大花蕙蘭的組培繁育和栽培技術(shù)研究

葛坤紅?李芹

摘 要： 大花蕙蘭是一種具有很高觀賞價值的蘭科植物，深受廣大消費者的歡迎。傳統(tǒng)繁殖方式一般采用分株繁殖，繁殖系數(shù)較低，繁殖出的品種質(zhì)量品質(zhì)不高。本文主要介紹大花蕙蘭的組培快繁和栽培技術(shù)兩方面內(nèi)容的研究情況。

關(guān)鍵詞： 大花蕙蘭;組織培養(yǎng);栽培管理

大花蕙蘭俗稱“虎頭蘭”，為蘭科蘭屬植物，屬于復(fù)莖蘭類的附生蘭。原產(chǎn)于中國、印度、緬甸、泰國、越南。大花蕙蘭是中國傳統(tǒng)節(jié)日的主要禮品花卉之一，市場前景廣闊，無論是切花品種還是盆花，在國際市場上都占有重要地位。蘭花的傳統(tǒng)繁殖方式為分株繁殖，然而，一株健壯的蘭花一年只能繁殖幾個芽，繁殖系數(shù)較低，增殖倍數(shù)也只有1～3倍。我國許多珍稀品種不能大量繁殖，多數(shù)需從國外進(jìn)口，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場需求，價格長期居高不下，每個葉芽高達(dá)上萬元。不少品種在栽培條件下不能或很少結(jié)種子，如果通過有性繁殖，由于蘭花的種子小，胚發(fā)育不完全，沒有提供營養(yǎng)的胚乳和其它組織，不易發(fā)芽。要借助共生的菌類提供營養(yǎng)才能發(fā)芽。許多名貴品種實際上是一些自然突變體，如果借助有性生殖過程產(chǎn)生種子，再由種子繁殖后代，那么，這個品種的絕大多數(shù)個體將失去原有品種的獨特的觀賞價值。另外，長期的無性繁殖，造成帶病毒的植株日益增多，使蘭花的品質(zhì)嚴(yán)重下降。因此，通過組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖蘭花無毒苗和通過現(xiàn)代栽培管理技術(shù)生產(chǎn)高品質(zhì)產(chǎn)品具有十分重要的現(xiàn)實意義。

一、大花蕙蘭的組培繁育技術(shù)

大花蕙蘭傳統(tǒng)繁殖方式是分株繁殖，繁殖系數(shù)低，易引起退化，新品種少。通過組織培養(yǎng)繁殖，可大大提高繁殖率，且生產(chǎn)的同一批苗易控制花期，能較好地占有市場。

1.外植體的選擇與原球莖的誘導(dǎo)。大花蕙蘭原球莖誘導(dǎo)采用的外植體主要有莖尖、莖段、試管苗莖段、幼根、花梗等，切取試管苗莖段，用改良White、Vacinandwent培養(yǎng)基附加0.4BA+蔗糖20g/L。將培養(yǎng)物置于搖床上，進(jìn)行液體振蕩培養(yǎng)，光照每天12小時，光照強(qiáng)度2000lx，培養(yǎng)溫度25℃±3℃。2周左右外植體膨大，6周左右形成綠色原球莖。取新芽8.0～10.0cm ，切取莖尖0.2～0.5cm。利用5cm以內(nèi)的葉基進(jìn)行誘導(dǎo)試驗，發(fā)現(xiàn)只有在距葉基部0.5～1.0cm處才能誘導(dǎo)出原球莖;利用新出芽的2.0～3.0cm長的幼根，將其切成0.5～0.8cm 的根段，接種后2周左右切口開始膨大，3周以后形成淡綠色原球莖;而利用開花期的花梗進(jìn)行培養(yǎng)，出愈率達(dá)61%，并由愈傷組織誘導(dǎo)出原球莖，誘導(dǎo)率為20%，由于花瓣和葉片在培養(yǎng)過程中褐化嚴(yán)重，均未能誘導(dǎo)出原球莖。由此可見，外植體的最佳選擇是新芽和試管苗莖段。

