影響豬人工授精效果多因素分析

康懷艷，仇志林，白 騰，任 發(fā)，杜燁青，方 乾，李 梅，胡建宏，*

(1.子洲縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,陜西 子洲 718499;2.西咸新區(qū)秦漢新城農(nóng)林水和交通工作局;3.子洲縣畜牧技術(shù)推廣站;4.西北農(nóng)林科技大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院；5.白水縣家畜改良站)

養(yǎng)豬業(yè)在畜牧業(yè)生產(chǎn)中占有重要地位，而提高母豬繁殖率、加快良種繁育是目前該產(chǎn)業(yè)亟需解決的問題。在此條件下加快人工授精技術(shù)在生豬養(yǎng)殖中進(jìn)一步推廣成為重中之重。豬人工授精技術(shù)分為常規(guī)人工授精技術(shù)與深部人工授精技術(shù)。本文首先闡述常規(guī)人工采精，其次對(duì)常規(guī)人工授精技術(shù)與深部人工授精技術(shù)進(jìn)行對(duì)比，期望能對(duì)實(shí)際生產(chǎn)過程中科學(xué)輸精進(jìn)行指導(dǎo)意義，促進(jìn)現(xiàn)代養(yǎng)豬業(yè)更好更快的發(fā)展。

1 種豬精液采集與分裝保存

1.1 種公豬精液采集方法

公豬在進(jìn)行采精前要對(duì)其進(jìn)行采精調(diào)教，通常后備公豬在7月齡時(shí)進(jìn)行采精調(diào)教，每次調(diào)教時(shí)間不超過15 min；可以利用發(fā)情母畜誘導(dǎo)、觀摩、發(fā)情母豬分泌物刺激等方法進(jìn)行采精調(diào)教。一旦獲得成功，應(yīng)立即進(jìn)行多次練習(xí)，以鞏固掌握該技術(shù)。關(guān)于種公豬采精調(diào)教技術(shù)，根據(jù)楊明發(fā)報(bào)道，在實(shí)際生產(chǎn)中尿液分泌物引誘法、木凳引誘法、小母豬引誘法、麻袋蓋身引誘法等應(yīng)用較為普遍。

正式采精前，首先調(diào)節(jié)好質(zhì)檢所用顯微鏡，以便采精后能及時(shí)進(jìn)行精液質(zhì)量評(píng)定；其次將準(zhǔn)備采精的公豬趕入采精欄，根據(jù)公豬體高將假豬臺(tái)調(diào)至適當(dāng)高度，并誘導(dǎo)公豬爬跨假臺(tái)豬；而后清洗體表并擦拭干凈，擠出公豬包皮積尿，修剪公豬的包皮長(zhǎng)毛，按摩公豬包皮，而用溫水洗凈公豬的包皮周圍，并用干毛巾擦干；最后采精員一手帶雙層采精手套，另一手持37℃集精杯準(zhǔn)備采精。

精液收集時(shí)，使用蓋有3層濾紙的集精杯收集，剛開始及最后射出的少量精液(約5～10 mL)含精子很少并含有細(xì)菌及殘留的尿液，不必收集，只需收集中間時(shí)段富含精子的部分。射精過程大致分2～3個(gè)階段，整個(gè)過程不能松手。整個(gè)射精的過程需約5～10 min，采精結(jié)束要讓公豬自然爬下假臺(tái)豬。

在采精過程中，要注意采精頻率不可過頻，做到定時(shí)、定點(diǎn)、定人。成年公豬每周采精2～3次，青年公豬每周采精1次。采精過程中一定要對(duì)公豬溫順，禁止毆打公豬，保持安靜，防止出現(xiàn)性抑制。注意采精安全，公豬出現(xiàn)攻擊行為時(shí)需立即停止采精。

1.2 精液品質(zhì)鑒定與稀釋

關(guān)于精液品質(zhì)鑒定，呂成繼指出，精液品質(zhì)的鑒定包括原精液品質(zhì)的鑒定和稀釋后精液品質(zhì)的鑒定。而且采精后要立即對(duì)精液的品質(zhì)進(jìn)行鑒定(注意避免雜物掉進(jìn)杯內(nèi))。首先通過精液的外觀來初步判定精液品質(zhì)，正常新鮮精液顏色乳白色或灰白色；注意觀察精液中是否有雜物(毛、血、尿、膿等)，污染的精液不能用于人工授精，應(yīng)棄之不用；鑒別精液是否有除腥味以外的異味，有異味則為異常精液，也應(yīng)棄之不用。而后顯微鏡下檢查精子活率、密度(原精正常密度為1～3億/mL)、畸形率等。

