腫瘤患者細(xì)胞免疫功能的影響因素分析*

楊偉 賀彬彬

(重慶市墊江縣人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，重慶 408300)

腫瘤患者細(xì)胞免疫功能的影響因素分析*

楊偉 賀彬彬

(重慶市墊江縣人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，重慶 408300)

目的：旨在探討各相關(guān)因素對腫瘤患者的細(xì)胞免疫功能的影響。方法采用我院檢驗(yàn)科的BD FACSCantoⅡ流式細(xì)胞儀分析2016年6月至2017年4月期間67例肺癌、胃癌及結(jié)直腸癌腫瘤患者體內(nèi)CD4+、CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)及CD4+/CD8+，將CD4+細(xì)胞計(jì)數(shù)或CD4+/CD8+低于正常范圍最低值的患者定義為其細(xì)胞免疫功能低下，使用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)分析軟件全方位分析各相關(guān)因素與CD4+、CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)、CD4+/CD8+及細(xì)胞免疫功能低下之間的關(guān)系，最后客觀地討論出可能會受到影響的相關(guān)因素。結(jié)果男性及年齡≤60歲的患者的CD4+、CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)和CD4+/CD8+比值均高于女性及>60歲的患者，且總蛋白(Total protein，TP)降低組、白蛋白(Albumin，ALB)降低組、血紅蛋白(Hemoglobin，HGB)降低組及癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen，CEA)升高組的CD4+、CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)和CD4+/CD8+比值均低于各分組的正常組，其中性別組、TP組及CEA組的細(xì)胞計(jì)數(shù)具有顯著性差異(P<0.05)；單因素分析的細(xì)胞免疫功能低下的患者中，CEA升高組的比例低于CEA正常組，其差異具有顯著性(P<0.05)；但在多因素分析中并無具有顯著差異性的相關(guān)因素(P>0.05)。結(jié)論隨時(shí)關(guān)注患者營養(yǎng)狀況并及時(shí)進(jìn)行糾正能有效地保護(hù)患者的細(xì)胞免疫功能，這也在臨床的抗腫瘤免疫過程中發(fā)揮著重要作用。

腫瘤患者；細(xì)胞免疫功能；影響因素

當(dāng)前我國腫瘤的發(fā)病率和死亡率仍處于極其嚴(yán)峻的形勢中，近幾年的日益增長趨勢讓醫(yī)學(xué)界高度重視對抗腫瘤治療的研究。諸多研究均表明腫瘤的發(fā)生發(fā)展、預(yù)后等環(huán)節(jié)與機(jī)體的免疫狀態(tài)都息息相關(guān)，所以臨床上針對腫瘤患者細(xì)胞免疫狀態(tài)的評估與測定對掌握病情、抗腫瘤治療等具有重要意義[1]。既往研究報(bào)道，腫瘤患者的細(xì)胞免疫功能常常呈現(xiàn)低下狀態(tài)[2]，臨床上常通過檢測患者體內(nèi)的CD4+、CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)以及CD4+/CD8+來直接反映腫瘤患者的細(xì)胞免疫功能[3]?，F(xiàn)通過分析腫瘤患者的部分臨床因素及檢測的一些常規(guī)指標(biāo)與CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值間的關(guān)系，探討各相關(guān)因素對腫瘤患者的細(xì)胞免疫功能的影響，為臨床上腫瘤的治療過程中能及時(shí)發(fā)現(xiàn)并糾正患者的細(xì)胞免疫狀態(tài)起提示作用。

1 臨床資料與方法

1.1 研究對象

選取2016年6月至2017年4月到我院中醫(yī)腫瘤科進(jìn)行住院治療的腫瘤患者67例，其中男性26名，女性41名，60歲以上32名，60歲以下35名，平均年齡57歲，總蛋白正常38名，總蛋白降低29名，其他詳見表1。納入標(biāo)準(zhǔn)為患者需要具有完善的臨床資料且完成了血常規(guī)、肝功及癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen，CEA)的檢測，同時(shí)剔除患有能影響細(xì)胞免疫功能的基礎(chǔ)性疾病(如糖尿病、高血壓、結(jié)核等)，以及在細(xì)胞免疫功能檢測前未使用過免疫調(diào)節(jié)劑、激素等藥物，最后經(jīng)篩選得到這67例樣本。

1.2 儀器與試劑

本研究全程使用美國Becton Dickinson公司生產(chǎn)的BD FACSCantoⅡ流式細(xì)胞儀。檢測CD4+、CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)所用試劑為淋巴細(xì)胞亞群檢測試劑和BD Trucount絕對計(jì)數(shù)管。當(dāng)全血加入到試劑中時(shí)，試劑中熒光標(biāo)記的抗體會和白細(xì)胞表面抗體特異性結(jié)合，在采集時(shí)，細(xì)胞通過激光束使激光散射，被染色的細(xì)胞就會發(fā)出熒光。這些被熒光檢測到的散射光和熒光信號提供了關(guān)于細(xì)胞大小、內(nèi)部復(fù)雜程度和相對熒光強(qiáng)度等信息。一個(gè)有著精確體積的樣本在BD Trucount絕對計(jì)數(shù)管中被直接染色。管中低壓凍干的絮狀沉淀物被溶解，釋放出已知數(shù)量的熒光微球。在分析過程中，通過比較細(xì)胞事件數(shù)和微球事件數(shù)可以確定樣本陽性細(xì)胞的絕對數(shù)量。