2.原球莖的增殖。在原球莖分化出莖葉之前，將原球莖取出切成小塊轉(zhuǎn)移到增殖培養(yǎng)基上。增殖用培養(yǎng)基一般與誘導(dǎo)培養(yǎng)基成份相同，也可用液體振蕩培養(yǎng)。將已出現(xiàn)葉原基或長出幼葉的原球莖轉(zhuǎn)移到含有10%香蕉勻漿汁的Knud-sonc固體培養(yǎng)基，幼葉生長迅速，并向下長出根，3個月左后形成10～20cm的完整植株。培養(yǎng)時可根據(jù)不同培養(yǎng)物種類，對所有激素及附加物進(jìn)行調(diào)整。加入精氨酸，天門冬氨酸，酵母提取物對原球莖和植株的生長均有促進(jìn)作用。NAA低于0.1時促進(jìn)芽的形成，含量約0.6促進(jìn)根的生長。

將誘導(dǎo)出的大花蕙蘭原球莖為培養(yǎng)原材料，在無菌條件下，選取呈嫩綠色、大小基本一致、生命力處于旺盛時期的原球莖，切割后接種到增殖培養(yǎng)基上。15d左右開始長出綠色的原球莖，一般25 d左右，原球莖增殖系數(shù)基本穩(wěn)定。用不同濃度的香蕉汁、6-BA、NAA3種不同的添加物對原球莖的增殖效果進(jìn)行了對比實驗。實驗結(jié)果表明，3種添加的物增殖效果各有不同。其中，增殖效果最好的是香蕉汁lO%+NAA0.5mg/L，增殖系數(shù)達(dá)到了4.8;其次為NAA0.5mg/L，增殖系數(shù)為4.4，再次為香蕉汁lO%+6-BA0.5mg/L，增殖系數(shù)為3.5。總的來說，在NAA濃度為0.5 mg/L的情況下，大花蕙蘭的增殖效果均比較好。6-BA對大花蕙蘭的原球莖增殖效果不如NAA。

3.原球莖繼代過程褐化的防治?？s短繼代周期，在誘導(dǎo)7天時做繼代培養(yǎng)，可有效克服原球莖誘導(dǎo)過程中的褐化現(xiàn)象，或在初始培養(yǎng)過程中進(jìn)行短時間的暗培養(yǎng)可顯著抑制褐變發(fā)生。在原球莖或叢生芽的繼代增殖過程中，在培養(yǎng)基中加人0.5～1.0g/L的活性炭，可抑制培養(yǎng)物產(chǎn)生紅色的多酚氧化物，從而提高繁殖速度。另外，采用降低瓊脂用量制成半固體培養(yǎng)基，將培養(yǎng)塊浸在培養(yǎng)基內(nèi)，可降低培養(yǎng)塊黃枯和切口褐化的機(jī)會。

4.生根壯苗。生根階段之前，降低培養(yǎng)基中的激素含量，以便形成健壯芽。在生根壯苗培養(yǎng)基中，NAA用量以0.2～1.0mg/L為最佳，幼苗健壯，葉色深綠，根粗且長、根毛多。在培養(yǎng)基中添加香蕉泥、肌醇和水解酪蛋白能夠提高生根率。生根培養(yǎng)基中減少大量元素用量、添加適量的蔗糖、活性炭能夠促進(jìn)生根。研究表明，光照強(qiáng)度大小也是影響大花蕙蘭瓶苗培養(yǎng)中健壯苗生產(chǎn)量和移栽苗成活率的關(guān)鍵因素之一。強(qiáng)光照下（2500Lx）的瓶苗根系發(fā)達(dá)，植株健壯，移栽成活率高，而弱光照下（500Lx）的瓶苗較弱且不分葉片。

