• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    衰老過程中有氧運動干預(yù)對海馬突觸可塑性及PDE-4基因表達(dá)的影響

    2017-10-22 11:46:06張樹玲李雪袁瓊嘉王璐
    中國運動醫(yī)學(xué)雜志 2017年10期
    關(guān)鍵詞:可塑性有氧海馬

    張樹玲 李雪 袁瓊嘉 王璐

    1成都體育學(xué)院運動醫(yī)學(xué)與健康學(xué)院運動醫(yī)學(xué)與健康研究所(四川成都 610041)

    2成都體育學(xué)院運動醫(yī)學(xué)與健康學(xué)院運動人體科學(xué)系(四川成都 610041)

    1 引言

    腦是機體最高調(diào)節(jié)中樞,神經(jīng)系統(tǒng)由神經(jīng)元借突觸連接,并依賴突觸來實現(xiàn)腦的調(diào)節(jié)功能。突觸結(jié)構(gòu)和功能的完整性是神經(jīng)元獲取、傳遞、加工分析、貯存信息的重要前提和保證。衰老可導(dǎo)致腦萎縮,表現(xiàn)為神經(jīng)元及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量減少,形態(tài)、結(jié)構(gòu)、組成、功能均發(fā)生改變;機體表現(xiàn)出學(xué)習(xí)記憶、分析、反應(yīng)、判斷、推理等能力減退[1]。有研究指出,雖然衰老大腦某些部位神經(jīng)元已有不同程度的損傷,其功能卻維持在一定的水平,提示可能存在一定程度的腦功能代償,神經(jīng)系統(tǒng)具有一定程度的可塑性,即神經(jīng)元間有建立突觸聯(lián)系的能力。在這一過程中,突觸對內(nèi)外刺激極為敏感,其可塑性能力的改變對神經(jīng)系統(tǒng)的功能影響重大。突觸素(synaptophysin,Syp)是位于突觸囊泡膜上的特異性蛋白質(zhì),是突觸前終末的特異性標(biāo)記物,可用于檢測突觸的數(shù)量及密度,是突觸結(jié)構(gòu)可塑性的重要標(biāo)志之一[2]。代謝型谷氨酸受體(metabotropic gluta?mate receptor,mGluRs)與G蛋白偶聯(lián),參與胞內(nèi)多種信使系統(tǒng)介導(dǎo)的慢突觸傳遞[3]。其中,代謝型谷氨酸受體1(metabotropi glutamate receptor 1,mGluR1)可作為突觸可塑性的代表性指標(biāo)之一[4]。磷酸二酯酶-4(Phos-phodiesterase 4,PDE-4)是細(xì)胞內(nèi)第二信使環(huán)腺苷酸(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)特異性水解酶,可通過對cAMP信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)控,改善認(rèn)知記憶,維持和促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的生存,阻斷藥物依賴的形成及抗抑郁等作用,進(jìn)而改善腦功能障礙[5]。有關(guān)運動影響腦功能機制的研究主要包括神經(jīng)發(fā)生、突觸可塑性、樹突棘密度和血管新生等[6]。運動對海馬的積極作用可能是通過調(diào)節(jié)海馬突觸可塑性實現(xiàn)的,主要表現(xiàn)為提高海馬DG區(qū)神經(jīng)發(fā)生,增加樹突棘密度,促進(jìn)血管新生,特別是有助于長時程增強(long-term potentia?tion,LTP)等[7]。但是,關(guān)于有氧運動對衰老過程中大鼠海馬Syp和mGluR1表達(dá)以及PDE-4基因的影響仍不清楚。本研究通過成功建立D-半乳糖衰老動物模型,并在建模過程中對大鼠進(jìn)行中等負(fù)荷有氧運動干預(yù),觀察大鼠衰老過程中進(jìn)行有氧運動干預(yù)對海馬突觸可塑性及PDE-4基因表達(dá)影響,分析指標(biāo)變化之間的相互關(guān)系及可能作用機制。

