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    電針百會、神庭穴對腦缺血再灌注大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及海馬5-羥色胺1A受體表達(dá)的影響①

    2017-10-31 06:15:34金昊柳維林林冰冰李瓏彭洪衛(wèi)張秀峰宋長明黃佳陶靜陳立典
    中國康復(fù)理論與實踐 2017年10期
    關(guān)鍵詞:海馬記憶實驗

    金昊,柳維林,林冰冰,李瓏,彭洪衛(wèi),張秀峰,宋長明,黃佳,陶靜,2,3,陳立典,2,3,4

    ·基礎(chǔ)研究·

    電針百會、神庭穴對腦缺血再灌注大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及海馬5-羥色胺1A受體表達(dá)的影響①

    金昊1,柳維林1,林冰冰1,李瓏1,彭洪衛(wèi)1,張秀峰1,宋長明1,黃佳1,陶靜1,2,3,陳立典1,2,3,4

    目的 探討電針百會、神庭穴對腦缺血再灌注(MCAO/R)大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響及其可能的作用機(jī)制。方法 將90只健康雄性Sprague-Dawley大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(n=18)和手術(shù)組(n=72)。手術(shù)組參照線栓法制備MCAO/R大鼠模型。將符合納入標(biāo)準(zhǔn)的54只手術(shù)組大鼠隨機(jī)分為模型組(n=18)、電針組(n=18)和非穴組(n=18)。電針組電針百會、神庭穴共14 d。小動物磁共振掃描檢測腦梗死體積;Morris水迷宮測試檢測學(xué)習(xí)記憶能力;免疫組化檢測5-羥色胺1A(5-HT1A)受體的定位和表達(dá)。結(jié)果 干預(yù)前各組大鼠腦梗死體積無顯著性差異(F=1.678,P〉0.05)。干預(yù)后,與模型組和非穴組相比,電針組腦梗死體積顯著減小(P〈0.001)。Morris水迷宮測試中,電針組較模型組和非穴組逃避潛伏期顯著縮短(P〈0.001),穿越平臺次數(shù)增加(P〈0.05)。5-HT1A受體在缺血側(cè)海馬CA1、CA3和DG區(qū)均出現(xiàn)表達(dá),電針組表達(dá)量較模型組和非穴組均降低(P〈0.05)。非穴組各項指標(biāo)與模型組比較均無顯著性差異(P〉0.05)。結(jié)論 電針百會、神庭穴可有效改善MCAO/R大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力,其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)海馬區(qū)5-HT1A受體表達(dá)有關(guān)。

    腦缺血再灌注;電針;學(xué)習(xí)記憶;5-羥色胺1A受體;大鼠

    腦卒中是人類三大死亡原因之一,我國每年新發(fā)腦卒中患者約200萬人,其中70%~80%患者因殘疾而喪失獨立生活的能力[1]。缺血性腦卒中后高達(dá)65%的患者伴發(fā)認(rèn)知功能障礙[2]。認(rèn)知功能障礙除了嚴(yán)重影響運(yùn)動和感覺功能等的康復(fù),對患者的日常生活活動能力(activity of daily living,ADL)及生活質(zhì)量亦產(chǎn)生直接影響[3-4]。學(xué)習(xí)記憶障礙是腦卒中后認(rèn)知障礙的核心癥狀[5-6]。課題組前期研究顯示,針刺百會、神庭穴可以改善腦卒中后認(rèn)知功能障礙和學(xué)習(xí)記憶障礙[7-8],但其具體機(jī)制未明。

    5-羥色胺 1A(5-hydroxytryptamine 1A,5-HT1A)受體是5-HT受體亞型中的一種,分為突觸前膜受體和突觸后膜受體,海馬神經(jīng)元5-HT1A受體為突觸后膜受體[9]。目前研究已證實,海馬5-HT1A受體參與學(xué)習(xí)記憶過程[10],通過調(diào)控蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)信號級聯(lián)反應(yīng)影響學(xué)習(xí)記憶[11]。研究表明腦缺血時海馬5-HT1A受體水平發(fā)生變化,在一定時間內(nèi)顯著升高,而針刺能夠影響5-HT1A受體水平[12]。