二、培養(yǎng)基質(zhì)及組培苗處理

1.培養(yǎng)基質(zhì)準(zhǔn)備。大花蕙蘭屬氣生性蘭類，對植料的通氣性要求很高，并要求有一定的保水能力。培養(yǎng)基質(zhì)應(yīng)以疏松透氣的材料為主，如樹皮塊、木炭、碎磚塊、苔鮮等。Kim Dong Won et al.（1997）研究認(rèn)為混合基質(zhì)與單一基質(zhì)相比更有利于大花蕙蘭‘MoonVenus幼苗的生長。苔蘚是最適合大花蕙蘭生長的基質(zhì)，樹皮、磚塊、苔鮮（3：1：1）和樹皮、煤渣、苔醉（3：1：l）次之。有研究認(rèn)為在天水地區(qū)大花蕙蘭栽培用朽木屑作基質(zhì)較為理想，栽培的大花蕙蘭生長最為健壯。也有研究表明，以樹皮+碎木炭作為大花蕙蘭的栽培植料比較理想，只是應(yīng)根據(jù)花苗的大小確定樹皮、木炭的粗細(xì);其次為樹皮+碎磚，再次為松樹皮;鋸木屑最差。

為此，用不同培養(yǎng)基進(jìn)行對原球莖的誘導(dǎo)進(jìn)行了實驗。將新芽接種于MS、1/2MS及Ms+6-Bal.0mg/L+NAA0.5mg/L三種不同配方的基礎(chǔ)培養(yǎng)基上。lOd左右，新芽開始膨大，20d左右可觀察到新芽周圍有大小不一的黃白色顆粒狀組織，30d左右轉(zhuǎn)為綠色原球莖，培養(yǎng)三種培養(yǎng)基均能誘導(dǎo)大花蕙蘭原球莖的產(chǎn)生，誘導(dǎo)期分別為32d、35d和28d，誘導(dǎo)率分別為55%、40%、79%。由此可知，采用Ms+6-Bal.0mg/L+NAA0.5mg/L，誘導(dǎo)原球莖所需時間最短且誘導(dǎo)率最高，故大花蕙蘭原球莖誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)基為Ms+6-Bal.0mg/L+NAA0.5mg/L。

2.組培苗處理。當(dāng)試管苗生長至15cm左右高，2～3條根時即可移植。將生根的瓶苗放置在蘭棚1周左右。出瓶前， 先將瓶蓋完全打開， 使瓶苗在自然環(huán)境中適應(yīng)3～5d， 再從瓶中移出幼苗， 放在清水中沖洗幼苗根上的培養(yǎng)基， 并用短毛筆輕輕地把附在根上的培養(yǎng)基清洗干凈， 然后用托布津1000～1500倍液浸泡30秒;最后，按大小規(guī)格分極，置于鋪有報紙的花架上晾干，以備種植。根據(jù)經(jīng)驗，煉苗 2d 后即可將苗取出，用清水洗凈根部的瓊脂，植于溫室苗床內(nèi)、栽培基質(zhì)為松針+苔蘚+粗砂，苗床底部墊以碎石、碎磚塊，用稀薄的營養(yǎng)液噴霧，每隔1周噴1次800倍的多菌靈溶液，溫度保持在lO～25℃，在大棚里亦可生長良好，1個月后統(tǒng)計移栽成活宰可達(dá)98%以上，1年后上盆，栽培基質(zhì)用泥炭土+蕨根+樹皮，每周澆1次液肥。

三、環(huán)境控制

1.溫度。研究表明，適合大花蕙蘭生長的溫度為15～25℃，但大花蕙蘭對溫度的適應(yīng)性很強(qiáng)，溫度在5～30℃均能維持生命。另有報道，生長期日溫最適溫度為22℃～28℃，夜溫最適溫度為18℃～22℃，生長適溫15℃～25℃?；ㄑ糠只谌諟刈钸m溫度為18℃～22℃;夜溫最適溫度為12℃～18℃，不能高于18℃，也不能低于12℃，否則花芽分化不良。花期日溫20℃～25℃，夜溫15℃～20℃。

