血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-C、高危型人乳頭瘤病毒在子宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變及子宮頸鱗癌中的表達(dá)和意義

田圓圓

（浙江省長(zhǎng)興縣婦幼保健院，浙江 湖州 313100）

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-C、高危型人乳頭瘤病毒在子宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變及子宮頸鱗癌中的表達(dá)和意義

田圓圓

（浙江省長(zhǎng)興縣婦幼保健院，浙江 湖州 313100）

目的探討人乳頭瘤病毒（HPV）感染和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-（CVEGF-C）在子宮頸癌的形成及演進(jìn)過程中可能的作用機(jī)制。方法 選取2015年3月～2016年9月本院收治的宮頸病變患者（檢查原因：體檢、白帶增多、性生活后出血、異常陰道出血、臨床病史或體征異常）102例為研究對(duì)象。結(jié)果 VEGF-C在CIN及子宮頸鱗癌組織中均表達(dá)，并且隨著病變程度的增強(qiáng)VEGF-C的表達(dá)呈漸進(jìn)性增強(qiáng)，而正常的子宮頸組織中無表達(dá)。HR-HPV同CIN及子宮頸癌均顯著相關(guān)。CIN及子宮頸癌組織中VEGF-C的表達(dá)同HR-HPV的感染顯著相關(guān)。結(jié)論 ，檢測(cè)高危型HPV對(duì)子宮頸癌篩查和追蹤管理是有效和可行的。

人類乳頭狀瘤病毒感染；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-C；子宮頸癌

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一，我國(guó)每年新增子宮頸癌病例約13.5萬，占全球發(fā)病量的1/3[1]。近些年隨著普查普治工作的開展，我國(guó)宮頸癌的死亡率明顯下降，宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變發(fā)病率明顯上升。盡早發(fā)現(xiàn)HR-HPV感染、發(fā)現(xiàn)和治療子宮頸癌前期病變患者以阻斷子宮頸癌的發(fā)生，有利于輔助患者臨床治療[2]。Gombos等人[3]的研究成果中顯示宮頸鱗癌中VEGF-C的表達(dá)與以下因素均存在一定的相關(guān)性，分別是腫瘤周圍淋巴管密度以及淋巴管浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。子宮頸癌早期轉(zhuǎn)移是通過淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移，VEGF-C及其受體在早期子宮頸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中起著主要作用。這就提示VEGF對(duì)子宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移均起到了促進(jìn)作用。

本研究采用免疫組化（ strept avidin biotin com plex，SA BC）微波加熱抗原修復(fù)技術(shù)，檢測(cè)子宮頸組織由正常到CIN再到子宮頸浸潤(rùn)癌的VEGF-C的表達(dá)。采用HPV基因分型檢測(cè)，觀察宮頸疾病中各種HR-HPV感染情況。對(duì)病理和臨床資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，驗(yàn)證VEGF-C蛋白的表達(dá)及HRHPV感染可能是子宮頸癌血管形成的早期預(yù)測(cè)指標(biāo)。為宮頸癌的早期發(fā)現(xiàn)，判斷預(yù)后和指導(dǎo)臨床治療提供一種新思路。最大限度的降低宮頸癌對(duì)女性的健康的威脅。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年3月～2016年9月本院收治的宮頸病變患者（檢查原因：體檢、白帶增多、性生活后出血、異常陰道出血、臨床病史或體征異常）102例為研究對(duì)象，患者年齡30～65歲，性生活史超過1年，沒有婦科病變手術(shù)史，也無其他放化療史。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集

采取宮頸口上皮細(xì)胞樣品，放入盛有2 mL細(xì)胞保存液的小瓶?jī)?nèi)，送檢HPV檢測(cè)。采取宮頸脫落細(xì)胞，放入盛有20 mL細(xì)胞保存液的瓶?jī)?nèi)，用于液基薄層細(xì)胞檢測(cè)（TCT）。

1.2.2 檢測(cè)方法

對(duì)選中病例（120例HR-HPV陽性或HPV陽性且TCT異常病例）由固定的經(jīng)驗(yàn)豐富、陰道鏡檢查熟練的醫(yī)師進(jìn)行陰道鏡檢查，行肉眼醋酸及碘染色檢查，在陰道鏡圖像異常區(qū)及碘試驗(yàn)陰性區(qū)多點(diǎn)活檢，如為正常轉(zhuǎn)化區(qū)，則在轉(zhuǎn)化3、6、9、12點(diǎn)取活檢，利用濃度為10%的中性甲醛溶液進(jìn)行標(biāo)本固定并給予標(biāo)本常規(guī)石蠟包埋，行4 um連續(xù)切片操作，然后行病理檢查以及免疫組化檢測(cè)。陰性對(duì)照：每組切片以PBS代替一抗。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)辦法

對(duì)本次參與探究的宮頸病變患者所有臨床數(shù)據(jù)進(jìn)行深入分析，分析軟件名稱是SPSS 19.0軟件，本組探究中，計(jì)數(shù)資料：經(jīng)x2檢驗(yàn)且用率的形式表示。若統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果為P＜0.05則表示統(tǒng)計(jì)學(xué)意義存在。H-HPV與VEGF-C表達(dá)水平相關(guān)性采用Speaman相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1 H-HPV在正常宮頸組織、CIN及宮頸鱗癌組織中的表達(dá)比較

