薇甘菊栽培的巨大口蘑營(yíng)養(yǎng)成分研究

莫美華，高億波，馬紫英，謝偉忠，劉春燕，黃茂俊，邱仕奇，許少嫦，喻曉明，吳英

（1.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，廣東廣州 510642）（2.廣東省林業(yè)有害生物防治檢疫管理辦公室，廣東廣州 510173）（3.中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，北京 100101）

巨大口蘑(Tricholoma gigantean Massee)，隸屬于擔(dān)子菌亞門(Basidiomycotina)、層菌綱(Hymenomycetes)、傘菌目(Agaricales)、白蘑科(口蘑科)(Tricholomataceae)、口蘑屬(Tricholoma)的一種珍稀大型食用菌。其子實(shí)體營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美，且具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抑制高血壓，抑制細(xì)菌、真菌和艾滋病毒等多種生理功能[1～6]。巨大口蘑是一種草腐型真菌，主要分解纖維素、半纖維素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，適宜的原材料有稻草、棉籽殼、玉米芯和作物秸稈等[7,8]。為了能夠更好的發(fā)掘巨大口蘑的栽培特性，提高產(chǎn)量，許多學(xué)者根據(jù)地域情況尋找其他的材料替代棉籽殼等常規(guī)材料栽培巨大口蘑。

趙承剛等利用木薯酒精渣及木薯稈屑栽培巨大口蘑，其效果明顯優(yōu)于麩皮[9]。馬紫英等以椰子殼為主要材料栽培巨大口蘑，結(jié)果表明不同成分的含量與產(chǎn)量之間有著密切的相關(guān)性[10]。郭翠英等分別用溝葉結(jié)縷草及雜木屑為主要栽培基質(zhì)，以棉籽殼、碳酸鈣和米糠為輔料，增產(chǎn)94.5%，生物效率可達(dá)155.8%[11]。福建農(nóng)科院在傳統(tǒng)栽培料棉籽殼的基礎(chǔ)上添加豆科牧草圓葉決明營(yíng)養(yǎng)配方栽培巨大口蘑具有極顯著的增產(chǎn)效果[12]。云南王元忠等嘗試用菜籽皮作培養(yǎng)料栽培的巨大口蘑，其鮮菇產(chǎn)量、粗蛋白含量、亞油酸含量都有提高[13]。

薇甘菊（Mikania micrantha）為菊科假澤蘭屬植物，多年生草質(zhì)或稍木質(zhì)藤本，具蔓生莖，又稱一分鐘一英里雜草，是世界十大惡性入侵雜草之一[14,15]。原產(chǎn)中、南美洲，現(xiàn)廣泛分布于西非、印度、東南亞、太平洋島嶼、澳大利亞等地，是危害經(jīng)濟(jì)作物和森林植被的主要害草，對(duì)入侵地的生物多樣性、生態(tài)環(huán)境及農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)的安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅[16]。

目前對(duì)該入侵植物的主要防治方法有人工清除、化學(xué)防治、種群競(jìng)爭(zhēng)和生物防治，其中生物防治為最安全有效的方法[17,18]?；瘜W(xué)防治會(huì)帶來(lái)環(huán)境污染[19,20]；種群競(jìng)爭(zhēng)需要選好物種，且要掌握好栽培時(shí)機(jī)；人工清除費(fèi)時(shí)費(fèi)工，而且清除的薇甘菊如不集中處理，其莖節(jié)又可萌發(fā)長(zhǎng)成新個(gè)體；如果焚燒即造成環(huán)境污染，多年后焚燒地幼苗又會(huì)重新生長(zhǎng)起來(lái)[21]。因此尋找新的防治方法和綜合治理措施顯得尤為迫切。本文測(cè)試了利用薇甘菊栽培的巨大口蘑的營(yíng)養(yǎng)成分，為薇甘菊栽培巨大口蘑的進(jìn)一步開發(fā)和利用提供理論依據(jù)，也為薇甘菊的綜合防治提供新方法。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 原材料

薇甘菊：野外采集，常溫陽(yáng)光下曬干，切碎，作為栽培巨大口蘑的原材料；巨大口蘑：為華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院應(yīng)用真菌研究室分離、鑒定、保藏菌種；甘蔗渣、棉籽殼、麩皮和石灰購(gòu)于廣州華業(yè)食用菌有限公司。

