川楝素和吡蟲啉對瓜蚜聯(lián)合作用的研究

張波+郁春柳+楊得恩+賀秋磊

摘要：采用浸葉法測定川楝素與吡蟲啉對瓜蚜2齡若蟲的毒力，篩選復(fù)配的最佳配比，并測定復(fù)配劑的共毒系數(shù)。結(jié)果表明，在11個(gè)配比處理中，川楝素與吡蟲啉的質(zhì)量比分別為3 ∶ 7、4 ∶ 6、5 ∶ 5的毒效比分別達(dá)到1.81、1.90、1.90，明顯高于其他組，3組復(fù)配劑均具有明顯的增效活性；對上述3組復(fù)配劑進(jìn)行室內(nèi)毒力測定，求出各自的回歸方程和半數(shù)致死濃度（median lethal concentration，簡稱LC50），結(jié)合川楝素與吡蟲啉2種單劑的LC50，測得3種復(fù)配劑的共毒系數(shù)分別為219.46、331.77、220.37，均大于100，為增效復(fù)配。綜上所述，川楝素與吡蟲啉的質(zhì)量比為4 ∶ 6時(shí)共毒系數(shù)可達(dá)331.77，增效作用最大，為最佳配比。

關(guān)鍵詞：川楝素；吡蟲啉；瓜蚜；聯(lián)合作用；毒力測定

中圖分類號： S433.39 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號：1002-1302（2017）20-0121-02

瓜蚜（Aphis gossypii Glover）別稱棉蚜，屬同翅目蚜科，廣泛分布于世界各地，是危害瓜類、豆類及棉花等多種農(nóng)作物的主要害蟲之一，其中對棉花、瓜類的危害最為嚴(yán)重。該蟲以成蟲和若蟲在寄主植物葉背和嫩莖上取食汁液，植物被害后葉片卷縮，老葉受害變黃，提前枯落，同時(shí)瓜蚜為害時(shí)不但排出大量蜜露，引發(fā)植株煤污病，還會(huì)傳播花葉病毒病等多種病害[1]。當(dāng)前，瓜蚜的主要防治措施仍是化學(xué)防治，由于瓜蚜發(fā)生量大、世代短，其抗藥性發(fā)展迅速。研究表明，瓜蚜對有機(jī)磷類、擬除蟲菊酯類、氨基甲酸酯類等殺蟲藥劑均產(chǎn)生了抗藥性，已經(jīng)成為抗藥性嚴(yán)重和難以治理的主要害蟲之一[2-5]。

川楝素是從楝屬植物川楝（Melia toosendan Sieb.et Zucc.）樹皮中提取的一種植物源殺蟲劑。川楝素在醫(yī)藥上具有驅(qū)蟲、抗癌、抗菌，影響神經(jīng)肌肉、細(xì)胞、呼吸中樞等多種生物活性。在農(nóng)業(yè)上，已有報(bào)道顯示川楝素對多種農(nóng)業(yè)害蟲表現(xiàn)出一定的生物活性，特別是對菜粉蝶、小菜蛾等蔬菜上的主要害蟲均表現(xiàn)出明顯的防治效果[6-8]。吡蟲啉是新一代氯代尼古丁殺蟲劑，有觸殺、胃毒和內(nèi)吸多重藥效，主要用于防治刺吸式口器害蟲，如蚜蟲、飛虱、粉虱、葉蟬、薊馬等，但對鱗翅目昆蟲的藥效不理想，在我國主要用于防治蚜蟲、飛虱等同翅目昆蟲，也是防治瓜蚜的主要化學(xué)藥劑[9-11]。

關(guān)于川楝素、吡蟲啉生物活性的研究和報(bào)道有很多，但尚無關(guān)于它們之間復(fù)配的增效作用及復(fù)配比例的報(bào)道，為解決川楝素和吡蟲啉單獨(dú)使用時(shí)殺蟲譜較窄、藥效較慢、易產(chǎn)生抗藥性的問題，提高二者對瓜蚜以及其他蔬菜害蟲防治效果，為蔬菜蟲害的田間防治探索出更加高效且環(huán)境友好的防治策略，本研究通過測定川楝素、吡蟲啉以及二者不同配比復(fù)配劑對瓜蚜的毒力，篩選出對瓜蚜具有增效活性的復(fù)配劑配方。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試?yán)ハx：將溫室中飼養(yǎng)在黃瓜上的瓜蚜成蟲，接種到展2～3張葉片的黃瓜幼苗上，在成蚜生產(chǎn)若蚜后，及時(shí)將成蚜清除，并把黃瓜的幼苗置于環(huán)境溫度為25 ℃的光照恒溫培養(yǎng)箱中，光—暗周期為14 h—10 h的條件下，等到若蚜發(fā)育至2齡時(shí)待用。

