聯(lián)合檢測PAPP-A、AFP和uE3對孕早中期子癇前期的預(yù)測價值

李玉琴，郭 紅

(青海省人民醫(yī)院產(chǎn)科，青海 西寧 810000)

子癇前期(pre-eclampsia，PE)作為妊娠期的特殊性疾病，其患病率為2%～8%，且因PE導(dǎo)致孕產(chǎn)婦病死在全部孕產(chǎn)婦死亡病因中位于第3位，可見PE是危險孕產(chǎn)婦生命安全的重要疾病[1]。并且，PE臨床癥狀主要表現(xiàn)為蛋白尿、水腫及高血壓等多器官功能異常，容易引起胎兒窘迫、早產(chǎn)與胎兒生長受限等情況[2]。但因目前尚未明確其有效的預(yù)測指標(biāo)，導(dǎo)致孕產(chǎn)婦發(fā)生PE的臨床征象后才進行就診治療，最終造成孕產(chǎn)婦及圍產(chǎn)兒預(yù)后情況較差，提高其死亡的發(fā)生率[3]。本次研究就青海省人民醫(yī)院160例孕婦進行回顧性分析，探討聯(lián)合檢測妊娠相關(guān)血漿蛋白A(pregnancy associated plasma protein A，PAPP-A)、甲胎蛋白(α-fetoprotein，AFP)和游離雌三醇(unconjugated estradiol，uE3)水平對孕早中期PE的預(yù)測價值。

1資料與方法

1.1一般資料

回顧性分析2016年3月至2017年1月在青海省人民醫(yī)院就診的80例PE孕婦(研究組)，其中輕度PE者53例為輕度組，重度PE者27例為重度組，并選擇同期80例健康體檢的孕婦為對照組，均為單胎孕婦。其中，對照組年齡為23～31歲，平均為(28.67±1.57)歲；孕周為10～18周，平均(14.76±1.96)周。研究組年齡為22～30歲，平均為(27.47±1.15)歲；孕周為11～20周，平均為(15.26±2.65)周。兩組孕婦年齡及孕周等一般資料對比均無明顯差異(均P>0.05)，具有可比性。本次研究內(nèi)容已獲得本院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核通過，且160例孕婦均自愿簽署知情同意書。

1.2檢測方法

采集兩組孕婦空腹靜脈血5mL，通過酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)對兩組孕婦血清PAPP-A、AFP及uE3水平進行檢測。

1.3觀察指標(biāo)

記錄兩組孕婦臨床資料，孕期定期對其進行產(chǎn)前檢查，并記錄兩組孕婦孕10～20周血清PAPP-A、AFP及uE3的水平。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

將160例孕婦的臨床相關(guān)數(shù)據(jù)錄入SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)處理分析，其中計量資料如血清PAPP-A、AFP及uE3水平等用(χ±S)表示并采用t檢驗，而計數(shù)資料用百分率(%)表示，則用χ2檢驗。用特異度、敏感度與風(fēng)險度檢驗血清PAPP-A、AFP及uE3水平在孕早中期PE的預(yù)測價值，并通過受試者工作曲線(ROC曲線)與約登指數(shù)對PAPP-A、AFP及uE3水平對孕早中期PE的預(yù)測價值進行評估，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1各組孕早中期PAPP-A、AFP及uE3水平情況

對比孕10～20周時，研究組PAPP-A水平明顯低于對照組(P<0.05)，且重度組PAPP-A水平明顯低于輕度組(P<0.05)；孕10～20周時，研究組AFP與uE3水平均較對照組低(均P<0.05)，而重度組AFP和uE3水平稍高于輕度組，但均無明顯差異(均P>0.05)，見表1。

表1各組孕早中期PAPP-A、AFP及uE3水平情況對比

Table 1 Comparison of the levels of PAPP-A, AFP and uE3in first and second trimester among groups(χ±S)

組別例數(shù)(n)PAPP?A(mU/L)AFP(g/L)uE3(g/L)對照組803725．97±784．2546．97±15．251．19±0．28 研究組80 2795．35±635．97? 37．96±12．64?0．95±0．25?t8．2444．0695．719P<0．001<0．001<0．001輕度組533258．35±542．87 35．97±10．460．98±0．31重度組271853．97±642．86#40．56±9．581．02±0．43t10．2741．9080．477P<0．0010．0600．635