2.水分。大花蕙蘭性喜溫暖、濕潤的氣候條件。在整個生長期空氣濕度應(yīng)保持在80﹪～90﹪。開花期則應(yīng)控在80﹪～90﹪。但高溫高濕條件，大花蕙蘭易患病害，因此應(yīng)注意通風(fēng)換氣。大花蕙蘭的根系肉質(zhì)，基質(zhì)水分過多，會造成爛根爛葉，易滋長病蟲害;但大花蕙蘭又原產(chǎn)于熱帶亞熱帶地區(qū)，性習(xí)溫暖高濕環(huán)境，空氣濕度不夠，基質(zhì)水分不足，影響新芽生長和開花。大花蕙蘭澆水應(yīng)依據(jù)植株的年齡、生長勢、栽培基質(zhì)不同而不同。

3.光照強(qiáng)度。光照對大花蕙蘭生長發(fā)育及成花有一定的作用。據(jù)報道，大花蕙蘭是比較喜陽光的一種，夏季可遮光50～60%，春秋應(yīng)遮去30%的陽光，冬季需日光充足。假鱗莖遮光處理可以促進(jìn)新生側(cè)芽的發(fā)育，一般處理4～5個月時效果比較明顯。在幼苗期，光照強(qiáng)度應(yīng)控制在15000～30000lx;到了中苗期以后，光照強(qiáng)度應(yīng)控制在40000～50000lx。然而，光照強(qiáng)度也應(yīng)隨溫度和水分條件的變化作適當(dāng)調(diào)節(jié)。當(dāng)溫度太高，強(qiáng)烈的光照會使植株呈休眠狀態(tài)，停止生長，甚至造成灼傷;溫度太低時，光照不足也會使植株呈休眠狀態(tài)，停止生長。當(dāng)光照強(qiáng)時，水分蒸發(fā)迅速，光合作用旺盛故必須充分供水;光照弱時，光合作用進(jìn)行緩慢，所需消耗水分較少，給水過多反而影響根系發(fā)生。

四、栽培管理技術(shù)

1.灌水。生長期：處于旺盛生長時期，需水量多，需要充足的水分，特別是光合作用旺盛時，不能缺乏水分。每天都得及時灌水。冬季植株生長慢，需求少，2～3天灌水1次即可。

開花期：灌水以保持適量水分為宜。水分過多導(dǎo)致新陳代謝加速，反而縮短花期;水分過少，則無法滿足開花消耗的養(yǎng)分及水分，花朵會過早萎蔫。灌水時注意水溫應(yīng)與土溫相近，否則容易傷根?？傊嗨畱?yīng)掌握見干見濕。

2.施肥。大花蕙蘭生長旺盛期較其它洋蘭喜肥。使用的無機(jī)肥以復(fù)合肥為主，濃度為，0.1%～0.2%，每周1次。有機(jī)肥以發(fā)酵過的餅肥與骨粉或過磷酸鈣制成直徑約2cm的丸狀，置于盆面，隨水分的滲透慢慢釋放肥力，每丸有效時間約為30d，全年施6～8次。

幼苗期一般以根外追肥為主，應(yīng)薄肥勤施，每7d1次，N：P：K按1：1：1稀釋1000倍液噴施;中苗期和大苗期按N：P：K按1：2：3，花期按N：P：K按1：4：2稀釋1000倍液噴施。7d1～2次，冬季停施。在生長旺季追施腐熟的餅肥，稀釋至0.02%使用。