1.1.2 試劑

磷酸二氫鉀、無(wú)水碳酸鈉、輕質(zhì)碳酸鈣、苯酚、氫氧化鈉、氫氧化鉀、硫酸鉀和硼酸等試劑購(gòu)于廣州化學(xué)試劑廠；濃鹽酸、硝酸和高氯酸購(gòu)于廣州東紅化工廠；甲基紅購(gòu)于公私合營(yíng)新中化學(xué)廠；溴甲酚綠購(gòu)于天津市大茂化學(xué)試劑廠；硫酸鎂和輕質(zhì)碳酸鈣購(gòu)于天津福晨試劑廠；酵母粉購(gòu)于安琪酵母有限公司；葡萄糖購(gòu)于廣州偉伯化工有限公司；無(wú)水硫酸銅購(gòu)于天津中信凱泰化工有限公司；鄰苯二甲酸氫鉀、乙醇和乙醚購(gòu)于天津市瑞金特化學(xué)有限公司；除用于配制培養(yǎng)基的硫酸鎂、碳酸鈣和磷酸二氫鉀為化學(xué)純外，分析用的試劑均為分析純。

50 g/L苯酚溶液：稱取5 g苯酚（C6H6O，重蒸），用水溶解于100 mL容量瓶中，定容后搖勻，轉(zhuǎn)至棕色瓶，置4 ℃冰箱中避光貯存；

鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液：準(zhǔn)確量取9 mL鹽酸，注入1000 mL水中，搖勻。

100 mg/L葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：將葡萄糖于105 ℃恒溫烘干至恒重，稱取葡萄糖約0.1 g（精確值0.0001 g），用水溶解于1000 mL容量瓶中，定容后搖勻，置4 ℃冰箱中避光貯存，兩周內(nèi)有效；

加速劑：將600 g硫酸鉀和100 g五水合硫酸銅混勻，充分研磨后過40目篩，試劑瓶?jī)?nèi)密封保存。

鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：濃度0.05 mol/L或0.1 mol/L，用無(wú)水碳酸鈉或鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)定其濃度，精確到小數(shù)點(diǎn)后第四位。

甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑：50 mL濃度為2 g/L的溴甲酚綠95%乙醇溶液和10 mL濃度為2 g/L的甲基紅95%乙醇溶液混合。

1.1.3 培養(yǎng)基

栽培巨大口蘑的培養(yǎng)基：蔗渣41.80%，棉籽殼13.93%，薇甘菊37.16%，酵母粉0.74%，麩皮1.86%，輕質(zhì)碳酸鈣0.42%，硫酸鎂0.42%，磷酸二氫鉀0.37%，1.5%石灰。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣品制備

子實(shí)體采摘后，去除泥沙稱重，清洗，用手撕成小塊，50 ℃鼓風(fēng)干燥6 h以上，待樣品干燥至恒重后，在干燥器內(nèi)冷卻，粉碎，過60目篩，儲(chǔ)存在干燥器內(nèi)備用。

1.2.2 水分含量的測(cè)定

水分含量測(cè)定，采用重量法[22]。

1.2.3 灰分含量的測(cè)定

灰分含量測(cè)定，采用重量法[22]。

1.2.4 粗脂肪含量的測(cè)定

粗脂肪含量測(cè)定，采用索氏提取法[22]。

1.2.5 總糖含量的測(cè)定

多糖含量測(cè)定，采用苯酚-硫酸法[22]。分別吸取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液制定標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.6 粗多糖含量的測(cè)定

多糖含量測(cè)定，采用苯酚-硫酸法[22]。標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定同總糖。

1.2.7 粗纖維含量的測(cè)定

粗纖維含量測(cè)定，采用重量法[22]。

1.2.8 粗蛋白含量的測(cè)定

粗蛋白質(zhì)含量測(cè)定，采用凱氏定氮法[22]。

1.2.9 氨基酸含量的測(cè)定

氨基酸含量測(cè)定采用熒光分光光度法，參考王元忠等[23]。待測(cè)樣品置6 mol/L HCl中，于110 ℃水解24 h，用日立855-350型氨基酸分析儀測(cè)定氨基酸組成。色氨酸于堿水解后用熒光分光光度法測(cè)定。

檢測(cè)條件為柱溫：57 ℃；色譜柱：日立855-350型；反應(yīng)柱溫：134 ℃；分析時(shí)間：59 min；進(jìn)樣量20 μL；WindowNT操作系統(tǒng)；檢測(cè)波長(zhǎng)為570 nm和440 nm（脯氨酸）。

