146株金黃色葡萄球菌的耐藥性監(jiān)測與分析

郭麗娜

【摘要】 目的：調(diào)查金黃色葡萄球菌對15種抗菌藥物的敏感性。方法：收集2015年1月-2016年9月以來，臨床分離的146株金黃色葡萄球菌，采用美國BD公司生產(chǎn)的PhoenixTM-100細(xì)菌鑒定/藥敏系統(tǒng)檢測15種抗菌藥物對分離菌的敏感性，數(shù)據(jù)分析采用WHONET5.6軟件。結(jié)果：耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）占金黃色葡萄球菌的比例為24.7%。金黃色葡萄球菌對15種常用抗菌藥物總耐藥率依次為氨芐西林96.6%、青霉素95.9%、紅霉素72.6%、克林霉素43.2%、阿莫西林/克拉維酸25.0%、復(fù)方新諾明及苯唑西林24.7%、妥布霉素21.2%、慶大霉素20.5%、環(huán)丙沙星17.1%；來源不同部位的標(biāo)本分離的金黃色葡萄球菌對同一種抗菌藥物的耐藥率差異顯著。結(jié)論：臨床醫(yī)生在治療金黃色葡萄球菌引起的感染的過程中，應(yīng)根據(jù)不同感染部位參考耐藥性監(jiān)測，給予合適的抗菌藥物，臨床上一旦檢出MRSA，微生物室要根據(jù)NCCLS的有關(guān)規(guī)定修訂藥敏報告。

【關(guān)鍵詞】 金黃色葡萄球菌； 藥敏試驗； 耐藥性； MRSA

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.30.035 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1674-6805（2017）30-0069-03

Drug-resistance Monitoring and Analysis of 146 Strains of Staphylococcus Aureus/GUO Li-na.//Chinese and Foreign Medical Research，2017，15（30）：69-71

【Abstract】 Objective：To investigate the sensitivity of staphylococcus aureus（S.aureus） to 15 kinds of antibacterial drugs.Method：From January 2015 to September 2016，146 strains of S.aureus were selected，clinical separation of trace broth dilution method detection of 15 kinds of antimicrobial agents for sensibility of isolated bacteria.WHONET5.6 software was used to analyze the data.Result：Methicillin-resistant S.aureus（MRSA） accounted for 24.7% of S.aureus，the drug-resistance rate of S.aureus to Am-picillin was 96.6%，to Penicillin was 95.9%，to Erythromycin was 72.6%，to Clindamycin was 43.2%，to Amoxicillin/Clavulanic Acid was 25.0%，to Compound Sulfamethoxazole and Oxacillin were 24.7%，to Tobramycin was 21.2%，to Gentamicin was 20.5%，to Ciprofloxacin was 17.1%.Specimens from different parts of the source separation of S.aureus to the same kind of antimicrobial resistance difference is significant.Conclusion：Clinicians in the treatment of infections caused by S.aureus，shall according to different infection site reference drug resistance surveillance，to appropriate antimicrobial agents，once the clinical detection of MRSA，microbial chamber shall be revised according to NCCLS the relevant provisions of the drug susceptibility reports.

【Key words】 Staphylococcus aureus； Susceptibility tests； Drug-resistance； Methicillin-resistant staphylococcus aureus

First-authors address：Baotou Medical College Second Affiliated Hospital，Baotou 014030，China

近幾年來，伴隨著耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）的檢出率不斷地升高，臨床治療越來越困難。有報道指出由MRSA所致的全身嚴(yán)重感染的病死率>50%[1]，引起了世界衛(wèi)生組織的高度重視，因此加強(qiáng)對金黃色葡萄球菌的耐藥性監(jiān)測，了解其耐藥特點(diǎn)和變化趨勢對合理使用抗菌藥物和有效預(yù)防院內(nèi)感染顯得尤為重要。本研究從2015年1月-2016年9月，收集來自臨床各類標(biāo)本中分離的146株金黃色葡萄球菌，并對這146株金黃色葡萄球菌進(jìn)行藥敏試驗，現(xiàn)就耐藥性監(jiān)測結(jié)果和MRSA檢出情況報告如下。

