HPLC測定板藍根藥材及其制劑中表告依春含量的方法分析

梁 劍

（湘潭市中醫(yī)醫(yī)院，湖南 湘潭 411100）

HPLC測定板藍根藥材及其制劑中表告依春含量的方法分析

梁 劍

（湘潭市中醫(yī)醫(yī)院，湖南 湘潭 411100）

目的 探討HPLC用于測定板藍根及相關(guān)制劑當中表告依春的含量方法，從而控制板藍根以及其相關(guān)制劑的質(zhì)量。方法 選擇反相高效的液相色譜法，其色譜柱定SB-C18ZORBAX（5μm，150mm×4.6mm)；其流動相三乙胺-磷酸-水-乙腈（0.05∶0.73∶90.72∶8.50）；其流速為每分鐘0.7mL；其檢測波長為245nm，其柱溫為30℃。結(jié)果 在表告依春的含量測定中，其線性范圍為0.3060～0.0204μg，其r為0.9998，其平均加樣的回收率為98.99%，其RSD為1.31%。結(jié)論 高效的液相色譜法對板藍根及其相關(guān)制劑中的表告依春進行含量測定，可靠準確，能夠用于對板藍根藥材以及其相關(guān)制劑進行質(zhì)量評價。

含量測定；制劑；高效的液相色譜法；表告依春；板藍根

目前板藍根為比較常用的一種抗病毒中藥，最開始記載自《神農(nóng)本草經(jīng)》，其中表告依春系板藍根起到抗病毒作用的有效成分，也是反映該藥材及其相關(guān)制劑質(zhì)量最重要的指標；本文研究選擇反相高效的液相色譜法對板藍根藥材以及其相關(guān)制劑（包括板藍根顆粒與復(fù)方的板藍根顆粒以及板藍根含片和板藍根糖漿）當中的表告依春其含量進行測定[1-4]。報道如下。

1 資料與方法：

1.1 一般資料

l100 Agilent型高效的液相色譜儀（主要包括四元泵與自動進樣器，以及DAD的陣列二極管檢測器）；5200KQ型的超聲清洗器；211D-BP電子天平。選定表告依春的對照品以及板藍根，包括板藍根顆粒與復(fù)方的板藍根顆粒，包括板藍根含片與板藍根糖漿。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件

C18 SB ZORBAX-色譜柱（5μm，150×4.6mm），三乙胺-磷酸-水-乙腈（0.05∶0.73∶90.72∶8.50）；其流速為每分鐘0.7mL；其檢測波長為245nm，其柱溫為30℃。其高效的液相色譜可見圖1。

1.2.2 其中對照品的溶液制備

首先稱取其表告依春的對照品量1.0mg，予以精密稱定后，放置在10mL容量的量瓶中，并加流動相直至刻度，當搖勻后，在制為質(zhì)量濃度系每升0.102g的對照品溶液。

1.2.3 制備供試品溶液：

1.2.3.1 將板藍根的藥材供試品首先取粉末約為0.2g，予以精密稱定，并置于50mL的錐形瓶中，再加入20mL的水后稱重，以超聲對其提取達60min后放冷，之后再稱重，以水補足其損失的質(zhì)量并過濾，再將初濾液棄去，之后取出2mL續(xù)濾液，再以水浴蒸干，其殘渣加至流動相進行適量溶解，同時定容在10mL的量瓶當中予以搖勻，最后取出續(xù)濾液即可得到供試品的溶液。

1.2.3.2 制備板藍根顆粒的供試品

首先取出本品10袋并研細，選取2g并精密稱定，再置于50mL的錐形瓶當中，之后加入20mL的水，通過水浴加熱同時震搖將其溶解后搖勻并過濾，再將初濾液棄去，之后取2 mL續(xù)濾液以水浴蒸干，其殘渣加至流動相予以適量溶解，同時定容在10mL的量瓶當中并搖勻。

圖1 高效的液相色譜

1.2.3.3 制備板復(fù)方藍根顆粒的供試品

取出本品10袋，研細，精密量取2g，置于50mL錐形瓶中，加入20mL水，水浴加熱并振搖，使其完全溶解，過濾，取續(xù)濾液2mL，水浴蒸干，殘渣加適量流動溶解，置于10mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

1.2.3.4 制備板藍根含片的供試品溶液

取10片本品，將其研細后取0.8g并精密稱定，再置于50mL的錐形瓶之中，接著加20 mL水，以水浴加熱，同時震搖溶解，在搖勻后過濾棄去其初濾液，再取2mL續(xù)濾液予以水浴蒸干，其殘渣加入流動相進行適量溶解，之后定容在10mL的量瓶中予以搖勻。

