5種鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)、生化和免疫指標(biāo)的影響

張海濤，陳效儒，董曉慧，趙 鑫，譚北平，楊奇慧

( 1. 廣東海洋大學(xué) 水產(chǎn)學(xué)院，廣東 湛江 524088； 2. 通威股份有限公司，四川 成都 610041 )

5種鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)、生化和免疫指標(biāo)的影響

張海濤1，陳效儒2，董曉慧1，趙 鑫2，譚北平1，楊奇慧1

( 1. 廣東海洋大學(xué) 水產(chǎn)學(xué)院，廣東 湛江 524088； 2. 通威股份有限公司，四川 成都 610041 )

在水溫28～33 ℃、鹽度27～31條件下，將體質(zhì)量(0.340±0.001) g的凡納濱對(duì)蝦，隨機(jī)分養(yǎng)到18個(gè)380 L玻璃鋼桶中，每桶放蝦40尾，投喂在基礎(chǔ)飼料中分別添加40 mg/kg源于七水硫酸鋅、蛋氨酸鋅、甘氨酸鋅、美多C-鋅A型(結(jié)合型)和美多C-鋅B型(包被型)鋅的飼料(含鋅量為78.28～86.18 mg/kg)，對(duì)照組不添加(含鋅36.62 mg/kg)，喂養(yǎng)8 周，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)結(jié)果表明，鋅添加組蝦的質(zhì)量增加率和特定生長(zhǎng)率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其中蛋氨酸鋅組最佳，飼料系數(shù)最低。鋅添加組全蝦粗脂肪和肝體比高于對(duì)照組，全蝦粗蛋白及除美多C-鋅B型組外的全蝦粗灰分低于對(duì)照組(P<0.05)。美多C-鋅B型組凡納濱對(duì)蝦血清總蛋白含量最高，其次為蛋氨酸鋅組；硫酸鋅組蝦血清甘油三酯和膽固醇均最高。蛋氨酸鋅組蝦血清總超氧化物歧化酶、堿性磷酸酯酶、酸性磷酸酶和酚氧化酶活性最高。鋅添加組全蝦鋅含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，硫酸鋅組蝦肌肉鋅含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其他組與對(duì)照組和硫酸鋅組無顯著差異(P>0.05)。綜上所述，蛋氨酸鋅促進(jìn)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)，提升免疫力的效果最佳，是飼料中適宜的鋅源。

凡納濱對(duì)蝦；鋅源；生長(zhǎng)性能；免疫；組織鋅含量

凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeusvannamei)俗稱南美白對(duì)蝦，原產(chǎn)于南美太平洋沿岸熱帶水域，厄瓜多爾沿岸地區(qū)分布最為集中，具有生長(zhǎng)迅速、出肉率高、繁殖周期長(zhǎng)、抗逆性強(qiáng)、對(duì)飼料蛋白質(zhì)需求量低等優(yōu)點(diǎn)，1988年被引入我國(guó)后，養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大，現(xiàn)已成為我國(guó)及世界養(yǎng)殖蝦類產(chǎn)量最高的三大優(yōu)良品種之一，2014年我國(guó)凡納濱對(duì)蝦總產(chǎn)量已超過1.50×106t。

鋅是動(dòng)物體必需的微量元素之一，分布于動(dòng)物機(jī)體的各組織中，主要生理功能有：多種酶的組成成分和激活劑[1]；參與胰島素等激素及DNA的合成與代謝[2]；影響動(dòng)物的免疫力和繁殖力[3]。攝入適量的鋅可以促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、骨骼發(fā)育，提高免疫力和繁殖力，維持皮膚和黏膜的正常結(jié)構(gòu)與功能。動(dòng)物缺鋅將導(dǎo)致生長(zhǎng)緩慢、免疫力低下、機(jī)體相關(guān)酶活性下降、DNA合成和細(xì)胞分裂能力減弱[4]。隨著科技的發(fā)展，微量元素添加劑的添加形式也逐漸由無機(jī)鹽類到簡(jiǎn)單有機(jī)酸鹽，再到氨基酸螯合鹽類，目前添加劑市場(chǎng)上有機(jī)微量元素品種較多。本試驗(yàn)在基礎(chǔ)飼料中添加4種有機(jī)鋅源與1種無機(jī)鋅源，考查同樣添加水平下5種鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能、組織生化和免疫指標(biāo)及組織鋅沉積的影響，為生產(chǎn)中選擇添加鋅的形式提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料的配制

