高表達miR—92a對結直腸癌患者預后影響的Meta分析

李利發(fā)++陳小波+侯松林+劉帶志++張廣軍++周何++周彤

[摘要] 目的 系統(tǒng)評估m(xù)iR-92a對結直腸癌（CRC）患者病理生理特征及預后的影響。方法 計算機檢索PubMed、中國生物醫(yī)學數(shù)據(jù)庫（CBM）、中國知網(wǎng)（CNKI）、萬方數(shù)據(jù)庫以及維普科技期刊數(shù)據(jù)庫獲取相關文獻，檢索時間從建庫到2016年12月。利用stata 12.0對資料進行合并分析，數(shù)據(jù)采取危險比（HR），比值比（OR）以及95%置信區(qū)間（95%CI）表示。 結果 總共6篇文獻，695例患者納入本次Meta分析。合并分析表明：①高表達的miR-92a與CRC患者總體生存率有著顯著的聯(lián)系（HR=2.91，95%CI：1.16～7.28，P < 0.05）；②高表達的miR-92a與CRC患者腫瘤浸潤深度（OR=0.56，95%CI：0.33～0.96，P < 0.05），TNM分期（OR=0.41，95%CI：0.24～0.71，P < 0.05），遠處轉移（OR=4.71，95%CI：1.74～12.69，P < 0.05），淋巴結轉移（OR=2.90，95%CI：1.64～5.13，P < 0.05）有著明顯的聯(lián)系；與CRC患者的性別（OR=1.01，95%CI：0.60～1.69，P > 0.05）和腫瘤分化程度（OR=0.66，95%CI：0.33～1.30，P > 0.05）無明顯關系。 結論 高表達的miR-92a能夠潛在的預測CRC患者總體預后和臨床病理特征。

[關鍵詞] 結直腸癌；miR-92a；總體生存率；TNM分期；預后；Meta分析

[中圖分類號] R73 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2017）10（b）-0015-05

A Meta-analysis of prognostic effect of elevated mir-92a in patients with colorectal cancer

LI Lifa1，2 CHEN Xiaobo1 HOU Songlin2 LIU Daizhi2 ZHANG Guangjun1，2 ZHOU He1 ZHOU Tong1，2

1.Department of Gastrointestinal Surgery， Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College， Sichuan Province， Nanchong 637000， China； 2.Institute of Hepato-Biliary-Pancreas and Intestinal Disease， North Sichuan Medical College， Sichuan Province， Nachong 637000， China

[Abstract] Objective To systematically estimate the effect of over-expression miR-92a in clinicopathological and prognosis of patients with colorectal cancer. Methods All available literatures were obtained from PubMed， CBM， CNKI， WanFang， and Vip database，from the building up to December 2016. Eventually， the pooled hazard ratio （HR）， odds ratio （OR） and 95% confidence interval （95%CI） were evaluated by statistical software of stata 12.0. Results There were altogether 6 qualified articles with 695 patients in this Meta-analysis. The pooled analysis shows， ①which increased miR-92a levels were capable of predicting worse overall survival （HR=2.91， 95%CI： 1.16-7.28， P < 0.05） in CRC patients； ②which elevated miR-92a was distinctly associated with depth of tumor invasion （OR=0.56， 95%CI： 0.33-0.96， P < 0.05）， TNM stage （OR=0.41， 95%CI： 0.24-0.71， P < 0.05）， distant metastasis （OR=4.71， 95%CI： 1.74-12.69， P < 0.05）， lymph node metastasis （OR=2.90， 95%CI： 1.64-5.13， P < 0.05）； however， high expression of miR-92a was negatively correlated with gender and tumor differentiation， with pooled OR of 1.01 （95%CI： 0.6-1.69， P > 0.05） and 0.66 （95% CI： 0.33-1.30， P > 0.05）， respectively. Conclusion Up-regulated miR-92a is able to predict survival outcomes and clinicopathologic features.endprint

[Key words] Colorectal cancer； MiR-92a； Overall survival； TNM stage； Prognosis； Meta-analysis

