動植物源蛋白體外消化產(chǎn)物結(jié)構(gòu)性質(zhì)及ACE抑制活性

梁婷婷，佟立濤，蒲華寅，王麗麗，周閑容，鞠志遠(yuǎn)，周素梅，黃峻榕,*

（1.陜西科技大學(xué)食品與生物工程學(xué)院，陜西 西安 710021；2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品加工綜合性重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100193）

近年來有研究指出，過多的攝入動物性蛋白（尤其是紅肉）與較高的死亡率相關(guān)，然而多攝入植物性蛋白則與死亡風(fēng)險的降低相關(guān)[1]。王金芯[2]和杜春紅[3]報道稱蛋白質(zhì)代謝可引起血壓波動，應(yīng)限制動物蛋白。因此，人們應(yīng)選優(yōu)質(zhì)蛋白，其中植物蛋白質(zhì)可占50%，動物蛋白選用魚肉、雞肉等白肉蛋白。前期研究表明，食物中的蛋白經(jīng)降解成為小分子多肽，且可以直接被人體消化吸收[4]，這些小分子多肽具有降血脂、增強(qiáng)免疫力、改善心血管功能和預(yù)防心血管疾病等功效。高血壓是一種常見的心血管疾病，它不僅患病率高，而且常引起嚴(yán)重的心、腦、腎等其他疾病[5]。因此，研究生產(chǎn)高效安全的降血壓肽已經(jīng)成為國內(nèi)外科學(xué)家積極探索的一項(xiàng)重要課題。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（angiotensin conversion enzyme，ACE）在激肽釋放酶-激肽系統(tǒng)中能使舒緩激肽失活，使激肽釋放酶-激肽系統(tǒng)處于抑制狀態(tài)，從而導(dǎo)致血管收縮，血壓升高，因此抑制ACE的活性是改善高血壓，從而抑制動脈粥樣硬化等心血管疾病的重要途徑之一。

自從Ferreira等[6]首次從南美洲蛇毒中發(fā)現(xiàn)天然ACE抑制肽以來，研究學(xué)者們又開始從更多的蛋白源中獲取ACE抑制肽，包括植物蛋白來源，如谷類蛋白：大米蛋白[7]、燕麥蛋白[8]、小麥蛋白[9]和玉米蛋白[10]；豆類蛋白：大豆蛋白[11]、豌豆蛋白[12]、綠豆蛋白[13]，肉類蛋白來源，如雞肉蛋白[14-15]、豬肉蛋白[16-17]、牛肉蛋白、魚肉蛋白[18]、蠶蛹蛋白[19]，乳制品蛋白來源[20]，如牛奶中的酪蛋白[21]以及其他蛋白來源。這些蛋白的ACE抑制肽功能活性雖然已有眾多報道，但是關(guān)于動植物源蛋白肽的橫向比較研究以及借此探究不同蛋白來源的ACE抑制肽對于血壓影響的差異尚需明確。

盡管ACE抑制肽的體外活性研究較多，但是功能肽在進(jìn)入人體后經(jīng)胃腸道消化酶消化，使得肽的空間結(jié)構(gòu)、氨基酸序列、分子質(zhì)量等發(fā)生改變。因此，ACE抑制肽經(jīng)過胃腸道消化酶的作用后其降血壓活性發(fā)生怎樣的變化亦受到研究者關(guān)注。并且，多肽能否穿過小腸壁，能否最后到達(dá)靶器官等都影響著其活性的發(fā)揮。因此，應(yīng)用模擬體外消化模型來評價多肽的ACE抑制活性對于功能肽的開發(fā)更具有現(xiàn)實(shí)意義。Wendy等[22]發(fā)現(xiàn)大豆分離蛋白經(jīng)模擬消化后能直接產(chǎn)生ACE抑制肽。因此，應(yīng)用模擬體外消化模型來評價多肽的ACE抑制活性有著重要的意義。

