憂遁草的化學(xué)成分研究

冷 鵬，黃蓉麗，宋小平*，韓長日，鄭彩娟

(1. 海南師范大學(xué) 熱帶藥用植物化學(xué)教育部重點實驗室，海南?？?570203；2. 海南科技職業(yè)學(xué)院，海南?？?71126)

憂遁草是爵床科鱷嘴花屬植物，又名沙巴蛇草.在我國民間和東南亞地區(qū)多用于治療蛇蟲叮咬.在我國主要產(chǎn)于廣東、廣西、云南等地，憂遁草全株無毒，蛋白質(zhì)含量較高，是一種理想的蔬菜[1].現(xiàn)代藥理活性研究表明,憂遁草石油醚及乙酸乙酯提取物對皰疹及帶狀皰疹病毒均有良好的療效[2].憂遁草化學(xué)成分種類豐富，結(jié)構(gòu)類型包括三萜類、黃酮類、含硫化合物、植物甾醇類、脫鎂葉綠素類、腦苷類、氨基酸、微量元素、生物堿以及多種小分子化合物等[3].為尋找憂遁草中的活性化學(xué)成分，筆者對憂遁草95%乙醇提取物的化學(xué)成分展開研究，分離得到 9 個化合物，并通過核磁共振譜圖和與文獻數(shù)據(jù)對照確定為：黑麥草內(nèi)酯 (1)，異黑麥草內(nèi)酯 (2)， 3-羥基-9甲氧基紫檀烷 (3)，蚱蜢酮 (4)， (-) evofolin B (5)， 3-羥基-1-(4-羥基-3, 5-二甲氧基苯) -1-丙酮(6)， 吲唑 (7)，吲哚-3-甲醛 (8)，entadamide A (9)(圖 1).其中化合物 3 - 6，9為首次從憂遁草中分離得到.

圖1 化合物 1-9 結(jié)構(gòu)

1 儀器與材料

1.1 儀器

核磁共振儀 (Bruker AV-400MHz，瑞士Bruker公司)；HPLC液相色譜 (安捷倫公司，USA)；AOTOPOL V型旋光儀 (魯?shù)婪蚬?，USA).

1.2 試劑

LH-20葡聚糖凝膠 (Amersham Biosciences公司)；C-18反相硅膠 (Merck公司)；柱色譜硅膠 (100-200目，200-300目，青島海洋化工廠)；薄層析色譜硅膠 (GF254，青島海洋化工廠)；所有有機溶劑來自廣東西隴化學(xué)試劑廠.

1.3 材料

憂遁草新鮮枝葉共65 kg，于2016年4月采集自海南省五指山憂遁草種植區(qū).

2 提取與分離

干憂遁草 (17.5 Kg)，用95%的乙醇 (60 L)滲透提取，濃縮后用水 (5 L)分散，分別使用石油醚 (60 ～ 90 ℃)，乙酸乙酯萃取獲得石油醚浸膏 (137 g)，乙酸乙酯浸膏 (29 g).取乙酸乙酯浸膏采用石油醚與乙酸乙酯(100∶0-0∶100)及乙酸乙酯與甲醇 (100∶0-80∶20)梯度洗脫得5個組分 (Fr.1 - Fr.5).經(jīng)TLC檢測后對 Fr.2 進行反復(fù)硅膠層析和半制備HPLC分離[4]獲得化合物 1 (25 mg)、化合物2 (9 mg)、化合物3 (24 mg)、化合物4 (19 mg)、化合物5 (14 mg)、化合物 6 (12 mg), 對 Fr.5 分離獲得化合物 10 (4.2 mg). 對石油醚浸膏用石油醚與乙酸乙酯(100∶0 - 00∶100)及乙酸乙酯與甲醇 (100∶0-80∶20)梯度洗脫得 5 個組分 (Fr.1 - Fr.5).將 Fr.3采用100～200目硅膠洗脫和C-18反相柱反復(fù)洗脫并用半制備 HPLC 分離，化合物 7 (27 mg), 化合物 8 (11 mg)，化合物 9 (19 mg).