    本實驗制備腦缺血再灌注(middle cerebral artery occlusion and reperfusion,MCAO/R)大鼠模型,觀察電針百會、神庭穴對腦缺血再灌注大鼠學(xué)習(xí)記憶能力、腦梗死體積、5-HT1A受體表達(dá)的影響。

    1 材料與方法

    1.1 實驗動物

    90只SPF級健康雄性Sprague-Dawley大鼠,由上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司提供,許可證號碼SCXK(滬)2013-0005,體質(zhì)量(260±20)g,于2016年11月5日至26日由福建中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心負(fù)責(zé)喂養(yǎng),每籠4只。喂養(yǎng)條件為無菌環(huán)境,溫度22℃,濕度恒定,均自由進(jìn)食和飲水。期間適性飼養(yǎng)1周后完成實驗動物模型的制備和干預(yù)。各項實驗觀察指標(biāo)在福建中西醫(yī)結(jié)合研究院各平臺實驗室完成。實驗過程中均嚴(yán)格按照國際動物保護(hù)及使用指南的規(guī)定進(jìn)行。

    1.2 主要試劑和儀器

    5-HT1A抗體:ABCAM公司。β-actin抗體:北京全式金生物技術(shù)有限公司。華佗牌電針治療儀:蘇州醫(yī)療用品廠有限公司。Morris水迷宮實驗裝置:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所。7.0 T小動物磁共振儀:德國布魯克公司。萊卡DM4000B LED顯微鏡:德國萊卡公司。Image-lab圖像分析系統(tǒng):美國伯樂公司。

    1.3 分組和造模

    將所有大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(n=18)和手術(shù)組(n=72)。

    手術(shù)組術(shù)前禁食12 h,制備MCAO/R大鼠模型。將大鼠稱重,使用10%水合氯醛3 ml/kg腹腔注射麻醉;將頸部皮膚沿正中縱向剪開,后沿著左側(cè)胸鎖乳突肌內(nèi)緣對肌肉和筋膜進(jìn)行分離,以充分暴露出左側(cè)頸總動脈(common carotid artery,CCA)、左側(cè)頸內(nèi)動脈(internal carotid artery,ICA)和左側(cè)頸外動脈(external carotid artery,ECA);依次將左側(cè)CCA、ECA近心端結(jié)扎,并于ICA近心端預(yù)留結(jié)扎線,使用微動脈夾暫時夾閉ICA;使用顯微彈簧剪于距CCA結(jié)扎處遠(yuǎn)端約3 mm處剪一小口,將已備好的線栓插入,用顯微鑷輕推線栓使之進(jìn)入CCA,直至大腦前動脈近端(以感到有少許阻力為度),從CCA分叉處起插入長度約18~22 mm;將左側(cè)ICA上預(yù)留的結(jié)扎線扎緊、固定線栓;檢查、清洗手術(shù)創(chuàng)口,縫合皮膚,注意將線栓露于外部;90 min后,輕輕抽出線栓,使線栓頭側(cè)退回至CCA分叉處。

    假手術(shù)組只分離頸外動脈、頸總動脈和頸內(nèi)動脈,不結(jié)扎和插線栓。

    再灌注2 h后,根據(jù)Longa[13]法對蘇醒大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評分。0分,無神經(jīng)功能缺損體征;1分,不能完全伸展對側(cè)前爪;2分,向偏癱側(cè)轉(zhuǎn)圈;3分,行走時向偏癱側(cè)傾倒;4分,不能自發(fā)行走,意識喪失。評分1~3分者納入實驗。進(jìn)行相關(guān)排除后,最終納入54只合格的大鼠并將其隨機(jī)分成模型組(n=18)、電針組(n=18)和非穴組(n=18),并分別放回籠中正常飼養(yǎng)。

