣。針對(duì)果皮類樣品,需在對(duì)至少3個(gè)個(gè)體的不同部位表皮取樣。針對(duì)汁液中含有破壞酶活性物質(zhì)的果蔬,需進(jìn)行表面測(cè)定[2]。在取樣時(shí),需將樣品表面泥土利用紗布擦拭干凈。考慮到果蔬不同部位農(nóng)藥量不同,需對(duì)同一批次果蔬進(jìn)行混樣稱量,即在混樣紙上完成各種樣品充分混合,然后進(jìn)行稱量,稱取克數(shù)時(shí)應(yīng)精確到小數(shù)點(diǎn)后1位。在取樣時(shí),需對(duì)1個(gè)樣品進(jìn)行3個(gè)平行樣的稱取,以減小偶然誤差。在檢測(cè)時(shí),需在向樣品提取瓶中添加5mL緩沖液,在振蕩2min后移入其它容器靜置3min。在上機(jī)測(cè)試前,需向比色皿中加入2.5mL樣品溶液,進(jìn)行100uL酶液和100uL顯色劑的順次添加,并在搖勻后靜置15min,溫度應(yīng)控制為37℃。在檢測(cè)過(guò)程中,應(yīng)使用同一方法進(jìn)行空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)。
2.3 結(jié)果處理
從檢測(cè)結(jié)果來(lái)看,正常平行樣品測(cè)定值差異不超出10%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不超出8%。在3個(gè)測(cè)量結(jié)果算術(shù)平均值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差超出50%時(shí),可判斷為檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性,否則為陰性。如果檢測(cè)結(jié)果全為0%或100%,可認(rèn)為檢測(cè)結(jié)果異常,需分析原因,重新進(jìn)行快速檢測(cè)。
2.4 前景分析
在蔬菜水果農(nóng)藥殘留檢測(cè)方面,過(guò)去普遍采用氣相色譜法、薄層色譜法等方法,需要在實(shí)驗(yàn)室中完成全部操作。為確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確,還要對(duì)檢測(cè)人員進(jìn)行專門技術(shù)培訓(xùn),不僅檢測(cè)周期較長(zhǎng),檢測(cè)費(fèi)用也較高。但是蔬菜水果作為需要盡快運(yùn)輸和售賣的農(nóng)產(chǎn)品,其質(zhì)量安全監(jiān)管需要迅速、及時(shí)。因此采用傳統(tǒng)的農(nóng)藥檢測(cè)方法,難以滿足蔬菜水果農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)要求。分析基于酶抑制率法的蔬菜水果農(nóng)藥殘留速測(cè)過(guò)程可以發(fā)現(xiàn),采用該方法可以快速完成檢測(cè)操作,并且檢測(cè)成本較低,儀器操作便利,能夠解決蔬菜水果農(nóng)藥檢測(cè)周期長(zhǎng)和費(fèi)用高的問(wèn)題。不同于常規(guī)檢測(cè)方法,采用該方法獲得的檢測(cè)結(jié)果可以準(zhǔn)確判斷是否存在檢測(cè)失誤,因此能夠保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。所以相比較而言,酶抑制率法在蔬菜水果農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)中擁有良好應(yīng)用前景。
3 結(jié)語(yǔ)
采用酶抑制率法進(jìn)行蔬菜水果農(nóng)藥殘留速測(cè),其試劑制備和樣品處理操作都較為簡(jiǎn)單,檢測(cè)人員也能輕松判斷檢測(cè)結(jié)果是否正確,所以能夠使蔬菜水果農(nóng)藥殘留檢測(cè)的及時(shí)性和準(zhǔn)確性要求得到滿足。因此,隨著相關(guān)技術(shù)的發(fā)展,相信酶抑制率法可以在蔬菜水果農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)中得到更好的應(yīng)用。
參考文獻(xiàn)
[1]張秀玲.酶抑制率法在農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管中的應(yīng)用[J].農(nóng)業(yè)開(kāi)發(fā)與裝備,2014(10):36.
[2]王柱寬.酶抑制率法在蔬菜農(nóng)殘檢測(cè)中的應(yīng)用[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)信息,2015(2):64-66.endprint