3 化合物結(jié)構(gòu)鑒定

化合物 1：淡黃色油狀物，分子式為C11H16O3，溶于丙酮.1H-NMR (400 MHz, CD3COCD3):δ5.63 (1H, s, H-7), 4.24 (1H, m, H-3), 4.13 (1H, br s, 3-OH), 2.34 (1H, dt,J= 2.0, 12.0 Hz,H-4b), 1.96 (1H, dt,J= 2.0, 12.0 Hz, H-2b), 1.65 (3H, s, H-11), 1.64 (1H, dd,J= 4.0, 12.0 Hz, H-4a), 1.49 (1H, dd,J= 4.0, 14.0 Hz, H-2a), 1.47 (3H, s, H-10), 1.21 (3H, s, H-9).13C-NMR (100Hz, CD3COCD3):δ36.6 (C-1), 47.9 (C-2), 66.8 (C-3), 46.4 (C-4), 87.0 (C-5), 183.4 (C-6), 113.3 (C-7), 171.6 (C-8), 30.5 (C-9), 26.9 (C-10), 27.5 (C-11). 以上數(shù)據(jù)與文獻[5]數(shù)據(jù)報道一致，鑒定為黑麥草內(nèi)酯.

化合物 2：淡黃色油狀物，分子式為C11H16O3，溶于氯仿.1H-NMR (400 MHz, CDCl3):δ5.63 (1H, s, H-7), 4.13 (1H, tt,J= 12.0, 4.0Hz, H-3), 2.34 (1H, dt,J= 2.0, 12.0Hz, H-4b), 1.96 (1H, dt,J= 2.0, 12.0Hz, H-2b), 1.65 (3H, s, H-11), 1.64 (1H, dd,J= 4.0, 12.0Hz, H-4a), 1.49 (1H, dd,J= 4.0, 14.0, H-2a), 1.47 (3H, s, H-10), 1.21 (3H, s, H-9).13C-NMR (100Hz, CDCl3):δ36.6 (C-1), 47.9 (C-2), 66.8 (C-3), 46.4 (C-4), 87.0 (C-5), 183.4 (C-6), 113.3 (C-7), 171.6 (C-8), 30.5 (C-9), 26.9 (C-10), 27.5 (C-11). 以上數(shù)據(jù)與文獻[6]報道一致，鑒定為異黑麥草內(nèi)酯.

化合物 3：白色針狀晶體，分子式為C16H14O4，溶于丙酮.1H-NMR (400 MHz, CD3COCD3): δ 7.32 (1H, d,J= 8.0Hz, H-1), 7.21 (1H, d,J= 8.0Hz, H-7), 6.55 (1H, dd,J= 2.0, 8.0Hz, H-2), 6.43 (1H, dd,J= 2.0, 8.0Hz, H-8), 6.36 (1H, d,J= 2.0Hz, H-10), 6.35 (1H, d,J= 2.0Hz, H-4), 5.51 (1H, d,J= 6.0Hz, H-11a), 4.26 (1H, dd,J= 8.0, 16.0 Hz, H-6a), 3.74 (3H, s, -OMe), 3.60 (2H, m, H-6). 13C-NMR (100Hz, CD3COCD3):δ133.0 (C-1), 110.5 (C-2), 159.7 (C-3), 103.9 (C-4), 157.7 (C-4a), 67.1 (C-6), 40.4 (C-6a), 120.4 (C-6b), 125.8 (C-7), 97.2 (C-8), 162.1 (C-9), 106.9 (C-10), 161.8 (C-10a), 79.4 (C-11a), 112.8 (C-11b), 55.7 (-OMe). 以上數(shù)據(jù)與文獻[7]報道一致，鑒定為3-羥基-9-甲氧基紫檀烷.

