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    煙屬野生種資源黑脛病抗性研究

    2018-02-06 07:17王仁剛楊志曉林世鋒
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2017年15期
    關(guān)鍵詞:野生種

    王仁剛 楊志曉 林世鋒

    摘要:以64個(gè)煙屬野生種(其中33個(gè)種為我國(guó)首次收集的野生種資源)、4個(gè)普通煙草栽培種為試驗(yàn)材料,采用黑脛病苗期接種鑒定和田間病圃鑒定2種方法,研究煙屬野生種資源對(duì)黑脛病的抗病性。結(jié)果表明,2種鑒定方法得到的抗性鑒定結(jié)果一致性較高,其中54個(gè)參試材料鑒定結(jié)果相同,10個(gè)參試材料鑒定結(jié)果有差異,但抗性鑒定的結(jié)果差異都是在相近抗性水平上波動(dòng);在參試材料中共鑒定出高抗黑脛病野生種4個(gè),抗黑脛病野生種14個(gè),中抗黑脛病野生種13個(gè);不同組的野生種黑脛病抗性有一定差異,圓錐煙草組、殘波煙草組的野生種表現(xiàn)出對(duì)黑脛病較好的抗性。

    關(guān)鍵詞:煙屬;野生種;黑脛病;抗病性鑒定;野生資源;抗黑脛病育種利用

    中圖分類號(hào): S435.72文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A

    文章編號(hào):1002-1302(2017)15-0099-04

    煙屬(Nicotiana)包含75種,我國(guó)煙草種質(zhì)資源庫(kù)中共保存煙屬野生種資源35份(33個(gè)種)[1-3]。栽培煙草主要來(lái)源于普通煙草,自然加倍和人工選擇等因素導(dǎo)致現(xiàn)代栽培煙草遺傳基因庫(kù)的變窄,背景狹窄限制了煙草育種等諸多研究難以取得突破性進(jìn)展。煙屬野生種具有高度的遺傳復(fù)雜性和異質(zhì)性,具有栽培種所不具備的重要性狀,如抗逆性、適應(yīng)性、抗病性、雄性不育性及獨(dú)特的品質(zhì)特性等,是極具研究?jī)r(jià)值的戰(zhàn)略資源[4-5]。利用野生資源是解決栽培煙草遺傳瓶頸、拓寬基因資源等最可靠、有效的途徑之一。廣泛收集、鑒定煙屬野生種資源是開(kāi)展研究利用必不可少的前提工作。在文獻(xiàn)資料中可查詢到一些野生種資源對(duì)各種病害抗性的介紹,但關(guān)于野生種資源對(duì)煙草黑脛病抗性的系統(tǒng)研究鮮有報(bào)導(dǎo)。煙草黑脛病是煙草生產(chǎn)上最具毀滅性的病害之一,在我國(guó)主要煙區(qū)都有發(fā)生[6-7]。本研究采用苗期接種鑒定、田間病圃鑒定2種方法對(duì)煙屬64份野生種資源進(jìn)行黑脛病抗病性鑒定,篩選抗病資源,為野生種資源在抗黑脛病育種的應(yīng)用提供基礎(chǔ)材料。

    1材料與方法

    1.1試驗(yàn)材料

    參試材料共68份,包括了64份野生種資源和4個(gè)普通煙草種,函蓋了煙屬全部13個(gè)組[2-3]。參試野生種資源中33個(gè)種為我國(guó)首次收集的野生種資源[2-3,5],2份資源為合成種、3份資源為變種;4個(gè)普通煙草種為烤煙黑脛病常用對(duì)照品種,其中革新3號(hào)為抗病對(duì)照,K326、金星6007為中抗對(duì)照,小黃金1025為感病對(duì)照(表1)。

    1.2試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)

    在本試驗(yàn)于2015年在貴州省福泉市貴州省煙草科學(xué)研究院試驗(yàn)基地進(jìn)行。田間病圃鑒定于貴州省煙草科學(xué)研究院試驗(yàn)基地黑脛病圃內(nèi)進(jìn)行、苗期接種鑒定于貴州省煙草科學(xué)研究院試驗(yàn)基地溫室內(nèi)進(jìn)行。

