百脈根化學成分的研究

李小強，楊怡昱，彭 偉，陳業(yè)高

(云南師范大學 化學化工學院，云南 昆明 650500)

百脈根(LotuscorniculatusLinn)為豆科(Leguminosae)百脈根屬(Lotus)植物，產自西北、西南和長江中上游各省區(qū)，生于濕潤而呈弱堿性的山坡、草地、田野或河灘地.亞洲、歐洲、北美洲和大洋洲均有分布[1].百脈根作為傳統中草藥，具有清熱祛濕、止渴解毒、活血散瘀和治療扁桃體炎、咽炎的功效.百脈根屬植物中主要有尖齒百脈根、蘭嶼百脈根、短果百脈根、細葉百脈根和翅莢百脈根等.迄今為止，已從百脈根屬植物中分離得到了大量化合物，主要包括黃酮類、酚苷類和三萜皂苷等.百脈根植物的提取物及活性成分具有較強的抗炎、抗菌作用，對腫瘤細胞有明顯的抑制作用[2-5].為了探索新的活性天然產物，我們對云南產百脈根的化學成分進行了分離鑒定，采用包括硅膠柱層析、反相柱層析和Sephadex LH-20柱層析等方法，從中分離得到了6個化合物.經過波譜分析鑒定其結構為：kaempherol (1), quercetin (2), quercetin-3-O-α-L-arabinofuranose (3), 2′,4′,3,4-α-pentahydroxychalcone (4), trimerhylester dehydrochebulic acid (5), syringic acid (6).其中化合物1-5為首次從該種植物中分離得到.

圖1 化合物1-6的結構

1 藥材與儀器

1.1 儀器

Bruker DRX-500 MHz 超導核磁共振儀(瑞士Bruker公司)；ZF-II型紫外分析儀(上海顧村中實儀器廠)；Sephadex LH-20：20～80μm(Pharmacia Fine Chemical Co., Ltd.)；反相色譜硅膠 RP-C 18：(40-63μm，德國Merck公司)；EYELA IV-1100型旋轉蒸發(fā)儀(上海愛朗儀器有限公司).

1.2 試劑

高效薄層層析硅膠板GF 25(煙臺化工研究院)；層析硅膠(青島海洋化工廠)；顯色劑10%濃硫酸-乙醇溶液；所用溶劑為工業(yè)純(重蒸)，其它試劑為化學純或分析純.

1.3 藥材

百脈根(LotuscorniculatusLinn) 地上部分5.0 kg，由昆明醫(yī)科大學藥學院陳麗君老師采集自云南尋甸，并鑒定.

2 提取與分離

百脈根地上部分5.0 kg，粉碎后用工業(yè)甲醇室溫浸提4次，浸出液減壓濃縮得甲醇提取物320 g.將浸膏加入到2.0 L蒸餾水中，使其完全溶解，然后用乙酸乙酯萃取4次，共用乙酸乙酯2.0 L，得到乙酸乙酯部分(185 g).再將乙酸乙酯部分用丙酮溶解，用288 g硅膠(80-100目)拌樣后上柱，用氯仿-甲醇(1 ∶0→0 ∶1)梯度洗脫，經薄層層析檢驗，分為9個部分F-1(35.0 g)、F-9(11.8 g)、F-9(16.5 g)、F-9(25.4 g)、F-9(45.8 g)、F-9(22.6 g)、F-9(11.4 g)、F-9(12.5 g)、F-9(18.6 g)、F-9(16.6 g).取氯仿/甲醇(20 ∶1)部分，經反復的硅膠柱層析，Sephadex LH-20柱層析和反相硅膠柱層析進行分離純化，得到kaempherol (1, 20 mg), quercetin (2, 9 mg), quercetin-3-O-α-L-arabinofuranose (3, 24 mg), 2′,4′,3,4-α-pentahydroxychalcone (4, 18 mg), trimerhylester dehydrochebulic acid (5, 45 mg)和syringic acid (6, 18 mg).

3 結構鑒定

化合物1：黃色粉末，分子式C15H10O6，溶于甲醇.1H-NMR (500 MHz, CD3OD): δ 6.21 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-6), 6.42 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-8), 8.09 (2H, d,J= 8.5 Hz, H-2′, 6′), 6.92 (2H, d,J= 8.5 Hz, H-3′, 5′);13C-NMR (125 MHz, CD3OD): δ 176.0 (s, C-4), 164.2 (s, C-7), 161.1 (s, C-9), 159.1 (s, C-4′), 156.9 (s, C-5), 146.7 (s, C-2), 135.7 (s, C-3), 129.3(d, C-2′, 6′), 122.3 (s, C-1′), 114.9 (d, C-3′, 5′), 103.2 (s, C-10), 97.9 (d, C-6), 93.1 (d, C-8). 以上數據與文獻中kaempherol的數據一致[6]，故鑒定化合物1為kaempherol.