注：與對照組對比，*P<0.05；與輕度組對比，#P<0.05。

2.2單獨檢測血清PAPP-A、AFP及uE3在孕早中期PE的預(yù)測價值

以兩組孕婦血清PAPP-A、AFP及uE3水平為檢驗變量，將孕早中期PE發(fā)病為狀態(tài)變量，以此算出約登指數(shù)，進而獲得血清PAPP-A、AFP及uE3預(yù)測PE價值最大時的水平為預(yù)測界值，則血清PAPP-A、AFP及uE3水平<預(yù)測界值時將出現(xiàn)PE，否則不會出現(xiàn)PE，由此計算PAPP-A、AFP及uE3預(yù)測PE的敏感度、相對風(fēng)險度及特異度。統(tǒng)計結(jié)果顯示，血清PAPP-A對孕早中期PE的預(yù)測界值為1 832mU/L，AFP為42g/L，而uE3為1.06g/L，PAPP-A、AFP及uE3預(yù)測孕早中期PE的特異度分別是97.79%、98.47%及98.77%，見表2。

表2單獨檢測血清PAPP-A、AFP及uE3在孕早中期PE的預(yù)測價值

Table 2 Predictive value of serum PAPP-A, AFP and uE3in PE in first and second trimester

血清指標(biāo)預(yù)測界值敏感度(%)相對風(fēng)險度特異度(%)約登指數(shù)PAPP?A1832mU/L42．342．8197．790．44AFP42g/L71．031．6598．470．33uE31．06g/L76．351．8698．770．38

2.3聯(lián)合檢測血清PAPP-A、AFP及uE3在孕早中期PE的預(yù)測價值

將血清PAPP-A、AFP及uE3的聯(lián)合檢測因子為本研究的檢驗變量，將有無發(fā)生PE作為狀態(tài)變量進行ROC曲線的繪制，見圖1，同時計算約登指數(shù)，計算預(yù)測價值最大的總阻力分值即為聯(lián)合檢測的預(yù)測界值，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血清PAPP-A、AFP及uE3的聯(lián)合預(yù)測因子為0.03時，約登指數(shù)最大為0.42，故此時孕早中期PE的預(yù)測價值最高。所以將0.03為本研究血清PAPP-A、AFP及uE3聯(lián)合預(yù)測因子的預(yù)測界值，結(jié)果顯示，此時聯(lián)合預(yù)測孕早中期PE的敏感度為70.56%，特異度為98.95%，相對風(fēng)險度為2.35。血清PAPP-A、AFP及uE3單獨或聯(lián)合預(yù)測，其對孕早中期PE均存在一定的預(yù)測價值，而三者進行聯(lián)合預(yù)測時的ROC曲線下面積最大，為0.79，所以聯(lián)合檢測價值較單獨檢測價值高，見表3。

圖1血清PAPP-A、AFP及uE3的聯(lián)合預(yù)測因子預(yù)測孕早中期PE的ROC曲線

Fig.1 ROC curve of serum PAPP-A, AFP and uE3as combined predictive factors for prediction PE in first and second trimester

表3單獨、聯(lián)合檢測PAPP-A、AFP及uE3的ROC曲線下面積

Table 3 Area under the ROC curve of single or combined detection of PAPP-A, AFP and uE3

血清指標(biāo)曲線下面積95%CIPPAPP?A0．680．51～0．850．01AFP0．700．54～0．800．02uE30．690．52～0．760．02聯(lián)合預(yù)測因子0．790．65～0．89<0．01

3討論

3.1 PE的發(fā)病機制

PE作為妊娠期常見的并發(fā)癥之一，其病情會伴隨著孕周的延長而有所加重，但在孕婦胎盤娩出后，PE的病情能夠短時間內(nèi)明顯改善，這亦反映出PE是胎盤源性疾病之一[4]。此外，腹腔妊娠的孕婦亦會存在PE的臨床癥狀。同時，部分伴有妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病的患者亦存在PE的臨床表現(xiàn)，這亦反映出PE發(fā)病與胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞密切相關(guān)，也表明胎盤因素是PE的重要病因，而并非以胎兒或子宮為來源[5]。故此，在近幾年來學(xué)者們對PE發(fā)病機制的研究中，逐漸認(rèn)為PE是胎盤源性疾病之一。由于孕早期時，絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞缺乏對其螺旋動脈的侵襲，造成子宮螺旋動脈在重塑期間出現(xiàn)異常，引起胎盤缺血缺氧，部分細(xì)胞毒性因子分泌發(fā)生障礙，而其進入母體后導(dǎo)致嚴(yán)重的血管內(nèi)皮細(xì)胞受損。PE的主要臨床表現(xiàn)有全身小動脈發(fā)生痙攣，引起子宮-胎盤血流灌注不足，導(dǎo)致胎盤發(fā)生缺血缺氧，部分激素、細(xì)胞因子的分泌量出現(xiàn)較大變化，引起蛋白尿及高血壓等癥狀的發(fā)生[6]。PE所引起的蛋白尿、水腫與高血壓的臨床表現(xiàn)均由于母體血管內(nèi)皮功能異常而引起[7]。所以，目前臨床中對PE的研究報道著眼于滋養(yǎng)細(xì)胞淺著床與血管內(nèi)皮功能異常的角度。目前，普遍觀點認(rèn)為，胎盤缺血缺氧、胎盤的淺著床與血管內(nèi)皮細(xì)胞受損是PE發(fā)病的病理生理基礎(chǔ)，但遺傳因素與母體免疫失調(diào)會提高其易感性[8]。亦有研究指出，在PE孕婦中，因胎盤異常與炎癥反應(yīng)而導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞激活，可進而引起不同血清標(biāo)志物的水平出現(xiàn)顯著變化，其中部分血清標(biāo)志物水平的改變較臨床癥狀的發(fā)生時間早[9]，這亦反映出通過對不同血清指標(biāo)進行檢測以預(yù)測PE發(fā)病情況，對早期篩查與及時診斷和治療以改善孕婦妊娠結(jié)局等均具有重要的價值。