除了基本的N、P、K三要素外，微量元素對大花蕙蘭的生長也非常重要。應(yīng)適量補(bǔ)充一些微量元素。

3.通風(fēng)。大花蕙蘭習(xí)性介于地生蘭和附生蘭之間，性喜通風(fēng)良好的環(huán)境。通風(fēng)不良將造成二氧化碳的不足，影響光合作用，且易引起病菌滋長，通風(fēng)量須達(dá)到植株葉梢晃動為宜。

4.疏芽。大花蕙蘭從中苗期開始，需進(jìn)行適當(dāng)疏芽。其新假球莖每年可繁殖2次，為充實分生假鱗莖，生長中途分生假球莖發(fā)生的芽，必須全部除去。1個球莖若同時長出兩個或更多芽，可留下茁壯芽1個，將其余的摘去。若1個球莖同時長出花芽（先端飽滿）和葉芽（先端瘦長），應(yīng)將葉芽摘除，否則影響花芽生長。

五、病蟲害防治

1.莖腐病。該病每年發(fā)生在6～10份， 是因為棚內(nèi)溫度過高、澆水過多、通風(fēng)不良引起發(fā)病， 一經(jīng)發(fā)現(xiàn)就會無藥可救， 應(yīng)把發(fā)生病害的植株清理出棚燒毀， 并用可殺得、鏈霉素或土霉素1000～1500倍液噴施植株， 3天1次連續(xù)3次。

2.軟腐病。軟腐病通常侵害大花蕙蘭的葉片、芽、球莖。一年中從春季到秋季都可能發(fā)生， 冬天較少發(fā)現(xiàn)， 主要也是高溫高濕引起的， 平時要注意通風(fēng)透氣，一旦發(fā)病只好拋棄病株， 清理出棚并燒毀?？捎?8.8%多保鏈霉素或18.8%鏈霉素1000倍液防治， 每隔7～10天噴灑1次， 連續(xù)3～4次。

3.根腐病。根腐病是大花蕙蘭毀滅性病害之一。在大花蕙蘭植株的任何生育期， 不論是聚苗盆中的幼苗、中苗、大苗以及老熟的開花株都容易感染。發(fā)現(xiàn)病株時要及時隔離并進(jìn)行燒毀， 可用代森鋅或甲基托布津稀釋1000倍液充分噴灑植株， 每5天1次， 連續(xù)3次。

4.介殼蟲類。一般多在高溫高濕、通風(fēng)不良、日光不足的情況下比較容易發(fā)生?？捎?0%氧化樂果或速滅松乳劑1000倍液噴殺， 每隔7～10天噴灑1次， 噴灑時葉片及鱗莖都要噴到， 連續(xù)噴灑3次。少量時可用小刷子蘸肥皂水擦除。

5.螨蟲類。也主要是由高溫高濕、光照不足、通風(fēng)不良引起的。可用5%的馬拉硫磷800倍液或用速滅松乳劑1000倍液噴殺， 每隔7天噴1次， 連續(xù)3次。

六、結(jié)語

研究結(jié)果表明，大花蕙蘭組織繁育外植體的最佳選擇為新芽和試管苗莖段;原球莖增殖效果最好的基質(zhì)激素為香蕉汁lO%+NAA0.5mg/L，增殖系數(shù)達(dá)到了4.8;原球莖誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)基為Ms+6-Bal.0mg/L+NAA0.5mg/L;組培苗栽培基質(zhì)用泥炭土+蕨根+樹皮并輔以液肥效果較佳。通過以上繁育技術(shù)，可以實現(xiàn)大花蕙蘭的快速繁殖。另外，通過后期的栽培管理技術(shù)，為廣大的花卉愛好者生產(chǎn)出了高品質(zhì)的大花蕙蘭。在未來時期，科技的不斷進(jìn)步，社會的不斷發(fā)展，大花蕙蘭組培快繁及栽培管理技術(shù)將更加的完善，設(shè)備更加的齊全，定會有更為廣闊的發(fā)展空間，這項技術(shù)定將會給我們帶來不可估量的價值。

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