初步檢驗(yàn)合格的精液應(yīng)該立即進(jìn)行稀釋，原精液存放的時(shí)間不能超過30 min。在稀釋液和鮮精溫度不相差1 ℃的情況下進(jìn)行兩種液體的等溫稀釋混勻。為避免精子所處液體環(huán)境的劇烈變動(dòng)，稀釋時(shí)需要將稀釋液加入精液中，緩慢加入后混勻。通過精子活率、密度來確定最終稀釋倍數(shù)。

稀釋后靜置片刻，對(duì)精液再次進(jìn)行品質(zhì)鑒定，此次鑒定主要是針對(duì)精子活力。如果稀釋前后精液活力沒有顯著差異，可以對(duì)精液進(jìn)行分裝與保存；如果稀釋后精子活力大幅度下降，說明稀釋液的配制或稀釋操作出現(xiàn)問題，應(yīng)更換稀釋液重新采精稀釋。

1.3 精液分裝及儲(chǔ)存

采集的新鮮精液經(jīng)過質(zhì)檢合格后，若有發(fā)情母豬可直接進(jìn)行輸精，否則要對(duì)精液進(jìn)行分裝保存。出于方便的目的，瓶裝儲(chǔ)存精液是目前國(guó)內(nèi)大多數(shù)養(yǎng)殖場(chǎng)所采用的方式，但是存在運(yùn)輸不便、保存效果差等不足?，F(xiàn)有很多機(jī)構(gòu)已經(jīng)采用塑料管分裝。分裝完成后，進(jìn)行密封、標(biāo)記等工作。分裝后精液應(yīng)在室外放置一段時(shí)間，待精液溫度逐步下降與室溫接近后再放入17 ℃恒溫箱，或用幾層毛巾包裹好后直接放入17 ℃冰箱中進(jìn)行貯存，否則溫度下降過快將對(duì)精子產(chǎn)生溫度刺激，造成精子的死亡。同時(shí)每12 h應(yīng)緩慢搖勻瓶裝精液，防止精子沉積，對(duì)精子造成損傷。

2 豬人工授精技術(shù)

2.1 人工授精的常規(guī)技術(shù)

在確定母豬發(fā)情達(dá)到盛情期后，便可對(duì)母豬進(jìn)行輸精操作。周傳臣實(shí)踐表明，常規(guī)輸精時(shí)，首先徹底消毒雙手及輸精用到的一切輸精器械，用抹布擦拭清潔干凈母豬外陰及尾根部。輸精操作為一手掰開母豬外陰，另一手將海綿頭上涂潤(rùn)滑劑的一次性輸精管以45度角斜向上插入母豬生殖道內(nèi)進(jìn)行輸精。整個(gè)過程要溫和，不要對(duì)母豬造成應(yīng)激。輸精時(shí)為了使精液不逆流，需要對(duì)母豬進(jìn)行壓背刺激，使子宮內(nèi)產(chǎn)生負(fù)壓，充分吸收精液。輸精時(shí)不要將精子擠入生殖道內(nèi)，應(yīng)讓其自然流入，防止精液倒流。母豬在一個(gè)發(fā)情期內(nèi)除特殊情況外，要求輸精2次，并要認(rèn)真做好配種記錄。

2.2 豬子宮頸內(nèi)深部輸精技術(shù)

一般傳統(tǒng)輸精方法為子宮頸輸精，而隨著人工授精技術(shù)的不斷發(fā)展，深部輸精方法也開始逐步推廣。目前有三種深部輸精最為人們所熟知，分別為母豬子宮體輸精法(IUI)、子宮深部輸精法(DUI)，輸卵管輸精法(IOI)。張騰等試驗(yàn)證明，深部輸精的前期操作比常規(guī)輸精法時(shí)間長(zhǎng)20 s，但是精液輸入時(shí)間卻比常規(guī)輸精時(shí)間短46 s，因此整個(gè)過程時(shí)間深部輸精法比常規(guī)輸精法短26 s，差異不顯著。但是，深部受精卻可以將更多豬精液直接送入母豬子宮體內(nèi)，縮短了精子達(dá)到受精部位的距離，減少精子能量損耗，減少精液的輸入量，提高精液利用率，所以深部授精技術(shù)較常規(guī)授精技術(shù)在精液利用方面有較大優(yōu)勢(shì)。