本研究采用植物蛋白（大米蛋白、燕麥蛋白、大豆蛋白、豌豆蛋白）、紅肉蛋白（豬肉蛋白、牛肉蛋白）、白肉蛋白（雞肉蛋白），3 類不同來源的蛋白作為原料。在模擬胃腸道消化環(huán)境的基礎(chǔ)上，研究3 類蛋白在消化過程中ACE抑制肽活性變化以及與水解度、分子質(zhì)量分布和氨基酸組成的相互關(guān)系，以探討植物蛋白、紅肉蛋白和白肉蛋白在血壓調(diào)節(jié)功能上的差異以及形成的原因，為蛋白資源的深度開發(fā)、保健食品、降壓藥品的開發(fā)和人們在日常膳食中對蛋白來源的選擇提供科學(xué)的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

大米蛋白 安徽陸榮生物技術(shù)有限公司；燕麥粉河北石家莊凌峰農(nóng)副產(chǎn)品開發(fā)公司；大豆蛋白、豌豆蛋白 煙臺東方蛋白科技有限公司；雞肉蛋白、豬肉蛋白、牛肉蛋白 山東青島德潤隆食品有限公司；胃蛋白酶、胰蛋白酶 北京索萊寶科技有限公司；ACE、馬尿酰組氨酰亮氨酸（Hip-His-Leu，HHL） 美國Sigma公司；高分子質(zhì)量蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品（10～200 kDa）英國GE Healthcare公司；其他試劑均為國產(chǎn)分析純。燕麥蛋白采用堿溶酸沉自制。

1.2 儀器與設(shè)備

DGG-9203A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海森新實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；Kieltec Analysister全自動凱氏定氮儀 瑞典FOSS儀器有限公司；U-3010紫外-可見分光光度計(jì)日本日立公司；UB-7 pH計(jì) 美國丹佛儀器公司；TGL-16臺式高速冷凍離心機(jī) 湖南湘一實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司；WE-2恒溫水浴振蕩器 天津市歐諾儀器儀表有限公司；DF-101S集熱式恒溫加熱磁力攪拌器鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司；LGJ-25C型冷凍干燥機(jī)北京四環(huán)科學(xué)儀器廠有限公司；Mini-Protean電泳儀美國Bio-Rad公司；FluorChem FC2凝膠成像系統(tǒng) 美國Alpha公司；1200高效液相色譜儀 美國安捷倫公司。

1.3 方法

1.3.1 原料蛋白基本成分的測定

采用GB 5009.3—2010《食品中水分的測定》，105 ℃常壓干燥法測定水分含量；采用GB/T 5512—2008《糧油檢驗(yàn) 糧食中粗脂肪含量測定》，索氏抽提法測定脂肪含量；采用GB 5009.4—2010《食品中灰分的測定》，550 ℃灼燒法測定灰分含量；采用GB 5009.5—2010《食品中蛋白質(zhì)的測定》，凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)含量。氮轉(zhuǎn)換系數(shù)：大米蛋白為5.95；燕麥蛋白為5.83；大豆及豌豆蛋白為6.25；豬肉、牛肉、雞肉蛋白為6.25。其中，蛋白質(zhì)、脂肪、灰分均以干質(zhì)量計(jì)。

1.3.2 十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dodecyl sulfonate polyacrylamide gel electrophoresis，SDSPAGE）

采用12%的分離膠和5%的濃縮膠對大米蛋白、燕麥蛋白、大豆蛋白、豌豆蛋白、豬肉蛋白、牛肉蛋白、雞肉蛋白進(jìn)行SDS-PAGE分析，樣品在濃縮膠時電壓70 V，樣品到分離膠之后，電壓升高到120 V，電泳過程保持電流穩(wěn)定。R-250考馬斯亮藍(lán)染色3 h，用脫色液脫色。FluorChemFC2凝膠成像系統(tǒng)拍照。