    1.4 干預(yù)方法

    電針組參考《實驗針灸學(xué)》[14]取大鼠百會和神庭穴。采用華佗牌30號0.5寸毫針,接華佗牌G6805電針治療儀,設(shè)定電壓峰值為6 V,電流1~3 mA,疏密波,頻率2/20 Hz,以大鼠安靜耐受、穴位周邊組織輕輕抖動為度。每次30 min,每天1次,于手術(shù)后第1天開始治療,共14 d。

    非穴組大鼠針刺雙脅下非經(jīng)非穴,依據(jù)Zhang[15]實驗中的方法進(jìn)行穴位定位:低于脅部,高于髂嵴10~15 mm,向下斜刺3 mm,其余條件同電針組。

    假手術(shù)組與模型組,每天同一時間同等條件下抓取30 min后回籠飼養(yǎng),不予任何治療。

    1.5 檢測方法

    1.5.1 腦梗死體積檢測

    干預(yù)前及干預(yù)14 d后使用7.0 T小動物磁共振儀(德國BRUKER)進(jìn)行掃描。0.3%異氟烷吸入10 min麻醉,先行矢狀位定位掃描,而后開始T2加權(quán)成像(T2-weighted imaging,T2WI)掃描。采用弛豫增強(qiáng)快速采集(rapid acquisition with relaxation enhancement,RARE),掃描參數(shù) TR/TE=4200/55 ms,F(xiàn)OV=32×32 mm,矩陣=256×256,層數(shù)=21,層厚=1.0 mm,層間距=0.5 mm,視野=30×30 mm,翻轉(zhuǎn)角=30o,激發(fā)15次,掃描時間為350 s。

    1.5.2 Morris水迷宮測試

    在干預(yù)的第10天,采用Morris水迷宮進(jìn)行大鼠行為測試。該迷宮為一個直徑200 cm、高50 cm的圓形水池,水深30 cm,水溫維持(25±2)℃。平臺放置在第三象限的中心且比水面低2 cm,該平臺為圓柱形平臺,直徑6 cm,水池內(nèi)表面與平臺涂成黑色。將自由活動的大鼠放置在水池中,讓其尋找該平臺。行為學(xué)測驗主要包括定位航行試驗和空間探索試驗。

    定位航行實驗:分別從水池的4個象限按順時針方向依次將大鼠面朝池壁放入水中,測其找到平臺所需的時間(逃避潛伏期);若大鼠未于90 s內(nèi)找到平臺,記錄本次潛伏期為90 s,將大鼠移至平臺上并停留10 s后再進(jìn)行下一次測試。實驗于干預(yù)的第10~13天進(jìn)行,歷時4 d。

    空間探索實驗:定位航行實驗結(jié)束后撤掉第3象限平臺,將大鼠面向池壁放入水中,記錄在90 s內(nèi)大鼠穿過原放置平臺區(qū)域的次數(shù)。實驗于干預(yù)的第14天進(jìn)行,歷時1 d。

    1.5.3 缺血側(cè)海馬區(qū)5-HT1A受體檢測

    大鼠10%水合氯醛3 ml/kg腹腔注射麻醉后,打開胸腔暴露心臟,剪開右心耳,從左心室依次灌注生理鹽水300 ml至流出液清晰,動物肝臟及腸系膜呈蒼白,繼續(xù)灌以4℃多聚甲醛500 ml,待動物出現(xiàn)四肢肌肉抽搐時表示灌注成功。斷頭、迅速剝?nèi)∧X組織,放入4%多聚甲醛中固定24~48 h后行常規(guī)脫水,石蠟包埋,切片厚5 μm,使用防脫載玻片撈片、烤片。