2.2.1 子宮體(子宮頸后)授精(IUI) 子宮體輸精指用一支長(zhǎng)度為15～20 cm的半軟細(xì)管，通過常規(guī)輸精管內(nèi)將精液直接通過子宮頸送入到子宮體。Wasten和Behan研究表明，采用子宮體授精方式可直接把10億精子通過子宮頸后輸精輸入子宮體，母豬產(chǎn)仔率與正常交配相比無顯著性差異。但是，將10億精子通過常規(guī)輸精技術(shù)輸入母豬體內(nèi)，母豬產(chǎn)仔率和產(chǎn)仔數(shù)均明顯下降。Buranaamnuay等將20億精子通過子宮體授精技術(shù)輸入母豬體內(nèi)，最終得到窩產(chǎn)仔數(shù)為11.3頭，試驗(yàn)豬的窩產(chǎn)仔數(shù)明顯高于自然交配。而Roberts和Bilkei在對(duì)比子宮頸輸精技術(shù)與子宮體輸精技術(shù)效果時(shí)發(fā)現(xiàn)，將30億精子通過子宮頸輸精(859頭母豬)與10億精子通過子宮體輸精(924頭母豬)后，兩種方法在分娩率與窩產(chǎn)仔豬數(shù)上沒有顯著差異，但子宮體輸精技術(shù)卻可以明顯降低精液使用量，提高精液利用率。

2.2.2 子宮深部輸精(DUI) 相對(duì)于子宮體輸精而言，子宮深部輸精則可以將精液輸入更靠近輸卵管的位置，進(jìn)一步減少精子在子宮內(nèi)運(yùn)動(dòng)，保證有足夠數(shù)量的精子進(jìn)入輸卵管，達(dá)到同樣產(chǎn)仔率的同時(shí)減少輸精量。其中DUI輸精內(nèi)管管長(zhǎng)1.8 m，外周直徑4 mm，內(nèi)圈直徑1.8 mm。操作過程為首先將常規(guī)輸精管插入到母豬體內(nèi)子宮頸處，而后將DUI輸精管插入到常規(guī)輸精管，使精液可以通過該裝置直接到達(dá)子宮角近端1/3處。Bolarin等研究表明，對(duì)母豬進(jìn)行子宮深部輸精后，母豬繁殖性能無明顯差異；Martinez等研究表明，將5000萬和1.5億精子數(shù)通過子宮深部輸精輸入到母豬體內(nèi)，并與30億精子數(shù)通過子宮頸輸精技術(shù)做對(duì)比，最后試驗(yàn)結(jié)果在受胎率、產(chǎn)子率和產(chǎn)仔數(shù)上均無顯著性差異。也再次證實(shí)子宮深部受精技術(shù)相對(duì)于子宮頸輸精技術(shù)有較大優(yōu)勢(shì)，而且通過子宮深部輸精技術(shù)可極大減少精液輸入量且對(duì)生產(chǎn)效果無影響。

2.2.3 輸卵管輸精法(IOI) 為了進(jìn)一步減少精液輸入量，提高優(yōu)質(zhì)精液利用率。輸卵管輸精法應(yīng)運(yùn)而生。操作過程為在畜體上做微創(chuàng)手術(shù)，而后利用腹腔內(nèi)窺鏡裝置，將精液直接輸入到子宮與輸卵管的連接部。Fantinati等通過該方法將500萬精子直接輸入到輸卵管與子宮連接處，得出受胎率為81.9%。該方法相對(duì)于常規(guī)授精技術(shù)、子宮體輸精法、子宮深部輸精法而言，可以提高精子受精率，減少精子注入量，提高精液利用率。但時(shí)需要在畜體進(jìn)行微創(chuàng)手術(shù)，操作過程復(fù)雜，對(duì)員工基礎(chǔ)操作技能要求高，成本也較高，就目前進(jìn)行技術(shù)范圍推廣而言稍有困難。