1.2.10 礦質(zhì)元素的測(cè)定

礦質(zhì)元素含量測(cè)定，采用原子吸收分光光度法(日本島津AA-6800型原子吸收分光光度計(jì))。礦質(zhì)元素的測(cè)定方法參照劉鳳枝等和李濤等的方法進(jìn)行[24,25]。

1.2.10.1 全磷的測(cè)定

全磷的測(cè)定參考劉鳳枝等的方法[24]，采用硫酸-雙氧水消煮-釩鉬黃比色法。

1.2.10.2 全鉀的測(cè)定

全鉀的測(cè)定參考劉鳳枝等的方法[24]，采用硫酸-雙氧水消煮-火焰原子吸收分光光度法。

1.2.10.3 全鈣、全鎂、全銅、全鋅、全鈉、全鐵和全錳的測(cè)定

全鈣、全鎂、全銅、全鋅、全鈉、全鐵、全錳的測(cè)定參考劉鳳枝等和李濤等的方法[24,25]，采用干灰化-稀鹽酸溶解-火焰原子吸收分光光度法。

1.2.10.4 全鎘、全鉛的測(cè)定

全鎘、全鉛的測(cè)定參考劉鳳枝等的方法[24]，采用硝酸-高氯酸消煮-火焰原子吸收分光光度法。

1.2.10.5 全汞的測(cè)定

冷原子吸收光譜法：按照《GB/T 5009.17-2003食品中總汞及有機(jī)汞的測(cè)定》進(jìn)行[26]。

1.2.10.6 全砷的測(cè)定

銀鹽法：按照《GB/T5009.11-2003食品中總砷及無(wú)機(jī)砷的測(cè)定》進(jìn)行[27]。

1.2.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用軟件DPS v9.5進(jìn)行分析，以Duncan新復(fù)極差法進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表述為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，p<0.05為差異顯著[28]。

2 結(jié)果與討論

2.1 巨大口蘑主要營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定結(jié)果

巨大口蘑主要營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定結(jié)果如表1。每100 g薇甘菊栽培巨大口蘑干子實(shí)體中的多糖、總糖、粗纖維、粗脂肪、粗蛋白、灰分含量分別為12.91 g、54.21 g、5.52 g、1.60 g、15.22 g和6.21 g。鮮子實(shí)體中的水分含量為88.56%。其多糖含量比云南野生口蘑（11.59 g）和云南栽培口蘑（8.40 g）均高[23]，且超過著名的雞樅（約7%）和價(jià)格昂貴的松茸（約7.9%）[29,30]。薇甘菊栽培的巨大口蘑多糖含量豐富，有很好的生理活性，是一種很好的保健功能食品，這表明薇甘菊是栽培巨大口蘑的一個(gè)很好的原材料。

2.2 薇甘菊栽培巨大口蘑中氨基酸含量

圖1 薇甘菊栽培巨大口蘑子實(shí)體氨基酸組成及含量測(cè)定結(jié)果Fig.1 Composition and content of amino acids in fruiting body of Tricholoma giganteum cultivated with Mikania micrantha

薇甘菊栽培的巨大口蘑子實(shí)體氨基酸測(cè)定峰圖如圖1，經(jīng)分析得出薇甘菊栽培巨大口蘑中氨基酸的組成及含量，如表2。

圖1中顯示有18個(gè)氨基酸的峰，除16號(hào)峰為NH4以外，其他均為氨基酸的峰，說明巨大口蘑中含有17種氨基酸，但是色氨酸在測(cè)定過程中損失了。

氨基酸總量為15.13 g/100 g，必需氨基酸占氨基酸總量的40.38%，必需氨基酸與非必需氨基酸的比值（E/N）為0.68，符合FAO/WHO提出的理想蛋白質(zhì)必需氨基酸含量達(dá)到40%以上，E/N在0.6以上的要求。所以薇甘菊栽培的巨大口蘑所含氨基酸種類豐富，人體必需氨基酸占總氨基酸的比例高，有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。

表1 薇甘菊栽培的巨大口蘑子實(shí)體主要營(yíng)養(yǎng)成分含量Table 1 Content of main nutritional components in fruiting body of Tricholoma giganteum cultivated with Mikania micrantha