結直腸癌（colorectal cancer，CRC）是全世界最常見的惡性腫瘤之一，由于吸煙、過度飲酒以及過多進食肉類食物等危險因素的影響，其發(fā)病率仍在逐漸的上升[1-2]。然而慶幸的是，CRC從癌前病變到腫瘤的形成是一個相對緩慢的過程，故有望通過早期診斷和個體化治療降低CRC所帶來的危害[3-4]。因此，迫切的需要尋求一種具有高度敏感性和特異性的生物標記，為CRC患者的早期診斷、治療和預后評估提供更加可靠的依據(jù)。諸多研究表明，過表達的miR-92a不僅在冠心病[5]、白血病[6]、肺癌[7]等疾病中扮演著重要的角色，也與CRC患者的臨床預后有著明顯的聯(lián)系[8-9]。因此，本次Meta分析旨在全面的總結miR-92a在CRC患者臨床病理特征及預后評估中的潛在功能。

1 資料與方法

1.1 檢索策略

以cancer、tumor、carcinoma、neoplasm、colorectal、colon，rectal、rectum、miR-92、microRNA-92、miR-92a、microRNA-92a、結直腸癌、結直腸腫瘤、結腸癌、結腸腫瘤、直腸癌、直腸腫瘤為檢索詞，檢索PubMed、CBM、中國知網(wǎng)和萬方數(shù)據(jù)庫等，檢索語言為中文和英文，檢索時間從建庫到2016年12月。

1.2 文獻納入和排除標準

納入標準：①關于不同表達水平的miR-92a與CRC患者臨床病理特征和預后一次研究；②組織病理學確診的CRC患者；③檢測樣本為組織、血清或血漿。

排除標準：①研究重復發(fā)表；②研究數(shù)據(jù)缺乏或有誤；③文獻為綜述、會議摘要或評論等。

1.3 文獻篩選和數(shù)據(jù)提取

由2位研究者獨立進行文獻檢索和數(shù)據(jù)提取，對存在分歧而難以確定是否納入的文獻和數(shù)據(jù)由第3位經(jīng)驗豐富的研究者決定。對不符合納入要求的文獻和數(shù)據(jù)說明排除理由。提取資料包括：①一般資料：文獻題名、第一作者、發(fā)表日期、研究方法、樣本量、檢測方法、截斷值等；②結局指標。

1.4 質(zhì)量評價

利用MOOSE報告規(guī)范詳情表對所納入的隊列研究進行質(zhì)量評價。MOOSE詳情表包括6個關鍵條目：①明確說明研究人群和國家；②明確說明了疾病的性質(zhì)；③明確說明研究設計類型；④明確的定義了結局評估；⑤明確的說明了miR-92a檢測方法；⑥有充足的隨訪期限。對于納入臨床病理特征的Meta分析的合格文獻，須符合①～⑤條要求；對于納入總體生存率的Meta分析的合格文獻，須符合上述6個要求，其余不符合的文獻，予以排除。

1.5 統(tǒng)計學方法

應用Stata 12.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行Meta分析。總體生存率采用危險比（hazard ratio，HR）和95%置信區(qū)間（95% confidence interval，95%CI）表示，臨床病理生理特征采用比值比（odds ratio，OR）和95%CI表示，并繪制森林圖。以Kaplan-Meier生存曲線表示的資料，可采用Engauge Digitizer 4.1統(tǒng)計軟件和Tierney′s法[10]對曲線數(shù)據(jù)進行提取和處理。異質(zhì)性分析通過Q檢驗和I2檢驗表示，當P > 0.10，I2 ≤ 50%，認為異質(zhì)性可以接受，采用固定效應模型；反之，采用隨機效應模型。P < 0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 文獻檢索結果

共檢索獲得文獻183篇，通過閱讀題目、摘要和全文最終合格的納入文獻為6篇[8，11-15]。文獻篩選流程圖見圖1。納入文獻基本資料見表1。

2.2 Meta分析結果

2.2.1 mir-92a與CRC患者臨床病理特征 合并分析表明：高表達的miR-92a與CRC患者腫瘤浸潤深度（OR=0.56，95%CI：0.33～0.96，P < 0.05），TNM分期（OR=0.41，95%CI：0.24～0.71，P < 0.05），遠處轉移（OR=4.71，95%CI：1.74～12.69，P < 0.05），淋巴結轉移（OR=2.90，95%CI：1.64～5.13，P < 0.05）有著明顯的聯(lián)系；與CRC患者的性別（OR=1.01，95%CI：0.60～1.69，P > 0.05）和腫瘤分化程度（OR=0.66，95%CI：0.33～1.30， P > 0.05）無明顯關系。見圖2～7。

2.2.2 總體生存率 4篇[12-15]文獻分析了高表達miR-92a與CRC患者總體生存率的關系。各研究組間異質(zhì)性（I2=70.7%，P≤0.10）不可接受，故采用隨機效應模型行Meta分析。結果表明：高表達的miR-92a可能導致CRC患者較差的總體生存率（HR=2.91，95% CI：1.16～7.28，P < 0.05）。見圖8。