以魚粉、豆粕、花生粕、玉米蛋白粉為蛋白源，魚油及大豆卵磷脂為脂肪源，面粉為糖源配制基礎(chǔ)飼料(對(duì)照組)(表1)。基礎(chǔ)飼料中分別添加40 mg/kg來自于七水硫酸鋅、蛋氨酸鋅、甘氨酸鋅、美多C-鋅A型(結(jié)合型)及美多C-鋅B型(包被型 )的鋅(除七水硫酸鋅外，其他鋅源由廣州天科科技有限公司提供)，配制成6種等氮等能飼料。各組實(shí)際含鋅量分別為：36.62、86.18、78.28、82.09、81.94、84.15 mg/kg。

所有原料粉碎后過80目篩，按配方準(zhǔn)確稱取各飼料組分，微量添加組分采取逐級(jí)擴(kuò)大法預(yù)先混勻，再用V型混合機(jī)充分混合均勻，然后將稱量好的魚油和卵磷脂與粉狀飼料原料混合均勻，手工搓散油脂微粒并再次混勻。過60目篩后，置于攪拌機(jī)中邊攪拌邊添加相當(dāng)于30%飼料質(zhì)量的蒸餾水，直至混合均勻后用雙螺桿擠條機(jī)擠壓成粒徑為1.0 mm和1.5 mm的顆粒飼料，放于60 ℃烘箱中熟化30 min后取出散開，自然風(fēng)干后封口袋分裝，冰箱中-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 基礎(chǔ)飼料配方及營(yíng)養(yǎng)成分組成(干質(zhì)量) %

注：1. 維生素預(yù)混料成分(每千克)：視黃醇醋酸酯 44.00 g; VD333000 IU; VE 90.00 g; VK35.00 g; VB124.72 g; VB223.0 g; VB646.00 g; VB120.10 g; D-泛酸鈣 65.00 g; 煙酸 35.00 g; 生物素 17.77 g; 肌醇 126.87 g; 葉酸 5.80 g. 2. 礦物質(zhì)預(yù)混料成分(每千克)：FeSO4·7H2O 38.715 g; MgSO412.5 g; MnSO4·H2O 7.6829 g; CoCl2·6H2O 2.5212 g; KI 0.0817 g; KCl 25.1475 g; Na2SeO3(1%) 0.1095 g; CuSO4·H2O 9.7656 g. 3. 實(shí)測(cè)值.

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在廣東海洋大學(xué)東海島海洋生物研究基地開展。試驗(yàn)用蝦苗購(gòu)自湛江中聯(lián)養(yǎng)殖有限公司。試驗(yàn)蝦于室外水泥池中暫養(yǎng)至所需規(guī)格，禁食24 h，挑選體格健壯、規(guī)格相近、體表完整、初始體質(zhì)量為(0.340±0.001) g的健康對(duì)蝦，分對(duì)照組和5個(gè)添加組，每處理3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)1個(gè)380 L玻璃鋼桶，每桶40尾蝦。每日7:00、11:00、17:00、21：00各投喂1次，投喂量為對(duì)蝦總質(zhì)量的8%～10%，定時(shí)觀察對(duì)蝦攝食飼料的情況并記錄死亡數(shù)，根據(jù)攝食情況和天氣對(duì)投喂量進(jìn)行調(diào)整。養(yǎng)殖期間水溫28～33 ℃，鹽度27～31，pH 7.7～8.2，水中鋅質(zhì)量濃度為5.33～6.42 μg/L；不間斷充氣，溶解氧不低于6.5 mg/L，氨氮低于0.03 mg/L，試驗(yàn)期8 周。前期換水1次/2 d，3 周后每日換水1/5～1/2。

1.3 樣品采集

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束禁食24 h后，每桶對(duì)蝦稱總質(zhì)量、記總尾數(shù)；然后每桶隨機(jī)取6～8尾蝦，保存-20 ℃下，備測(cè)常規(guī)成分及體鋅含量；另隨機(jī)取8～10尾蝦采集血樣，血樣放置于已標(biāo)記好的1.5 mL離心管中，4 ℃靜置過夜后，4 ℃，8000 r/min離心10 min，逐一吸取上清液分裝后于冰箱-80 ℃保存，備測(cè)血清生理生化指標(biāo)。另取10尾蝦稱量質(zhì)量，于冰浴中剝離完整肝胰腺，稱取體質(zhì)量以計(jì)算肝體比；再剝離肌肉，分裝于2 mL離心管中，于冰箱-80 ℃保存，備測(cè)肌肉中鋅含量。

