金黃色葡萄球菌毒力基因檢測及分子分型研究

王瑩

【摘要】 目的 對金黃色葡萄球菌進行毒力基因檢測以及分子分型情況的研究。方法 488株金黃色葡萄球菌作為研究對象， 采用瓊脂稀釋法作為測定苯唑西林以及頭孢西丁對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度（MIC）， 以聚合酶鏈式反應（PCR）方法進行葡萄球菌染色體mec盒子（SCCmec）分型以及多位點序列分型， 并以多重PCR方法檢測31個常規(guī)的金黃色葡萄球菌毒力基因。結果 488株金黃色葡萄球菌中共檢測出耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）227株， 檢出率達46.5%， 從分型上看， 其中SCCmecⅢ占比最多， 達81.5%， 其次是Ⅳ型， 占10.1%；另有261株甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌（MSSA）， 其主要克隆型為CC1， 占34.1%， 有109株（41.8%）的MSSA其同時攜帶超過15個毒力基因， 明顯要高于MRSA菌株（28.2%）。結論 本地區(qū)的MRSA流行率為46.5%， 相對于全國平均水平基本一致， 其中主要的流行克隆為SCCmecⅢ， 占81.5%， 而MSSA菌株其主要流行克隆為CC1， 占34.1%， 從毒力基因來看MSSA其毒力基因的檢出率要明顯高于MRSA， 這種情況提示相關的醫(yī)療衛(wèi)生部門需要根據(jù)實際情況采取有效的措施控制各種病菌的傳播。

【關鍵詞】 金黃色葡萄球菌；毒力基因檢測；分子分型研究

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.01.126

金黃色葡萄球菌是醫(yī)院以及社區(qū)感染常見的致病病菌， 其廣泛的存在于自然界中， 可以導致多種感染疾病， 嚴重威脅人們的生命健康安全[1]。并且金黃色葡萄球的臨床重要性還由于其有著非常高的毒力以及快速發(fā)展的耐藥性， 一旦沒有將其控制住， 非常容易引起傳播和流行， 我國作為抗生素使用的大國， 使得耐藥的現(xiàn)象非常嚴重， 在各地區(qū)MRSA的檢出率都相對較高。本文以488株金黃色葡萄球菌作為研究對象， 研究金黃色葡萄球菌的毒力基因以及分子分型情況， 為醫(yī)療部門采取必要的預防措施提供必要的研究理論依據(jù)， 具體的研究過程報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 取本中心2013～2015年分離的488株金黃色葡萄球菌作為研究對象， 確保每一株病菌樣本不是同一患者相同部位的重復分離株， 標本包括痰標本254株， 占52.0%；分泌物標本97株， 占19.9%；血液標本64株， 占13.1%；膿液標本38株， 占7.8%；引流液標本11株， 占2.3%；腹水標本11株， 占2.3%；胸水標本8株， 占1.6%；腦脊液標本5株， 占1.0%。

1. 2 方法 抗菌藥物敏感檢測采用瓊脂稀釋法測定苯唑西林以及頭孢西丁對金黃色葡萄球菌的MIC；基因組DNA提取， 按照革蘭陽性菌DNA提取步驟提取。SCCmec分型檢測：以PCR方法進行SCCmec分型以及多位點序列分型；毒力因子檢測：并以多重PCR方法檢測31個常規(guī)的金黃色葡萄球菌毒力基因[2]。

1. 3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS21.0統(tǒng)計學軟件對研究數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

488株金黃色葡萄球菌中共檢測出MRSA 227株， 檢出率46.5%。從分型上看， 其中SCCmecⅢ占比最多， 達81.5% （185/227）， 其次是Ⅳ型， 占10.1%（23/227）；另有261株MSSA， 其主要克隆型為CC1， 占34.1%（89/261）， 有109株（41.8%）的MSSA其同時攜帶超過15個毒力基因， 明顯要高于MRSA菌株[28.2%（64/227）]， 差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

3 討論

金黃色葡萄球菌在自然界中無處不在， 是人類的一種重要病原菌， 屬于葡萄球菌屬， 可引起多種嚴重感染， 由金黃色葡萄球菌引起的感染僅次于大腸桿菌居第二位[3]。金黃色葡萄球菌有著多重耐藥性以及高致病性的特點， 隨著抗生素的廣泛使用， 使得其在高選擇壓力下出現(xiàn)大量的耐藥菌， 尤其是對于MRSA來說， 對于多種抗生素呈現(xiàn)出耐藥現(xiàn)象。另外， 金黃色葡萄球菌的致病性與其高毒性有著很大的關系， 這從金黃色葡萄球菌的常見的31個毒力基因， 菌株至少同時攜帶6個毒力基因就可以看出。

綜上所述。經(jīng)研究顯示本地區(qū)的MRSA流行率46.5%， 相對于全國平均水平基本一致， 其中主要的流行克隆為SCCmecⅢ， 占81.5%， 而MSSA菌株其主要流行克隆為CC1， 占34.1%， 從毒力基因來看MSSA其毒力基因的檢出率要明顯高于MRSA， 這表明本地區(qū)存在耐藥株的傳播， 本地區(qū)部分醫(yī)院消毒控制管理仍然存在不足， 因此需要加強消毒管理和培訓， 定期及時加強空氣消毒， 醫(yī)護人員檢查患者前后要嚴格洗手消毒， 加強醫(yī)院環(huán)境、物體表面衛(wèi)生清潔， 強調(diào)合理使用抗生素， 以這些綜合措施達到有效控制醫(yī)院感染環(huán)境因素。

參考文獻

[1] 王新， 韋藝媛， 張靜， 等. 乳房炎奶牛金黃色葡萄球菌毒素基因的檢測及PFGE分型研究. 畜牧獸醫(yī)學報， 2011， 14（7）：974-980.

[2] 譚翰清， 林鳳， 譚海芳， 等. 醫(yī)院分離金黃色葡萄球菌的毒力基因和耐藥基因的研究. 中國消毒學雜志， 2011， 12（6）：710-713， 716.

[3] 陳道利， 金東， 崔志剛， 等. 馬鞍山市志賀菌福氏4c亞型毒力基因檢測及分子分型研究. 中國人獸共患病學報， 2010， 18（9）： 851-855.

[收稿日期：2015-07-27]