    2 材料與方法

    2.1 動物建模及取材

    成年3月齡雄性SPF級SD大鼠45只,體重400±20 g,購于成都達(dá)碩生物有限公司[生產(chǎn)許可證號:CSXK(川)2008-24]。大鼠分籠飼養(yǎng),自由飲食。室溫24±2℃,相對濕度45%~60%,國家標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類動物飼料喂養(yǎng)。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機分為3組:對照組(C組,n=15)、D-半乳糖致衰老模型組(A組,n=15)、D-半乳糖致衰老+有氧運動干預(yù)組(AE組,n=15)。A組、AE組采用“腹腔注射D-半乳糖法”建立亞急性衰老動物模型,根據(jù)大鼠體重注射量為100 mg/kg/d[8(]D-半乳糖用生理鹽水稀釋成5%濃度,即濃度為2 ml/kg/d的D-半乳糖生理鹽水溶液),C組大鼠則根據(jù)體重每天注射一次相同劑量的生理鹽水,均連續(xù)注射6周。有氧運動干預(yù)方式采用中等負(fù)荷游泳運動[9],在自制透明的玻璃缸(160 cm×60 cm×110 cm)內(nèi)進(jìn)行,水深80 cm,水溫34±2℃[8,9]。在建模過程中,AE組大鼠進(jìn)行游泳運動(不負(fù)重),60 min/天,6天/周,為期6周,其余兩組不進(jìn)行游泳運動。實驗結(jié)束后,大鼠斷頭取腦,用冰冷生理鹽水漂洗,除去血液,冰上切割,剝離海馬,分裝入凍存管中,迅速投入液氮中保存?zhèn)溆谩?/p>

    2.2 指標(biāo)檢測

    2.2.1 大鼠海馬神經(jīng)元尼氏染色

    制備石蠟切片,依次進(jìn)行二甲苯溶液Ⅰ脫水7 min,二甲苯溶液Ⅱ脫水7 min,梯度酒精溶液脫水2 min。之后于37℃恒溫箱中2%硫瑾溶液染色8 min,流水沖洗5 min,90%酒精溶液脫色數(shù)秒(光學(xué)顯微鏡觀察脫色情況以便控制時間,一般情況下酒精溶液濃度越低脫色越快),95%酒精溶液脫水1 min,再依次進(jìn)行二甲苯溶液Ⅲ透明5 min,二甲苯溶液Ⅳ透明5 min,之后中性樹膠封片,于顯微鏡下觀察拍照。

    2.2.2 大鼠海馬Syp、mGluR 1免疫熒光檢測

    冰凍的海馬組織切割成矢狀切片(厚度約4 μm),室溫至霜除(約5 min),于4℃下4%多聚甲醛固定10 min,室溫PBS洗1 h,在37℃下孵育一抗2 h,4℃過夜,第2天在避光條件下,室溫PBS洗1 h,在37℃下孵育二抗1 h,室溫PBS洗1 h,DAPI溶液染核,室溫PBS洗40 min,雙蒸水洗10 min,90%甘油封片。利用激光共聚焦掃描顯微鏡采集圖像,Image pro-plus軟件進(jìn)行圖像處理分析,計算積分光密度(integral optical densi?ty,IOD值)。

    2.2.3 大鼠海馬PDE- 4基因Real Time-PCR 檢測

    采用Trizol法提取海馬組織總RNA:取適量海馬組織,樣品按50~100 mg組織加入1 ml冰Trizol;利用分光光度計(Thermo Scientific NanoRop 2000)測定RNA含量,并估算其純度及濃度;用2%瓊脂糖凝膠分析總RNA的完整性;采用BIO-RAD iScriptTMcDNA Synthe?sis Kit試劑盒將RNA反轉(zhuǎn)錄成活性穩(wěn)定的cDNA;采用SsoAdvancedTMSYBR?Green Supermix試劑盒進(jìn)行Re?al-Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)。由TaKaRa寶生物工程有限公司設(shè)計并合成引物序列:β-actin上游序列為5’-CgT AAA gAC CTC TAT gCC AAC A-3’,下游序列為5’-Tag gAg CCA ggg CAg TAA TC-3’,產(chǎn)物長度為99bp;PDE-4上游序列為5’-Agg AgA AAT CAg CgT Tgg AgA-3’,下游序列為5’-TTg Tag ATg gTg Agg gTA gAg gA-3’,產(chǎn)物長度為171 bp。反應(yīng)結(jié)束后,先觀察PDE-4和β-actin標(biāo)準(zhǔn)曲線的擴(kuò)增效率是否接近100%,溶解曲線是否為單一峰以確定PCR的特異性。之后采用2-△△CT(Livak)的方法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,比較各組間 PDE-4基因表達(dá)水平的差異性數(shù)據(jù),由Bio-Rad CFX Manager system自動分析,生成數(shù)據(jù)及圖像。