1.4 試驗(yàn)指標(biāo)測(cè)定與計(jì)算

參照AOAC[5]方法測(cè)定飼料及全蝦樣品中的水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分的含量。水分測(cè)定采用105 ℃烘干恒定質(zhì)量法；粗蛋白采用凱氏定氮法(KjeltecTM8400，瑞典)；粗脂肪采用索氏抽提法(乙醚為提取溶劑)；粗灰分采用550 ℃馬福爐灼燒恒定質(zhì)量法。

血清中總蛋白、甘油三酯、膽固醇用全自動(dòng)生化分析儀(日立7020，日本)測(cè)定，所用試劑購(gòu)自威特曼公司。血清中的總超氧化物歧化酶、酸性磷酸酶、堿性磷酸酶活力用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測(cè)定；血清中酚氧化酶活力的測(cè)定參照文獻(xiàn)[6-7]的方法。

飼料、全蝦、肌肉和養(yǎng)殖水體中鋅含量的測(cè)定：將飼料、全蝦或肌肉烘干至質(zhì)量恒等，稱取0.20～ 0.25 g，置于25 mL的具塞試管中，同時(shí)準(zhǔn)備3個(gè)不放樣品的試管，作為空白對(duì)照，然后分別向每個(gè)試管中加入5 mL默克硝酸(65%)，置于加熱板中70 ℃消化1.5～2 h，150 ℃消化4～6 h，取出冷卻至室溫，加入1 mL雙氧水，待反應(yīng)不再劇烈后置于加熱板中(150 ℃)繼續(xù)消化至澄清，然后趕酸至體積約1 mL，冷卻后用超純水定容至25 mL，抽濾(0.45 μm的針頭濾膜)至經(jīng)濃硝酸處理過的10 mL離心管中待測(cè)。養(yǎng)殖水體中鋅含量檢測(cè)時(shí)，吸取1 mL的樣本注入具塞試管中，其他操作步驟與飼料中鋅含量檢測(cè)相同。測(cè)定所用儀器為電感耦合等離子體光譜儀(熱電iCAP6300，美國(guó))。

生長(zhǎng)性能計(jì)算公式如下：

質(zhì)量增加率/%=(m2-m1)/m1×100%

特定生長(zhǎng)率/%·d-1=(lnm2-lnm1)/t×100%

成活率/%=n2/n1×100%

飼料系數(shù)=m/(m4-m3)

蛋白質(zhì)效率=(m4-m3)/(m×P)

肝體比/%=m5/m6×100%

式中，m1、m2試驗(yàn)始、末對(duì)蝦平均體質(zhì)量(g)；n1、n2為試驗(yàn)始、末對(duì)蝦尾數(shù)；t為試驗(yàn)期(d)；m為攝入的飼料總干質(zhì)量(g)；m3、m4為試驗(yàn)始、末對(duì)蝦總質(zhì)量；P為飼料蛋白質(zhì)含量(%)；m5為肝胰臟質(zhì)量；m6為該尾蝦體質(zhì)量。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析；當(dāng)處理之間差異顯著(P<0.05)時(shí)，進(jìn)行Duncan′s多重比較。

2 結(jié) 果

2.1 鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能和體成分的影響

鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦的質(zhì)量增加率、特定生長(zhǎng)率、成活率、飼料系數(shù)、蛋白質(zhì)效率均有顯著影響(P<0.05)(表2)。鋅添加組對(duì)蝦的質(zhì)量增加率和特定生長(zhǎng)率均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，蛋氨酸鋅組對(duì)蝦的質(zhì)量增加率和特定生長(zhǎng)率顯著高于其他各組(P<0.05)，硫酸鋅組、美多C-鋅A型組和美多C-鋅B型組之間差異不顯著，但顯著低于蛋氨酸鋅組并高于甘氨酸鋅組(P<0.05)。硫酸鋅組成活率最高，顯著高于美多C-鋅B型組(P<0.05)，但與其他各組無顯著差異(P>0.05)。蛋氨酸鋅組對(duì)蝦的飼料系數(shù)最優(yōu)，顯著低于其他各組(P<0.05)，對(duì)照組最差，顯著高于其他各組(P<0.05)。硫酸鋅組、蛋氨酸鋅組和美多C-鋅A型組的蛋白質(zhì)效率無顯著差異，但顯著高于其他各組(P<0.05)。甘氨酸鋅組和美多C-鋅B型組的蛋白質(zhì)效率顯著高于對(duì)照組并顯著低于其他各組(P<0.05)。

鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦全蝦水分影響不顯著(P>0.05)；對(duì)照組全蝦粗蛋白含量顯著高于其他各組(P<0.05)，其他各組之間無顯著差異(P>0.05)；對(duì)照組粗脂肪含量顯著低于其他各組(P<0.05)，美多C-鋅B型組與美多C-鋅A型組無顯著差異(P>0.05)，但顯著高于其他各組(P<0.05)；對(duì)照組和美多C-鋅B型組灰分含量顯著高于蛋氨酸鋅組和甘氨酸鋅組(P<0.05)，蛋氨酸鋅組灰分含量最低。硫酸鋅組的肝體比顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其他各組之間差異不顯著(P>0.05)(表3)。

2.2 鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦血清生化和免疫指標(biāo)的影響

5種鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦血清中總蛋白、甘油三酯和膽固醇含量均有顯著影響(P<0.05)(表4)。美多C-鋅B型組總蛋白含量顯著高于其他各組(P<0.05)，甘氨酸鋅組含量最低，顯著低于其他各組(P<0.05)；硫酸鋅組和美多C-鋅A型組甘油三酯含量無顯著差異(P>0.05)，但顯著高于其他各組(P<0.05)，其他各組之間差異不顯著(P>0.05)；鋅添加組膽固醇含量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，硫酸鋅組和美多C-鋅A型組顯著高于其他各組(P<0.05)(表4)。

表2 鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能的影響

注：表中值用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(n=3)表示，同列數(shù)值上標(biāo)字母不同表示差異顯著(P<0.05)，下同.

表3 鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦體成分及肝體比的影響 %

各處理組凡納濱對(duì)蝦血清非特異性免疫酶酸性磷酸酶、堿性磷酸酶、總超氧化物歧化酶、酚氧化酶的活性差異顯著(P<0.05)，蛋氨酸鋅組酚氧化酶活性與硫酸鋅組無顯著差異(P>0.05)，但顯著高于其他各組(P<0.05)，對(duì)照組、甘氨酸鋅組、美多C-鋅A型組的酚氧化酶活性無顯著差異(P>0.05)；蛋氨酸鋅組凡納濱對(duì)蝦總超氧化物歧化酶活性最高，與硫酸鋅組無顯著差異(P>0.05)，但顯著高于其他各組(P<0.05)，對(duì)照組和美多C-鋅B型組顯著低于其他各組(P<0.05)；蛋氨酸鋅組凡納濱對(duì)蝦堿性磷酸酶、酸性磷酸酶活性最高，顯著高于其他各組(P<0.05)，對(duì)照組最低(表5)。

表4 鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦血清生化指標(biāo)的影響

表5 鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦血清非特異性免疫酶活性的影響

2.3 鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦組織鋅含量的影響

鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦全蝦及肌肉中鋅的含量影響顯著(P<0.05)。對(duì)照組全蝦中鋅的含量最低，顯著低于其他各組(P<0.05)，美多C-鋅B型組含量最高，顯著高于其他各組(P<0.05)，硫酸鋅、蛋氨酸鋅和甘氨酸鋅組之間差異不顯著(P>0.05)，但顯著低于美多C-鋅A型組(P<0.05)；對(duì)照組肌肉中鋅的含量顯著低于硫酸鋅組(P<0.05)，但與其他各組之間差異不顯著(P>0.05)(表6)。