2.3 質(zhì)量評價及敏感分析結果

通過MOOSE報告規(guī)范詳情表對納入的文獻進行質(zhì)量評價，6篇文獻中質(zhì)量評分5、6和7分各2篇，并且均符合本次Meta分析的要求。由于總體生存率Meta分析的異質(zhì)性較明顯，故逐一去除1篇文獻進行發(fā)現(xiàn)：去除Liu等[15]的研究后異質(zhì)性（I2=13.0%，P > 0.10）可以接受，并且合并分析表明：高表達的miR-92a可能導致CRC患者較差的總體生存率（OR=2.04， 95%CI：1.23～3.38，P < 0.05）。

3 討論

MiR-92a家族屬于miR-17-92基因簇，主要包括miR-25、miR-92a-1、miR-92a-2和miR-363四個子序列[16-17]。早期研究表明，miR-17-92基因簇能夠促進腫瘤細胞增殖，抑制腫瘤細胞凋亡[18]。并且Nishida等[12]研究發(fā)現(xiàn)，miR-17-92簇在CRC組織中的表達水平均高于癌旁正常組織，從而表明miR-17-92簇與CRC的形成和發(fā)展有著積極的聯(lián)系。此外，Zhou等[14]研究證實，過度表達的miR-92a與CRC患者糟糕的臨床病例特征和較差總體生存率（HR=2.947，95%CI：1.494～5.813，P=0.002）有著密切的聯(lián)系。相反，Shigoka等[19]研究卻現(xiàn)，肝癌患者血漿中miR-92a的表達水平較健康人群要低。隨后，類似的發(fā)現(xiàn)在Wang等[20]關于CRC的研究中也有所報道。但是總體而言，諸多的研究已證實miR-92a可能是CRC患者臨床病理特征和預后的評估標志物。因此，本次Meta分析旨在全面的總結miR-92a在CRC患者臨床病理特征及預后評估中的潛在功能。endprint

本次Meta分析全面的總結了高表達的miR-92a與CRC患者多種臨床病理特征的關系。分析表明：CRC患者T1/T2期較T3/T4期miR-92a的表達水平更低，從而表明高表達的miR-92a與CRC的浸潤深度有著顯著的聯(lián)系（OR=0.56，95%CI：0.33～0.96，P < 0.05）；并且，具有淋巴結轉移和遠處轉移的CRC患者其miR-92a的表達明顯高于不具有淋巴結轉移和遠處轉移的患者，因而證實上調(diào)的miR-92a在CRC患者的淋巴結轉移（OR=2.90，95%CI：1.64～5.13，P < 0.05）和遠處轉移（OR=4.71，95%CI：1.74～12.69，P < 0.05）中扮演著積極的作用；進一步分析發(fā)現(xiàn)，TNM分期中Ⅲ期和Ⅳ期的CRC患者較Ⅰ期和Ⅱ期的CRC患者具有更高miR-92a表達水平，從而可知高表達的miR-92a與CRC患者較高的TNM分期有著密切的聯(lián)系（OR=0.41， 95%CI：0.24～0.71，P < 0.05）。然而，本次Meta分析也發(fā)現(xiàn)，CRC患者的性別（OR=1.01，95%CI：0.6～1.69，P > 0.05）和腫瘤分化程度（OR=0.66，95%CI：0.33～1.30，P > 0.05）與其miR-92a的表達水平無明顯聯(lián)系。

此外，此次Meta分析也評估了高表達的miR-92a與CRC患者總體生存率之間的關系。合并4篇研究發(fā)現(xiàn)：雖然高表達的miR-92a可能導致CRC患者較差的總體生存率（HR=2.91，95%CI：1.16～7.28，P < 0.05），但是其較高的異質(zhì)性也嚴重影響了合并結果的可靠性，因而筆者進行進一步的分析并發(fā)現(xiàn)，只有排除Liu等[15]的研究后，其異質(zhì)性才能夠被接受，此時合并分析的結果（OR=2.04，95%CI：1.23～3.38，P < 0.05）與之前并無明顯差異，因此有理由認為高表達的miR-92a可能導致CRC患者較差的總體生存率。

綜上所述，高表達的miR-92a與CRC患者腫瘤浸潤深度、淋巴結轉移、遠處轉移、TNM分期以及總體生存率有著顯著的聯(lián)系。然而，本次Meta分析也存在一些不足，如納入文獻偏少，涉及地域較窄且檢測截斷值等。因此，為了miR-92a能更快運用于臨床患者的日常管理，進一步多中心、大樣本的臨床研究仍然很有必要進行。

[參考文獻]

[1] Binefa G，Rodriguez-Moranta F，Teule A，et al. Colorectal cancer：from prevention to personalized medicine [J]. World J Gastroenterol，2014，20（22）：6786-6808.