    1.3材料培養(yǎng)與處理方法

    1.3.1接種病原菌及菌谷培養(yǎng)

    黑脛病菌為黑脛病1號(hào)小種,由貴州省煙草科學(xué)研究院鑒定、保存。菌谷制種方法參照GB/T 23224—2008《煙草品種抗病性鑒定》。

    1.3.2田間病圃鑒定

    煙草黑脛病抗性鑒定采用田間病圃鑒定法。試驗(yàn)設(shè)4個(gè)重復(fù),每重復(fù)1行,栽煙10株。采用漂浮育苗法,密度1 m×0.6 m,施純氮90 kg/hm2。其他栽培管理措施同大田生產(chǎn)。設(shè)革新3號(hào)為抗病對(duì)照,金星6007為中抗對(duì)照,小黃金1025為感病對(duì)照。病害人工誘發(fā):于移栽后20 d,對(duì)所有供試煙株進(jìn)行莖基部的人工接種,每株接種病菌菌谷3 g。

    1.3.3苗期接種鑒定

    將供試材料播種于56孔育苗托盤上培養(yǎng)供試煙苗到60 d苗齡用于試驗(yàn)。每份資源56株,設(shè)3個(gè)重復(fù)。接種:對(duì)所有供試煙株進(jìn)行莖基部的人工接種,每株接種病菌菌谷0.5 g,保持溫度26~28 ℃。

    1.4測(cè)定指標(biāo)與方法

    記載方法執(zhí)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 23222—2008《煙草病蟲(chóng)害分級(jí)及調(diào)查方法》。苗期接種鑒定以黑脛菌谷接種10 d 1次病情指數(shù)為準(zhǔn),田間病圃鑒定以菌谷抗種后20、40、60 d 3次病情指數(shù)平均值為準(zhǔn)。

    2結(jié)果與分析

    試驗(yàn)結(jié)果(表2)表明,苗期鑒定所設(shè)抗病鑒定對(duì)照病情指數(shù)均在正常范圍內(nèi),抗病對(duì)照品種革新3號(hào)表現(xiàn)為抗,中抗對(duì)照品種K326、金星6007表現(xiàn)為中抗,感病對(duì)照小黃金1025表現(xiàn)高感;田間鑒定所設(shè)抗病鑒定對(duì)照除抗病對(duì)照有小幅偏高,其他對(duì)照病情指數(shù)屬正常范圍,抗病對(duì)照品種革新3號(hào)表現(xiàn)為中抗,中抗對(duì)照品種K326、金星6007表現(xiàn)為中抗,感病對(duì)照小黃金1025表現(xiàn)高感。參試材料通過(guò)黑脛病苗期鑒定法鑒定出高抗黑脛病野生種4個(gè),抗黑脛病野生種14個(gè),中抗黑脛病野生種13個(gè),其他33個(gè)野生種資源為中感至高感。田間病圃鑒定法的結(jié)果與苗期鑒定有一定差異,鑒定出高抗黑脛病野生種4個(gè),抗黑脛病野生種17個(gè),中抗黑脛病種16個(gè)。

    2種方法共有10個(gè)野生種的鑒定結(jié)果有差異,但抗性鑒定的結(jié)果差異都是在相近抗性水平上波動(dòng),其中,N. excelsior、N. suaveolens 2個(gè)種在苗期鑒定為抗,田間病圃中因病情指數(shù)略高而劃分為中抗水平;N. rustica、N. ingulba、N. sylvestris 3個(gè)種苗期鑒定為中抗,田間病圃中則表現(xiàn)為中感;N. miersii、N. acuminata、N. amplexicaulis、N. setchellii、N. undulate 5個(gè)種苗期鑒定為抗,田間病圃病情指數(shù)達(dá)到感病水平。