1.3 方法

患者在入院完善臨床資料及各種化驗(yàn)檢查后采集全血標(biāo)本，應(yīng)用BD FACSCanto Ⅱ流式細(xì)胞儀檢測全血中的CD4+、CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)以及CD4+/CD8+，同時(shí)收集相關(guān)檢查的結(jié)果，按性別、分段年齡、總蛋白(Total protein，TP)、白蛋白(Albumin ，ALB)、血紅蛋白(Hemoglobin，HGB)、癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen，CEA)的水平進(jìn)行分組。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本研究全程使用SPSS13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析，采用t檢驗(yàn)對各組間的CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的平均值進(jìn)行組內(nèi)分析比較；將CD4+細(xì)胞計(jì)數(shù)或CD4+/CD8+低于正常范圍最低值的患者定義為其細(xì)胞免疫功能低下，再通過卡方檢驗(yàn)對細(xì)胞免疫功能低下的組進(jìn)行組內(nèi)比較。為避免各種因素的相互影響，再應(yīng)用Logistic回歸分析對細(xì)胞免疫功能低下的分組進(jìn)一步進(jìn)行組間比較。將P值<0.05判定為其比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 腫瘤患者的性別、年齡、TP高低、白蛋白高低、血紅蛋白高低與細(xì)胞免疫功能的關(guān)系

此次研究中的CD4+、CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)及CD4+/CD8+比值參考我院檢驗(yàn)科的正常值范圍，分別為550-1440個(gè)·L-1、320-1250個(gè)·L-1、0.71-2.87。分析統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，男性腫瘤患者CD4+、CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著高于女性(P<0.05)，這提示男性腫瘤患者的細(xì)胞免疫功能明顯好于女性患者的細(xì)胞免疫功能；腫瘤患者小于60歲的CD4+、CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著性高于大于60歲的腫瘤患者(P<0.05)，這提示小于60歲的患者的細(xì)胞免疫功能明顯好于大于60歲的腫瘤患者；總蛋白降低的腫瘤患者的CD4+、CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯低于總蛋白正常的腫瘤患者(P<0.05)，這提示當(dāng)總蛋白水平降低的時(shí)候，影響了患者的細(xì)胞免疫功能，具體詳見表1。

2.2 癌胚抗原CEA的高低與細(xì)胞免疫功能之間的關(guān)系

將CD4+細(xì)胞計(jì)數(shù)或CD4+/CD8+低于正常范圍最低值的患者定義為其細(xì)胞免疫功能低下，將CEA分為正常組和升高組，再將各組分為細(xì)胞免疫功能低下組和細(xì)胞免疫功能正常組。對各分組進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，由統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果顯示，CEA正常組細(xì)胞免疫功能低下與CEA升高組的細(xì)胞免疫功能比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且CEA水平升高組明顯低于正常組，具體見表2。

表1 按不同標(biāo)準(zhǔn)分組后CD4+、CD8+、CD4+/CD8+計(jì)數(shù)

注：與女性組相比，男性組CD4+、CD8+的值明顯偏高(P<0.05)，與大于60歲以上組相比，小于60歲組的CD4+、CD8+的值明顯偏高(P<0.05)，與白蛋白降低組相比，白蛋白正常組CD4+、CD8+的值明顯偏高(P<0.05)。

表2 腫瘤患者CEA升高與正常時(shí)細(xì)胞免疫功能低下的情況與比較(例)

注：與CEA正常組相比，*P<0.05。

3 討論

在機(jī)體的抗腫瘤免疫過程中，由T細(xì)胞介導(dǎo)的特異性免疫起著主要作用，各T細(xì)胞亞群發(fā)揮著其不同的細(xì)胞免疫功能，其中發(fā)揮主導(dǎo)作用的為CD4+、CD8+這兩類T細(xì)胞。CD4+T細(xì)胞，稱輔助性T細(xì)胞[4]，對Tc、Ts、B等免疫細(xì)胞均具有輔助作用，可協(xié)助機(jī)體完成抗腫瘤免疫，不僅如此，CD4+T細(xì)胞在腫瘤發(fā)生的早期還可以起到免疫監(jiān)視的作用；CD8+T細(xì)胞，稱細(xì)胞毒性T細(xì)胞，能高效殺傷腫瘤細(xì)胞，但異常增多后會抑制機(jī)體的免疫應(yīng)答。當(dāng)兩種細(xì)胞數(shù)量或比例失衡時(shí)，其細(xì)胞免疫功能便會出現(xiàn)異常。

有研究表明，不同腫瘤的細(xì)胞免疫功能變化會有所不同，但常見的是CD4+和(或)CD4+/CD8+的降低，CD8+的升高，患者表現(xiàn)為細(xì)胞免疫功能的低下[5-6]。其中可能影響其細(xì)胞免疫功能的因素有很多，患者性別、年齡、腫瘤分期、是否放化療、是否使用一些激素或免疫調(diào)節(jié)劑、是否輸血、手術(shù)方式及患者營養(yǎng)狀況等[11-12]。本次研究主要探討的是患者的一般情況及常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目與細(xì)胞免疫功能間的影響關(guān)系。

