ICAM-1和PCT與未足月胎膜早破并發(fā)絨毛膜羊膜炎的相關(guān)性研究

杜文淵，于曉霞，王小莎，劉慶，王曉玲

胎膜早破(PROM)是較為常見的產(chǎn)科并發(fā)癥，其中未足月胎膜早破（p-PROM）的發(fā)生率約為2%～3.5%[1]。絨毛膜羊膜炎（CA）是PROM的重要并發(fā)癥。目前臨床上主要通過心率、白細(xì)胞計數(shù)、降鈣素原（PCT）等來判斷PROM孕婦有無感染，但普遍認(rèn)為特異度低。有研究顯示，細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）在PROM發(fā)生過程中起著重要作用，是診斷PROM可靠的生物標(biāo)志物[2]，但是否能夠鑒別診斷p-PROM有無合并CA以及對CA的具體診斷效能，目前尚缺乏研究。為此，本研究分析了ICAM-1與p-PROM并發(fā)CA的關(guān)系及其對疾病的診斷效能。

1 對象與方法

1.1 研究對象選擇2014年1月～2016年12月本院收治的48例單純p-PROM患者（P組）、37例p-PROM并發(fā)CA患者（C組）及30例足月正常分娩的孕婦（對照組）為研究對象。p-PROM按《婦產(chǎn)科學(xué)》診斷[3]，p-PROM并發(fā)CA經(jīng)病理組織學(xué)檢查證實。P組年齡25～31（27.4±3.5）歲，孕齡29～35（32.7±4.1）w；C組年齡23～33（26.4±4.4）歲，孕齡28～36（33.4±3.8）w，其中p-PROM并發(fā)CA輕中度患者21例，p-PROM并發(fā)CA重度患者16例。對照組年齡25～31（28.4±5.0）歲，孕齡38～40（39.0±1.7）w。各組年齡、孕齡比較無顯著差異(P＞0.05)。所有研究對象均為單胎妊娠，無其他妊娠并發(fā)癥及內(nèi)外科合并癥。

1.2 標(biāo)本采集P組和C組在入院確診后、對照組在正常產(chǎn)檢或待產(chǎn)時，抽取肘靜脈血5 ml，離心分離血清凍存待檢。胎膜娩出后，距破口2 cm處，剪取全層胎膜組織2 cm×1 cm，經(jīng)生理鹽水沖凈血液和羊水后，甲醛溶液固定24 h，常規(guī)石蠟包埋、切片。

1.3 檢測指標(biāo)使用人降鈣素原（PCT）ELISE試劑盒（上海江萊生物科技有限公司），采用ELISE法檢測血清可溶性細(xì)胞間黏附分子-1(sICAM-1)和PCT水平。采用免疫組化SP法檢測胎膜組織中ICAM-1的表達(dá)水平，具體方法是：常規(guī)脫蠟、水化，加入ICAM-1一抗（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，工作濃度為1∶200），4℃過夜，PBS沖洗，加入二抗孵育20 min，最后行DAB顯色、復(fù)染、脫水、封片等處理。光鏡下見棕黃色顆粒，即可判斷ICAM-1表達(dá)陽性；胎膜ICAM-1表達(dá)水平計算方法：在高倍鏡下選取5個視野，ICAM-1構(gòu)成比=陽性細(xì)胞數(shù)/絨毛膜細(xì)胞及羊膜細(xì)胞總數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS20.00統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)，計量資料以x±s表示，兩組間比較采用t檢驗，多組間比較采用方差分析；率的比較采用χ2檢驗。繪制血清PCT與ICAM-1的ROI曲線，計算曲線下面積、95%CI及Youden指數(shù)，計算敏感度與特異度，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清PCT和sICAM-1及胎膜ICAM-1水平比較P組血清PCT、sICAM-1及胎膜ICAM-1表達(dá)水平明顯高于對照組（P＜0.05）；C組血清sICAM-1及胎膜ICAM-1表達(dá)水平明顯高于P組（P＜0.05），血清PCT與P組比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05），見表1。

2.2 不同程度p-PROM并發(fā)CA患者血清PCT和sICAM-1及胎膜ICAM-1水平比較p-PROM并發(fā)CA重度患者組血清PCT、sICAM-1及胎膜ICAM-1的表達(dá)水平明顯高于p-PROM并發(fā)CA輕中度組（P＜0.05，表2）。

