丹參的化學(xué)成份分離及其抗氧化活性分析

李宣怡

摘 要：目的對(duì)于丹參的根和根莖的化學(xué)成分的分離和相關(guān)抗氧化性的活性進(jìn)行相關(guān)性的研究。方法分別去采用醇提法與水提法分離其脂溶性的化學(xué)成分以及水溶性的化學(xué)成份，這兩種成分分別是丹參酮和丹酚酸。運(yùn)用相關(guān)的水楊酸與鄰苯三分法分別去分析丹參酮對(duì)于羥基自由基以及超氧陰離子清楚的能力。運(yùn)用水楊酸法以及還原法分別的去分析其丹酚酸對(duì)于羥自由基清楚的能力和還原的能力。結(jié)果丹參酮清除其羥基自由基與超氧陰離子能力強(qiáng)，丹酚酸有著較強(qiáng)的清除其羥基自由基的相關(guān)的能力和還原能力。結(jié)論丹參根以及其根莖當(dāng)中的含有的水溶性與脂溶性的相關(guān)的化學(xué)成份有很強(qiáng)的抗氧化活性和還原的能力，可以有效的去預(yù)防治療心血管等相關(guān)的疾病疾病，有很好的藥用價(jià)值，非常值得使用。

關(guān)鍵詞：丹參 化學(xué)成分 抗氧活性 討論與分析

中圖分類號(hào)：TS26 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-3791（2017）11（a）-0213-02

中醫(yī)的相關(guān)理論認(rèn)為，丹參味苦，微寒，歸心、肝經(jīng)，具有祛淤止痛、活血通經(jīng)、清心除煩之功效。古有“一味丹參，功同四物”之說，可以適用于月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)閉痛經(jīng)、癮瘕積聚、胸腹刺痛、熱痹疼痛、瘡瘍腫痛、心煩不眠和肝脾腫大以及心絞痛等等。丹參和自身的相關(guān)制劑對(duì)于治療一些心腦血管的疾病或者是癌癥、中風(fēng)以及肝炎等等包括抗衰老都有著十分好的效果。自從20世紀(jì)30年代以來，我們國內(nèi)外的一些學(xué)者都分分對(duì)丹參相關(guān)活性成分與相關(guān)的藥理作用作出了大量的研究，并且還得到了大量的化學(xué)成分。

本文主要研究如何使用水提法和醇提法來對(duì)丹酚酸和丹參酮，經(jīng)過分離之后就可以使用這些分離出來的成分對(duì)羥自由基以及超氧陰離子這些與抗氧性活性有關(guān)系的元素進(jìn)行清除以及研究，最終為丹參治療相關(guān)疾病提供理論依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

HWS-24型電熱恒溫水浴鍋（上海泰坦科技股份有限公司）；磁力攪拌器（德國）；電子天平（梅特勒）；DHG-9005型的電熱鼓風(fēng)干燥箱（北京恒泰）；7235型可見光的分光光度計(jì)（上海天普）；離心機(jī)）；組織粉碎機(jī)（上海勝啟儀表有限公司）；250ML的燒杯；專用移液器；ZKJ-1001型循環(huán)水真空抽氣泵（成都普龍科學(xué)儀器有限公司）；KQ3200型超聲波清洗器（上海精密）。

1.2 試藥

甲醇、丹參藥材、鹽酸、過豬油、三氯化鐵、鄰苯三分、水楊酸、鐵氰化鉀、乙醇、三羥甲基氨基甲、氧化氫、烷硫酸亞鐵檸檬酸。

2 丹參抗氧化的作用以及脂溶性化學(xué)成分的分離研究

2.1 丹參脂溶性的化合物（總丹參酮）提取

丹參中有許多有醫(yī)用價(jià)值的成分，其中比較常見的一種就是總丹參酮，提取總丹參酮主要使用下面的手法，首先搗碎選好的丹參，然后再進(jìn)行過篩處理，在進(jìn)行處理的過程要注意，必須要比較精密的稱出50g的丹參粉末放入到圓底燒瓶中去，確保全部放入之后還需要加入95%濃度的乙醇約250mL，經(jīng)過了超聲提取20min之后，取出加熱回流提取1h，然后再加入95%的乙醇溶液250mL提取一次，將兩次的提取液進(jìn)行充分的合并混勻，開始進(jìn)行濃縮，靜置30min之后，等其晶體全部析出，再離心5min，最后放到干燥箱之中，進(jìn)行干燥1h之后，最終得到一種紅色的固體0.308g，也就是要的總丹參酮。

2.2 配置丹參酮試劑

在對(duì)丹參酮溶液進(jìn)行配置時(shí)的主要操作如下：首先需要精確的稱適量的丹參酮粉末，然后使用純凈的乙醇溶液進(jìn)行溶解處理并分別配置出濃度為0.01%、0.02%以及0.05%的丹參酮溶液。其pH8.2的相關(guān)的緩沖液進(jìn)行配置，然后再將該種溶液10mL和9mL的0.02mol/mL的氯化氫混合制成。