1.3.3 蛋白體外模擬胃腸道消化

體外消化過程參照Wendy等[22]的方法，并略作修改。將1 g原料蛋白中加入20 mL的蒸餾水配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的溶液，煮沸2 min，冷卻后，用1 mol/L的鹽酸溶液調(diào)pH值至2.0，加入0.04 g胃蛋白酶（占底物質(zhì)量的4%），37 ℃恒溫反應(yīng)1 h；用0.9 mol/L的NaHCO3溶液將pH值調(diào)至5.3，再用1 mol/L的NaOH溶液調(diào)pH值至7.0，加入0.04 g胰蛋白酶（占底物質(zhì)量的4%），37 ℃恒溫反應(yīng)2 h，沸水浴10 min終止反應(yīng)，分別在消化過程中（0、30、60、90、120、180 min）取樣。冷卻后離心（14 000 r/min，10 min）收集上清液，隨后冷凍干燥于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.4 水解度的測定

采用鄰苯二甲醛法[23]，將5 mL試管中加入3.00 mL鄰苯二甲醛溶液，再加入400 μL稀釋至一定倍數(shù)的水解上清液，室溫條件下反應(yīng)2 min后在波長340 nm處測定光密度。同時用絲氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.951 6 mmol/L）做參考，用水做空白實(shí)驗(yàn)。按公式（1）計(jì)算每克蛋白質(zhì)中絲氨酸氨基含氨基的量：

式中：Serine NH2為每克蛋白質(zhì)中含絲氨酸氨基的量/（mmol/g）；X為樣品質(zhì)量/g；P為樣品中的蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)/%；N為稀釋倍數(shù)；V為上清液體積/L。

按公式（2）計(jì)算水解度：

式中：htot、β、α均為常數(shù)；htot為每克原料蛋白的肽鍵毫摩爾數(shù)/（mmol/g）；大米蛋白、燕麥蛋白β、α分別為0.4和1，htot=7.72；大豆蛋白，豌豆蛋白β、α分別為0.342和0.970，htot=7.8；豬肉蛋白、牛肉蛋白、雞肉蛋白β、α分別為0.40和1.00，htot=7.6。

1.3.5 ACE抑制活性的測定

用含有0.3 mol/L NaCl的0.1 mol/L硼酸鹽緩沖液（pH 8.3）將HHL配成5 mmol/L溶液。將80 μL的5.0 mmol/L HHL溶液和20 μL的樣品加入到1.5 mL EP管中，在37 ℃反應(yīng)5 min后，再加入20 μL活力為0.1 U/mL ACE溶液，旋渦混勻后在37 ℃反應(yīng)30 min，用200 μL的1.0 mol/L鹽酸溶液終止反應(yīng)。同時用等量硼酸鹽緩沖液代替樣品做空白實(shí)驗(yàn)。

采用高效液相色譜法測定馬尿酸的含量[24]。色譜條件：ZORBAX Eclipse Plus-C18色譜柱（150 mm×4.6 mm）；流動相為乙腈-水-三氟乙酸溶液（50∶50∶0.05，V/V）；檢測波長228 nm；流速0.4 mL/min；柱溫30 ℃；進(jìn)樣量10 μL。按公式（3）計(jì)算ACE抑制率：

式中：A為含有樣品和ACE反應(yīng)液的峰面積；B為不含樣品，含有ACE反應(yīng)液的峰面積。

1.3.6 胃蛋白酶、胰蛋白酶消化產(chǎn)物的分子質(zhì)量分布

采用高效液相色譜法測定[25]。將胃蛋白酶和胰蛋白酶消化以后的上清液稀釋一定倍數(shù)后，用0.45 μm微孔過濾膜過濾后上色譜柱。色譜條件：TSK gel 2000SWXL色譜柱（300 mm×7.8 mm），流動相為乙腈-水-三氟乙酸溶液（45∶55∶0.1，V/V）；檢測波長220 nm；流速0.5 mL/min；柱溫30 ℃；進(jìn)樣量10 μL。分子質(zhì)量校正標(biāo)準(zhǔn)品：乙氨酰氨-乙氨酰氨-乙氨酰氨（mw＝189 Da）、乙氨酰氨-乙氨酰氨-精氨酸（mw＝451 Da）、桿菌肽（mw＝1450 Da）、抑肽酶（mw＝6 500 Da）和細(xì)胞色素C（mw＝12 500 Da）。

