三種頻率電針對慢性腦低灌注大鼠rCBF和學(xué)習(xí)記憶的影響

胡鑫豪 艾琪 馮培培 蔣持怡 韓德雄 劉喆

浙江中醫(yī)藥大學(xué) 杭州 310053

三種頻率電針對慢性腦低灌注大鼠rCBF和學(xué)習(xí)記憶的影響

胡鑫豪 艾琪 馮培培 蔣持怡 韓德雄 劉喆

浙江中醫(yī)藥大學(xué) 杭州 310053

[目的]觀察不同頻率電針對慢性腦低灌注（Chronic cerebral hypoperfusion，CCH）模型大鼠局部腦血流量（regional cerebral blood flow，rCBF）的影響。[方法]將50只健康雄性SD大鼠隨機分為假手術(shù)組（Sham）、CCH模型對照組（CCH+Model）、CCH+電針組（CCH+15Hz、CCH+2/50 Hz和CCH+2/100 Hz），每組10只。CCH模型大鼠行雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎，不予任何干預(yù)處理；假手術(shù)組僅分離雙側(cè)頸總動脈。CCH+電針組大鼠是CCH模型給予不同頻率電針干預(yù)（電針“百會”“大椎”），于術(shù)后第2天開始行電針干預(yù)（1mA，30min，每日1次，連續(xù)4周），假手術(shù)組和CCH模型組僅同等CCH+電針組抓取固定以平衡處理因素。通過激光多普勒血流儀分別檢測大鼠術(shù)前、術(shù)后即刻、干預(yù)后一周、二周及四周時各組大鼠的局部腦血流量，通過Morris水迷宮（Morris water maze，MWM）實驗，觀察不同頻率電針對CCH模型大鼠局部血流和學(xué)習(xí)記憶（逃避潛伏期）的影響。[結(jié)果]（1）局部腦血流檢測：CCH造模后，各組大鼠rCBF均顯示不同程度下降，術(shù)后即刻CCH模型組與CCH+電針組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。與同時間點假手術(shù)組比較，CCH模型組和CCH+電針組各組大鼠的rCBF均顯著下降（P＜0.01）。與同時間點CCH模型組比較，電針干預(yù)后CCH+電針組大鼠rCBF均顯著升高（P＜0.01）。其中CCH+2/50Hz與CCH+2/100Hz組干預(yù)效果最好，優(yōu)于各時間點CCH+15Hz組。（2）行為學(xué)檢測：隨訓(xùn)練次數(shù)的增加，各組大鼠逃避潛伏期呈下降趨勢。與同時間點第2、3、4、5天假手術(shù)組比較，CCH模型組潛伏期減少緩慢（P＜0.01）；CCH+電針組潛伏期減少較快（P＜0.01或P＜0.05）。與同時間點模型組比較，CCH+電針組潛伏期減少較快（P＜0.01或P＜0.05），其中CCH+2/50Hz和CCH+2/100Hz組平臺定位能力優(yōu)于CCH+15Hz組（P＜0.01或P＜0.05）。[結(jié)論]不同頻率電針刺激對CCH模型大鼠具有治療效應(yīng)，其機制可能與電針提高CCH模型大鼠的腦血流量進(jìn)而改善其學(xué)習(xí)記憶能力有關(guān)，其中2/50Hz、2/100 Hz的刺激頻率優(yōu)于15Hz頻率。