研究首先對患者的性別與細(xì)胞免疫功能進(jìn)行了分析，其中男性患者的CD4+細(xì)胞計(jì)數(shù)較女性患者升高，且具有顯著差異，結(jié)果提示女性比男性更容易出現(xiàn)細(xì)胞免疫功能低下，雖然研究腫瘤的細(xì)胞免疫功能與性激素的文章較少，但研究細(xì)胞免疫功能與性激素關(guān)系的報(bào)道提示，雌二醇作為一種誘導(dǎo)因子通過雌激素受體α誘導(dǎo)胸腺細(xì)胞的凋亡，其具體的作用機(jī)制還有待進(jìn)一步去研究[7]。在年齡的分析中，年齡>60歲患者的CD4+、CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)以及CD4+/CD8+的比值均低于年齡≤60歲的患者，但其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，對細(xì)胞免疫功能低下的比例的單因素和多因素分析也無顯著性差異，分析結(jié)果提示年齡較大的患者細(xì)胞免疫功能有趨向低下的可能。

有研究顯示，臨床上惡性腫瘤患者常呈現(xiàn)營養(yǎng)不良的狀態(tài)[8]，因此本文分析了代表營養(yǎng)狀況的部分指標(biāo)TP、ALB及HGB與細(xì)胞免疫功能的關(guān)系。其中TP、ALB及HGB降低組患者的CD4+、CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)及CD4+/CD8+的比值均低于正常組，結(jié)果提示營養(yǎng)狀況較差的患者細(xì)胞免疫功能更為低下，有研究也表明營養(yǎng)不良的腫瘤患者會導(dǎo)致其體液免疫和細(xì)胞免疫功能均受損[9-12]。但結(jié)果顯示這些營養(yǎng)指標(biāo)水平的差異無顯著性，原因可能是營養(yǎng)指標(biāo)選擇不全面或在劃分范圍的選擇上出現(xiàn)了問題。

最后對患者的CEA水平進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，CEA正常組的CD4+細(xì)胞計(jì)數(shù)高于升高組，其差異具有顯著性；在單因素分析的卡方檢驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)，其升高組內(nèi)患者細(xì)胞免疫功能低下的比例要低于正常組，且差異具有顯著性；但在多因素logistic回歸分析中，差異卻無顯著性。結(jié)果提示，可能CEA這種物質(zhì)對機(jī)體的細(xì)胞免疫功能具有一定的刺激作用。

綜上可知，能影響腫瘤患者的細(xì)胞免疫功能的因素為患者的營養(yǎng)狀況，在臨床腫瘤治療過程中隨時(shí)關(guān)注患者營養(yǎng)狀況并及時(shí)進(jìn)行糾正能有效地保護(hù)患者的細(xì)胞免疫功能，這也在臨床的抗腫瘤免疫過程中發(fā)揮著重要作用。

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Analysisofinfluencingfactorsofcellularimmunefunctionincancerpatients*

Yang-Wei, He-Bin-bin

(Medical Laboratory of the Dianjiang People′s Hospital of Chongqing, Chongqing 408300)

Objective： To explore the impact of various factors on the cellular immune function of cancer patients.MethodsThe CD4+, CD8+cells absolute value and the ratio of CD4+and CD8+cells in 67 blood specimens collected from patients with lung cancer, gastric cancer or colorectal cancer during June 2016 to April 2017 were analyzed by BD FACSCantoII flow cytometry. And then the patients were diagnosed with low cellular immune function when the absolute value and the ratio of CD4+and CD8+ cells is lower than the normal range. The relationship between CD4+, CD8+cell count, CD4+/CD8+and low cellular immune function were analyzed by SPSS19.0 statistical analysis software. Finally, the factors that might be affected were discussed objectively. Results: The CD4+, CD8+cell count and CD4+/CD8+ratio among male younger than 60 years were higher than those in female older than 60 years. And the CD4+ , CD8+ cells absolute value and the ratio of CD4 + and CD8 + cells in TP+group, ALB reduction group, HGB reduction group and CEA group were lower than the normal group. The cells count was significantly different in sex group, TP group and CEA group (P<0.05). In patients with low immunologic function of single factor analysis, the proportion of CEA was lower than the normal group of CEA, and the difference was significant (P<0.05). However, there was no significant difference by multifactor analysis (P>0.05).ConclusionConcerned about the nutritional status of patients and timely correction can effectively protect the patient′s cellular immune function, which is also in the clinical anti-tumor immune process plays an important role.

Cancer patients; Cellular immune function; Influence factors

重慶市墊江縣科委基金項(xiàng)目(編號：djkjxm2016jsyfysfyy025)

楊偉，男，檢驗(yàn)師，主要從事分子及遺傳相關(guān)疾病和腫瘤細(xì)胞免疫功能方面的研究，Email：673571090@qq.com。

2017-6-26)