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    拮抗菌生物有機(jī)肥對(duì)植煙土壤和煙草青枯病的影響

    2018-02-06 07:15:46吳曉宗曾強(qiáng)李紅麗
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2017年15期
    關(guān)鍵詞:生物有機(jī)肥土壤微生物土壤養(yǎng)分

    吳曉宗 曾強(qiáng) 李紅麗

    摘要:以常規(guī)施肥為對(duì)照,比較分析移栽前、團(tuán)棵期、旺長(zhǎng)期、成熟期4個(gè)生長(zhǎng)階段施用拮抗菌生物有機(jī)肥對(duì)煙株根際與非根際土壤養(yǎng)分、微生物數(shù)量及煙草青枯病的影響。結(jié)果表明,與常規(guī)施肥相比,施用生物有機(jī)肥的土壤pH值有所降低,根際土壤堿解氮、速效磷的含量有所升高,非根際土壤的堿解氮含量沒(méi)有明顯變化,根際與非根際土壤的細(xì)菌數(shù)量均低于常規(guī)施肥;施用生物有機(jī)肥的煙草青枯病發(fā)病率、病情指數(shù)比常規(guī)施肥低,煙株移栽95 d時(shí)的防效為31.43%;煙葉產(chǎn)量、上等煙的比例高于常規(guī)處理,產(chǎn)值增加3 039.30元/hm2。

    關(guān)鍵詞:生物有機(jī)肥;土壤微生物;土壤養(yǎng)分;煙草;青枯病

    中圖分類號(hào): S572.06文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A

    文章編號(hào):1002-1302(2017)15-0088-03

    煙草青枯病是由青枯雷爾氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的土傳病害,其發(fā)生不僅與高溫高濕的氣候有關(guān),還與土壤種類、土壤養(yǎng)分、連作情況、移栽時(shí)期、中期管理等有關(guān),難以進(jìn)行有效防治[1-3]。近年來(lái),人們選育出對(duì)病原菌具有拮抗效果的微生物,并制成生物有機(jī)肥用來(lái)防治土傳病害,不僅能改變土壤微生物區(qū)系、增加有益微生物數(shù)量、增強(qiáng)煙株抗病性,而且能改善植物根際的微生態(tài)環(huán)境,促進(jìn)根系生長(zhǎng)和對(duì)養(yǎng)分的吸收,同時(shí)還可以改善和修復(fù)土壤生態(tài)環(huán)境、減少化肥和農(nóng)藥的使用,突破了有機(jī)肥傳統(tǒng)的肥料效果,得到廣泛的研究應(yīng)用[4-5]。本試驗(yàn)是將從福建省邵武市青枯病發(fā)病嚴(yán)重的原位土壤中篩選出拮抗菌[6]制成拮抗菌生物有機(jī)肥,考查施用該生物有機(jī)肥對(duì)邵武地區(qū)煙草生長(zhǎng)環(huán)境的影響及防治青枯病的效果,為抗青枯病生物有機(jī)肥的進(jìn)一步應(yīng)用提供理論依據(jù)。

    1材料與方法

    1.1拮抗菌生物有機(jī)肥的配制

    拮抗菌生物有機(jī)肥由福建省邵武煙草公司提供。有機(jī)肥為秸稈與動(dòng)物糞便按8 ∶2混合的堆肥;拮抗微生物菌劑T5由鄭州大學(xué)提供,其基本生物性狀見(jiàn)文獻(xiàn)[6],在堆肥溫度降至40 ℃以下時(shí)進(jìn)行接種,接種量為108 CFU/g。

    1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    試驗(yàn)于2014年3—8月在邵武市徐溪村青枯病常發(fā)煙田進(jìn)行,該地塊2012年、2013年連續(xù)2年青枯病發(fā)病非常嚴(yán)重。試驗(yàn)設(shè)2個(gè)處理:處理1為常規(guī)施肥(對(duì)照),即施煙葉專用肥+化肥+有機(jī)肥;處理2施生物有機(jī)肥,即施煙葉專用肥+化肥+生物有機(jī)肥。煙葉專用肥、化肥的施用量一致,N ∶P2O5 ∶K2O 比例為1 ∶0.8 ∶2.7,折算為純氮用量 136.35 kg/hm2;生物有機(jī)肥的施用量與常規(guī)有機(jī)肥的施用量相等。完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),重復(fù)3次,每小區(qū)面積為132 m2,設(shè)有保護(hù)行,煙株的種植密度為1.65萬(wàn)株/hm2,株行間距為 0.5 m×1.2 m。施肥在植煙移苗前進(jìn)行,采用分層方法施肥,其他大田管理措施按邵武市優(yōu)質(zhì)煙生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程進(jìn)行。