電針；頻率；CCH（慢性腦低灌注）；rCBF（局部腦血流量）；學(xué)習(xí)記憶；認(rèn)知功能

慢性腦低灌注（chronic cerebral hypoperfusion，CCH）是由各種原因引起的腦血管狹窄和（或）低灌注，腦血流量長期、慢性供應(yīng)不足，導(dǎo)致腦代謝障礙和功能衰退的一個病理過程，臨床上主要表現(xiàn)為不同程度的認(rèn)知功能障礙[1]。它是腦動脈硬化、腦梗死、血管性癡呆、阿爾茨海默病等多種腦血管病和變性病發(fā)生、發(fā)展過程中的一個共同病理過程。隨著我國社會老齡化的加劇，癡呆的發(fā)病率增高，認(rèn)知障礙已經(jīng)嚴(yán)重影響老齡人口生存質(zhì)量，因此如何有效防治CCH是治療此類疾病的重點之一。目前，大量的臨床和實驗研究證實電針對腦缺血后認(rèn)知功能障礙有比較好的改善作用，但是電針刺激參數(shù)在其中所起的作用沒有明確的結(jié)論。以往研究發(fā)現(xiàn)[2-3]：2Hz電針能引起中樞腦啡肽、內(nèi)啡肽和內(nèi)碼啡肽釋放，100Hz電針引起強啡肽釋放，2/100Hz電針能同時釋放四種阿片肽；15Hz、30Hz電針能增加星形膠質(zhì)細(xì)胞的活化，而100Hz電針無此作用。因此，本實驗擬通過2VO手術(shù)造模復(fù)制永久性CCH模型，分別選取15Hz、2/50Hz、2/100Hz頻率對CCH模型大鼠進(jìn)行電針干預(yù)，分析實驗結(jié)果，討論不同頻率電針對大鼠rCBF和認(rèn)知功能的影響。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物 健康清潔級雄性SD大鼠50只，3～4月齡，體質(zhì)量300±50g，由浙江中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。飼養(yǎng)環(huán)境維持溫度在18～22℃之間，給予充足的水和飼料。

1.1.2 實驗儀器 韓式電針儀（南京濟生醫(yī)療科技有限公司 HANS-200A）、Morris水迷宮（深圳市瑞沃德生命科技有限公司）、激光多普勒血流儀（深圳市瑞沃德生命科技有限公司）、VIP小動物專業(yè)吸入麻醉機（美國 Matrx公司）、34-0313動物手術(shù)臺（美國HARVARD APPARATUS公司）。

1.1.3 針灸針：華佗牌無菌針灸針（蘇州醫(yī)療用品廠有限公司，規(guī)格0.30mm×25mm）

1.2 實驗方法

1.2.1 實驗分組 實驗開始前，將50只SD大鼠隨機分為假手術(shù)組（Sham）、CCH模型對照組（CCH+ Model）、CCH+電針組（CCH+15Hz、CCH+2/50Hz和CCH+2/100 Hz），每組10只。

1.2.2 CCH模型制備 所有大鼠在術(shù)前一天稱重，術(shù)前12h禁食，4h禁水。采用Cechetti[4]改良雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎（Bilateral Common Carotid Artery Occlusion，2-VO）法制備永久性CCH模型。造模前所有大鼠均放入麻醉盒中麻醉，采用2%異氟烷呼吸麻醉，維持氧分壓為1 mmHg，維持劑量為0.5mmHg左右，將麻醉完全的實驗大鼠，仰臥位放置并固定于恒溫手術(shù)臺（37℃）以異氟烷吸入麻醉，充分暴露頸部，用剃毛機將頸部正中部位剃毛，為造模準(zhǔn)備。用碘伏消毒后行頸部正中切開術(shù)，切口約1cm，小心分開兩側(cè)胸鎖乳突肌，盡量避開甲狀腺，分離雙側(cè)頸總動脈，用6#縫合線結(jié)扎，然后按壓并用青霉素鈉消毒，最后縫合內(nèi)外切口并用碘伏消毒，并在傷口涂抹適量青霉素鈉溶液抗感染，再將大鼠置于37℃環(huán)境中待其完全蘇醒后分組治療或予以平衡處理。

1.2.3 電針干預(yù) 電針組動物于手術(shù)造模后24h給予相應(yīng)治療性干預(yù)，將大鼠穿上特制“鼠衣”并固定在特制鼠架上，依據(jù)實驗針灸學(xué)[5]取“百會”“大椎”穴(百會：頂骨正中，大椎：第7頸椎與第1胸椎間背部正中)，使用無菌針灸針（規(guī)格：0.30mm×25mm）刺入皮下1cm左右，接通HANS-200A型韓氏穴位神經(jīng)刺激儀進(jìn)行電針治療，電針參數(shù)：輸出電流1mA，頻率為各組對應(yīng)頻率，時間30min/次/天。Sham組和CCH模型對照組僅進(jìn)行抓取固定以平衡因素。