表6 鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦組織鋅含量的影響 mg/kg

3 討 論

3.1 鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能和體成分的影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明，40 mg/kg的5種鋅源均能顯著提高凡納濱對(duì)蝦的生長(zhǎng)性能。對(duì)照組的質(zhì)量增加率和特定生長(zhǎng)率最低，表明基礎(chǔ)飼料中的鋅未能滿足對(duì)蝦生長(zhǎng)需求，因而生長(zhǎng)受限；而蛋氨酸鋅組的質(zhì)量增加率、特定生長(zhǎng)率、飼料系數(shù)及蛋白質(zhì)效率最優(yōu)。已有的研究指出，氨基酸螯合鋅能提高動(dòng)物的生長(zhǎng)性能和免疫功能。相同水平的無機(jī)鋅(ZnSO4、ZnCl2和ZnO等)促生長(zhǎng)效果弱于氨基酸螯合鋅，生物學(xué)效價(jià)相對(duì)較低，而添加高水平無機(jī)鋅對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境有不良影響[8]。凡納濱對(duì)蝦的試驗(yàn)表明，低添加量的氨基酸鋅與高添加量的無機(jī)鋅具有相似的促生長(zhǎng)效果[9]。據(jù)報(bào)道，鯉魚(Cyprinuscarpio)攝食含羥基蛋氨酸鋅的飼料時(shí)質(zhì)量增加率約為硫酸鋅組的1.05倍，極顯著高于硫酸鋅組[10]。皺紋盤鮑(Haliotisdiscushannai)、虹鱒(Oncorhynchusmykiss)、雜交條紋鱸(Moronechrysops×M.saxatilis)上亦有類似的研究結(jié)果[11-13]。本試驗(yàn)中，甘氨酸鋅組的質(zhì)量增加率雖然顯著高于對(duì)照組，但在5種鋅源添加組中甘氨酸鋅組的質(zhì)量增加率最低。甘氨酸鋅作為鋅源添加到日糧中，可提高仔豬的生長(zhǎng)性能、血液中酶的活性，減少排泄物中鋅的含量[14-15]。楊月欣等[16]比較了甘氨酸鋅、硫酸鋅、葡萄糖酸鋅及乳酸鋅的生物利用率及吸收效果，發(fā)現(xiàn)其生物利用率分別為124%、100%、132%和73%，甘氨酸鋅攝入后進(jìn)入血液的速度要快于其他3種鋅的化合物，與本試驗(yàn)的結(jié)果不一致。其原因可能是，蛋氨酸螯合鋅分子量大，穩(wěn)定常數(shù)高，可防止鋅在腸道中與植酸、草酸等的結(jié)合，而甘氨酸對(duì)鋅的絡(luò)合力弱于蛋氨酸，因此甘氨酸鋅進(jìn)入腸道后可能有某些螯合性強(qiáng)的抗?fàn)I養(yǎng)因子奪取鋅(如植酸)而降低了甘氨酸鋅的吸收量；另一方面可能是，甘氨酸鋅的入血速度快，連接在甘氨酸上的鋅離子未能及時(shí)代謝而隨甘氨酸被排出體外。硫酸鋅組的質(zhì)量增加率高于甘氨酸鋅的可能原因是，對(duì)蝦飼料中蛋白質(zhì)含量高，硫酸鋅在腸道中溶解速度快，解離出的鋅離子會(huì)與蛋白質(zhì)分解的氨基酸結(jié)合而變?yōu)轵箱\，提高了其吸收率；而甘氨酸鋅快速入血未能參與體內(nèi)代謝，促生長(zhǎng)效果低下。其準(zhǔn)確機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。

鋅在動(dòng)物體內(nèi)參與了三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝過程，但鋅對(duì)蝦體成分影響的報(bào)道并不多。王道尊等[17]研究表明，添加鋅未影響草魚(Ctenopharynodonidellus)肌肉中粗蛋白的含量，但影響肌肉中粗脂肪的含量。試驗(yàn)前魚體及缺鋅飼料處理組粗脂肪含量為0.54%、1.47%，試驗(yàn)后測(cè)定得出含鋅飼料處理組草魚肌肉中粗脂肪含量為0.83%～1.09%，即缺鋅飼料處理組草魚肌肉中粗脂肪含量比含鋅飼料處理組高出約60%。

鋅源和鋅水平對(duì)不同養(yǎng)殖動(dòng)物體成分的影響不同。對(duì)大黃魚(Pseudosciaenacrocea)幼魚鋅需要量的研究表明，飼料中添加不同水平的一水合硫酸鋅并未對(duì)大黃魚全魚體成分產(chǎn)生顯著影響[18]。甘氨酸鋅對(duì)點(diǎn)帶石斑魚(Epinephelusmalabaricus)體水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分含量未產(chǎn)生顯著影響[19]。飼料中鋅源和鋅水平對(duì)方斑東風(fēng)螺(Babyloniaareolate)體成分的影響不顯著[20]。葉超霞等[21]報(bào)道，斜帶石斑魚(E.coioides)全魚水分和粗灰分未受到飼料鋅水平的影響，但是飼料中添加20～80 mg/kg的源于硫酸鋅的鋅顯著提高了全魚粗蛋白、粗脂肪的含量。隨飼料中蛋氨酸鋅水平的提高，奧尼羅非魚(Oreochromisaureus×O.niloticus)體脂肪的含量不斷降低[22]。飼料中硫酸鋅的水平不影響日本沼蝦(Macrobrachiumnipponense)全蝦的粗蛋白、粗脂肪和粗灰分[23]。飼料中添加蛋氨酸鋅則顯著降低了吉富羅非魚(GIFT，O.niloticus)體粗脂肪含量[24]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，5種鋅源均提高了蝦體粗脂肪的含量，與上述結(jié)果部分一致。關(guān)于鋅源、鋅水平影響對(duì)蝦體組成的機(jī)制有待進(jìn)一步探究。