    1.3測(cè)定內(nèi)容及方法

    分別在煙株移栽前、團(tuán)棵期(移栽后35 d)、旺長(zhǎng)期(移栽后60 d)、采摘期(移栽后90 d),采用5點(diǎn)取樣法,隨機(jī)選取長(zhǎng)勢(shì)良好的煙株,去除煙株根部表層土,將煙株連根拔起,抖掉根系外圍土,取緊貼在根表附近的土樣,同時(shí)在附近未種煙草的同一處理地塊取非根際土樣[7];采用稀釋平板法測(cè)定土壤微生物數(shù)量[8],細(xì)菌、真菌、放線菌分離培養(yǎng)基分別為牛肉膏蛋白胨瓊脂、馬鈴薯蔗糖瓊脂、高氏1號(hào)瓊脂,采用電位法測(cè)定pH值,分別采用堿解擴(kuò)散法、火焰分光光度計(jì)法、酸性氟化銨法測(cè)定土壤的堿解氮、速效鉀、速效磷的含量[9-10]。分別在煙株移栽后85、95、105 d,依據(jù)《煙草病蟲(chóng)害分級(jí)及調(diào)查方法》(GB/T 23222—2008)記錄青枯病的病情級(jí)數(shù),以株為單位分組調(diào)查病害嚴(yán)重程度,統(tǒng)計(jì)發(fā)病率、病情指數(shù)與防控效果,計(jì)算公式為

    1.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

    采用Excel 2007、SPSS 19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

    2結(jié)果與分析

    2.1施肥對(duì)根際與非根際土壤pH值的影響

    土壤pH值是影響土壤養(yǎng)分轉(zhuǎn)化及有效性的決定因素之一,同時(shí)對(duì)土壤微生物數(shù)量和種類也會(huì)產(chǎn)生影響,是影響煙草生長(zhǎng)發(fā)育、煙葉產(chǎn)量和品質(zhì)的重要因素[11]。有研究表明,福建煙區(qū)土壤以酸性為主,pH值在3.5~7.0之間,大多土壤的pH值低于5.5[12-13]。由圖1可知,隨煙株生長(zhǎng)發(fā)育,2種施肥處理的土壤pH值呈先升后降趨勢(shì),煙株旺長(zhǎng)期達(dá)到最大值;煙株根際土壤的pH值高于非根際土壤,說(shuō)明煙株根系在生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)分泌堿性物質(zhì)以提高根際土壤pH值,或是根系分泌的生物酶可以破開(kāi)土壤膠體吸附的氫離子以減少酸性物質(zhì)的形成;處理2根際與非根際土壤的pH值在煙株團(tuán)棵期、旺長(zhǎng)期、采摘期均低于處理1,尤其在旺長(zhǎng)期,處理2根際土壤的pH值為5.43,明顯低于處理1根際土壤pH值(563),說(shuō)明施用拮抗生物有機(jī)肥可降低煙株生長(zhǎng)土壤的pH值。