1 材料與方法

1.1 菌株來源

2015年1月-2016年9月，從筆者所在醫(yī)院臨床各個科室送檢的呼吸道、分泌物、血液、穿刺液、糞便、胸水、腹水、尿液、腦脊液、肺泡灌洗液等標(biāo)本中，共檢出146株金黃色葡萄球菌（排除來自同一患者同一部位重復(fù)分離的菌株）。

1.2 金黃色葡萄球菌培養(yǎng)及鑒定

嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》微生物部分進(jìn)行操作[2]，所用麥康凱以及血瓊脂等多種培養(yǎng)基，均購自鄭州安圖生物公司，菌株鑒定采用美國BD公司生產(chǎn)的PhoenixTM-100細(xì)菌鑒定/藥敏系統(tǒng)。

1.3 藥敏試驗

采用PhoenixTM-100細(xì)菌鑒定/藥敏系統(tǒng)，藥敏試驗結(jié)果依據(jù)美國國家臨床實(shí)驗室標(biāo)準(zhǔn)化研究所（CLSI）2015版標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果判定。

1.4 質(zhì)量控制

金黃色葡萄球菌ATCC29213作為試驗的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株。標(biāo)準(zhǔn)菌株來自衛(wèi)生部臨床檢驗中心。

1.5 MRSA鑒定

采用PhoenixTM-100細(xì)菌鑒定/藥敏系統(tǒng)，測定苯唑西林MIC值，判斷標(biāo)準(zhǔn)遵循美國國家臨床實(shí)驗室標(biāo)準(zhǔn)化研究所（CLSI）制定的規(guī)則：MIC值≥4 ?g/ml為MRSA。

1.6 數(shù)據(jù)處理

采用WHONET 5.6軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果

2.1 菌株的標(biāo)本來源詳情

在本研究的住院患者中，共監(jiān)測分離到146株金黃色葡萄球菌，其中70株（47.9%）來自呼吸道、37株（25.3%）來自分泌物、22株（15.1%）來自血液、穿刺液分離5株（3.4%）、尿液分離4株（2.7%）、糞便分離3株（2.1%）、其他（包括胸水、腹水、腦脊液、肺泡灌洗液）共計5株（3.4%）。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）占金黃色葡萄球菌的比例為24.7%（36/146），其中呼吸道和分泌物中MRSA檢出率分別為14.3%（10/70）和29.7%（11/37）。

2.2 146株金黃色葡萄球菌對15種常用抗菌藥物的總耐藥率

排名靠前的依次為：氨芐西林96.6%、青霉素95.9%、紅霉素72.6%、克林霉素43.2%、阿莫西林/克拉維酸25.0%、復(fù)方新諾明及苯唑西林24.7%、妥布霉素21.2%、慶大霉素20.5%、環(huán)丙沙星17.1%；來源不同部位的標(biāo)本分離的金黃色葡萄球菌對同一種抗菌藥物的耐藥率差異顯著