3.2 鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦血清生化和免疫指標(biāo)的影響

血液指標(biāo)被廣泛用于評(píng)價(jià)蝦營(yíng)養(yǎng)水平、健康狀況及對(duì)環(huán)境適應(yīng)能力。飼養(yǎng)動(dòng)物攝食的飼料蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)水平以及機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的消化吸收程度可通過檢測(cè)血清中總蛋白含量進(jìn)行反饋，動(dòng)物血清中總蛋白的含量也與機(jī)體自身的蛋白質(zhì)合成機(jī)能和氮的沉積效果息息相關(guān)[25]。本試驗(yàn)中，美多C-鋅B型組對(duì)蝦總蛋白含量最高，說明美多C-鋅B型組中添加的鋅源即美多C-鋅B型(包被型)能夠促進(jìn)凡納濱對(duì)蝦對(duì)飼料中蛋白的消化吸收，其原因可能是該鋅源以維生素C與鋅相結(jié)合的形式添加到飼料中，提供了兩種營(yíng)養(yǎng)素，不但發(fā)揮了維生素C的功能，也在一定程度上促進(jìn)了蝦體對(duì)鋅的吸收，促進(jìn)了機(jī)體對(duì)蛋白的代謝。

微量元素在維持機(jī)體正常生理功中起重要作用，許多酶的活性中心和輔助因子的構(gòu)成均有鋅的參與。本試驗(yàn)結(jié)果表明，蛋氨酸鋅組蝦血清中的酚氧化酶、總超氧化物歧化酶、堿性磷酸酶和酸性磷酸酶活性最高，表明蛋氨酸鋅提高對(duì)蝦機(jī)體免疫功能方面優(yōu)于其他4種鋅源。Tan等[11]報(bào)道，蛋氨酸鋅在提高皺紋盤鮑的堿性磷酸酶活性方面要優(yōu)于硫酸鋅。

3.3 鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦組織鋅含量的影響

對(duì)蝦部分組織(全蝦、肌肉及肝胰腺等)中鋅含量能夠反映對(duì)蝦對(duì)微量元素鋅的攝取程度。飼料中硫酸鋅或蛋氨酸鋅水平超過20 mg/kg時(shí)，軍曹魚(Rachycentroncanadum)肌肉中鋅含量達(dá)到飽和[26]。飼料中添加20 mg/kg及以上的硫酸鋅，或10 mg/kg及以上的堿式氯化鋅或羥基蛋氨酸鋅，斜帶石斑魚全魚鋅含量基本穩(wěn)定[27]。日本沼蝦肌肉鋅含量不受飼料鋅水平的影響[23]。吉富羅非魚魚體鋅含量則與飼料鋅水平線性相關(guān)[24]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加5種鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦全蝦和肌肉中鋅的含量均有顯著影響，美多C-鋅B型組全蝦中鋅的含量顯著高于其他各組；盡管添加鋅的各處理組的肌肉鋅含量顯著高于對(duì)照組，但鋅添加組間肌肉鋅含量無顯著差異。B型美多C中微量元素鋅處于包被狀態(tài)，可降低鋅與飼料中抗?fàn)I養(yǎng)因子的接觸；維生素C具有還原性，可保護(hù)鋅價(jià)態(tài)的穩(wěn)定性，而維生素C又是一種促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)和提高動(dòng)物免疫力的營(yíng)養(yǎng)素；與結(jié)合形式的蛋氨酸鋅、甘氨酸鋅和美多C-鋅A型相比，美多C-鋅B型中鋅可能更容易被釋放出來。綜上，美多C-鋅B型中鋅穩(wěn)定，并可能短時(shí)間內(nèi)通過對(duì)蝦腸道中的屏障，實(shí)現(xiàn)鋅在體內(nèi)更多的沉積。