1.3.7 蛋白消化產(chǎn)物的氨基酸組成分析

采用酸水解法，參照GB/T 5009.124—2003《食品中氨基酸的測定》。稱取40～60 mg酶解后冷凍干燥的樣品，將10 mL 6 mol/L鹽酸溶液加入到水解管中，用氮?dú)獯蹈珊笊w好蓋子，放入到110 ℃恒溫干燥箱內(nèi)，水解24 h以后，取出冷卻。打開水解管，將水解液過濾后，用純凈水將水解管沖洗3 次，液體全部轉(zhuǎn)移到50 mL容量瓶，定容后取1 mL濾液，氮?dú)獯蹈桑? mL 0.02 mol/L鹽酸復(fù)溶。使用氨基酸自動分析儀測定氨基酸組成。

其中，色氨酸采用高效液相色譜法測定[26]。取70～80 mg冷凍干燥的樣品，將1.5 mL 4 mol/L氫氧化鈉溶液加入到離心管中，用鑷子將離心管放入到水解管中，用氮?dú)獯蹈珊笊w好蓋子，放入到110 ℃恒溫干燥箱內(nèi)，水解24 h以后，取出冷卻。打開水解管，將1.14 mL 6 mol/L鹽酸溶液加入到離心管中，用純凈水將離心管和水解管沖洗3 次，調(diào)pH 4～5，液體全部轉(zhuǎn)移到50 mL容量瓶，定容后取1 mL濾液，用0.45 μm微孔過濾膜過濾后上色譜柱。色譜條件：Agela Technologies Innoval-C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相為甲醇-乙酸鈉溶液（5∶95，V/V）；檢測波長280 nm，流速1 mL/min；柱溫25 ℃；進(jìn)樣量20 μL。

1.4 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié)果與分析

2.1 蛋白的基本成分分析

對植物蛋白（大米、燕麥、大豆、豌豆）、紅肉蛋白（豬肉、牛肉）和白肉蛋白（雞肉）3 類蛋白樣品的基本成分進(jìn)行了分析，如表1所示。3 類蛋白樣品的蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)均達(dá)到85%以上，高于謝柳倩等[27]研究ACE抑制活性中所用蜈蚣蛋白的含量，且對ACE抑制活性影響較大的脂肪和灰分質(zhì)量分?jǐn)?shù)相對較低，較高的純度可保證不同蛋白的ACE抑制活性比較研究中實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

表1 植物、紅肉和白肉3 類原料蛋白的基本組成（n=3）Table1 Proximate composition of plant, red meat and white meat proteins (n= 3)

2.2 蛋白的SDS-PAGE分析

圖1 植物、紅肉和白肉3 類蛋白的SDS-PAGE圖譜Fig. 1 SDS-PAGE patterns of plant, red meat and white meat proteins

通過對3 類蛋白進(jìn)行了SDS-PAGE分析，如圖1所示。植物蛋白分子質(zhì)量分布范圍在10～100 kDa之間，紅肉和白肉蛋白分子質(zhì)量分布范圍在30～200 kDa之間。其中，大米蛋白最大分子質(zhì)量為97 kDa，3 條帶在60～80 kDa之間，較寬且顏色較深，說明在這3 個條帶分子質(zhì)量大小的蛋白含量較大，分子質(zhì)量最小的在10～15 kDa之間，該結(jié)果與相關(guān)報道一致[28]；燕麥蛋白分子質(zhì)量主要5 個條帶分布，分別是13～18、31～37、50～60 kDa以及60～66 kDa左右，其中最大分子質(zhì)量大概在70～72 kDa之間，與王霞霞等[29]報道的一致；大豆和豌豆蛋白分子量質(zhì)分布范圍較廣，最大分子質(zhì)量為85 kDa和83 kDa，最小分子質(zhì)量為10 kDa左右，在65～80、50、25～40 kDa之間也有條帶分布，與陳振家等[30]報道的一致；豬肉、牛肉和雞肉蛋白，出現(xiàn)電泳條帶的位置相似，第1個條帶在30 kDa左右，第2個條帶在70～80 kDa之間，而且大于200 kDa的蛋白含量較多，與方紹慶等[31]報道一致。由3 類蛋白的電泳條帶分析可知，在體外消化前，紅肉和白肉蛋白分子質(zhì)量顯著高于植物蛋白。