2.3 丹參酮對(duì)于一些油脂的抗氧化能力相關(guān)的測(cè)定

采用相關(guān)的烘箱法，稱取豬油20g，放到250mL的燒杯當(dāng)中，然后加入相應(yīng)的1mL的丹參酮溶液，充分的進(jìn)行混勻，將其豬油放到恒溫箱當(dāng)中，在70℃的條件下，每?jī)蓚€(gè)小時(shí)運(yùn)用玻璃杯攪拌一次，24h之后，運(yùn)用紫外可見光光度計(jì)去測(cè)定其相關(guān)樣品中過氧化氫值。

2.4 丹參酮清除羥自由基的能力測(cè)定

運(yùn)用水楊酸法，鐵離子可以和過氧化氫產(chǎn)生羥自由基。其試驗(yàn)的方法：量取相應(yīng)的1mL的丹參酮溶液，然后再加入0.5mL30%的過氧化氫溶液、適量的硫酸亞鐵溶液與適量的水楊酸溶液。然后需要進(jìn)行的操作就等待加入的化學(xué)成分在充分反應(yīng)大約30mL，然后使用可見光紫外光的光度計(jì)，將觀測(cè)范圍設(shè)定為510nm波長(zhǎng)，然后以純凈的蒸餾水作為比較物并測(cè)定其相關(guān)的吸光度值，計(jì)算相應(yīng)清除率。

2.5 丹參酮清除其超氧陰離子的能力測(cè)定

丹參酮有一個(gè)十分重要的作用就是用來清除超氧陰離子，而測(cè)定其清除超氧負(fù)離子能力運(yùn)用的方法主要使用的就是鄰苯三分法。這種方法主要的操作如下：首先將實(shí)驗(yàn)的環(huán)境調(diào)整問哦堿性，在這種環(huán)境下鄰苯三分就會(huì)發(fā)生自氧化反應(yīng)，在自氧化的過程中，會(huì)有一種有色的中間反應(yīng)產(chǎn)物產(chǎn)生，而這些有色的中間產(chǎn)物也會(huì)進(jìn)一步去氧化其他的中間產(chǎn)物，這樣就可以保證自氧化過程不斷進(jìn)行；待自氧化過程進(jìn)行得差不多的時(shí)候就可以加入一些清潔劑，這樣就可以將超氧陰離子清除掉，從而抑制生成新的超氧負(fù)離子，最終抑制超氧負(fù)離子的自氧化過程。

3 丹參水溶性的成分分離和抗氧化活性的研究

3.1 水溶性的成分提取分離

將其丹參粉進(jìn)行粉碎過篩，準(zhǔn)確的稱取2g的粉末放到250mL的三角瓶當(dāng)中，加100mL蒸餾水，100℃水水浴4h，取出室溫冷卻，備用。得到丹酚酸類化合物提取液。相當(dāng)于10g/L。

3.2 丹酚酸清除其羥自由基的相關(guān)能力測(cè)定

運(yùn)用水楊酸法，取相應(yīng)的丹酚酸溶液1mL，然后按照相應(yīng)的方法進(jìn)行。結(jié)果顯示，濃度越高，其清除率也就越高。

3.3 相應(yīng)的還原能力的測(cè)定

對(duì)于丹參來說，其一些成分還具有一定的還原能力，而測(cè)定其還原能力的原理也比較簡(jiǎn)單，就是依據(jù)氧化還原反應(yīng)的原理進(jìn)行測(cè)定。還原能力越強(qiáng)的，在氧化還原反應(yīng)中越能夠提供電子，提出出來的電子可以將正三價(jià)的鐵元素還原為正二價(jià)的鐵元素，也可以提供給自由基，與自由基進(jìn)行相關(guān)的反應(yīng)，使之變化為更加穩(wěn)定的物質(zhì)，而據(jù)化學(xué)領(lǐng)域的相關(guān)研究，化學(xué)成分的抗氧化能力與其還原能力有很大的相關(guān)性。對(duì)丹參成分的還原能力測(cè)定的主要試驗(yàn)方法如下：移取其相關(guān)項(xiàng)中丹酚酸溶液1mL，然后加入0.2mL0.2mol/L的PBS溶液與0.5mL1%鐵氰化鉀溶液，然后就需要將溶液放在大約55攝氏度的水當(dāng)中進(jìn)行水浴操作約20分鐘。

4 結(jié)語

丹參是一種唇形科的鼠尾草植物，丹參的干燥根和根莖，在春秋二季的時(shí)候進(jìn)行采挖并去除泥沙，干燥。在民間，又將其稱之為“紅根”。通過以上的一系列關(guān)于丹參的成分的各種研究表明：丹參酮在清除超氧負(fù)離子以及羥基的自由基方面有比較強(qiáng)的能力，而且在限定范圍內(nèi)，其效果還有劑量正相關(guān)，也就是說，丹參是一種天然有效的用于清除自由基的清除劑。

參考文獻(xiàn)

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