1.2.4 rCBF測量 采用激光多普勒血流儀檢測大鼠rCBF變化：異氟烷呼吸麻醉，統(tǒng)一選取大鼠顱腦右顳側(cè)（外耳道孔與后眼角連線中點）作為檢測點，碘伏消毒之后作一5mm縱向切口，鈍性分離肌肉組織露出骨平面，用無菌棉球蘸少許 3%雙氧水清理骨平面上血漬，用特制膠水將自制的簡易探頭底座黏貼于骨面上。檢測時將激光多普勒腦血流儀探頭插入探頭底座，待顯示屏上穩(wěn)定讀值后進(jìn)行監(jiān)測并記錄存盤（記錄時間不少于3min），檢測時間點為手術(shù)前5min、缺血術(shù)后隨即測值及處死前5min；比較手術(shù)前、術(shù)后即刻、電針干預(yù)一周、二周及四周后rCBF的變化程度，缺血后達(dá)到缺血前70%即認(rèn)為造模成功；記錄缺血不同時相rCBF變化。

1.2.5 行為學(xué)檢測 實驗設(shè)備：水迷宮為直徑180cm，深約70cm的圓柱形水池，平臺為直徑約12cm的圓形臺面，池壁、池底與平臺均為黑色。水深約50cm，溫度22±1℃，平臺置于水下2～3cm處。水迷宮周圍用遮光簾圍繞以消除周圍環(huán)境影響。采用ANY-maze動物行為分析系統(tǒng)（ANY-maze；Stoelting，CO，USA)）跟蹤記錄大鼠活動情況。實驗方法：本實驗在大鼠造模后第23天開始進(jìn)行連續(xù)6天。檢測時間為每天電針干預(yù)治療后的10～16h之間。實驗時將大鼠面向池壁輕輕放入水池中，觀察大鼠60s內(nèi)自由航行情況。并通過自動影像跟蹤系統(tǒng)（SMART，Panlab）進(jìn)行實時采集錄像。實驗結(jié)束后，將影像資料采用SMART（3.0版）軟件進(jìn)行分析。定位航行試驗：于大鼠處死前第6天開始，持續(xù)5天，每天1次，時間固定。將大鼠頭朝上面向池壁從第一象限開始依次緩緩放入水中，利用軟件記錄大鼠自入池之后至找到平臺所需時間，即逃避潛伏期。以此檢測大鼠學(xué)習(xí)能力。若大鼠60s內(nèi)未找到平臺，則將大鼠引至平臺放置10s。

1.2.6 統(tǒng)計學(xué)方法 統(tǒng)計軟件采用SPSS17.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計。實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤（mean±s.e）表示。Morris水迷宮檢測數(shù)據(jù)采用重復(fù)測量方差分析；其余數(shù)據(jù)同時間點多個樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析（One-Way-ANOVA），若方差齊者，使用LSD檢驗；若方差不齊者，使用DunnettsT3檢驗；以P＜0.05或P＜0.01作為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 局部腦血流量檢測結(jié)果 本實驗采用激光多普勒血流儀對各組大鼠在術(shù)前、術(shù)后即刻、造模后1周、2周和4周的rCBF進(jìn)行檢測，由實驗結(jié)果可知：各組大鼠造模前差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），表明實驗大鼠無個體差異。CCH造模后，各組大鼠（假手術(shù)組、模型組和電針組大鼠）不同時間點rCBF均顯示不同程度下降，且術(shù)后即刻CCH模型組與CCH+電針組無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。與同時間點假手術(shù)組比較，CCH模型組和CCH+電針組各組大鼠的rCBF均顯著下降差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。與同時間點CCH模型組比較，造模后1周、2周和4周時，CCH+電針組大鼠rCBF均顯著升高差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。CCH模型組rCBF值隨著缺血時間的延長有緩慢回升趨勢，CCH+電針組rCBF隨著干預(yù)治療時間的延長呈快速回升趨勢，其中CCH+2/50Hz與CCH+2/100Hz組干預(yù)效果最好，優(yōu)于各時間點CCH+ 15Hz組，且無明顯區(qū)別（P＞0.05）。提示電針能夠明顯改善CCH大鼠局部腦供血，且頻率2/50Hz和2/100Hz優(yōu)于頻率15Hz。見表1、圖1。