    腦片在二甲苯中脫蠟、梯度酒精脫水后,微波法抗原修復(fù)。之后滴加過氧化物酶阻斷劑;滴加山羊血清封閉液;滴加5-HT1A一抗(1∶100),于濕盒中4℃過夜;室溫中復(fù)溫30 min,滴加生物素標(biāo)記的二抗;滴加鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶。除滴加封閉液外,以上各步驟間均需使用PBS漂洗3遍,每遍5 min。除滴加一抗外,各步驟孵育時間均為10 min。上述步驟完成后滴加事先配制好的DAB顯色劑進(jìn)行顯色,水洗,蘇木素染色1 min,水洗3遍,進(jìn)行脫水、樹脂封片,并觀察、拍照。海馬CA1、CA3及DG區(qū)各選6個視野,使用Motic Med 6.0病理圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析,分別得出積分光密度及各區(qū)面積,結(jié)果以各區(qū)平均光密度(optical density,OD)值表示。OD=各區(qū)積分光密度/各區(qū)面積。

    1.6 統(tǒng)計學(xué)分析

    采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析,所有數(shù)據(jù)用(xˉ±s)表示。符合正態(tài)分布且方差齊的組間比較采用單因素方差分析,并以LSD法進(jìn)行組間的兩兩比較。若不符合正態(tài)分布則采用秩和檢驗。顯著性水平α=0.05。

    2 結(jié)果

    2.1 腦梗死體積

    干預(yù)前,假手術(shù)組結(jié)構(gòu)清晰,腦室走向正常,未觀察到腦梗死;與假手術(shù)組比較,模型、電針、非穴三組右側(cè)結(jié)構(gòu)正常,左側(cè)大腦呈部分梗死,三組間腦梗死體積無顯著性差異(P〈0.05)。干預(yù)14 d后,模型、電針、非穴三組腦梗死體積較干預(yù)前均顯著減小(P〈0.001),但電針組的左側(cè)梗死區(qū)域顯著小于模型組、非穴組(P〈0.001);模型組與非穴組相比無顯著性差異(P〈0.05)。見圖1~圖2、表1。

    圖1 干預(yù)前T2WI掃描典型圖片

    圖2 干預(yù)14 d后T2WI掃描典型圖片

    表1 干預(yù)前后各組大鼠腦梗體積占全腦體積的百分比(%)

    2.2 Morris水迷宮測試結(jié)果

    2.2.1 定位航行實驗

    各組大鼠逃避潛伏期均隨時間推移呈下降趨勢(P〈0.001)。組內(nèi)比較顯示,假手術(shù)組第13天逃避潛伏期明顯小于第12天(P〈0.01);模型組第13天逃避潛伏期與第12天無顯著性差異(P〉0.05),但顯著小于第10天(P〈0.001)。電針組第13天潛伏期明顯小于第12天(P〈0.01);非穴組第13天潛伏期與第12天相比無顯著性差異(P〉0.05),但與第10天、第11天比較明顯縮短(P〈0.001)。組間比較顯示,電針組較模型和非穴組逃避潛伏期顯著下降(P〈0.001),模型組與非穴組間無顯著性差異(P〉0.05)。見表2。

    2.2.2 空間探索實驗

    模型組穿越平臺次數(shù)明顯少于假手術(shù)組(P〈0.01),電針組穿越平臺次數(shù)多于模型組和非穴組(P〈0.05)。模型組與非穴組間無顯著性差異(P〉0.05)。見表3。

    2.3 缺血側(cè)海馬區(qū)5-HT1A受體表達(dá)

    免疫組化染色顯示,5-HT1A受體在缺血側(cè)海馬CA1、CA3和齒狀回(dentate gyrus,DG)區(qū)均表達(dá)。見圖3。與假手術(shù)組相比,模型組大鼠5-HT1A受體表達(dá)均明顯升高(P〈0.01);與模型組和非穴組相比較,電針組大鼠5-HT1A受體表達(dá)降低(P〈0.05)。見圖3、表4。

    表2 各組大鼠逃避潛伏期比較(s)

    圖3 各組大鼠缺血側(cè)海馬區(qū)5-HT1A受體表達(dá)(免疫組化染色,100×)

    表3 各組大鼠穿越平臺次數(shù)比較

    表4 各組大鼠缺血側(cè)海馬5-HT1A受體表達(dá)比較(OD)