    2.2施肥對(duì)土壤養(yǎng)分的影響

    優(yōu)質(zhì)烤煙生產(chǎn)通常要求土壤氮素和有機(jī)質(zhì)含量適中,磷、鉀及微量營(yíng)養(yǎng)元素含量豐富。土壤養(yǎng)分的變化尤其是煙株根際土壤養(yǎng)分的變化,往往會(huì)造成根際微生物區(qū)系的變化,對(duì)煙株抵抗青枯病造成一定的影響[14-15]。由表1可知,根際土壤在煙株移栽前到團(tuán)棵期,由于根系對(duì)肥料的吸收和聚集,除處理1的堿解氮含量變化不顯著外,其他各處理的堿解氮、速效磷、速效鉀的含量都顯著高于移栽前(P<0.05);除處理2的堿解氮含量在團(tuán)棵期時(shí)相對(duì)最高,為185.48 mg/kg外,2個(gè)處理土壤其他養(yǎng)分含量均在旺長(zhǎng)期時(shí)相對(duì)最高,且顯著高于移栽前和團(tuán)棵期(P<0.05);處理2各生長(zhǎng)階段根際土壤的堿解氮和速效磷含量高于處理1,而速效鉀含量低于處理1。對(duì)煙株非根際土壤而言,各生長(zhǎng)期的速效磷、速效鉀含量呈先增后減趨勢(shì)外,堿解氮含量差異不顯著,變化趨勢(shì)平緩。

    2.3施肥對(duì)土壤微生物的影響endprint

    土壤微生物的種類、數(shù)量與土壤種類、氣候條件等當(dāng)?shù)刈匀簧鷳B(tài)及輪作、施肥等農(nóng)業(yè)生產(chǎn)措施密切相關(guān),當(dāng)這些生態(tài)條件或農(nóng)業(yè)措施發(fā)生改變時(shí),土壤微生物的種類和數(shù)量也會(huì)相應(yīng)發(fā)生變化[16]。由表2可見(jiàn),使用拮抗生物有機(jī)肥,對(duì)土壤微生物細(xì)菌、真菌和放線菌的數(shù)量產(chǎn)生較大影響;在健康煙株生長(zhǎng)期內(nèi),2個(gè)處理土壤的細(xì)菌數(shù)量呈逐漸增大趨勢(shì),各生長(zhǎng)期的細(xì)菌數(shù)量均顯著高于移栽前(P<0.05);根際土壤的細(xì)菌數(shù)量高于非根際土壤,說(shuō)明根際土壤微生物區(qū)系的細(xì)菌更為活躍;處理2的根際土壤細(xì)菌數(shù)量低于同期的處理1,可能是因?yàn)樘幚?的青枯病發(fā)生相對(duì)較重,誘導(dǎo)拮抗菌成為根際優(yōu)勢(shì)菌;隨健康煙株的生長(zhǎng),處理1根際、非根際土壤的真菌數(shù)量呈先升后降趨勢(shì),并在旺長(zhǎng)期數(shù)量相對(duì)最多,處理2根際、非根際土壤的真菌數(shù)量變化較小,說(shuō)明煙株生長(zhǎng)過(guò)程中,施用生物有機(jī)肥可使土壤碳素和能源利用較為穩(wěn)定;放線菌數(shù)量比煙株移植前有不同程度提高,這是由于放線菌與土壤腐殖質(zhì)含量有關(guān),可以利用煙株的根系纖維素,但這種數(shù)量變化在統(tǒng)計(jì)學(xué)上意義相對(duì)不大。

    2.4施肥對(duì)煙株青枯病發(fā)病的影響

    由表3可知,發(fā)病煙田中施入拮抗生物有機(jī)肥,青枯病的發(fā)生有明顯減輕,處理2的發(fā)病率、病情指數(shù)均低于處理1;移栽后85 d,處理2煙株的發(fā)病率、病情指數(shù)、防控效果分別為21.33%、6.37%、10.41%,移栽后95 d的防控效果為 31.43%,說(shuō)明施用生物有機(jī)肥不僅可有效抑制煙草青枯病的發(fā)生,還能降低煙株的病情指數(shù),提高防控效果,這可能是因?yàn)闊煵莞H土壤從施肥中獲得青枯病拮抗微生物,并具有一定的定殖能力,給煙株根際提供較大數(shù)量的有益拮抗菌群,在根際微生物區(qū)系中形成相對(duì)規(guī)模的優(yōu)勢(shì)菌。

    2.5各處理經(jīng)濟(jì)性狀對(duì)比

    由表4可見(jiàn),處理2的煙葉產(chǎn)量、上等煙比例、平均單葉質(zhì)量、經(jīng)濟(jì)效益均高于處理1,說(shuō)明施用拮抗生物有機(jī)肥,可明顯提高煙葉種植的經(jīng)濟(jì)效益,增效達(dá)3 039.30元/hm2,有較高的應(yīng)用價(jià)值。