3 討論

金黃色葡萄球菌是院內(nèi)感染常見且重要的致病菌之一，感染源常見是患者或攜帶者，通過醫(yī)療器械、被污染的環(huán)境傳播，文獻(xiàn)[3-6]報道：金黃色葡萄球菌的感染者或攜帶者，容易引起院內(nèi)感染的暴發(fā)流行，該菌耐藥性較高且MRSA檢出率逐年升高，使得金黃色葡萄球菌造成的感染受到廣泛關(guān)注，臨床治療方面也愈加棘手，所以，為了爭取能早期治療、有效控制感染、改善預(yù)后，對金黃色葡萄球菌進(jìn)行耐藥性監(jiān)測，依照監(jiān)測結(jié)果，合理選擇抗菌藥物進(jìn)行有效治療顯得越來越重要。藥敏結(jié)果顯示146株金黃色葡萄球菌對15種常用抗菌藥物（除萬古霉素及利奈唑胺）的耐藥率依次為：氨芐西林96.6%、青霉素95.9%、紅霉素72.6%、克林霉素43.2%、阿莫西林/克拉維酸25.0%、復(fù)方新諾明及苯唑西林24.7%、妥布霉素21.2%、慶大霉素20.5%、環(huán)丙沙星17.1%。阿米卡星和利福平的耐藥率最低，分別為9.6%和5.5%。但不同部位的分離菌株對同一種抗菌藥物的耐藥率差異有顯著性，如環(huán)丙沙星、妥布霉素對從血液中分離的金黃色葡萄球菌耐藥率分別為9.1%和22.7%，但在糞便中分離的菌株耐藥率則均為66.7%，明顯高于在血液中分離的菌株耐藥率；全面分析得出血液中分離的菌株耐藥率最低，從糞便中分離的菌株耐藥率為最高。分析可能的原因：糞便標(biāo)本大多來自筆者所在醫(yī)院消化科的患者，均患過不同程度的慢性腹瀉。在正常情況下，金黃色葡萄球菌常引起急性腹瀉，而慢性腹瀉為金黃色葡萄球菌的因素常較少見。這些患者反復(fù)服用多種廣譜抗菌藥物，從而破壞了腸道內(nèi)微環(huán)境的健康，造成菌群嚴(yán)重失衡，使高耐藥性金黃色葡萄球菌得到了迅速繁殖這一有利條件，從而造成腹瀉。

近十年來國內(nèi)外分離的MRSA占金黃色葡萄球菌的20%～50%，本研究中分離的MRSA占金黃色葡萄球菌的24.7%，符合文獻(xiàn)[7]報道趨勢，而國外曾有報道MRSA占金黃色葡萄球菌的62.1%，可見MRSA的檢出有升高趨勢。MRSA的致病性強(qiáng)，常引起院內(nèi)嚴(yán)重感染并具有多重耐藥的特點(diǎn)。有相關(guān)研究報道：敏感的金黃色葡萄球菌從MRSA或耐藥腸球菌獲得耐藥基因，成為金黃色葡萄球菌耐藥菌株[8]，這成為臨床醫(yī)師治療其感染的難點(diǎn)。有時體外藥敏試驗顯示對某些頭孢菌素類和氨基糖苷類敏感，但臨床治療也往往避免不了失敗[9-11]。當(dāng)檢測到MRSA時，即使檢測出該菌對青霉素、頭孢菌素、β-內(nèi)酰胺類包括含酶抑制劑、氨基糖苷類抗生素敏感，也應(yīng)修改為耐藥[12]，以免誤導(dǎo)臨床醫(yī)師用藥。從本研究數(shù)據(jù)中看出，金黃色葡萄球菌在體外對氨芐西林、青霉素等一些藥物十分敏感，一旦檢測為MRSA，臨床微生物室一定要依據(jù)NCCLS的相關(guān)規(guī)定作出相應(yīng)的修訂報告，從而為臨床醫(yī)師合理用藥提供可靠的數(shù)據(jù)。MRSA對氨基糖苷類耐藥和耐消毒劑分別與攜帶氨基糖苷類耐藥基因和耐消毒劑基因有關(guān)[13]，因此，低效消毒劑的合理使用對抗菌藥物耐藥形勢的惡化可以產(chǎn)生積極作用。146株金黃色葡萄球菌MRSA檢出率為24.7%，比2016年中國CHINET細(xì)菌耐藥監(jiān)測報告中的42.2%低。分析原因：可能主要與受試菌的標(biāo)本來源分布有關(guān)。本研究中分泌物中檢出的MRSA占金黃色葡萄球菌的比例為29.7%，痰中檢出的MRSA占金黃色葡萄球菌的比例為14.3%，而國內(nèi)文獻(xiàn)[14-16]報道，金黃色葡萄球菌主要來自呼吸道，來自于分泌物相對較少。本文中，未發(fā)現(xiàn)耐利奈唑胺的金黃色葡萄球菌，可以作為金黃色葡萄球菌發(fā)生嚴(yán)重感染的理想藥物。2002年世界上分離出第一株耐萬古霉素金黃色葡萄球菌[17]，盡管全球已經(jīng)報道有較多耐萬古霉素金黃色葡萄球菌菌株出現(xiàn)，國內(nèi)有關(guān)報道也曾表明萬古霉素對金黃色葡萄球菌敏感性降低[18]，但在本研究中，未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素的菌株，所以目前還是抗MRSA感染的保留藥物。