表1 不同頻率電針對干預(yù)治療CCH大鼠的影響(mean±s.e.,%) Tab.1 Effect of electroacupuncture at different frequency on interventional treatment of chronic cerebral hypoperfusion in rats（mean±s.e.,%）

2.2 不同頻率電針對CCH模型大鼠行為學(xué)的影響2VO造模后第23d到27d的MWM 5天的定位航行實驗中，觀察假手術(shù)組、CCH模型對照組和CCH+電針組大鼠的逃避潛伏期，結(jié)果顯示：隨訓(xùn)練次數(shù)的增加，各組大鼠逃避潛伏期呈下降趨勢，第一天各組間無差異。與同時間點第2、3、4、5天假手術(shù)組比較，CCH模型組潛伏期減少緩慢（P＜0.01）；CCH+電針組潛伏期減少較快，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01或P＜0.05）。與同時間點CCH模型組比較，CCH+電針組潛伏期減少較快（P＜0.01或P＜0.05）。與同時間點CCH+ 15Hz組比較，可觀察到除第二天外，CCH+2/50Hz和CCH+2/100Hz組大鼠的逃避潛伏期減少皆顯著快于CCH+15Hz組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01或P＜0.05），而CCH+2/50Hz和CCH+2/100Hz組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。這表明：電針干預(yù)能有效改善CCH大鼠局部腦血流循環(huán)，增強其學(xué)習(xí)記憶能力，且頻率2/ 50Hz與2/100Hz要優(yōu)于頻率15Hz。見表2、圖2。

圖1 不同頻率電針對干預(yù)治療CCH大鼠的影響Figure 1 Effect of electroacupuncture at different frequencies on CCH in rats

表2 不同頻率電針干預(yù)治療對CCH大鼠平均逃避潛伏期的影響(±s.e,S) Tab.2 Effect of electroacupuncture at different frequency on the mean escape latency of chronic cerebral hypoperfusion in rats (±s.e,S)

表2 不同頻率電針干預(yù)治療對CCH大鼠平均逃避潛伏期的影響(±s.e,S) Tab.2 Effect of electroacupuncture at different frequency on the mean escape latency of chronic cerebral hypoperfusion in rats (±s.e,S)

注：與同時相假手術(shù)組比較，*P＜0.05,**P＜0.01；與同時相CCH模型組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；與同時相CCH+15Hz電針組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。Note:Compared with the same time Sham group,*P＜0.05,**P＜0.01；compared with the same time CCH+Model group,▲P＜0.05,▲▲P＜0.01;compared with the same time CCH+15Hz group,△P＜0.05,△△P＜0.01.

組別 n學(xué)習(xí)訓(xùn)練天數(shù)Day1 Day2 Day3 Day4 Day5 Sham CCH+Model CCH+15HZ CCH+2/50HZ CCH+2/100HZ 10 10 10 10 10 49.75±1.36 50.97±2.20 50.84±2.46 50.35±2.24 50.08±2.57 25.79±2.65 50.32±1.85** 42.54±4.02** 35.45±2.43*▲35.19±1.62*▲▲△19.03±2.25 48.51±1.50** 38.98±4.96**▲28.80±3.82*▲▲△29.32±2.85*▲▲△14.7±1.75 42.50±1.91** 35.28±3.97**▲25.78±1.87*▲▲△△24.95±0.92▲▲△△15.32±1.69 40.36±2.51** 32.06±4.32**▲24.31±2.35*▲▲△23.30±1.37*▲▲△

3 討論

圖2 不同頻率電針干預(yù)治療對CCH大鼠平均潛伏期的影響Figure 2 Effect of different frequency electroacupuncture on the average latency of CCH rats