    2.2.4 大鼠海馬PDE- 4蛋白Western Blotting ting檢測

    取適量海馬組織稱重,按1 mg組織/20 μl裂解液比例加入RIPA裂解液(含PMSF)進(jìn)行蛋白提取,嚴(yán)格按BCA蛋白濃度測試試劑盒說明書進(jìn)行總蛋白濃度的測定;將上樣緩沖液(2×loading Buffer)與蛋白質(zhì)按1︰1的比例均勻混合,約在100℃水浴鍋加熱變性10 min,冷卻分裝,-20℃保存待用;進(jìn)行SDS-PAGE凝膠電泳,將蛋白及marker轉(zhuǎn)移至 PVDF膜,用5%脫脂奶粉室溫下將PVDF膜封閉1 h,用同樣濃度的脫脂奶粉溶液稀釋一抗(ab9018,濃度1︰1000),4℃封閉過夜;第2天,室溫TBST液洗8×5 min,用同樣濃度的脫脂奶粉溶液稀釋二抗(山羊抗小鼠lgG/辣根酶標(biāo)志,濃度1︰2000),37℃封閉孵育2 h;之后室溫TBST液洗8×5 min,進(jìn)行AB顯色;暗室內(nèi)顯影;將所得PDE-4和β-ac?tin膠片進(jìn)行掃描,獲得圖片,再應(yīng)用Quantity One分析軟件上的條帶軌跡,用定量分析方法(TraceTracking)對圖片條帶進(jìn)行灰度值分析,將各組PDE-4與其β-ac?tin值相比,以比值作為目的蛋白表達(dá)量。

    2.3 統(tǒng)計學(xué)方法

    利用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,以±s表示結(jié)果。采用單因素方差分析(One-way ANOVA)進(jìn)行組間比較,P<0.05表示差異性顯著,P<0.01表示差異性非常顯著;運用Spearman等級相關(guān)及Pearson積差相關(guān)判斷各指標(biāo)間的相關(guān)性。

    3 結(jié)果

    3.1 大鼠一般狀態(tài)觀察結(jié)果

    C組大鼠精神良好、動作敏捷、食欲良好、體毛光澤、體形健碩等;A組大鼠精神不振、嗜睡、動作遲緩、無食欲、體毛枯黃卷曲、體形瘦弱等,呈現(xiàn)衰老體征;AE組大鼠精神狀態(tài)、食欲情況、體毛顏色、體形等情況均與C組大鼠相似,未出現(xiàn)衰老體征。

    3.2 大鼠海馬神經(jīng)元尼氏染色結(jié)果

    各組大鼠海馬神經(jīng)元尼氏染色在40倍光鏡下結(jié)果:C組大鼠海馬神經(jīng)元數(shù)量正常,排列整齊有序,細(xì)胞間距均勻,胞質(zhì)中尼氏體著色勻稱;A組大鼠海馬神經(jīng)元數(shù)量明顯減少,排列紊亂,細(xì)胞間距增大,胞質(zhì)中尼氏體著色變淺;AE組大鼠海馬神經(jīng)元數(shù)量、排列情況、細(xì)胞間距、胞質(zhì)中尼氏體著色等情況與C組相似。見圖1。

    圖1 各組大鼠海馬DG區(qū)神經(jīng)元尼氏染色

    3.3 大鼠海馬Syp、mGluRm1免疫熒光檢測結(jié)果

    3.3.1 大鼠海馬Syp免疫熒光檢測結(jié)果

    大鼠海馬Syp免疫熒光染色結(jié)果見圖2。與C組比,A組大鼠海馬Syp免疫熒光染色I(xiàn)OD值非常顯著性降低(P<0.01);與A組比,AE組大鼠海馬Syp免疫熒光染色I(xiàn)OD值非常顯著性升高(P<0.01)。見表1。