2.3 血清PCT、sICAM-1水平對p-PROM并發(fā)CA患者組的診斷效能血清PCT的曲線下面積為0.638(95%CI0.611～0.872），當(dāng)Youden指數(shù)最大值為0.577，截斷點為70.36 pg/ml時，PCT對p-PROM并發(fā)CA的診斷敏感度、特異度分別為69.8%、55.4%。血清sICAM-1的曲線下面積為0.894(95%CI0.573～0.841），當(dāng)Youden指數(shù)最大值為0.613，截斷點為959.41 ng/ml時，sICAM-1對p-PROM并發(fā)CA的診斷敏感度、特異度分別為89.6%、79.1%。見圖1。

表1 各組血清PCT和sICAM -1及胎膜ICAM-1水平比較

表2 不同程度p-PROM并發(fā)CA患者血清PCT和sICAM-1及胎膜ICAM-1水平比較

圖1 血清PCT和ICAM-1的ROC曲線

3 討論

目前認(rèn)為，PROM的病因與感染、胎膜結(jié)構(gòu)破壞、機(jī)械力學(xué)及免疫等因素有關(guān)，對于p-PROM并發(fā)CA的孕婦，無論孕齡長短，都應(yīng)積極抗感染并及時終止妊娠，以提高早產(chǎn)兒的存活率。

研究證明，血清PCT在診斷細(xì)菌感染方面較傳統(tǒng)的C反應(yīng)蛋白（CRP）、白細(xì)胞計數(shù)（WBC）更勝一籌[4]。至于其在p-PROM合并感染中的應(yīng)用，p-PROM孕婦血清PCT水平顯著升高，是否存在CA對血清PCT水平的影響并不大，PCT對CA患者診斷的敏感度、特異度僅為60%、35%[3]。本研究結(jié)果與其接近，單純p-PROM孕婦與合并CA的p-PROM孕婦血清PCT水平比較無統(tǒng)計學(xué)差異，盡管PCT能夠反映CA的嚴(yán)重程度。ROC曲線中，以70.36 pg/ml為截斷點，血清PCT診斷p-PROM并發(fā)CA患者的敏感度、特異度分別為69.8%、55.4%?？梢?，PCT診斷是否并發(fā)CA的最大問題便是特異度欠佳。

ICAM-1被認(rèn)為是目前診斷PROM的可靠標(biāo)志物，羅丹等[5]認(rèn)為，血清sICAM-1診斷PROM的敏感性、特異性分別可高達(dá)100.0%、97.1%。但I(xiàn)CAM-1是否能夠鑒別診斷p-PROM有無合并CA以及對CA的具體診斷效能，目前尚缺乏研究。本研究結(jié)果顯示，p-PROM孕婦血清sICAM-1和胎膜ICAM-1水平明顯高于正常孕婦，而合并CA的孕婦呈更高表達(dá)，且隨病情嚴(yán)重程度而增加。ROC曲線分析，當(dāng)截斷點為959.41 ng/ml時，血清sICAM-1診斷p-PROM并發(fā)CA的敏感度、特異度可達(dá)到89.6%、79.1%，明顯較血清PCT提高。

綜上所述，ICAM-1與p-PROM并發(fā)CA有關(guān)，且血清sICAM-1對CA的診斷效能高于PCT。

[1]劉芳芳,李小英,黃鶯.孕婦血中細(xì)胞粘附因子-1、白介素-6與胎膜早破的關(guān)系[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2010,10(17):3394-3397.

[2]彭靜,張學(xué)勤,唐樹榮.胎膜早破孕婦血清中細(xì)胞間黏附分子1及白細(xì)胞介素18的意義[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2015,21(2):16-17.

[3]謝幸，茍文麗.婦產(chǎn)科學(xué)[M].8版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2013：133-135.

[4]霍會蠶,程國梅,崔世紅,等.降鈣素原、新蝶呤與亞臨床感染胎膜早破的相關(guān)性研究[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展,2011,20(3):190-192.

[5]羅丹,魏素梅,高嵐,等.可溶性細(xì)胞間黏附分子-1快速檢測方法在胎膜早破診斷中的價值[J].實用婦產(chǎn)科雜志,2015,31(3):232-234.