化合物 4：白色粉末，分子式為C13H20O3，溶于甲醇.1H-NMR (400 MHz, CD3OD):δ5.86 (1H, s, H-8), 4.24 (1H, m, H-3), 2.22 (12H, s, -OMe), 2.04 (1H, s, H-4a), 1.95 (1H, ddd,J= 12.0, 4.0, 2.0Hz, H-2a), 1.41 (1H, s, H-2b), 1.31 (1H, m, H-4b).13C-NMR (100Hz, CD3OD):δ36.9 (C-1), 49.8 (C-2), 64.4 (C-3), 49.7 (C-4), 72.4 (C-5), 119.9 (C-6), 200.9 (C-7), 101.1 (C-8), 211.5 (C-9), 32.2 (C-10), 26.5 (C-11), 29.3 (C-12), 30.7 (C-13). 以上數(shù)據(jù)與文獻[8]報道一致，鑒定為蚱蜢酮.

化合物 5：淡黃色粉末，分子式為C17H18O6，溶于甲醇.1H-NMR (400 MHz, CD3OD):δ7.61 (1H, dd,J= 8.0, 2.0Hz, H-4′), 7.56 (1H, d,J= 2.0Hz, H-6″), 6.89 (1H, d,J= 2.0Hz, H-2′), 6.77 (1H, d,J= 8.0Hz, H-3′), 6.75 (1H, dd,J= 8.0, 2.0Hz, H-6′), 6.73 (1H, d,J= 8.0Hz, H-5′), 4.61 (1H, dd,J= 8.0, 6.0Hz, H-2), 4.24 (1H, dd,J= 10.0, 8.0Hz, Hb-1), 3.86 (3H, s, 5″-OMe), 3.82 (3H, s, 3′-OMe), 3.70 (1H, dd,J= 10.0, 6.0Hz, Ha-1). 13C-NMR (100Hz, CD3OD):δ65.5 (C-1), 56.4 (C-2), 199.7 (C-3), 129.9 (C-1′), 112.8 (C-2′), 149.3 (C-3′), 147.0 (C-4′), 116.6 (C-5′), 122.2 (C-6′), 130.4 (C-1″), 153.1 (C-2″), 115.7 (C-3″), 125.1 (C-4″), 148.9 (C-5″), 112.6 (C-6″), 56.4 (3′-OMe), 56.3 (5′-OMe) . 以上數(shù)據(jù)與文獻[9]報道一致，鑒定為(-)evofolin B.

化合物 6：無色油狀物，分子式為C11H14O5，溶于甲醇.1H-NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.32 (2H, s, H-2, 6), 3.93 (2H, t,J= 6.0Hz, H-9), 3.90 (6H, s, -OMe), 3.19 (2H, t,J= 6.0Hz, H-8).13C-NMR (100Hz, CD3OD):δ107.2 (C-2, 6), 149.0 (C-3, 5), 199.7 (C-7), 58.9 (C-8), 41.6 (C-9), 56.8 (-OMe). 以上數(shù)據(jù)與文獻[10]報道一致，鑒定為3-羥基-1-(4-羥基-3, 5-二甲氧基苯)-1-丙酮.

化合物7：白色粉末，分子式為C7H6N2，溶于氯仿.1H-NMR (400 MHz, CDCl3):δ8.08 (1H, dd,J= 2.0, 6.0 Hz, H-4), 7.93 (1H, s, H-3), 7.43 (1H, dd,J= 2.0, 6.0Hz, H-7), 7.19 (1H, m, H-6), 7.16 (1H, m, H-5). 13C-NMR (100Hz, CDCl3):δ133.2 (C-3), 122.2 (C-4), 122.0 (C-5), 127.6 (C-6), 112.8 (C-7), 138.1 (C-8), 123.4 (C-9). 以上數(shù)據(jù)與文獻[11]報道一致，鑒定為吲唑.

化合物 8：白色粉末，分子式為C9H7NO，溶于氯仿.1H-NMR (400 MHz, CDCl3):δ10.02 (1H, s, H-9), 8.22 (1H, d,J= 8.0Hz, H-4), 8.20 (1H, d,J= 8.0Hz, H-7), 7.54 (1H, d,J= 2.0Hz, H-1), 7.25 (1H, t,J= 8.0Hz, H-6), 7.20 (1H, t,J= 8.0, H-5). 13C-NMR (100Hz, CDCl3): δ 137.1 (C-1), 119.1 (C-2), 124.6 (C-3), 122.2 (C-4), 123.6 (C-5), 124.6 (C-6), 112.0 (C-7), 137.1 (C-8), 185.5 (C-9). 以上數(shù)據(jù)與文獻[12]報道一致，鑒定為吲哚-3-甲醛.