    3結(jié)論與討論

    青枯病怕堿喜酸,易在偏酸性的土壤中發(fā)病,有研究表明,土壤理化性狀尤其是pH值與煙草青枯病的發(fā)生有密切關(guān)系[17],調(diào)節(jié)土壤酸堿度可防控青枯病的發(fā)生[18];而施用拮抗菌制成的生物有機(jī)肥對(duì)植物病害具有良好的防控效果,不僅滿足植物的生長(zhǎng)需要,還為拮抗菌提供足夠的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),使其在根際土壤微生物區(qū)系中更易成為優(yōu)勢(shì)菌[19-20]。本試驗(yàn)施用拮抗生物肥,并未導(dǎo)致土壤pH值的降低,其對(duì)青枯病明

    顯的抑制主要是通過(guò)拮抗菌促進(jìn)煙草根際微生物群落發(fā)生多樣性變化而獲得,這與王麗麗等的研究結(jié)果[21-22]一致。

    肥料中硝態(tài)氮和銨態(tài)氮的適當(dāng)配比可有利于煙株對(duì)氮素的吸收;鉀的吸收主要是根際的鉀,非根際區(qū)的鉀必須遷移至根際才可被吸收利用;磷的吸收在整個(gè)生長(zhǎng)過(guò)程中相對(duì)持續(xù)穩(wěn)定。有試驗(yàn)表明,南平市邵武地區(qū)的煙田土壤已呈現(xiàn)出土壤供氮、供鉀能力降低,而供磷能力增加的趨勢(shì)[14]。根際土壤對(duì)植物的影響比非根際土壤更為明顯[23],養(yǎng)分含量變化較大,這是由于植物根系與根際土壤養(yǎng)分交換更為頻繁。施用生物有機(jī)肥,土壤的理化性質(zhì)發(fā)生改變,煙草的生長(zhǎng)環(huán)境得到改善,隨煙株的生長(zhǎng)發(fā)育,其根際土壤堿解氮、速效磷含量都高于常規(guī)施肥。

    生物防治青枯病等土傳病害,土壤微生物區(qū)系的動(dòng)態(tài)變化更為重要,煙株生長(zhǎng)期內(nèi)土壤細(xì)菌數(shù)量增大,表明煙株的發(fā)育生長(zhǎng)良好,根系發(fā)育旺盛。試驗(yàn)結(jié)果表明,煙株生長(zhǎng)期內(nèi)不同處理的細(xì)菌數(shù)量表現(xiàn)出先增加后減少的變化趨勢(shì),這與羅明等研究結(jié)論[24]相類似。隨煙株生長(zhǎng)發(fā)育,施用生物有機(jī)肥的根際和非根際土壤真菌數(shù)量沒(méi)有較大變化,說(shuō)明煙株生長(zhǎng)過(guò)程中,生物有機(jī)肥的加入使土壤碳素和能源利用較為穩(wěn)定。煙株發(fā)病后,由于放線菌與土壤腐殖質(zhì)含量有關(guān),發(fā)病株的根際土壤放線菌數(shù)量有一定增加。通過(guò)對(duì)土壤微生物數(shù)量的測(cè)定分析,可以初步了解生物有機(jī)肥對(duì)土壤微生物區(qū)系的影響,下一步可通過(guò)基于宏基因組數(shù)據(jù)的根際微生物群落結(jié)構(gòu)分析,更深層次地了解生物有機(jī)肥防治青枯病的機(jī)理。

    總之,有機(jī)肥與拮抗青枯病的微生物結(jié)合制成生物有機(jī)肥,在為煙株生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)的同時(shí),可使青枯病的發(fā)病率、病情指數(shù)較常規(guī)施肥有明顯下降,移栽后95 d對(duì)青枯病的防控效果達(dá)到31.43%;施用生物有機(jī)肥,煙葉產(chǎn)量、上等煙比例都高于常規(guī)施肥,產(chǎn)值提高了3 039.30元/hm2,經(jīng)濟(jì)性狀較佳,具有良好的應(yīng)用價(jià)值。

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