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    中紅外光譜分析甘氨酸分子結(jié)構(gòu)及熱變性

    2022-02-01 07:41:18馬星怡于佳琳郭子祺常美玲張美環(huán)于宏偉石家莊學(xué)院化工學(xué)院
    上海計量測試 2022年4期
    關(guān)鍵詞:分子結(jié)構(gòu)變溫甘氨酸

    馬星怡 于佳琳 郭子祺 常美玲 張美環(huán) 于宏偉 / 石家莊學(xué)院化工學(xué)院

    0 引言

    甘氨酸是一類結(jié)構(gòu)最為簡單的氨基酸,廣泛應(yīng)用在食品[1-2]、醫(yī)藥[3-4]、農(nóng)業(yè)[5-6]、畜牧[7-8]及材料科學(xué)[9-10]等領(lǐng)域。甘氨酸受熱脫水可進(jìn)一步縮合生成肽鏈[11-12]是生物化工領(lǐng)域重要的單元反應(yīng),但由于傳統(tǒng)分析儀器(包括:紫外、質(zhì)譜及核磁)的檢測原理限制,相關(guān)研究少見報道。中紅外(MIR)光譜[13-19]及變溫中紅外(TD-MIR)光譜[20-25]廣泛應(yīng)用于化合物的結(jié)構(gòu)及熱變性研究領(lǐng)域,并能提供豐富的光譜信息,但甘氨酸相關(guān)研究報道較少。本文采用MIR及TD-MIR光譜,分別開展了甘氨酸分子結(jié)構(gòu)及熱變性研究,為甘氨酸在生物化工領(lǐng)域應(yīng)用研究提供重要的技術(shù)參考。

    1 實驗部分

    1.1 材料

    甘氨酸(分析純,天津市化學(xué)試劑一廠)。

    1.2 儀器

    Spectrum100型紅外光譜儀(美國PE公司)。Golden Gate型ATR-FTIR變溫附件(英國Specac公司)。

    1.3 實驗方法

    采用ATR-FTIR變溫附件,甘氨酸樣品不需要前處理。每次實驗以空氣為背景,對于甘氨酸樣品進(jìn)行8次掃描累加,測溫范圍303~523 K(變溫步長10 K)。采用獲得PE公司Spectrum v 6.3.5操作軟件甘氨酸分子的MIR及TD-MIR光譜數(shù)據(jù)。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 甘氨酸分子MIR光譜

    在4 000~600 cm-1頻率范圍內(nèi),采用MIR光譜開展了甘氨酸分子結(jié)構(gòu)研究(圖1)。

    首先采用一維MIR光譜開展了甘氨酸分子的結(jié)構(gòu)研究(圖1A)。1 606.62 cm-1處的吸收峰歸屬于甘氨酸分子NH3+不對稱彎曲振動模式(δasNH3+-甘氨酸-一維);1 581.93 cm-1處的吸收峰歸屬于甘氨酸分子COO-不對稱伸縮振動模式(νasCOO--甘氨酸-一維);1 498.20 cm-1處的吸收峰歸屬于甘氨酸分子NH3+對稱彎曲振動模式;1 406.47 cm-1處的吸收峰歸屬于甘氨酸分子 COO-對稱伸縮振動模式(νsCOO--甘氨酸-一維)。進(jìn)一步開展了甘氨酸分子的二階導(dǎo)數(shù)MIR光譜研究(圖1B)。其中,1 608.39 cm-1處的吸收峰歸屬于甘氨酸分子;1 582.20 cm-1處的吸收峰歸屬于甘氨酸分子νasCOO--甘氨酸-二階導(dǎo)數(shù);1 502.08 cm-1處的吸收峰歸屬于甘氨酸分子;1 410.15 cm-1處的吸收峰歸屬于甘氨酸分子νsCOO--甘氨酸-二階導(dǎo)數(shù)。進(jìn)一步開展了甘氨酸分子的四階導(dǎo)數(shù)MIR光譜研究(圖1C),其中,1 614.72 cm-1處的吸收峰歸屬于甘氨酸分子;1 504.84 cm-1處的吸收峰歸屬于甘氨酸分子;1 416.90 cm-1處的吸收峰歸屬于甘氨酸分子νsCOO--甘氨酸-四階導(dǎo)數(shù)。最后開展了甘氨酸分子去卷積MIR光譜研究(圖1D),其中,1 619.28 cm-1、1 615.81 cm-1、1 610.88 cm-1和 1 607.12 cm-1處的吸收峰歸屬于甘氨酸分子δasNH3+-甘氨酸-去卷積;1 591.05 cm-1、1 586.92 cm-1、1 582.99 cm-1和 1 578.51 cm-1處的吸收峰歸屬于甘氨酸分子νasCOO--甘氨酸-去卷積;1 502.91 cm-1、1 500.63 cm-1、1 497.13 cm-1和 1 493.61 cm-1處的吸收峰歸屬于甘氨酸分子;1 414.93 cm-1、1 411.13 cm-1、1 407.39 cm-1和 1 403.87 cm-1處的吸收峰歸屬于甘氨酸分子νsCOO--甘氨酸-去卷積。研究發(fā)現(xiàn),甘氨酸分子二階導(dǎo)數(shù)MIR光譜的譜圖分辨能力沒有明顯提高,四階導(dǎo)數(shù)MIR光譜的譜圖分辨能力有所下降,而去卷積MIR光譜則過于復(fù)雜,而甘氨酸分子相應(yīng)官能團歸屬較為困難。