化合物 9：白色晶體，分子式為C6H11NO2S，溶于甲醇.1H-NMR (400 MHz, CD3OD):δ7.56 (1H, d,J= 16.0Hz, H-6), 5.85 (1H, d,J= 16.0Hz, H-5), 3.62 (2H, t,J= 6.0Hz, H-1), 3.38 (2H, m, H-2), 2.35 (3H, s, S-CH3).13C-NMR (100Hz, CD3OD):δ61.7 (C-1), 42.9 (C-2), 167.6 (C-4), 116.6 (C-5), 143.6 (C-6), 14.3 (S-CH3). 以上數(shù)據(jù)與文獻報道一致[13]鑒定化合物為 entadamide A.

4 結(jié)論

對憂遁草的石油醚和乙酸乙酯浸膏進行了化學(xué)成分研究，從中分離得到 9 個化合物，分別鑒定為黑麥草內(nèi)酯 (1)，異黑麥草內(nèi)酯 (2)，3-羥基-9甲氧基紫檀烷 (3)，蚱蜢酮 (4)，(-)evofolin B (5)，3-羥基-1-(4-羥基-3, 5-二甲氧基苯)-1-丙酮 (6)，吲唑 (7)，吲哚-3-甲醛 (8)，entadamide A (9).其中化合物 3-6，9 為首次從憂遁草中分離得到.

[1] 劉厚誠.新興野菜鱷嘴花[J].植物雜志，2001(2): 24.

[2] Sakdarat S, Shuyprom A, Pientong C, et al. Bioactive constituents from the leaves ofClinacanthusnutansLindau[J]. Bioorganic & Medicinal Chemistry，2009, 17(5): 1857 -1860.

[3] Alam M A, Ferdosh S, Ghafoor K, et al .Clinacanthusnutans: a review of the medicinal uses, pharmacology and phytochemistry[J]. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine，2016, 9(4): 402-409.

[4] 劉書劍,常曉鈺,都壽臻，等.爬樹龍化學(xué)成分的研究[J]. 海南師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)，2017，30(2):138-141.

[5] 史大勇, 韓麗君, 孫杰, 等.刺狀魚棲苔化學(xué)成分研究史[J].中國中藥雜志，2007, 32(11): 1035-1037.

[6] 肖美添, 葉靜, 洪本博, 等.白苞蒿化學(xué)成分研究[J].中國藥學(xué)雜志，2011(6): 414-417.

[7] 劉毅,馬曉霞,陳虎彪,等.華北巖黃芪化學(xué)成分研究[J].中國藥學(xué)雜志，2005, 14(2): 75-78.

[8] Kuang H X, Yang B Y, Xia Y G, et al. Chemical constituents from the flower ofDaturametelL [J]. Archives of Pharmacal Research，2008, 31(9): 1094-1097.

[9] Rahman M A A, Moon S S. Isoetin 5′-methyl ether a cytotoxic flavone fromTrichosantheskirilowii[J]. Cheminform，2008, 39(2): 1261-1264.

[10] 于民豐, 邵赟, 陶燕鐸. 藏藥鮮卑花化學(xué)成分研究[J].中草藥，2014, 45(24): 3528-3531.

[11] 袁譜龍, 王雪萍, 陳凱先,等.水茄莖化學(xué)成分的研究[J].中成藥，2016, 38(1): 104-107.

[12] 范文乾,熊曉夢,馬卓，等. 空心蓮子草的化學(xué)成分[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2008, 6(2): 112-115.

[13] Xiong H, Xiao E, Zhao Y H, et al. Sulfur-containing amides fromEntadaphaseoloides[J]. Acta Pharmaceutica Sinica，2010, 45(5): 624-626.