120例患者中有76例病理檢查為正常宮頸組織，其中HR-HPV感染為28例，感染率為36.84%。38例宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變患者（其中CINI5例，CINⅡ14例，CINⅢ19例），2例CINI因?yàn)門CT異常行宮頸活檢，其HR-HPV為陰性，其余CIN病例均有HR-HPV感染，總感染率為94.73%（其中CINI感染率60%，CINⅡ-Ⅲ感染率100%）。6例宮頸鱗癌患者，組織中均有H-HPV感染，HR-HPV感染率為100%。三組之間的H-HPV感染率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2檢驗(yàn)）對(duì)比分析正常宮頸組織與宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變中的表達(dá)，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；對(duì)比分析正常宮頸組織與宮頸鱗癌組織中的表達(dá)，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 H-HPV在正常宮頸組織、CIN及宮頸鱗癌組織中的表達(dá)比較（n，%）

2.2 VEGF-C在正常宮頸組織、CIN及宮頸鱗癌組織中的表達(dá)

正常宮頸組織中陽性表達(dá)為0例，在宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變中，CINI均為陰性表達(dá)，CINⅡ5例陽性表達(dá)，CINⅢ12例陽性表達(dá)，共17例出現(xiàn)陽性表達(dá)（其中+1 14例，++3例）；6例宮頸鱗癌組織中均出現(xiàn)陽性表達(dá)（+～+++），見表2。

正常宮頸組織及CINI中VEGF-C表達(dá)為陰性；CINⅡ～Ⅲ的陽性率為51.5%；宮頸癌的陽性率100% ；利用x2檢驗(yàn)可發(fā)現(xiàn)三者之間相比存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，正常宮頸組織與宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變中（CINⅡ～Ⅲ）的表達(dá)、正常宮頸組織與宮頸鱗癌組織中的表達(dá)均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2 VEGF-C在正常宮頸組織、CIN及宮頸鱗癌組織中的表達(dá)（n，%）

2.3 H-HPV與VEGF-C 在宮頸鱗癌中的相關(guān)性分析

采用Speaman相關(guān)性分析宮頸鱗癌中H-HPV與VEGF-C陽性表達(dá)率得出rs值=0.433且呈負(fù)相關(guān)，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義且=0.000。見表3。

表3 宮頸癌組H-HPV與VEGF-C的相關(guān)性研究（n，%）

3 討 論

通過本研究發(fā)現(xiàn)，正常宮頸組織HPV感染率36.84%，CINI高危型HPV感染率60%；CINⅡ-Ⅲ及宮頸癌高危型HPV感染率100%，我們可以知道，檢測(cè)高危型HPV對(duì)子宮頸癌篩查和追蹤管理是有效和可行的[4]。

李紅娟等研究[5-6]發(fā)現(xiàn)VEGF與一些惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)密切相關(guān)。本研究顯示正常宮頸組織及CINI患者組織中VEGF-C蛋白的表達(dá)均為陰性，而CINⅡ-Ⅲ的VEGF-C蛋白陽性表達(dá)率為51.5%，宮頸癌中VEGF-C蛋白陽性表達(dá)率為100%?？梢园l(fā)現(xiàn)隨著宮頸病變的進(jìn)展，VEGF-C的陽性表達(dá)率明顯升高，而在正常宮頸中無表達(dá)。提示VEGF對(duì)子宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移均起到了促進(jìn)作用。盡早發(fā)現(xiàn)HR-HPV 感染、檢測(cè)VEGF的表達(dá)對(duì)于及早發(fā)現(xiàn)和治療子宮頸癌前期病變患者，阻斷子宮頸癌的發(fā)生有有積極意義。

[1] 豐有潔,沈 鏗.婦產(chǎn)科學(xué)[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2010:325-331.

[2] Bulkmans NW,Berkhof J,Bulk S,et al.High-risk HPV typespeci fi c clearance rates in cervical screening[J].Br J Cancer,2007,96(9):1419-1424.

[3] Gombo s Z,Xu XW,Chu CS,et al.Per itumor al lymphaticvessel density and vascular endothelial gr ow th factor Cex pr ession in ear ly- stag e squamo us cell carcinoma of theuterine cerv ix [J].Clin Cancer Res,2005,11:8364

[4] 楊 杰,王風(fēng)霞.高危型HPV 病毒含量與不同程度子宮頸病變的關(guān)系研究[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新,2012,9(34):41-42.

[5] 李紅娟,王雅莉,張 穎.中原地區(qū)婦女宮頸癌患者人乳頭瘤病毒(HPV) 感染各亞型分布特點(diǎn)[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新,2012,9(2):83-85.

[6] Jach R,Dulinska-Litewka J,Laidlcr P,et a1.Expression of VEGF,VEGF-C and VEGF-2 in insitu and invasion SCC of cervix.FrontBiosci,2010.2:411-423.

R737.33

B

ISSN.2095-8242.2017.39.7579.02

湖州市科研計(jì)劃項(xiàng)目（項(xiàng)目名稱：血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-C、高危型人乳頭瘤病毒在子宮頸上皮內(nèi)瘤病變及子宮頸鱗癌中的表達(dá)和意義；項(xiàng)目編號(hào):2015GY54）

本文編輯：王雨辰本文編輯：李新剛