4 結(jié) 論

5種鋅源顯著影響凡納濱對(duì)蝦的生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)、非特異性免疫酶活性及組織鋅含量；蛋氨酸鋅在促生長(zhǎng)及提升免疫機(jī)能方面優(yōu)于七水硫酸鋅、甘氨酸鋅、美多C-鋅A型(結(jié)合型)及美多C-鋅B型(包被型)。

[1] 朱蓮珍. 人和動(dòng)物的微量元素營(yíng)養(yǎng)[M]. 青島：青島出版社，1994.

[2] 朱琳. 大菱鲆和牙鲆無機(jī)鹽鋅、磷的營(yíng)養(yǎng)生理研究[D]. 青島：中國(guó)海洋大學(xué)，2011.

[3] Shi H N，Scott M E, Stevenson M，et al. Zinc-deficiency impairs T cell function in mice with primary infection ofHeligmosomoidespolygyrus(Nematoda) [J]. Parasite Immunology, 1994, 16(7):339-350.

[4] King J C. Assessment of techniques for determining human zinc requirements [J]. Journal of the American Dietetic Association，1986，86(11)：1523-1528.

[5] AOAC.Official methods of analysis[M]. 15th ed. Arlington，VA：Association of Official Analytical Chemists，1995.

[6] 王建國(guó)，陸宏達(dá). 酚氧化酶活力測(cè)定方法中關(guān)于測(cè)定時(shí)間的研究[J]. 上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，18(6)：765-770.

[7] Huang J，Yang Y，Wang A. Reconsideration of phenoloxidase activity determination in white shrimpLitopenaeusvannamei[J]. Fish & Shellfish Immunology，2010，28(1):240-244.

[8] 王素仙，付學(xué)峰. 氨基酸螯合鋅在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用[J]. 飼料研究，2009(3):36-38.

[9] 楊原志，董曉慧. 鋅源對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)免疫的影響[J]. 飼料研究，2007(1):1-4, 8.

[10] 曹春燕. 羥基蛋氨酸螯合鋅對(duì)異育銀鯽和鯉魚生長(zhǎng)性能、生理功能以及組織鋅沉積的影響[D]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2012.

[11] Tan B P，Mai K S. Zinc methionine and zinc sulfate as sources of dietary zinc for juvenile abalone，HaliotisdiscushannaiIno [J]. Aquaculture，2001，192(1)：67-84.

[12] Apines M J S，Satoh S，Kiron V，et al. Availability of supplemental amino acid-chelated trace elements in diets containing tricalcium phosphate and phytate to rainbow trout，Oncorhynchusmykiss[J]. Aquaculture，2003，225(3)：431-444.

[13] Buentello J A，Goff J B，Gatlin D M. Dietary zinc requirement of hybrid striped bass，Moronechrysops×Moronesaxatilis，and bioavailability of two chemically different zinc compounds[J]. Journal of World Aquaculture Society，2009，40(5)：687-694.

[14] Wang Y，Tang W J，Ma W Q，et al. Dietary zinc glycine chelate on growth performance，tissue mineral concentrations，and serum enzyme activity in weanling piglets[J]. Biological Trace Elements Research，2010，133(3)：325-334.

[15] 王勇，鈕海華，馬文強(qiáng)，等. 甘氨酸鋅對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能、免疫指標(biāo)及腸道形態(tài)的研究[J]. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2010，22(1)：176-180.

[16] 楊月欣，劉建宇，崔紅梅. 四種鋅化合物的生物利用率的比較[J]. 營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，1998，20(2)：157-162.

[17] 王道尊，趙亮，俞清，等. 鋅對(duì)草魚魚種的影響[J]. 上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào)，1995，4(1)：62-65.

[18] 張佳明，艾慶輝，麥康森，等. 大黃魚幼魚對(duì)飼料中的鋅需要量[J]. 水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2008，32(3)：417-424.

[19] 孫蓬. 點(diǎn)帶石斑魚對(duì)甘氨酸鋅的營(yíng)養(yǎng)需求[D]. 天津：天津農(nóng)學(xué)院，2014.

[20] 楊原志，吳業(yè)陽，董曉慧，等. 方斑東風(fēng)螺飼料中鋅需要量的研究[J]. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2013，25(3)：643-650.