    采用苗期接種鑒定法和田間病圃鑒定法對(duì)野生種進(jìn)行黑脛病抗性鑒定,病情指數(shù)存在一定差異,是野生種生育期、環(huán)境條件等因素造成的,但其結(jié)果具有一定的一致性,對(duì)抗性的判定雖有差異但都在相近抗性級(jí)別波動(dòng)[8-9]。田間病圃鑒定受土壤中病原分布不均勻、野生種移栽到田間后生育期差異較苗期更為明顯、田間其他病害發(fā)生等因素影響,影響誤差相對(duì)較大;苗期接種鑒定環(huán)境因素影響較少,鑒定結(jié)果相對(duì)穩(wěn)定,因此本研究以苗期接種鑒定結(jié)果為準(zhǔn),田間病圃鑒定結(jié)果為參考。endprint

    [BT1#]3討論

    從煙屬野生種分類來(lái)分析不同組野生種資源對(duì)煙草黑脛病的抗性發(fā)現(xiàn),分類地位屬不同組的野生種對(duì)煙草黑脛病的抗性有一定差異。參試材料中圓錐煙草組、殘波煙草組的野生種表現(xiàn)出對(duì)黑脛病較好的抗性,絨毛煙草組的野生種對(duì)黑脛病的抗性較差,其他組的野生種在同一組內(nèi)的抗性差異較大。圓錐煙草組、殘波煙草組的野生種黑脛病抗性明顯優(yōu)于其他組的野生種,圓錐煙草組6個(gè)參試材料中,N. cordifolia表現(xiàn)為高抗黑脛病,N. raimondii、N. benavidesii、N. solanifolia、N. knightiana、N.paniculata等5個(gè)種表現(xiàn)為抗病。殘波煙草組包括4個(gè)種,其中N. repanda、N. nesophila 2個(gè)種表現(xiàn)為高抗黑脛病,N. nudicaulis、N. stocktonii 表現(xiàn)為抗病。絨毛煙草組是栽培煙草的祖先種[10-11],該組所包含的參試材料黑脛病抗性均為中感至高感。絨毛煙草組包含5個(gè)野生種,其中N. tomentosiformis表現(xiàn)為高感黑脛病,N. otophora、N. tomentosa 2個(gè)種均為感,N. kawakamii為中感黑脛病。栽培煙草的另1個(gè)祖先種林煙草組只有N. sylvestris 1個(gè)種,對(duì)黑脛病抗性病圃鑒定表現(xiàn)為中感。

    香甜煙草組在分類上共包含26個(gè)種,參試材料為其中18個(gè)種。其中N. megalosiphon、N. rotundifolia、N. debneyi 3個(gè)種表現(xiàn)為抗病,N. fragrans、N. occidentalis、N. simulans、N. velutina、N. exigua、N. goodspeedii等6個(gè)種表現(xiàn)為中抗,N. excelsior、N. suaveolens苗期接種鑒定為抗性,病圃鑒定為中抗,N. africana表現(xiàn)為高感黑脛病,其他材料為中感至感病。具翼煙草組包含的6個(gè)種對(duì)黑脛病抗性差異較大,N. plumbaginifolia表現(xiàn)為抗黑脛病,N. forgetiana為高感黑脛病,其他4個(gè)種抗性在中抗至中感。在夜花煙草組中鑒定出N. glauca高抗黑脛病。

    在研究中鑒定出的4個(gè)高抗黑脛病野生種中,N. nesophila、N. repanda為四倍體,染色體數(shù)與普通煙草相同,N. cordifolia、N. glauca為二倍體。這些資源的利用具有很大困難,需要在遠(yuǎn)緣雜交上有進(jìn)一步的突破。黑脛病抗性鑒定結(jié)果受病原菌致病性不同、環(huán)境因素的影響等,可能在不同地區(qū)有一定差異,在研究與利用這些野生種資源時(shí)應(yīng)考慮這些因素帶來(lái)的誤差。

    參考文獻(xiàn):

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