高效液相色譜法測定鹽酸麻黃堿原料的含量

郝桂清

（呼和浩特食品藥品檢驗(yàn)所，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020）

高效液相色譜法測定鹽酸麻黃堿原料的含量

郝桂清

（呼和浩特食品藥品檢驗(yàn)所，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020）

目的 建立高效液相色譜法，對鹽酸麻黃堿進(jìn)行含量測定。方法 采用Diamonsil C18柱（5 μm，250 mm×4.6 mm），以乙腈—磷酸鹽緩沖液（10∶90）為流動(dòng)相，用HPLC法進(jìn)行測定。結(jié)果 在該條件下，鹽酸麻黃堿濃度在4.895～97.9 μg/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系（r=1.000），測得平均回收率為99.89%。結(jié)論 本法與傳統(tǒng)方法比較具有準(zhǔn)確、靈敏等優(yōu)點(diǎn)。

鹽酸麻黃堿；高效液相色譜法；含量測定

鹽酸麻黃堿，具有抗過敏、收縮血管的作用，臨床上主要用于治療過敏性鼻炎、鼻竇炎及鼻黏膜水腫等。現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)載于《中國藥典》2015年版，是非水滴定法，本文參考文獻(xiàn)[1-2]，采用HPLC法建立了測定鹽酸麻黃含量的方法，提高其控制標(biāo)準(zhǔn)。

1 儀器與試藥

島津LC–2010AHT液相色譜儀，島津UV-2450紫外分光光度計(jì)，內(nèi)蒙古鄂爾多斯市金駝藥業(yè)有限責(zé)任公司（批號：20150534）、內(nèi)蒙古通遼制藥股份有限公司（批號：150703）、內(nèi)蒙古赤峰艾克制藥科技股份有限公司（批號：150421），鹽酸麻黃堿對照品（批號：171241-201206），中國藥品生物制品檢定所；水為超純水；其余試劑均為色譜純。

2 方法和結(jié)果

2.1 檢測波長的選擇：精密稱取鹽酸麻黃堿對照品適量，以流動(dòng)相溶解并稀釋制成10 μg/mL的溶液，掃描紫外圖譜，發(fā)現(xiàn)鹽酸麻黃堿在262 nm，256 nm及250 nm處有最大吸收，但吸收值較小，如用于高效液相色譜法測定含量響應(yīng)值過低，故此三波長不適宜作為檢測波長。而該溶液在205～215 nm處有較平緩的末端吸收，且吸收度較高，同時(shí)參考文獻(xiàn)[1-2]，最終選擇210 nm作為檢測波長。

2.2 流動(dòng)相的選擇：參照鹽酸麻黃堿的溶解性：在水中易溶，在乙醇中溶解，在三氯甲烷或乙醚中幾乎不溶。選用乙腈-水系統(tǒng)作為流動(dòng)相，經(jīng)過優(yōu)化篩選，流動(dòng)相為乙腈-磷酸鹽緩沖液（磷酸二氫鉀6.8 g，三乙胺5 mL，磷酸4 mL，加水至1000 mL，搖勻）（10∶90）時(shí)，液相色譜圖主峰與雜質(zhì)峰可達(dá)到有效分離，且峰形較理想。

2.3 色譜條件。色譜柱：Diamonsil C18柱（5 μm，250 mm×4.6 mm）；流動(dòng)相：乙腈-磷酸鹽緩沖液（磷酸二氫鉀6.8 g，三乙胺5 mL，磷酸4 mL，加水至1000 mL，搖勻）（10∶90）；流速：1.0 mL/min；檢測波長：210 nm；進(jìn)樣量：10 μL。

2.4 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：在擬定的條件下，對溶劑、對照品溶液及供試品溶液進(jìn)行測定，色譜圖見圖1。可見，供試品主峰的保留時(shí)間與對照品主峰的保留時(shí)間一致，并且溶劑對測定無干擾。

2.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：精密稱取鹽酸麻黃堿對照品10.00 mg，置于100 mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻。再精密量取此溶液20 mL，置25 mL量瓶中及分別精密量取5.0 mL，3.0 mL，2.0 mL，0.5 mL，分別置于10 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。照“2.2”項(xiàng)下色譜條件測定。以鹽酸麻黃堿的濃度（C）為橫坐標(biāo)、峰面積（A）為縱坐標(biāo)進(jìn)行回歸，得回歸方程Y=23174X+1121.7（r=1.000）。結(jié)果鹽酸麻黃堿線性范圍為4.895～97.9 μg/mL。

2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn)：取同一批樣品5份，按供試品溶液配制方法制備，測定，結(jié)果RSD為0.33%。

2.7 精密度試驗(yàn)：取同一對照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次，測定，結(jié)果RSD為0.11%。

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一對照品溶液，放置1 h、2 h、3 h、4 h、5 h、 6 h、7 h、8 h后，分別進(jìn)樣，結(jié)果RSD為0.08%。表明鹽酸麻黃堿溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.9 回收率試驗(yàn)：精密稱取鹽酸麻黃堿對照品及鹽酸麻黃堿原料，分別加流動(dòng)相配成濃度為24、30、36 μg/mL各三份，分別進(jìn)樣10 μL，測定其回收率，結(jié)果見表1。

表1 加鹽酸麻黃堿回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.10 耐用性試驗(yàn)：將 Diamonsil C18柱（5 μm，250 mm×4.6 mm）更換為Kromasil C18柱（5 μm，250 mm×4.6 mm）在其他條件保持不變的情況下進(jìn)行測定，理論板數(shù)為5400左右，峰形良好。

圖1 高效液相色譜圖

2.11 樣品含量測定：精密稱取鹽酸麻黃堿樣品適量，用流動(dòng)相配成濃度為30 μg/mL的溶液，作為供試品溶液，按“2.2”項(xiàng)下方法測定，以外標(biāo)法計(jì)算含量，結(jié)果內(nèi)蒙古鄂爾多斯市金駝藥業(yè)有限責(zé)任公司（批號：20150534），內(nèi)蒙古通遼制藥股份有限公司（批號：150703），內(nèi)蒙古赤峰艾克制藥科技股份有限公司（批號：150421）3批樣品中鹽酸麻黃堿相對含量分別為100.2%、100.2%、100.4%。

3 討 論

本實(shí)驗(yàn)以HPLC法測定鹽酸麻黃堿的含量，比傳統(tǒng)的非水法測定準(zhǔn)確、靈敏，且避免了用醋酸汞試液，對環(huán)境造成的不可逆轉(zhuǎn)的影響，因此可以作為鹽酸麻黃堿原料的含量控制方法。

[1] 國家藥典委員會(huì).中國藥典(二部)[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2015:1076-1077.

[2] 高蘇莉,顧宜.高效液相色譜法測定鼻竇炎糖漿中鹽酸麻黃堿含量[J].中國藥房,2007,18(4):22.

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B

1671-8194（2017）18-0040-02