1.2.3.5 制備板藍根糖漿的供試品溶液

精密稱定5mL本品，將其置于50mL的錐形瓶當中，之后加20mL水，予以搖勻，在搖勻后過濾掉其初濾液，再取2mL的續(xù)濾液給以水浴蒸干，其殘渣加入流動相進行適量溶解，之后定容在10mL的量瓶中予以搖勻。

1.2.4 考察線性關(guān)系

首先精密量取每升0.102g的上述對照品，將其分別放置在量瓶（10mL）中，一直加流動相到刻度并搖勻，再分別吸取對照品溶液，然后按照上述2.1的色譜條件予以測定，同時以y（峰面積），X（對照品質(zhì)量）予以線性回歸。

1.2.5 精密度試驗

先要精密量取密度為每升8.16mg的對照品溶液，共20uL，基于同樣的條件下來回進樣6次，計算出對照品的峰面積為1496.44，RSD0.58%，說明其精密度狀況良好。

1.2.6 穩(wěn)定性試驗

準備好待測的供試品溶液，然后參考上面色譜條件進行相關(guān)操作，在0h、2h、4h、8h、16h……進樣，得出最后的峰面積，根據(jù)峰面積得出平均的峰面積是1506.45，RSD1.02%。

1.2.7 重復(fù)性試驗

量取同批次板藍根藥材0.2g，稱定6份，根據(jù)以上方法制備出6份供試品溶液，精密取出20uL，然后參考上面色譜條件進行相關(guān)測定，得出表告依春質(zhì)量分數(shù)是每g中含有4.245mg，RSD1.43%。

1.2.7 加樣回收率試驗

量取既定含量的表告依春板藍根粉0.11g，稱定9份，對每3份添加等量表告依春，根據(jù)上面所講的方式來制備出供試品，進行測定。得出9份平均回收率是97.99%，RSD1.33%。

2 結(jié) 果

稱定出：①0.2g板藍根的藥材粉末，②2g板藍根的顆粒粉末，③2g復(fù)方板藍根的顆粒粉末，④0.8g板藍根的含片粉末，⑤5mL板藍根糖漿，按照1.2.1項目下的色譜條件，以外標法予以測定，同時計算各個樣品中其表告依春所占的含量，其測定結(jié)果可見下表1。

3 討 論

表1 上述樣品中其表告依春所占的質(zhì)量分數(shù)

3.1 據(jù)文獻報道，以HPLC對板藍根中其靛藍與靛玉紅等有效含量進行測量，其中靛藍與靛玉紅主要呈脂溶性，以水來提取大多提取不出，但實際的生產(chǎn)中，其板藍根則多系水提??；此外，目前板藍根于臨床上最主要的應(yīng)用是用作抗病毒藥物，由于靛藍以及靛玉紅均不具抗病毒的活性，所以靛藍以及靛玉紅的含量不適合用于板藍根以及其相關(guān)制劑的進行含量測定的指標；在本研究中，選擇RP與HPLC來測定板藍根以及其相關(guān)制劑中所含表告依春的量，應(yīng)用此法不僅重復(fù)性好，而且準確度也較高，應(yīng)予推廣。

3.2 在本文試驗中，對比甲醇一水與甲醇含酸水以及乙腈和含酸水流的動相系統(tǒng)中洗脫情況，其結(jié)果顯示：所測乙腈含酸水的流動相系統(tǒng)同甲醇一水以及甲醇含酸水相較，差異顯著，由于甲醇水系統(tǒng)能夠讓表告依春以及其他成分難于分開，所以甲醇含酸水同樣也不能夠呈較好的分離。

3.3 綜上所述，高效的液相色譜法對板藍根及其相關(guān)制劑中的表告依春進行含量測定，可靠準確，能夠用于對板藍根藥材以及其相關(guān)制劑進行質(zhì)量評價。

[1] 國家藥典委員會.中國藥典.一部[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005: 142.

[2] 徐麗華,黃芳,陳婷,等.板藍根中的抗病毒活性成分[J].中國天然藥物,2005,3(6): 359.

[3] 黃芳,熊雅婷,徐麗華,等.板藍根不同提取物中抗病毒成分表告依春在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)[J].中國藥科大學(xué)學(xué)報,2006,37 (6):519.

[4] 安益強,賈曉斌,袁海建,等.HPLC測定板藍根藥材及其制劑中表告依春的含量[J].中國中藥雜志,2008,33(18):12.

R282.71.03

B

1671-8194（2013）21-0102-02