[21] 葉超霞，劉永堅(jiān)，田麗霞，等. 飼料中鋅含量對(duì)斜帶石斑魚生長(zhǎng)、飼料效率、礦物質(zhì)含量和體組成的影響[J]. 海洋與湖沼，2013，44(1)：83-89.

[22] 吳紅巖. 飼料中添加不同鋅源和鋅水平對(duì)奧尼羅非魚的影響[D]. 武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2007.

[23] 郭建林，陳建明，孫麗慧，等. 日本沼蝦幼蝦對(duì)飼料中鋅的需要量[J]. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2013，25(3)：661-668.

[24] 吳凡，蔣明，文華，等. 吉富羅非魚對(duì)飼料中鋅的需要量[J]. 淡水漁業(yè)，2015，45(4)：63-68.

[25] Luo X G，Dove C R. Effect of dietary copper and fat on nutrient utilization, digestive enzyme activities, and tissue mineral levels in weanling pigs [J]. Animal Science，1996，74(8)：1888-1896.

[26] 徐志雄. 軍曹魚(Rachycentroncanadum)鋅需要量和影響因素的研究[D]. 湛江：廣東海洋大學(xué)，2007.

[27] 王二龍. 斜帶石斑魚鋅、鐵需要量及鋅源、鐵源相對(duì)生物學(xué)效價(jià)的研究[D]. 湛江：廣東海洋大學(xué)，2014.

EffectsofZnDerivedfromFiveCompoundsonGrowthPerformance,BiochemicalandImmunityIndicesinPacificWhiteLegShrimpLitopenaeusvannamei

ZHANG Haitao1，CHEN Xiaoru2，DONG Xiaohui1，ZHAO Xin2，TAN Beiping1， YANG Qihui1

( 1. College of Fisheries，Guangdong Ocean University，Zhanjiang 524025，China；2.Tongwei Co., Ltd.， Chengdu 610041，China )

Juvenile Pacific white leg shrimpLitopenaeusvannameiwith an average initial body weight of (0.340±0.001) g were reared in 18 fiberglass tanks of each 380 L at a stocking rate of 40 shrimp per tank, and fed basal diet (group C) supplemented with zinc sulfate (group Zn-S), methionine zinc (group Zn-M), glycine zinc (group Zn-G), Meiduo-C-A (group associative type, Zn-C-A), Meiduo-C-B (group coated form, Zn-C-B)at a rate of 40 mg/kg diet at water temperature of 28—33 ℃ and a salinity of 27—31 with 3 replicates per treatment for 8 weeks. The best weight gain rate (WGR), specific growth rate (SGR), protein efficiency rate (PER) and feed conversion ratio (FCR) were found in group Zn-M, significant higher than those in control group (P<0.05). There were no significant difference in body moisture among treatments (P>0.05). The Pacific white leg shrimp fed the dets containing Zn had higher body crude lipid (CL) and hepatopancreas-somatic index (HIS) than those in group C, with opposite trend in body crude protein (CP) and crude ash (CA) content (except Zn-C-B group). The maximal total protein (TP) in serum was observed in group Zn-C-B, followed by group Zn-M. The maximal contents of triglyceride (TG) and cholesterol (CHOL) in serum were found in group Zn-S. There were higher activities of superoxide dismutase (SOD), acid phosphatase(ACP), alkaline phosphatase(AKP) and phenol oxidase (PO) in serum in group Zn-M than those in the other groups. There was higher Zn content in whole body in the shrimp fed the diets supplemented with Zn than that in group C, with significantly higher Zn content in muscle in group Zn-S than that in group C (P<0.05), and without significant difference among the other groups . The findings indicate that Zn-M is the best Zn source for promoting the growth performance and immunity of Pacific white leg shrimp.

Litopenaeusvannamei；Zn source；growth performance；immunity；Zn content in tissue

10.16378/j.cnki.1003-1111.2017.01.003

S968.22

A

1003-1111(2017)01-0015-07

2016-01-06；

2016-04-25.

國(guó)家公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201003020)；廣東省教育廳科技創(chuàng)新基金資助項(xiàng)目(2013KJCX0096)；通威股份有限公司資助項(xiàng)目(TW2014I008).

張海濤(1989-)，男，碩士研究生；研究方向：水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料.E-mail：632174292@qq．com.通訊作者：董曉慧(1970-)，女，教授；研究方向：水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料.E-mail：dongxiaohui2003@163.com.