研究表明[6]，由CCH引起的局部腦血流量降低會使得大鼠出現(xiàn)進(jìn)行性認(rèn)知功能障礙，且慢性持續(xù)性腦血流下降是引起血管性癡呆的重要原因之一。電針作為目前治療CCH的主要手段之一，其治療方法簡便，價格低廉，長期應(yīng)用毒副作用小的特點頗受廣大患者青睞。而電針頻率作為針刺的一個重要的參數(shù)，其產(chǎn)生的效應(yīng)也截然不同。有研究[7]顯示，電針腦卒中患者頭皮運動區(qū)，根據(jù)頻率分為2Hz、2/15Hz、100Hz組，應(yīng)用單光子發(fā)射型計算機斷層(SPECT)觀察3組患者電針前和電針中腦血流灌注和腦功能的變化，結(jié)果顯示在固定電針的刺激強度時，分別使用2Hz、2/15Hz、100Hz三種不同的刺激頻率治療腦卒中，局部腦與全腦血流的比值(Fe)，血流功能變化率(blood functio nal changing rate,BFCR%）都有不同程度的增高，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理后發(fā)現(xiàn)，采用變頻2/15Hz和高頻100Hz刺激時，F(xiàn)e和BFCR%的增高比低頻2Hz更為顯著(P＜0.01)。上述研究表明，以往針灸實驗研究從不同角度和層次證實針刺頻率不同所產(chǎn)生的針刺效應(yīng)是有差別的。因此，我們選取臨床具有代表性的波形與頻率:15Hz、2/50Hz和2/100Hz，輸出電流1mA，刺激時間30min作為電針組參數(shù)。

已有學(xué)者證明[8-13]，電針調(diào)節(jié)可改善局部腦血流量，從而改善其學(xué)習(xí)記憶能力。因此，本實驗采用Cechetti等改良2VO法對模型組和電針組永久性結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈制作CCH大鼠模型，可以有效地模擬如椎基底動脈狹窄、頸動脈粥樣硬化斑塊形成及各種慢性心腦血管疾患引起的腦供血不足而導(dǎo)致的認(rèn)知功能缺陷性疾病；并采用Morris水迷宮對各組大鼠進(jìn)行學(xué)習(xí)記憶能力的檢測。Morris水迷宮檢驗已經(jīng)成為研究學(xué)習(xí)記憶的常用方法之一[14-17]，由英國心理學(xué)家Morris創(chuàng)建，主要用于以評估嚙齒類動物空間學(xué)習(xí)和記憶的能力[18]。本實驗同樣選擇了檢測大鼠局部腦血流量以及Morris水迷宮檢驗，結(jié)果顯示：(1)局部腦血流量檢測：各組大鼠造模前均無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。CCH造模后，各組大鼠（假手術(shù)組、CCH模型組和CCH+電針組大鼠）不同時間點rCBF均顯示不同程度下降，且術(shù)后即刻CCH模型組與CCH+電針組無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。與同時間點假手術(shù)組比較，CCH模型組和CCH+電針組各組大鼠的rCBF均顯著下降（P＜0.01）。與同時間點CCH模型組比較，電針干預(yù)后CCH+電針組大鼠rCBF均顯著升高（P＜0.01或P＜0.05）。其中CCH+2/50Hz與CCH+2/100Hz組干預(yù)效果最好，優(yōu)于各時間點CCH+15Hz組。(2)行為學(xué)檢測：2VO造模后第23d到27d的MWM 5天的定位航行實驗中，觀察假手術(shù)組、CCH模型對照組和CCH+電針組大鼠的逃避潛伏期，結(jié)果顯示：隨訓(xùn)練次數(shù)的增加，各組大鼠逃避潛伏期呈下降趨勢，第一天各組間無差異（P＞0.05）。與同時間點第2、3、4、5天假手術(shù)組比較，CCH模型組潛伏期減少緩慢（P＜0.01）；CCH+電針組潛伏期減少較快（P＜0.05或P＜0.01）。與同時間點模型組比較，CCH+電針組潛伏期減少較快（P＜0.01或 P＜0.05），其中 CCH+2/50和 CCH+2/ 100Hz組平臺定位能力優(yōu)于CCH+15Hz組（P＜0.01或P＜0.05）。這表明：電針干預(yù)能有效改善CCH大鼠局部腦血流循環(huán)，增強其學(xué)習(xí)記憶能力，且頻率2/50Hz與2/100Hz頻率要優(yōu)于頻率15Hz。