    2.2 甘氨酸分子TD-MIR光譜

    在303~523 K的溫度范圍內(nèi),分別開展了甘氨酸分子一維及二階導(dǎo)數(shù)TD-MIR光譜研究,并進(jìn)一步考查溫度變化對甘氨酸分子結(jié)構(gòu)的影響。

    2.2.1 甘氨酸分子一維TD-MIR光譜

    首先開展了甘氨酸分子的一維TD-MIR光譜研究(圖2)。

    試驗發(fā)現(xiàn):隨著測定溫度的升高,甘氨酸分子νasCOO--甘氨酸-一維、δsNH3+-甘氨酸-一維和νsCOO--甘氨酸-一維對應(yīng)的吸收頻率均發(fā)生紅移,相應(yīng)的吸收強度進(jìn)一步增加。甘氨酸分子δasNH3+-甘氨酸-一維對應(yīng)的吸收峰對溫度變化比較敏感,393 K的溫度條件下,其對應(yīng)的吸收峰消失。463~523 K的溫度區(qū)間內(nèi),甘氨酸分子主要官能團對應(yīng)的吸收強度及頻率明顯改變。甘氨酸分子主要官能團相關(guān)光譜數(shù)據(jù)見表1。

    表1 甘氨酸分子一維TD-MIR光譜數(shù)據(jù)(303 ~523 K)

    2.2.2 甘氨酸分子二階導(dǎo)數(shù)TD-MIR光譜

    進(jìn)一步開展了甘氨酸分子的二階導(dǎo)數(shù)TD-MIR光譜研究(圖3)。

    圖3 甘氨酸分子二階導(dǎo)數(shù)TD-MIR光譜(303~523 K)

    表2 甘氨酸分子二階導(dǎo)數(shù)TD-MIR光譜數(shù)據(jù)(303 ~523 K)

    在463 ~523 K的溫度區(qū)間內(nèi),甘氨酸分子受熱分解[11],主要化學(xué)反應(yīng)過程包括:脫羧基、脫水及脫氨基等(圖4),甘氨酸分子的熱穩(wěn)定性則進(jìn)一步降低,而相應(yīng)的分子官能團對應(yīng)的紅外吸收頻率和強度會發(fā)生一定的改變。

    圖4 甘氨酸分子熱變性機理

    3 結(jié)語

    甘氨酸是一類結(jié)構(gòu)最為簡單的氨基酸,以甘氨酸為模板化合物,采用中紅外光譜分析甘氨酸分子結(jié)構(gòu)及熱變性,為研究氨基酸脫水縮合成肽鏈過程,建立一個方法學(xué),具有重要的應(yīng)用研究價值。

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