3.2 PAPP-A、AFP及uE3與PE發(fā)病的關(guān)系分析

3.2.1 PAPP-A與 PE發(fā)病的關(guān)系分析

PAPP-A作為金屬蛋白酶超家族成員之一，亦是一種重要的血清標(biāo)志物，已被廣泛認(rèn)為其與PE發(fā)病有關(guān)。免疫組化檢測表明PAPP-A處在絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞層，是胎盤合體蛻膜與滋養(yǎng)細(xì)胞層形成的大分子糖蛋白之一，且PAPP-A無法通過胎盤，在整個孕期過程中均能被檢測出，并且PAPP-A能夠誘導(dǎo)胰島素樣生長因子的釋放，其在滋養(yǎng)細(xì)胞的生成與胎兒的生長發(fā)育中扮演著重要的角色[10]。目前，國內(nèi)外對PAPP-A的生物學(xué)功能的研究尚未形成確切看法，但普遍觀點認(rèn)為其與集體免疫抑制存在密切聯(lián)系。本次研究發(fā)現(xiàn)，孕10～20周時，研究組PAPP-A水平明顯低于對照組，且重度組PAPP-A水平明顯低于輕度組，與既往研究報道基本一致[11-12]。此外，本研究發(fā)現(xiàn)，血清PAPP-A在ROC曲線下的面積為0.68，效能靠近中等水平，對孕早中期PE的預(yù)測界值為1 832 mU/L，其預(yù)測孕早中期PE的敏感度為42.34%，特異度為97.79%。結(jié)果提示，PAPP-A水平在孕早中期PE發(fā)病存在一定聯(lián)系，早期妊娠血清PAPP-A水平明顯下降，這在PE發(fā)病中有著重要的篩查價值，并且能夠提示PE病情的嚴(yán)重程度。PAPP-A在PE發(fā)病期間的發(fā)生機制可能與以下幾點有關(guān)：①與嗜伊紅細(xì)胞基礎(chǔ)蛋白形成物復(fù)合蛋白的特異性交叉反應(yīng)；②PAPP-A本身的纖溶抑制作用；③PAPP-A對胰島素樣生長因子系統(tǒng)的影響。已有研究指出，血清PAPP-A在PE孕婦妊娠晚期時的水平明顯較健康孕婦高，提示在早期PE發(fā)病時，胎盤功能已逐漸減弱，此時尚未啟動相關(guān)代償機制，造成PAPP-A在胎盤中的生成量降低[12]。但在妊娠晚期時，PE病程啟動后，使得血清中的諸多黏附分子、細(xì)胞因子與胎盤分泌的蛋白表達水平明顯升高[13]。分析其原因，可能與滋養(yǎng)細(xì)胞功能異常的代償機制存在密切聯(lián)系。但目前有關(guān)血清PAPP-A水平在同一孕婦PE病程啟動前至發(fā)病期間動態(tài)變化的研究報道較少，故此今后仍需進一步探討。