    3 討論

    腦卒中后認(rèn)知功能障礙主要表現(xiàn)為記憶、思維、判斷和執(zhí)行能力的受損,其病位在腦,病機(jī)為腦脈痹阻,腦髓失養(yǎng),與中醫(yī)的“癡證”、“呆病”等相符,屬神志病范疇?!峨y經(jīng)?二十八難》中提到:“督脈者……上至風(fēng)府,入屬于腦”,同時督脈“上額交巔,入絡(luò)腦”,明確了督脈在經(jīng)絡(luò)聯(lián)系上歸屬于腦,督脈乃腦之網(wǎng)絡(luò)。而《脈經(jīng)?平奇經(jīng)八脈病》說督脈病會導(dǎo)致“大人癲疾,小兒風(fēng)癇疾”,可見督脈在病理表現(xiàn)上與腦和認(rèn)知關(guān)系密切。督脈為“陽脈之?!?,總督一身之陽氣,《素問?生氣通天論》中指出:“陽氣者,精則養(yǎng)神,柔則養(yǎng)筋”,而神為認(rèn)知,筋代表形,可見督脈可起到形神共調(diào)的功效。百會和神庭穴皆為督脈上的要穴,兩穴共用可明顯改善腦卒中后認(rèn)知功能障礙[16]。這一結(jié)論在課題組的前期臨床和基礎(chǔ)研究中也得到證實[17-18]。

    學(xué)習(xí)和空間記憶能力是腦的高級認(rèn)知功能,也是人類生存所必需的適應(yīng)性行為,與海馬密切相關(guān)[19]。海馬作為邊緣系統(tǒng)重要組成部分,參與情緒、學(xué)習(xí)和記憶的調(diào)節(jié)[20-21]。近年來研究表明,5-HT1A受體與學(xué)習(xí)記憶有著密切的關(guān)系[22-23]。5-HT1A受體有兩種類型,突觸前膜受體和突觸后膜受體,這兩種受體的分布位置和功能調(diào)控特點不同。突觸前膜受體位于中縫核群的5-HT能神經(jīng)元的胞體和樹突上,多為自身受體,調(diào)節(jié)5-HT能神經(jīng)元的活性;而突觸后膜受體在前腦區(qū)域的神經(jīng)元軸突上廣泛分布,參與數(shù)種神經(jīng)遞質(zhì)功能的調(diào)控,海馬神經(jīng)元5-HT1A受體即為突觸后膜受體。長時程增強(qiáng)(long-term potentiation,LTP)是突觸可塑性的重要表現(xiàn)形式,被廣泛認(rèn)為是學(xué)習(xí)記憶的細(xì)胞機(jī)制[24]。5-HT1A受體信號通路可通過對LTP形成機(jī)制中兩類關(guān)鍵受體N-甲基-D天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid,NMDA)受體和 α-氨基-3-羥基-5-甲基-4-異惡唑丙酸(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionic acid,AMPA)受體以及PKA信號級聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行調(diào)控,進(jìn)而影響學(xué)習(xí)與記憶[22]。

    5-HT1A受體在各種精神和神經(jīng)退行性病變的病理生理過程中起著重要的作用[25]。本研究中,在干預(yù)前通過磁共振T2WI掃描觀察到大鼠左側(cè)海馬、皮質(zhì)、紋狀體及丘腦的病變,而5-HT1A受體在對缺血性腦卒中或腦外傷引起的神經(jīng)元損傷高度敏感的海馬區(qū)(CA1、CA3和DG)突觸后表達(dá)[26],其激活會導(dǎo)致學(xué)習(xí)功能的損害[27]。腦缺血后海馬5-HT1A受體激活,表達(dá)升高。Lee等[28]使用短暫性全腦缺血沙鼠模型的研究表明,與假手術(shù)組相比,腦缺血組沙鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞層5-HT1A受體免疫反應(yīng)及蛋白表達(dá)水平在缺血損傷10 d后明顯升高。林玲等[29]研究創(chuàng)傷后應(yīng)激對大鼠海馬CA1區(qū)5-HT1A受體的影響,研究結(jié)果顯示,與對照組比較,模型組大鼠海馬CA1區(qū)5-HT1A受體的表達(dá)顯著增加。本研究顯示,與假手術(shù)組相比,模型組大鼠海馬5-HT1A受體表達(dá)明顯升高,提示腦缺血再灌注能夠引起海馬5-HT1A受體的激活;電針百會、神庭穴后,電針組較模型組和非穴組大鼠海馬5-HT1A受體表達(dá)降低,提示電針百會、神庭穴能夠抑制海馬5-HT1A受體的激活。