供試藥劑：1%川楝素母液，購自陜西昂盛生物醫(yī)藥科技有限公司；吡蟲啉95%原藥，由江蘇省農(nóng)藥研究所提供。

1.2 川楝素和吡蟲啉對瓜蚜的毒力測定

吡蟲啉原藥用適量丙酮初步溶解后用蒸餾水配制成不同濃度待用，川楝素母液直接用水稀釋，2種藥劑的濃度均配制成160、80、40、20、10 mg/L，另外用清水作空白對照（CK），共11個(gè)處理。采用浸葉法[12-13]處理帶蟲葉片，選取瓜蚜數(shù)量在30～50頭的葉片放入配好的藥液，浸泡5 s后取出，陰涼處晾干，把蟲葉置于直徑為9 cm且墊有濕潤濾紙的培養(yǎng)皿中。然后將培養(yǎng)皿置于溫度為25 ℃、濕度為70%～80%、光—暗周期為14 h—10 h的養(yǎng)蟲室內(nèi)。每個(gè)處理重復(fù)3次，每個(gè)重復(fù)3張葉片，分別在24、48 h時(shí)檢查死亡的瓜蚜數(shù)量，如果CK死亡率在10%以上，則須重新開展本次重復(fù)。蟲體死亡確認(rèn)判斷標(biāo)準(zhǔn)為用細(xì)針輕輕刺觸受試蟲體，無明顯自主反應(yīng)者判斷為死亡。參照張志祥等的方法[14]計(jì)算半數(shù)致死濃度（median lethal concentration，簡稱LC50）。

1.3 復(fù)配劑最佳配比的篩選

以單劑川楝素和吡蟲啉的LC50值為基礎(chǔ)，采用交互測定法[15-16]進(jìn)行最佳配比的篩選。試驗(yàn)設(shè)11個(gè)濃度梯度及空白對照共12個(gè)處理進(jìn)行測定，即取川楝素和吡蟲啉2種單劑各自LC50值為100%，然后分成10等份，按0 ∶ 10、1 ∶ 9、2 ∶ 8、3 ∶ 7、4 ∶ 6、5 ∶ 5、6 ∶ 4、7 ∶ 3、8 ∶ 2、9 ∶ 1、10 ∶ 0復(fù)配比分別計(jì)算2種單劑在各復(fù)配劑中的含量，以清水為對照，據(jù)各處理測試結(jié)果計(jì)算預(yù)期死亡率和毒效比率，公式如下：

預(yù)期死亡率=（A農(nóng)藥LC50值實(shí)際死亡率×A農(nóng)藥所占比例+B農(nóng)藥LC50值實(shí)際死亡率×B農(nóng)藥所占比例）×100%；

毒效比率=實(shí)際死亡率/預(yù)期死亡率。若1.00≤毒效比率≤1.25，為相加作用；若毒效比率>1.25，表現(xiàn)為增效作用；若毒效比率<0.75，則表現(xiàn)為拮抗作用。

1.4 川楝素和吡蟲啉復(fù)配劑共毒系數(shù)的測定

參照“1.2”節(jié)的方法測定川楝素和吡蟲啉復(fù)配劑對瓜蚜的毒力，然后計(jì)算共毒系數(shù)。據(jù)測定結(jié)果，運(yùn)用Finney公式法分別求出每組復(fù)配劑中的毒力回歸方程、LC50值及相對毒力指數(shù)；最后參照孫云沛合成法公式[17]計(jì)算出復(fù)配劑的共毒系數(shù)（co-toxicity coefficient，簡稱C.T.C）：

理論（A+B）復(fù)配劑毒力指數(shù)=A單劑毒力指數(shù)×A單劑在復(fù)配劑中所占百分比+B單劑毒力指數(shù)×B單劑在復(fù)配劑中所占百分比；endprint