3.2.2 AFP與 PE發(fā)病的關(guān)系分析

AFP作為胎兒時期較為常見的血清蛋白之一，其以胚胎的肝細(xì)胞為主要來源，對肝臟進行保護且不受母體影響，其在胎兒的生長發(fā)育過程中發(fā)揮著顯著的作用。一般而言，僅有部分AFP在妊娠期間利用胎盤進入母體，并且其在孕婦血清中的水平不僅與胎兒體內(nèi)AFP的分泌量存在密切聯(lián)系，而且與胎膜的通透性變化和胎盤的血流量存在一定的關(guān)系[14]。PE的孕婦全身小動脈痙攣，會降低其胎盤血流量，會進一步引起胎兒分泌AFP，進而降低其利用胎盤傳輸?shù)侥阁w的AFP水平。本次研究發(fā)現(xiàn)，孕10～20周時，研究組AFP水平較對照組低，分析其原因，可能因重度PE孕婦子宮發(fā)生螺旋動脈栓塞后，蛻膜出現(xiàn)出血壞死的情況，引起毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞出現(xiàn)損傷，最終對胎盤的屏障功能產(chǎn)生一定影響，進而提高其利用胎盤轉(zhuǎn)輸?shù)侥阁w的AFP水平。此外，本研究發(fā)現(xiàn)，重度組AFP和uE3水平稍高于輕度組，但均無明顯差異。分析其原因，可能因晚發(fā)型重度PE孕婦在其孕中期時，對其胎膜與胎盤的通透性影響較小，進而導(dǎo)致其進入母體血循環(huán)的AFP量相對較少而引起。其次，亦有可能因本研究的例數(shù)較少，且可能在檢測過程中出現(xiàn)誤差等影響，使得研究結(jié)果中未發(fā)現(xiàn)明顯差異。此外，結(jié)果顯示，血清AFP對孕早中期PE的預(yù)測界值為42g/L，AFP預(yù)測孕早中期PE的特異度98.47%，提示血清AFP水平在孕早中期PE發(fā)病存在一定聯(lián)系，早期妊娠血清AFP水平明顯下降，這在PE發(fā)病中有著重要的篩查價值。

3.2.3 uE3與 PE發(fā)病的關(guān)系分析

正常妊娠的情況下，雌激素表達水平會伴隨著孕周的延長而有所增加。早期妊娠的雌激素以黃體形成的雌酮與雌二醇為主要來源，且在孕10周后則由胎盤形成較多的雌激素。約有90%的雌三醇在妊娠期胎盤合成是以胚胎腎上腺為來源，而僅有10%是以母體為來源，同時無需利用孕婦的腎臟進行排泄，所有對血清uE3水平的檢測有助于評估胎盤功能的情況。在胎盤功能發(fā)生損傷時，使得血管內(nèi)皮細(xì)胞受損，導(dǎo)致胎盤缺血缺氧且引起毒性因子的釋放，并促使諸多滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致血清uE3水平明顯減少。因血壓升高，PE孕婦全身小血管出現(xiàn)痙攣，引起血管管腔發(fā)生狹窄，血液灌流較少，使得不同重要臟器組織缺氧與功能紊亂。子宮-胎盤血流灌注不足，引起絨毛出現(xiàn)退行性變，嚴(yán)重時引起出血而壞死，導(dǎo)致胎盤功能的異常，所以由胎盤分泌的不同標(biāo)志物的水平明顯降低，血清中的uE3水平明顯減少。本次研究發(fā)現(xiàn)，孕10～20周時，研究組uE3水平較對照組低。此外，本研究發(fā)現(xiàn)，重度組AFP、uE3水平稍高于輕度組，但均無明顯差異。統(tǒng)計結(jié)果顯示，血清uE3對孕早中期PE的預(yù)測界值為1.06g/L，uE3預(yù)測孕早中期PE的特異度為98.77%。結(jié)果提示，血清uE3水平在PE患病具有一定的預(yù)測價值，然而無法反映PE進展的嚴(yán)重程度。