    綜上所述,電針百會、神庭穴能夠抑制MCAO/R大鼠左側(cè)海馬區(qū)5-HT1A受體表達(dá),結(jié)合水迷宮測試中觀察到的電針百會、神庭穴后MCAO/R大鼠學(xué)習(xí)記憶能力改善的結(jié)果,我們認(rèn)為電針百會、神庭穴可能通過調(diào)節(jié)5-HT1A受體從而改善MCAO/R大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。

    [1]中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)病學(xué)分會神經(jīng)康復(fù)學(xué)組,中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)病學(xué)分會腦血管病學(xué)組,衛(wèi)生部腦卒中篩查與防治工程委員會辦公室.張通執(zhí)筆.中國腦卒中康復(fù)治療指南(2011完全版)[J].中國康復(fù)理論與實踐,2012,18(4):301-318.

    [2]Sun H,Zou X,Liu L.Epidemiological factors of stroke:a sur-vey of the current Status in China[J].J Stroke,2013,15(2):109-114.

    [3]Park JH,Kim BJ,Bae HJ,et al.Impact of post-stroke cognitive impairment with no dementia on health-related quality of life[J].J Stroke,2013,15(1):49-56.

    [4]Savva GM,Stephan BC.Epidemiological studies of the effect of stroke on incident dementia:a systematic review[J].Stroke,2010,41(1):e41-e46.

    [5]Li W,Huang R,Shetty RA,et al.Transient focal cerebral ischemia induces long-term cognitive function deficit in an experimental ischemic stroke model[J].Neurobiol Dis,2013,59:18-25.

    [6]Dacosta-Aguayo R,Grana M,Fernandez-Andujar M,et al.Structural integrity of the contralesional hemisphere predicts cognitive impairment in ischemic stroke at three months[J].PLoS One,2014,9(1):e86119.

    [7]Yang S,Ye H,Huang J,et al.The synergistic effect of acupuncture and computer-based cognitive training on poststroke cognitive dysfunction:a study protocol for a randomized controlled trial of 2×2 factorial design[J].BMC Complement Altern Med,2014,14:290.

    [8]馮曉東,劉嬌,陳立典.電針對局灶性腦缺血大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響及其機(jī)制[J].中國康復(fù)理論與實踐,2013,19(3):227-230.

    [9]Berumen LC,Rodríguez A,Miledi R,et al.Serotonin receptors in hippocampus[J].Scientific World Journal,2012,2012:823493.

    [10]Glikmann-Johnston Y,Saling MM,Chen J,et al.Hippocampal 5-HT1Areceptor binding is related to object-location memory in humans[J].Brain Struct Funct,2015,220(1):559-570.

    [11]Ogren SO,Eriksson TM,Elvander-Tottie E,et al.The role of 5-HT(1A)receptors in learning and memory[J].Behav Brain Res,2008,195(1):54-77.

    [12]段曉晶.針刺對腦卒中后抑郁大鼠單胺類遞質(zhì)及受體影響的實驗研究[D].鄭州:河南中醫(yī)學(xué)院,2013.

    [13]Longa EZ,Weinstein PR,Carlson S,et al.Reversible middle cerebral artery occlusion and reperfusion without craniectomy in rats[J].Stroke,1989,20(1):84-91.