[2] Jemal A，Bray F，Center MM，et al. Global cancer statistics [J]. CA Cancer J Clin，2011，61（2）：69-90.

[3] Benatti P，Gafa R，Barana D，et al. Microsatellite instability and colorectal cancer prognosis [J]. Clin Cancer Res，2005， 11（23）：8332-8340.

[4] Luo X，Burwinkel B，Tao S，et al. MicroRNA signatures：novel biomarker for colorectal cancer？[J]. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev，2011，20（7）：1272-1286.

[5] Niculescu LS，Simionescu N，Sanda GM，et al. MiR-486 and miR-92a Identified in Circulating HDL Discriminate between Stable and Vulnerable Coronary Artery Disease Patients [J]. PLoS ONE，2015；10（10）：e0140958.

[6] Ohyashiki JH，Umezu T，Kobayashi C，et al. Impact on cell to plasma ratio of miR-92a in patients with acute leukemia：in vivo assessment of cell to plasma ratio of miR-92a [J]. BMC Res Notes，2010；3：347.

[7] Lin HY，Chiang CH，Hung WC. STAT3 upregulates miR-92a to inhibit RECK expression and to promote invasiveness of lung cancer cells [J]. Br J Cancer，2013，109（3）：731-738.

[8] Yamada N，Nakagawa Y，Tsujimura N，et al. Role of Intracellular and Extracellular MicroRNA-92a in Colorectal Cancer [J]. Transl Oncol，2013，6（4）：482-492.

[9] Zhang G，Zhou H，Xiao H，et al. MicroRNA-92a functions as an oncogene in colorectal cancer by targeting PTEN [J]. Dig Dis Sci，2014，59（1）：98-107.endprint

[10] Tierney JF，Stewart LA，Ghersi D，et al. Practical methods for incorporating summary time-to-event data into meta-analysis [J]. Trials，2007，8：16.

[11] Schee K，Boye K，Abrahamsen TW，et al. Clinical relevance of microRNA miR-21，miR-31，miR-92a，miR-101，miR-106a and miR-145 in colorectal cancer [J]. BMC Cancer，2012，12：505.

[12] Nishida N，Nagahara M，Sato T，et al. Microarray analysis of colorectal cancer stromal tissue reveals upregulation of two oncogenic miRNA clusters [J]. Clin Cancer Res，2012， 18（11）：3054-3070.

[13] Ke TW，Wei PL，Yeh KT，et al. MiR-92a Promotes Cell Metastasis of Colorectal Cancer Through PTEN-Mediated PI3K/AKT Pathway [J]. Ann Surg Oncol，2015，22（8）：2649-2655.

[14] Zhou T，Zhang G，Liu Z，et al. Over expression of miR-92a correlates with tumor metastasis and poor prognosis in patients with colorectal cancer [J]. Int J Colorectal Dis，2013，28（1）：19-24.

[15] Liu GH，Zhou ZG，Chen R，et al. Serum miR-21 and miR-92a as biomarkers in the diagnosis and prognosis of colorectal cancer [J]. Tumour Biol，2013，34（4）：2175-2181.

[16] Li M，Guan X，Sun Y，et al. miR-92a family and their target genes in tumorigenesis and metastasis [J]. Exp Cell Res，2014，323（1）：1-6.

[17] Olive V，Jiang I，He L. mir-17-92，a cluster of miRNAs in the midst of the cancer network [J]. Int J Biochem Cell Biol，2010，42（8）：1348-1354.

[18] Mendell JT. miRiad roles for the miR-17-92 cluster in development and disease [J]. Cell，2008，133（2）：217-222.

[19] Shigoka M，Tsuchida A，Matsudo T，et al. Deregulation of miR-92a expression is implicated in hepatocellular carcinoma development [J]. Pathol Int，2010，60（5）： 351-357.

[20] Wang J，Huang SK，Zhao M，et al. Identification of a circulating microRNA signature for colorectal cancer detection [J]. PLoS One，2014，9（4）：e87451.

（收稿日期：2017-06-22 本文編輯：李岳澤）endprint