3.3單獨、聯(lián)合檢測血清PAPP-A、AFP及uE3在孕早中期PE的預(yù)測價值

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血清PAPP-A、AFP及uE3的ROC曲線下面積分別是0.68、0.70與0.69，而三者進行聯(lián)合預(yù)測時的ROC曲線下面積最大，為0.79，此時聯(lián)合預(yù)測孕早中期PE的敏感度為70.56%，特異度為98.95%，相對風(fēng)險度為2.35。可溶性絡(luò)氨酸激酶1(sFlt-1)和胎盤生長因子(PLGF)是目前普遍認(rèn)可的預(yù)測PE的重要指標(biāo)。Meta分析認(rèn)為sFlt-1/PIGF診斷早期PE的折點分別為≤33和≥85時，敏感度為95.3%和88.6%[15]，稍低于本研究數(shù)據(jù)，而且本研究中血清PAPP-A、AFP及uE3三者聯(lián)合預(yù)測孕早中期PE的特異度也高于sFlt-1/ PLGF(特異度分別為97.6%和94.2%)。同時，本研究發(fā)現(xiàn)，血清PAPP-A、AFP及uE3的聯(lián)合預(yù)測因子為0.03時，約登指數(shù)最大為0.42，故此時孕早中期PE的預(yù)測價值最高。將0.03為本研究血清PAPP-A、AFP及uE3聯(lián)合預(yù)測因子的預(yù)測界值，結(jié)果顯示，血清PAPP-A、AFP及uE3單獨或聯(lián)合預(yù)測，其對孕早中期PE均存在一定的預(yù)測價值，而三者進行聯(lián)合預(yù)測時的ROC曲線下面積最大(0.79)，所以聯(lián)合檢測價值較單獨檢測價值高。但作為回顧性研究，筆者在立項階段未作正式的樣本量評估，而且單中心研究的偏倚及誤差難以控制，因此三項指標(biāo)的確切診斷價值有待進一步研究。

綜上所述，PAPP-A、AFP及uE3單獨或聯(lián)合預(yù)測，其對孕早中期PE均存在一定的預(yù)測價值，而三者進行聯(lián)合預(yù)測的預(yù)測價值較高于單獨檢測。

[1]Kim M J,Kim Y N,Jung E J,etal.Is massive proteinuria associated with maternal and fetal morbidities in preeclampsia?[J].Obstet Gynecol Sci,2017,60(3):260-265.

[2]羅欣,漆洪波.子癇前期發(fā)病機制分子生物學(xué)研究進展[J].中國實用婦科與產(chǎn)科雜志,2012,28(4):309-311.

[3]Wantania J,Attamimi A,Siswishanto R.A comparison of 2-methoxyestradiol value in women with severe preeclampsia versus normotensive pregnancy[J].J Clin Diagn Res, 2017,11(3):QC35-QC38.

[4]Tsigas E.Advocacy is essential to supporting women with pre-eclampsia[J].Obstet Med, 2017,10(1):33-35.

[5]Milosevic-Stevanovic J,Krstic M,Radovic-Janosevic D,etal.Number of decidual natural killer cells & macrophages in pre-eclampsia[J].Indian J Med Res,2016,144(6):823-830.

[6]李芬蘭,晉雅凌,李娜,等.妊娠早期血清學(xué)指標(biāo)聯(lián)合子宮動脈血流動力學(xué)指標(biāo)預(yù)測子癇前期[J].中國婦幼健康研究,2016,27(3):305-307.

[7]Kunder M,Kutty A M,Lakshmaiah V,etal.Correlation of plasma neutrophil elastase activity and endogenous protease inhibitor levels with the severity of pre-eclampsia[J].J Clin Diagn Res, 2017,11(3):BC09-BC12.

[8]賀同強,趙三純.子癇前期臨床發(fā)病相關(guān)因素研究進展[J].實用婦產(chǎn)科雜志,2012,28(10):823-826.

[9]湯彪,黃引平,姚鋒祥,等.中孕期高水平母血清游離人絨毛膜促性腺激素與子癇前期發(fā)生相關(guān)性的Meta分析[J].中國全科醫(yī)學(xué),2012,15(5):493-495.

[10]Vatish M,Stepan H,Hund M,etal.Re:Screening for pre-eclampsia using sFlt-1/PlGF ratio cut-off of 38 at 30-37 weeks' gestation[J].Ultrasound Obstet Gynecol,2017,49(5):665-666.

[11]胡燕芳,桑穎,戚小藝,等.中孕期孕婦子宮動脈血流參數(shù)與早發(fā)型子癇前期的相關(guān)研究[J].中國婦幼健康研究,2016,27(12):1459-1461.

[12]Alma L J,Bokslag A,Maas A H,etal.Shared biomarkers between female diastolic heart failure and pre-eclampsia: a systematic review and meta-analysis[J].ESC Heart Fail,2017,4(2):88-98.

[13]Dey P.Role of decidual natural killer cells & macrophages in pre-eclampsia[J].Indian J Med Res,2016,144(6):793-795.

[14]Atiba A S,Abbiyesuku F M,Oparinde D P,etal.Plasma malondialdehyde (MDA):an indication of liver damage in women with pre-eclamsia[J].Ethiop J Health Sci,2016,26(5):479-486.

[15]Zhao M,Zhu Z,Liu C,etal.Dual-cutoff of sFlt-1/PlGF ratio in the stratification of preeclampsia: a systematic review and meta-analysis[J].Arch Gynecol Obstet,2017,295(5):1079-1087.