    圖2 各組大鼠海馬DG區(qū)Syp免疫熒光染色結(jié)果

    表1 各組大鼠海馬Syp免疫熒光染色I(xiàn)OD值比較(±s)

    表1 各組大鼠海馬Syp免疫熒光染色I(xiàn)OD值比較(±s)

    注:與C組比:▲▲P<0.01;與A組比:★★P<0.01

    C組596.59±27.32 AE組589.18 ± 36.68★★A組422.34 ± 32.17▲▲

    3.3.2 大鼠海馬mGluR 1免疫熒光檢測結(jié)果

    大鼠海馬mGluR1免疫熒光染色結(jié)果見圖3。與C組比,A組大鼠海馬mGluR1免疫熒光染色I(xiàn)OD值非常顯著性降低(P<0.01);與 A 組比,AE組大鼠海馬mGluR1免疫熒光染色I(xiàn)OD值非常顯著性升高(P<0.01)。見表2。

    圖3 各組大鼠海馬DG區(qū)mGluR1免疫熒光染色結(jié)果

    表2 大鼠海馬mGluR1免疫熒光染色I(xiàn)OD值(±s)

    表2 大鼠海馬mGluR1免疫熒光染色I(xiàn)OD值(±s)

    注:與C組比:▲▲P<0.01;與A組比:★★P<0.01

    C組235.21±27.56 A組169.34 ± 22.34▲▲AE組226.56 ± 25.13★★

    3.4 大鼠海馬PDE- 4 mRNA Real-Time PCR 檢測結(jié)果

    與C組比,A組大鼠海馬PDE-4 mRNA表達(dá)非常顯著性升高(P<0.01);與A組比,AE組大鼠海馬PDE-4 mRNA表達(dá)非常顯著性降低(P<0.01)。見表3。

    表3 各組大鼠海馬PDE-4 mRNA表達(dá)量(±s)

    表3 各組大鼠海馬PDE-4 mRNA表達(dá)量(±s)

    注:與C組比:▲▲P<0.01;與A組比:★★P<0.01。

    C組1.07±0.059 AE組0.88 ± 0.060★★A組1.20 ± 0.041▲▲

    3.5 大鼠海馬PDE- 4蛋白Western Blotting ting檢測結(jié)果

    與C組比,A組大鼠海馬PDE-4蛋白表達(dá)非常顯著性升高(P<0.01);與A組比,AE組大鼠海馬PDE-4蛋白表達(dá)非常顯著性降低(P<0.01)。見表4、圖4。

    表4 大鼠海馬PDE-4蛋白表達(dá)量(±s)

    表4 大鼠海馬PDE-4蛋白表達(dá)量(±s)

    注:與C組比:▲▲P<0.01;與A組比:★★P<0.01。

    C組0.31±0.01 AE組0.02 ± 0.01★★A組0.33 ± 0.01▲▲

    圖4 大鼠海馬免疫印跡條帶

    3.6 PDE- 4與突觸可塑性之間相關(guān)性分析

    PDE-4 mRNA表達(dá)與Syp的IOD值呈非常顯著性負(fù)相關(guān)(P<0.01),與mGluR1的IOD值呈顯著性負(fù)相關(guān)(P<0.05);PDE-4蛋白表達(dá)與Syp的IOD值和mGluR1的IOD值均呈顯著性負(fù)相關(guān)(P<0.05)。見表5。