參考文獻(xiàn)

[1]張文紅.耐甲氧西林葡萄球菌醫(yī)院感染耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2007，17（8）：998-999.

[2]葉應(yīng)嫵.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：736-753.

[3] Katayama Y，Ito T，Hiramatsu K.A new class of genetic element，Staphylococcus cassette mec，encodes methicillin resistance in Satphylococcus aureus[J].Antimicrob Agents Chemother，2000，44（6）：1549-1555.

[4] Fey P D，Said-Salim B，Rupp M E，et al.Comparative molecular analysis of community or hospital acqui-red methicilliin resistant Staphylococcus aureus [J].Antimicrobial Agents Chemother，2003，47（1）：196-203.

[5]孫宏莉，王輝，陳民鈞.甲氧西林耐藥的金黃色葡萄球菌耐藥性及分子流行病學(xué)調(diào)查[J].中華微生物和免疫學(xué)雜志，2005，25（2）：137-141.

[6]劉小平，樊尚榮，徐桂彪，等.168株金黃色葡萄球菌的臨床分布及耐藥性分析[J].中國全科醫(yī)學(xué)，2010，13（4）：1121.

[7] Tiwari H K，Das A K，Sapkota D，et al.Methicillin-resistant Staphy lococcus aureus：prevalence and antibiogram in a tertiary care hospital in western Nepal[J].J Infect Dev，2009，3（9）：681-684.

[8] Kumar S，Tamura K，Jakobsen I B，et al.MEGA2：molecular evolutionary genetics analysis software[J].Bioinformatics，2001，17（12）：1244-1245.

[9]徐德興，王露霞，韋莉萍.金黃色葡萄球菌隨機(jī)引物擴(kuò)增DNA分型與藥敏結(jié)果分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2002，12（6）：471-472.

[10]蔡文城.實(shí)用臨床微生物診斷學(xué)[M].南京：東南大學(xué)出版社，1998：933.

[11]白剛，俞月琴，王婧，等.葡萄球菌耐藥性及質(zhì)粒圖譜的對比分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2001，11（2）：90-91.

[12]李雅卿，黃衛(wèi)紅.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌醫(yī)院感染臨床分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2002，12（2）：151.

[13]胡志東，李金，馬睿，等.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐藥基因及耐消毒劑基因的研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2006，16（5）：481-484.

[14]朱德妹.2005年中國CHINET葡萄球菌耐藥性分析[J].中國感染與化療雜志，2007，7（4）：269-237.

[15]馬越，李景云，姚蕾，等.住院患者分離的金黃色葡萄球菌耐藥率比較分析[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，2003，83（5）：382-384.

[16]蔣景華，陳文光，章澤豹，等.金黃色葡萄球菌耐藥的現(xiàn)狀及臨床治療對策[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2007，17（10）：1292-1293.

[17] Goldrick B.First reported case of VRSA in the United States[J].Am J Nurs，2002，102（11）：17.

[18]王臻，童朝輝，徐莉莉，等.萬古霉素治療下呼吸道耐甲氧西林葡萄球菌感染的療效觀察[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2004，14（12）：1403-1405.

（收稿日期：2017-06-13）