2.3 蛋白體外模擬胃腸消化產(chǎn)物的水解度變化

圖2 體外模擬胃腸消化酶解3 類蛋白的水解度變化Fig. 2 Changes in degree of hydrolysis of plant, red meat and white meat proteins during stimulated in vitro gastrointestinal digestion

蛋白質(zhì)的水解度，即測定生成的有效蛋白肽。圖2A為植物蛋白、紅肉蛋白和白肉蛋白被胃蛋白酶、胰蛋白酶消化水解的進(jìn)程曲線。前60 min為胃蛋白酶水解階段，60～180 min為胰蛋白酶水解階段，蛋白消化液的水解度隨消化時間的延長而增加，到120 min左右，各蛋白消化產(chǎn)物基本達(dá)到最高水解度，之后變化較緩慢。這是因?yàn)殡S著消化反應(yīng)的進(jìn)行，消化產(chǎn)物濃度增大，底物濃度減小，蛋白酶的活性受到抑制等綜合因素所致[32]。由圖2B、C顯示可知，3 類不同來源蛋白經(jīng)過體外消化最終水解度有一定的差別，白肉蛋白水解度極顯著高于紅肉蛋白和植物蛋白（P＜0.01），在3 h內(nèi)其最大水解度可達(dá)44.04%，紅肉蛋白次之，植物蛋白的水解度較低，最低僅為20.15%，這與報道中的一致，即僅從消化性方面看，紅肉和白肉蛋白比植物蛋白更易消化[33]，這是因?yàn)橹参锏鞍淄庵苡欣w維薄膜的包裹而難以消化，故紅肉和白肉蛋白比植物蛋白更易消化和吸收。

2.4 蛋白體外模擬胃腸道消化產(chǎn)物的ACE抑制活性變化

圖3 體外模擬胃腸消化酶解3 類蛋白的ACE抑制活性變化Fig. 3 Changes in ACE inhibitory activity of plant, red meat and white meat proteins during in vitro gastrointestinal digestion

由圖3A、B可知，3 類不同來源蛋白在不同消化時間段的變化趨勢是一致的，且其ACE抑制活性的產(chǎn)生主要集中在胃蛋白酶階段，即在60 min內(nèi)的消化產(chǎn)物快速產(chǎn)生ACE抑制活性。加入胰蛋白酶后，3 類蛋白的ACE抑制活性都顯著降低，90 min以后ACE抑制活性變化較平緩，與劉志偉等[34]對大豆蛋白體外消化酶解產(chǎn)物ACE抑制活性研究相一致。由圖3C可知，植物蛋白消化產(chǎn)物抑制ACE的活性極顯著高于紅肉蛋白（P＜0.01），白肉蛋白消化產(chǎn)物抑制ACE的活性極顯著高于紅肉蛋白（P＜0.01），植物蛋白與白肉蛋白無顯著性差異（P＞0.05）。以上結(jié)果表明，動植物蛋白在血壓調(diào)節(jié)功能上的差異可能與其ACE抑制活性的差異相關(guān)。

2.5 胃蛋白酶和胰蛋白酶消化產(chǎn)物的分子質(zhì)量分布

圖4 體外模擬胃腸消化1 h和3 h酶解產(chǎn)物的分子質(zhì)量分布Fig. 4 Molecular weight distribution profiles of peptides after in vitro gastrointestinal digestion for 1 h and 3 h

如圖4所示，3 類蛋白經(jīng)胃蛋白酶和胰蛋白酶消化以后，消化液中的組分其分子質(zhì)量分布廣泛。胃蛋白酶消化產(chǎn)物分子質(zhì)量集中在3 000 Da以下，經(jīng)胰蛋白酶消化以后，3 類蛋白消化產(chǎn)物的分子質(zhì)量分布是相似的，分子質(zhì)量范圍在1 000 Da以下的多肽混合物的含量最高。其中，植物蛋白消化產(chǎn)物大于5 000 Da的多肽占5%左右，紅肉和白肉蛋白消化產(chǎn)物大于5 000 Da的多肽占比不到1%，該結(jié)果與模擬體外消化的水解度變化結(jié)果一致，即水解度越大，它們的分子質(zhì)量越小。隨著水解度的增大，分子質(zhì)量的減小，3 類蛋白消化產(chǎn)物的ACE活性抑制率均相應(yīng)增大，與Hyun[35]和Oshima[36]等報道的一致，即具有ACE抑制活性的肽分子質(zhì)量大小集中在1 500 Da左右。盡管肉類蛋白的分子質(zhì)量小、水解度高，但是同等濃度條件下的ACE抑制活性卻弱于植物蛋白，表明ACE活性差異可能受分子質(zhì)量以外的其他因素影響。