    [14]李忠仁.實驗針灸學(xué)[M].北京:中國中醫(yī)藥出版社,2007:327-329.

    [15]Zhang YF,Yu JC,Zhang XZ,et al.Effect of acupuncture intervention on hippocampal neuron loss and astrocytosis in SAMP 8 mice[J].Zhen Ci Yan Jiu,2013,38(5):358-364.

    [16]Feng XD,Yang SL,Liu J,et al.Electroacupuncture ameliorates cognitive impairment through inhibition of NF-κB-mediated neuronal cell apoptosis in cerebral ischemia reperfusion injured rats[J].Mol Med Rep,2013,7(5):1516-1522.

    [17]Liu F,Li ZM,Jiang YJ,et al.A meta-analysis of acupuncture use in the treatment of cognitive impairment after stroke[J].J Altern Complement Med,2014,20(7):535-544.

    [18]吳羽楠,張?zhí)N,林如輝,等.電針對腦缺血再灌注大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及RhoA蛋白表達(dá)的影響[J].中國康復(fù)理論與實踐,2015,21(1):17-21.

    [19]Bannerman DM,Sprengel R,Sanderson DJ,et al.Hippocampal synaptic plasticity,spatial memory and anxiety[J].Nat Rev Neurosci,2014,15(3):181-192.

    [20]Witte AV,Kerti L,Margulies DS,et al.Effects of resveratrol on memory performance,hippocampal functional connectivity,and glucose metabolism in healthy older adults[J].J Neurosci,2014,34(23):7862-7870.

    [21]Horner AJ,Doeller CF.Plasticity of hippocampal memories in humans[J].Curr Opin Neurobiol,2017,43:102-109.

    [22]郭瑞,那杰,白旭,等.5-HT1A受體參與學(xué)習(xí)記憶的分子機(jī)制研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2014,14(12):2390-2393.

    [23]Glikmann-Johnston Y,Saling MM,Reutens DC,et al.Hippocampal 5-HT1Areceptor and spatial learning and memory[J].Front Pharmacol,2015,6:289.

    [24]Park J,Chávez AE,Mineur YS,et al.CaMKII phosphorylation of TARPγ-8 is a mediator of LTP and learning and memory[J].Neuron,2016,92(1):75-83.

    [25]Le Franois B,Soo J,Millar AM,et al.Chronic stress antidepressant treatment alter mild 5-HT1Aand receptor expression by DNA methylation of a modifying conserved Sp4 site[J].Neurobiol Dis,2015,82:332-341.

    [26]Berends AC,Luiten PG,Nyakas C.A review of the neuroprotective properties of the 5-HT1Areceptor agonist repinotan HCl(BAYx3702)in ischemic stroke[J].CNS Drug Rev,2005,11(4):379-402.

    [27]Buhot M,Martin S,Segu L.Role of serotonin in memory impairment[J].Ann Med,2000,32(3):210-221.

    [28]Lee CH,Ahn JH,Won MH.New expression of 5-HT1Areceptor in astrocytes in the gerbil hippocampal CA1 region following transient global cerebral ischemia[J].Neurol Sci,2015,36(3):383-389.

    [29]林玲,劉國良,孫縵利.海馬CA1區(qū)5-HT1A受體調(diào)控PTSD大鼠空間記憶的作用[J].中國病理生理雜志,2017,33(1):98-103.

    Effects of Electroacupuncture at Baihui and Shenting Acupoints on Learning and Memory Ability and Expression of 5-hydroxytryptamine 1AReceptor in Rats with Cerebral Ischemia-Reperfusion

    JIN Hao1,LIU Wei-lin1,LIN Bing-bing1,LI Long1,PENG Hong-wei1,ZHANG Xiu-feng1,SONG Chang-ming1,HUANG Jia1,TAO Jing1,2,3,CHEN Li-dian1,2,3,4
    1.College of Rehabilitation Medicine,Fujian University of Traditional Chinese Medicine,Fuzhou,Fujian 350122,China;2.Fujian Collaborative Innovation Center for Rehabilitation Technology,Fuzhou,Fujian 350122,China;3.National&Local Joint Engineering Research Center of Rehabilitation Medical Technology,Fuzhou,Fujian 350122,China;4.Rehabilitation Research Center of Traditional Chinese Medicine,StateAdministration of Traditional Chinese Medicine,Fuzhou,Fujian 350122,China