表2 薇甘菊栽培的巨大口蘑子實(shí)體中氨基酸的組成及含量Table 2 Composition and content of amino acids in fruiting body of Tricholoma giganteum cultivated with Mikania micrantha

2.3 薇甘菊栽培巨大口蘑中礦物質(zhì)元素含量

薇甘菊栽培的巨大口蘑子實(shí)體礦質(zhì)元素含量測(cè)定結(jié)果如表3。其中含有人體所需的大量元素K、Na、Ca、Mg及微量元素Fe、Cu、Mn、Zn等，其中K的含量大于云南野生口蘑和云南栽培口蘑的含量，而鈉的含量低于云南野生口蘑和云南栽培口蘑[23]，這說明薇甘菊栽培的巨大口蘑屬于低鈉高鉀食品，進(jìn)一步證明了它為一種健康食品。

表3 不同來(lái)源巨大口蘑子實(shí)體中礦質(zhì)元素含量比較Table 3 Comparison of mineral element content in different sources of fruiting body of Tricholoma giganteum

2.4 薇甘菊栽培巨大口蘑中有毒重金屬含量

對(duì)薇甘菊栽培的巨大口蘑子實(shí)體進(jìn)行有害重金屬檢測(cè)結(jié)果如表4，對(duì)比食用菌質(zhì)量安全要求（表5）可以看出，除了總汞含量有少許超標(biāo)，鉛、鎘、總砷含量均在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)。重金屬汞超標(biāo)的可能原因：一、可能是栽培材料中汞含量超標(biāo)；二、可能是覆土材料受到污染造成；三、也有可能通過生物富集使?jié)舛壬?。具體原因還有待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證實(shí)，因此在口蘑栽培過程中一定要確保栽培基質(zhì)和覆土材料的安全，選取無(wú)工業(yè)污染的原材料和覆土材料，同時(shí)注意生長(zhǎng)環(huán)境不要受到污染，以確保生產(chǎn)和食用的安全。

表4 薇甘菊栽培巨大口蘑子實(shí)體有害金屬含量Table 4 Harmful metal content in fruiting body of Tricholoma giganteum cultivated with Mikania micrantha

表5 食用菌質(zhì)量安全要求的重金屬含量標(biāo)準(zhǔn)*Table 5 Standards for heavy metal content of edible fungus

3 結(jié)論

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果中可以看出，薇甘菊不僅能用于栽培巨大口蘑，而且栽培出來(lái)的巨大口蘑營(yíng)養(yǎng)比部分野生巨大口蘑和其他材料栽培的巨大口蘑營(yíng)養(yǎng)更加豐富，更具保健價(jià)值，具體表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：

3.1 薇甘菊栽培的巨大口蘑干子實(shí)體中（每100 g）多糖、總糖、粗纖維、粗脂肪、粗蛋白和灰分含量分別為12.91 g、54.21 g、5.52 g、1.60 g、15.22 g和6.21 g。其多糖含量比云南野生口蘑和云南栽培口蘑均高，且超過著名的雞樅和價(jià)格昂貴的松茸。

3.2 薇甘菊栽培的巨大口蘑子實(shí)體中含有17種氨基酸，氨基酸總量為15.13 g/100 g，必需氨基酸占氨基酸總量的40.38%，必需氨基酸與非必需氨基酸的比值為0.68，符合FDA和WHO提出的理想蛋白質(zhì)必需氨基酸含量達(dá)40%以上，E/N在0.6以上的要求。所以薇甘菊栽培的巨大口蘑所含氨基酸種類豐富和數(shù)量比例符合人體需求，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高。

3.3 薇甘菊栽培的巨大口蘑子實(shí)體中含有人體所需的大量元素K、Na、Ca、Mg及微量元素Fe、Cu、Mn、Zn等，其中K的含量大于云南野生口蘑和云南栽培口蘑的含量，而鈉的含量低于云南野生口蘑和云南栽培口蘑，這說明薇甘菊栽培的巨大口蘑屬于低鈉高鉀食品，為一種健康食品。

3.4 薇甘菊栽培的巨大口蘑子實(shí)體中有害重金屬含量，對(duì)比食用菌質(zhì)量安全要求，除了總汞含量有少許超標(biāo)外，鉛、鎘、總砷含量均在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，特別是鉛遠(yuǎn)低于標(biāo)準(zhǔn)允許的限量。

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