充足的腦血流量是大腦正常工作的基礎(chǔ)。因此本實驗在不同時間點（術(shù)前、術(shù)后即刻、術(shù)后1周、2周和4周）對各組大鼠局部腦血流進(jìn)行檢測，并在電針干預(yù)治療的23d到27d進(jìn)行MWM檢測。通過MWM檢測結(jié)果可以觀察到，各組大鼠逃避潛伏期均逐漸縮短，而其相應(yīng)組別（CCH模型組和CCH+電針組）的局部腦血流均逐漸升高，說明CCH模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能可能與腦血流存在相關(guān)性。

綜上所述，CCH模型大鼠腦血流下降同時其學(xué)習(xí)記憶能力也隨之下降，電針可改善CCH模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，可能是通過上調(diào)其腦血流來改善。其中電針頻率2/100Hz和2/50Hz對腦血流和學(xué)習(xí)記憶功能的改善優(yōu)于其他頻率。

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Effects of Electro-acupuncture at Different Frequencies on rCBF and Learning(Cognitive Function)in Rats with Chronic Cerebral Ischemia

HU Xinhao,AI Qi,FENG Peipei,et alZhejiang Chinese Medical University,Hangzhou(310053)

[Objective]To observe the effects of different frequency electroacupuncture on regional cerebral blood flow(rCBF)in chronic cerebral hypoperfusion(CCH)rats.[Methods]Fifty SD male rats were randomly split into Sham operation group,the CCH model group,CCH+electrocardiographic group(CCH+15Hz,CCH+2/50 Hz and CCH+2/100 Hz),10 per group.CCH model rats underwent bilateral common carotid artery ligation.without any intervention;Sham operation group only isolated bilateral common carotid artery.CCH+EA group was given CCH model to give different frequency of electro-acupuncture intervention(electroacupuncture points to take"Baihui","Dazhui"two points),in the second day after the start of electro-acupuncture intervention(1mA,30min,1 time for 4 weeks).The Sham operation group and the CCH model group were treated in the same CCH+EA group to fix the factors.Regional cerebral blood flow was measured by laser Doppler flowmeter in rats before and after operation,one week,two weeks and four weeks after the intervention.Morris water maze(Morris water maze，MWM)was used to observe the effects of different frequencies of electroacupuncture on local blood flow and learning and memory(Escape Latency)in CCH model rats.[Result]1.The levels of rCBF in the CCH model group were much smaller than those in the CCH+EA group were not statistically significant(P＞0.05).The rCBF in the CCH model group and CCH+EA group were significantly lower than those in the Sham group(P＜0.01).Compared with CCH model group,rCBF was significantly increased in CCH+EA group after electroacupuncture at the same time point(P＜0.01).CCH+2/50Hz and CCH+2/100Hz groups had the best intervention effect,which was better than CCH+15Hz group each time point.2,Behavioral examinations:With the increase in the number of training,the escape latency of rats in each group showed a decreasing trend.At the same time point compared with the Sham group,the latency of the rat at the CCH model group was slowly decreased(P＜0.01)and the CCH+ electroacupuncture group was significantly decreased(P＜0.01).At the same time point compared with the CCH model group,the latency of the rat at the CCH+electroacupuncture group was quickly decreased(P＜0.01 orP＜0.05).Among the CCH+electroacupuncture group,the platform positioning capability of the rat at the CCH+2/50 Hz group and CCH+2/100Hz group was better than rat at the CCH+15Hz group(P＜0.01 orP＜0.05).[Conclusion]Different frequency electroacupuncture stimulation both has a therapeutic effect on CCH model rats,and its mechanism may be related to the improvement of learning and memory ability of CCH model rats by electroacupuncture,and 2/50Hz,2/100 Hz stimulation Frequency is better than 15Hz.

electroacupuncture;frequency;CCH(chronic cerebral hypoperfusion);rCBF(blood flow after cerebral ischemia);learning and memory;cognitive function

R282 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1005-5509（2017）10-0790-06

10.16466/j.issn1005-5509.2017.10.003

浙江省自然科學(xué)基金項目（LY16H270004）；國家自然科學(xué)基金（81273822）；浙江省科技創(chuàng)新團隊項目（2013TD15）

Fund projects:Program of Zhejiang Provincial Natural Science Foundation(LY16H270004)；Program of National Natural Science Foundation(81273822);Key Science and Technology Innovation Team of Zhejiang Province(2013TD15)

劉喆 ,E-mail:ssrsliu＠163.com

2017-05-18）