3 影響人工授精效果的因素

3.1 精液因素

影響人工授精效果的因素有多種，而精液影響因素則主要為采集后的精液沒有進(jìn)行精液質(zhì)量檢查，質(zhì)量未達(dá)到要求即進(jìn)行稀釋受精(精子活力低于60%或者畸形率、死精率高于20%)。精液應(yīng)保存在17 ℃環(huán)境條件下，若精液保存過程中沒有嚴(yán)格控制溫度，所處環(huán)境溫度偏離17 ℃恒定溫度，或者溫度發(fā)生大幅度變化，均會(huì)對(duì)精子造成不可逆損傷。運(yùn)輸過程中受到某些理化刺激，如震蕩、溫度變化、光照、密封失效等，這些因素最終也可導(dǎo)致母豬受胎率及產(chǎn)仔數(shù)受到影響。因此，在前期準(zhǔn)備過程中應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程操作，并對(duì)授精前精液進(jìn)行質(zhì)量檢查。

3.2 母豬因素

在進(jìn)行母豬人工授精前，首先應(yīng)該確認(rèn)母豬發(fā)情規(guī)律，適時(shí)輸精。其次確認(rèn)母豬體況是否健康。母豬患有疾病，將會(huì)嚴(yán)重影響母豬的受胎與妊娠，導(dǎo)致最后結(jié)果不理想。母豬的營(yíng)養(yǎng)狀況也是影響母豬受胎率的一個(gè)重要原因，母豬過肥或過瘦會(huì)導(dǎo)致發(fā)情表現(xiàn)不明顯，即使進(jìn)行輸精也會(huì)造成受胎失敗。在實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，相對(duì)于外來品種如長(zhǎng)白、大約克等品種，我國(guó)很多地方豬具有明顯的發(fā)情表現(xiàn)，更易掌握配種時(shí)間，提高配種效果。

3.3 環(huán)境因素

配種時(shí)的季節(jié)、氣溫都會(huì)影響到配種的效果。潘新尤和徐杰研究發(fā)現(xiàn)，4～9月母豬受胎率與10月至次年3月受胎率相比差異性極其顯著。后備及初產(chǎn)母豬受胎率與月平均氣溫呈極顯著性負(fù)相關(guān)，而經(jīng)產(chǎn)母豬與月平均氣溫呈顯著性負(fù)相關(guān)。相比于陰雨天，母豬在晴天發(fā)情更明顯，輸精效果好。而朱相如同樣研究表明，高溫和低溫都易導(dǎo)致母豬受到應(yīng)激的影響導(dǎo)致胚胎死亡或流產(chǎn)。

3.4 其他因素

楊輝文報(bào)道稱，輸精員的操作熟練程度也是影響人工授精成功與否的一個(gè)重要因素。熟練的輸精員可以較為準(zhǔn)確的判斷母豬發(fā)情并及時(shí)進(jìn)行輸精。輸精前期的準(zhǔn)備工作，輸精時(shí)輸精槍是否準(zhǔn)確插入到子宮頸，輸精速度是否過快，輸精后是否立即讓母豬躺臥造成精液倒流現(xiàn)象，以上均能導(dǎo)致最后結(jié)果不理想。張蓮芝研究表明，確認(rèn)好兩次輸精間隔的輸精效果可以達(dá)到甚至優(yōu)于三次輸精方式的效果。這也要求在進(jìn)行人工授精技術(shù)時(shí)，應(yīng)確認(rèn)輸精員是否對(duì)輸精技術(shù)熟練掌握，以減少人員因素對(duì)授精結(jié)果造成的影響。

豬的人工授精技術(shù)發(fā)展迅猛，其各種方便和優(yōu)越性已經(jīng)受到更多養(yǎng)殖戶的青睞。相對(duì)于自然交配，人工授精技術(shù)可以克服體格差異、距離、季節(jié)等問題，充分發(fā)揮雜種優(yōu)勢(shì)，同時(shí)深部授精技術(shù)更可以顯著提高精液利用率，節(jié)約生產(chǎn)成本，而且在整個(gè)過程中沒有豬的直接接觸，可以減少某些疾病的傳播。曾瓊等指出，高水平的采精、輸精技術(shù)決定了人工授精整個(gè)技術(shù)環(huán)節(jié)的成功與否，而高質(zhì)量的種公母豬是產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)、大量后代的前提。人工授精技術(shù)正在被越來越多的人所接納。豬的人工授精技術(shù)已經(jīng)成為家畜繁殖技術(shù)的重大突破和革新，應(yīng)在世界范圍內(nèi)推廣使用，充分顯示出其發(fā)展?jié)摿颓熬啊?/p>