    Objective To explore the effect of electroacupuncture at Baihui(DU20)and Shenting(DU24)acupoints on learning and memory ability in rats with middle cerebral artery occlusion and reperfusion(MCAO/R),and the potential mechanisms.Methods A total of 90 healthy male Sprague-Dawley rats were randomly divided into sham group(n=18)and operation group(n=72).The MCAO/R model was established by suture method in the operation group.Finally,54 qualified rats of the operation group were randomly divided into ischemia group(n=18),electroacupuncture group(n=18)and non-acupoint group(n=18).The electroacupuncture group

    electroacupuncture at Baihui(DU20)and Shenting(DU24)for 14 days.The cerebral infarction volume was measured by magnetic resonance imaging(MRI).The learning and memory ability was tested by Morris water maze.The protein expression of 5-hydroxytryptamine 1A(5-HT1A)receptor was detected by immunohistochemistry.Results There was no significant difference in the cerebral infarction volume among three groups before intervention(F=1.678,P〉0.05).Compared with the ischemia group and the non-acupoint group,the cerebral infarction volume significantly reduced(P〈0.001);the latency significantly shortened(P〈0.001)and the times crossing the platform decreased(P〈0.05);the expression of 5-HT1Areceptor decreased in the left hippocampus(P〈0.05)in the electroacupuncture group after intervention.There was no significant difference in all the indices between the non-acupoint group and the ischemia group after intervention(P〉0.05).Conclusion Electroacu-puncture at Baihui(DU20)and Shenting(DU24)could effectively increase the learning and memory ability of MCAO/R rats,which might relate with inhibiting the expression of 5-HT1Areceptor in hippocampus.

    cerebral ischemia-reperfusion;electroacupuncture;learning and memory;5-hydroxytryptamine 1Areceptor;rats

    CHEN Li-dian.E-mail:cld@fjtcm.edu.cn

    R743.3

    A

    1006-9771(2017)10-1145-07

    10.3969/j.issn.1006-9771.2017.10.005

    國家自然科學(xué)基金項目(No.81403450)。

    1.福建中醫(yī)藥大學(xué)康復(fù)醫(yī)學(xué)院,福建福州市350122;2.福建省康復(fù)技術(shù)協(xié)同創(chuàng)新中心,福建福州市350122;3.康復(fù)醫(yī)療技術(shù)國家地方聯(lián)合工程研究中心,福建福州市350122;4.國家中醫(yī)藥管理局中醫(yī)康復(fù)研究中心,福建福州市350122。作者簡介:金昊(1989-),男,漢族,安徽阜陽市人,碩士研究生,主要研究方向:神經(jīng)康復(fù)與認(rèn)知科學(xué)研究。通訊作者:陳立典(1963-),男,漢族,福建政和縣人,博士,教授,主要研究方向:神經(jīng)康復(fù)與認(rèn)知科學(xué)研究。E-mail:cld@fjtcm.edu.cn。

    [本文著錄格式] 金昊,柳維林,林冰冰,等.電針百會、神庭穴對腦缺血再灌注大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及海馬5-羥色胺1A受體表達(dá)的影響[J].中國康復(fù)理論與實踐,2017,23(10):1145-1151.

    CITED AS:Jin H,Liu WL,Lin BB,et al.Effects of electroacupuncture at Baihui and Shenting acupoints on learning and memory ability and expression of 5-hydroxytryptamine 1A receptor in rats with cerebral ischemia-reperfusion[J].Zhongguo Kangfu Lilun Yu Shijian,2017,23(10):1145-1151.

    2017-04-17

    2017-06-02)

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