式中，A、B分別表示川楝素和吡蟲啉2種單劑。

2 結(jié)果與分析

2.1 川楝素和吡蟲啉對瓜蚜的毒力

室內(nèi)毒力測定結(jié)果表明，川楝素的毒力回歸方程為y=2394 3x+1.557 4，r2=0.924 1，由此計(jì)算出其對瓜蚜的致死中濃度LC50值為27.405 1 mg/L；吡蟲啉的毒力回歸方程為 y=3.021 7x+0.429 4，r2=0.956 8，其對瓜蚜的致死中濃度LC50值為31.812 7 mg/L。

2.2 川楝素和吡蟲啉復(fù)配的最佳配比

由表1可知，在11個(gè)復(fù)配組合中，處理2、處理7、處理8的毒效比大于1小于1.25，表現(xiàn)為相加作用；處理3、處理4、處理5、處理6、處理9、處理10的毒效比均大于1.25，表現(xiàn)為增效作用，其中處理4、處理5、處理6這3組的毒效比分別為1.81、1.90、1.90，明顯高于其他配比組合。

2.3 川楝素和吡蟲啉混配劑共毒系數(shù)

分別對處理4、處理5、處理6這3個(gè)配比進(jìn)行室內(nèi)毒力測定，求出各自的回歸方程和LC50。由表2可知，處理5共毒系數(shù)最高，達(dá)到331.77，川楝素與吡蟲啉的含量分別為10.964、19.086 mg/L，為最佳配比；其次是處理6，共毒系數(shù)為 220.37，川楝素與吡蟲啉的含量分別為13.705、15.905 mg/L；配比為3 ∶ 7組合的共毒系數(shù)為219.46，川楝素與吡蟲啉的含量分別為8.223、22.267 mg/L。處理4、處理5、處理6復(fù)配劑共毒系數(shù)均大于200，表明川楝素與吡蟲啉在這3種復(fù)配比例下對瓜蚜均有明顯的增效作用，2種藥劑混用能提高防治效果。

3 結(jié)論與討論

作物在生長發(fā)育過程中，容易受到各種蟲害的侵襲，特別是蔬菜作物，其蟲害種類繁多，危害嚴(yán)重，如蚜蟲、小菜蛾、菜粉蝶等[2]。長期以來，化學(xué)防治是防治作物蟲害的主要方法[18]。但長期使用化學(xué)殺蟲劑，害蟲容易產(chǎn)生抗藥性。為增強(qiáng)防治效果必然會(huì)造成化學(xué)農(nóng)藥的過量施用，這無疑加大了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)對生態(tài)環(huán)境的破壞，并對人類健康產(chǎn)生威脅?；诖耍οx生物防治逐漸受到了人們的關(guān)注。近年來，川楝素等生物殺蟲劑的應(yīng)用越來越受到人們的重視[7]。但與化學(xué)殺蟲劑相比，生物殺蟲劑往往存在殺蟲譜較窄的缺點(diǎn)。生產(chǎn)中多采用多種生物殺蟲劑復(fù)配或生物殺蟲劑與化學(xué)殺蟲劑復(fù)配來擴(kuò)大殺蟲譜并提高藥效，亦可延緩害蟲產(chǎn)生抗藥性。因此，增效生物復(fù)配劑以其獨(dú)特的優(yōu)勢，已成為農(nóng)田蟲害綜合防治的重要手段[11]。

本研究通過浸葉法測定川楝素和吡蟲啉對瓜蚜的毒力，并篩選2種藥劑復(fù)配的最佳配比。室內(nèi)毒力測定結(jié)果表明，川楝素和吡蟲啉復(fù)配的11組配比篩選試驗(yàn)中，增效作用明顯的川楝素與吡蟲啉含量比例分別為3 ∶ 7、4 ∶ 6、5 ∶ 5，這3種復(fù)配劑的共毒系數(shù)分別達(dá)到219.46、331.77、220.37，表明川楝素與吡蟲啉在這3種復(fù)配比下對瓜蚜均有明顯的增效作用。瓜蚜對化學(xué)農(nóng)藥易產(chǎn)生抗藥性[3]，而川楝素這一植物性殺蟲劑復(fù)配吡蟲啉，既能保證防效，又能減輕環(huán)境污染，同時(shí)還可有效延緩害蟲產(chǎn)生抗藥性，在我國的農(nóng)田害蟲防治中具有良好的應(yīng)用前景。

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