化合物2：黃色粉末，分子式C15H10O7，溶于甲醇.1H-NMR (500 MHz, CD3OD): δ 7.75 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-2′), 7.65 (1H, dd,J= 2.0, 8.5 Hz, H-6′), 6.90 (1H, d,J= 8.5 Hz, H-5′), 6.41 (1H, d,J= 2.0, H-8), 6.20 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-6);13C-NMR (125 MHz, CD3OD): δ175.9 (s, C-4), 164.2 (s, C-7), 161.0 (s, C-5), 156.8 (s, C-9), 147.4 (s, C-4′), 146.6 (s, C-2), 144.8 (s, C-3′), 135.8 (s, C-3), 122.7 (s, C-1′), 120.3 (d, C-6′), 114.8 (d, C-5′), 114.6 (d, C-2′), 103.1 (s, C-10), 97.9 (d, C-6), 93.0 (d, C-8). 以上數據與文獻中quercetin的數據一致[7]，故鑒定化合物2為quercetin.

化合物3：黃色粉末，分子式為C20H18O11，溶于甲醇.1H-NMR (500 MHz, CD3OD): δ 7.55 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-6′), 7.55 (1H, s, H-2′), 6.91 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-5′), 6.41 (1H, s, H-8), 6.22 (1H, s, H-6), 5.49 (1H, s, H-1′′), 4.35 (1H, brs, H-4′′), 3.93 (1H, d,J= 10.8 Hz, H-5′′b), 3.86 (1H, dd,J= 10.8, 6.3 Hz, H-5′′a), 3.52 (2H, brs, H-2′′, 3′′);13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 178.6 (s, C-4), 164.6 (s, C-7), 161.7 (s, C-5), 157.9(s, C-9), 157.2(s, C-2), 148.4 (s, C-4′), 144.9 (s, C-3′), 133.5 (s, C-3), 121.7 (d, C-6′), 121.6 (s, C-1′), 115.4 (d, C-5′), 115.0 (d, C-2′), 108.1 (d, C-1′′), 104.2 (s, C-10), 98.5 (d, C-6), 93.4 (d, C-8), 86.6 (d, C-4′′), 81.9 (d, C-2′′), 77.3 (d, C-3′′), 61.1 (t, C-5′′). 以上數據與文獻中的quercetin-3-O-α-L-arabinofuranose數據一致[8]，故鑒定化合物3為quercetin-3-O-α-L-arabinofuranose.

化合物4：黃色晶體，分子是為C15H12O6，溶于甲醇.1H-NMR (500 MHz, CD3OD): δ 7.60 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-2), 7.52 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-6′), 7.23 (1H, dd,J= 8.0, 2.0 Hz, H-6), 6.85 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-5), 6.70 (1H, dd,J= 8.0, 2.0 Hz, H-5′), 6.69 (1H, s, H-β), 6.68 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-3′); 13C-NMR (125 MHz, CD3OD): δ 183.1 (s, C-β′), 168.4 (s, C-2′), 166.9 (s, C-4′), 148.0 (s, C-4), 146.3 (s, C-α), 145.3 (s, C-3), 125.4 (d, C-6′), 125.1 (d, C-6), 124.2 (s, C-1′), 117.6 (d, C-2), 115.3 (d, C-5), 113.5 (s, C-1), 113.3 (d, C-3′), 112.7 (d, 5′), 98.0 (d, C-β). 以上數據與文獻中2′,4′,3,4-α-pentahydroxychalcone的數據一致[9]，故鑒定化合物4為2′,4′,3,4-α-pentahydroxychalcone.

化合物5：白色粉末，分子式為C17H16O11，溶于甲醇.1H-NMR (500 MHz, CD3OD): δ 7.08 (1H, s, H-7), 6.84 (1H, s, H-3′), 5.37 (1H, d,J= 1.5 Hz, H-3), 5.32(1H, d,J= 1.5 Hz, H-2), 3.71 (3H, s, OCH3), 3.66 (3H, s, OCH3), 3.65 (3H, s, OCH3);13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 165.4 (s, C-1), 78.6 (d, C-2), 34.3 (d, C-3), 114.9 (s, 3-a), 143.0 (s, C-4), 145.5 (s, C-5), 139.1 (s, C-6), 107.4 (d, C-7), 116.3 (s, C-7a), 166.4 (s, C-1′), 141.6 (s, C-2′), 129.0(d, C-3′), 165.7 (s, C-4′), 169.8 (C=O), 51.8 (q, OCH3), 52.2 (q, OCH3), 51.4 (q, OCH3). 以上數據與文獻中trimerhylester dehydrochebulic acid的數據一致[10]，故鑒定化合物5為trimerhylester dehydrochebulic acid.

化合物6：白色針狀晶體，分子式為C9H10O5，溶于甲醇.1H-NMR (500 MHz, CD3OD): δ 3.83 (6H, s, -OCH3× 2), 7.08 (2H, d,J= 2.0 H-2, 6);13C-NMR (125 MHz, CD3OD): δ 51.1 (q, OCH3× 2), 108.8 (d, C-2, 6), 120.1 (s, C-1), 138.5 (s, C-4), 145.1 (s, C-3, 5), 167.9 (s, COOH). 以上數據與文獻中syringic acid的數據一致[11]，故鑒定化合物6為syringic acid.

4 結論

從百脈根地上部分分離得到6個化合物，通過波譜解析和理化性質對其進行了結構鑒定，分別鑒定為：kaempherol (1), quercetin (2), quercetin-3-O-α-L-arabinofuranose (3), 2′,4′,3,4-α-pentahydroxychalcone (4), trimerhylester dehydrochebulic acid (5)和syringic acid (6).其中化合物1-5為首次從該種植物中分離得到.

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