    表5 大鼠海馬PDE-4表達(dá)水平與突觸可塑性檢測結(jié)果之間的相關(guān)系數(shù)矩陣

    4 討論

    在相關(guān)衰老研究中,衰老動物模型的正確選擇和成功建立尤其關(guān)鍵[10]。衰老動物模型包括轉(zhuǎn)基因動物模型、自發(fā)性動物模型和誘發(fā)性動物模型3種[11、12]。D-半乳糖衰老動物模型已成為國內(nèi)較公認(rèn)的誘發(fā)性衰老動物模型,與其他衰老模型相比,該模型造模周期短,操作簡單,創(chuàng)傷性比較小,易于建成,且重復(fù)性好,表現(xiàn)出與自然衰老動物相似的體征等[8、13],已被廣泛地應(yīng)用于白內(nèi)障、腦老化、延緩腦衰老等方面研究[11]。早期學(xué)者發(fā)現(xiàn),衰老時海馬神經(jīng)元出現(xiàn)丟失現(xiàn)象,神經(jīng)元細(xì)胞間距變得疏松[14]。本研究通過6周衰老造模,觀察一般狀態(tài)發(fā)現(xiàn),A組與C組相比,大鼠表現(xiàn)出精神不振、嗜睡、動作遲緩、無食欲、體毛枯黃卷曲、體形瘦弱等明顯的衰老體征;在40倍光鏡下觀察尼氏染色結(jié)果發(fā)現(xiàn),與C組比,A組大鼠海馬神經(jīng)元呈現(xiàn)數(shù)量明顯減少,排列紊亂,細(xì)胞間距增大,胞質(zhì)內(nèi)尼氏體減少及著色變淺等形態(tài)結(jié)構(gòu)退化特征。本研究結(jié)果可以證明D-半乳糖腦衰老造模成功。有研究表明8周中等負(fù)荷跑臺運動能夠有效降低海馬神經(jīng)元的凋亡率[15]。劉濤等[16]實驗顯示,衰老模型訓(xùn)練組大鼠通過6周游泳運動后其海馬神經(jīng)元凋亡細(xì)胞數(shù)量較衰老模型組顯著減少(P<0.01)。本研究結(jié)果中AE組大鼠精神狀態(tài)、食欲、體毛顏色、體形等一般狀態(tài)及海馬神經(jīng)元數(shù)量、排列情況、間距、胞質(zhì)中尼氏體著色等海馬神經(jīng)元結(jié)構(gòu)形態(tài)均與C組相似,未表現(xiàn)出衰老體征,與上述文獻(xiàn)一致,提示衰老過程中有氧運動可能保護(hù)和修復(fù)海馬神經(jīng)元的形態(tài)結(jié)構(gòu)。

    突觸在內(nèi)外環(huán)境刺激作用下形態(tài)和傳遞效能可發(fā)生某些適應(yīng)性變化,該過程稱為突觸可塑性(synapse plasticity,Sy)[17],具體表現(xiàn)為突觸結(jié)構(gòu)和功能可塑性。突觸功能可塑性按性質(zhì)不同分為長時程增強(long term potentiation,LTP)和長時程抑制(long term de?pression,LTD),可使突觸連接增強或減弱,貯存大量信息,是學(xué)習(xí)記憶的神經(jīng)基礎(chǔ)[18]。Syp是突觸前終末的特異性標(biāo)記物,可用于檢測突觸的數(shù)量和分布情況,是突觸可塑性的重要標(biāo)志之一[2]。Syp對于Ca2+具有高度親和力,促使突觸囊泡與突觸前膜融合,使神經(jīng)遞質(zhì)快速釋放[19],提高突觸傳遞效能。Syp也可激活酪氨酸激酶,促使自身磷酸化,調(diào)節(jié)內(nèi)源性神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸的釋放,提高突觸傳遞效能[20]。而突觸后致密物(postsynap?tic density,PSD)是位于突觸后膜質(zhì)膜下的細(xì)胞骨架網(wǎng),是突觸后信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和整合的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。LTP形成過程伴隨著PSD長度、厚度、面積的增加,推測PSD可能是為突觸傳遞效能增加的物質(zhì)基礎(chǔ)[21]。構(gòu)成PSD的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)蛋白質(zhì)之一的神經(jīng)遞質(zhì)受體[22、23]分為離子型谷氨酸受體(inootropic glutamate receptor,iGluRs)和代謝型谷氨酸受體(metabotropic glutamate receptor,mGluRs)。其中,mGluRs與多種細(xì)胞內(nèi)第二信使相連,調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)生理及病理過程,如突觸可塑性、神經(jīng)元的退化、神經(jīng)毒性等[3]。