2.6 蛋白消化產(chǎn)物氨基酸組成的變化

近年來，國內(nèi)外研究者從很多不同膳食蛋白中酶解得到具有ACE抑制活性的多肽，相關(guān)研究得出，若序列上存在芳香性和疏水性氨基酸殘基的多肽，其具有較高ACE抑制活性[19]。因此，本研究除上述的分子質(zhì)量外，還關(guān)注了消化產(chǎn)物中相關(guān)氨基酸的含量。

圖5 體外模擬胃腸消化酶解3 類蛋白的芳香性氨基酸和疏水性氨基酸含量Fig. 5 Contents of aromatic and hydrophobic amino acids of plant, red meat and white meat proteins after in vitro gastrointestinal digestion

蛋白經(jīng)過胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后產(chǎn)物的芳香性氨基酸組成如圖5A、B所示，植物蛋白肽中的芳香性氨基酸（Tyr、Phe和Trp）含量極顯著高于紅肉和白肉蛋白肽（P＜0.01），白肉蛋白肽的芳香性氨基酸含量顯著高于紅肉蛋白肽（P＜0.05）。此外，由圖5C、D可知，植物蛋白肽中的疏水性氨基酸含量極顯著高于紅肉蛋白肽（P＜0.01），白肉蛋白肽的疏水性氨基酸含量顯著高于紅肉蛋白肽（P＜0.05），但植物蛋白肽與白肉蛋白肽無顯著性差異（P＞0.05）。由這一結(jié)果可以看出，3 類蛋白中消化產(chǎn)物的疏水性氨基酸含量越高，則ACE抑制活性越高，表明高疏水性氨基酸含量可能是植物蛋白肽具有高的ACE抑制活性的主要原因之一。

但是，燕麥蛋白與豌豆蛋白的芳香性和疏水性氨基酸含量低于紅肉蛋白，ACE抑制活性反而高于紅肉蛋白，因此，芳香族和疏水性氨基酸含量還不能完全解釋植物蛋白的ACE抑制活性高于紅肉的原因，這可能是由于不同蛋白來源的功能活性肽通過其他的作用方式發(fā)揮ACE抑制活性以及血壓調(diào)節(jié)功能的作用，例如植物蛋白中存在更多的特定的、亦或活性更高的ACE抑制功能肽段等，但具體原因仍有待于深入研究。

3 結(jié) 論

植物蛋白與白肉蛋白消化產(chǎn)物的ACE抑制活性極顯著高于紅肉蛋白（P＜0.01），這一結(jié)果與植物蛋白源的血壓調(diào)節(jié)功能高于紅肉的前人研究結(jié)果相一致，表明動植物蛋白在血壓調(diào)節(jié)功能上的差異可能與其ACE抑制活性的大小直接相關(guān)?？傮w上看，植物蛋白消化產(chǎn)物的疏水性氨基酸含量極顯著高于紅肉蛋白肽（P＜0.01），這一結(jié)果表明高疏水性氨基酸含量是植物蛋白肽具有比較高的ACE抑制活性的主要原因之一。另一方面，燕麥蛋白與豌豆蛋白的芳香族和疏水性含量低于紅肉蛋白肽，而ACE抑制活性高于紅肉蛋白肽，因此單純從芳香族和疏水性氨基酸含量解釋不同蛋白源蛋白肽的ACE抑制活性乃至血壓調(diào)節(jié)功能的差異仍不盡然，具體的作用機(jī)制仍有待明確。

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