    已有研究表明,運動訓(xùn)練能夠增強海馬神經(jīng)元突觸可塑性[24]。孫詠虹等[25]實驗表明,2個月跑籠運動延緩了快速老化小鼠海馬神經(jīng)元的變性速度,提高了海馬突觸素表達(dá),進(jìn)而改善了腦功能。醫(yī)學(xué)領(lǐng)域?qū)τ谀X缺血及中樞相關(guān)性疾病的運動干預(yù)有類似的研究。劉傳玉[26]探討了運動康復(fù)治療對局灶腦梗死大鼠腦可塑性的影響,發(fā)現(xiàn)運動訓(xùn)練可促進(jìn)鼠腦梗死后缺血周邊區(qū)Syp表達(dá)量的增加,促進(jìn)突觸的重塑,提高了再建突觸的傳遞效能。劉建鋒[27]研究以食物為誘導(dǎo)的意向運動療法對局灶性腦缺血大鼠皮質(zhì)缺血區(qū)Syp表達(dá)的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)意向運動療法可促進(jìn)局灶性腦缺血大鼠皮質(zhì)缺血區(qū)Syp的表達(dá)量上調(diào),進(jìn)而修復(fù)缺損神經(jīng),有助于缺損神經(jīng)功能的恢復(fù)。于雪峰等[28]研究發(fā)現(xiàn),運動加針刺康復(fù)療法增加了腦癱病變皮質(zhì)區(qū)的Syp表達(dá)量,修復(fù)損傷神經(jīng),促進(jìn)神經(jīng)功能的康復(fù),有利于恢復(fù)腦癱肢體運動功能。本研究結(jié)果表明,各組大鼠海馬DG區(qū)Syp和mGluR1的IOD值變化趨勢一致:A組非常顯著性低于C組(P<0.01),AE組非常顯著性高于A組(P<0.01)。本研究結(jié)果與上述文獻(xiàn)一致,提示有氧運動可有效防止Syp、mGluR1的丟失,使Syp和mGluR1數(shù)量和密度保持在一定水平上,以維持突觸可塑性能力,進(jìn)而改善腦功能,延緩腦衰老。

    環(huán)腺苷酸(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)和環(huán)鳥苷酸(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)是生物體內(nèi)的第二信使物質(zhì),參與介導(dǎo)激素、神經(jīng)遞質(zhì)、多種細(xì)胞外信號引發(fā)的特定生物學(xué)效應(yīng),其表達(dá)水平對調(diào)節(jié)細(xì)胞的多項生理功能具有重要意義。其中,cAMP參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)短期突觸活動,如神經(jīng)遞質(zhì)合成、儲存、釋放及其受體的敏感性等[29]。PDEs是細(xì)胞內(nèi)cAMP和cGMP唯一的降解酶,對兩者濃度調(diào)節(jié)起關(guān)鍵性作用。PDEs是一個超級酶家族,PDE-4是PDEs中最大的家族。PDE-4在體內(nèi)分布廣泛,主要分布在腦組織中,是cAMP特異性水解酶[30]。PDE-4通過調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)cAMP/PKA途徑和cAMP/細(xì)胞外的信號相關(guān)激酶途徑或延遲cAMP水平升高影響相應(yīng)蛋白的合成進(jìn)而引發(fā)一系列生物學(xué)效應(yīng)[31]。有研究表明,PDE-4抑制劑使cAMP在細(xì)胞內(nèi)堆積,產(chǎn)生各種生物效應(yīng),如抗抑郁、改善認(rèn)知能力和增強記憶等[32]。新型PDE-4抑制劑氯比普蘭可通過增強cAMP/PKA信號通路進(jìn)而改善老年認(rèn)知功能及抗抑郁作用[33]。有實驗表明[34],給予毒蕈堿M受體激動劑東莨菪堿可以引起工作記憶和參照記憶的損害,應(yīng)用PDE-4抑制劑可逆轉(zhuǎn)這兩種記憶的損害,并推測這些作用可能與PDE-4抑制劑可以通過增加海馬cAMP含量,增加海馬神經(jīng)元LTP,增強海馬的突觸可塑性有關(guān)。但衰老過程中有氧運動對大鼠海馬PDE-4基因表達(dá)的影響仍不清楚,缺少文獻(xiàn)資料。本研究結(jié)果表明,各組大鼠海馬PDE-4 mRNA及蛋白表達(dá)變化趨于一致:與C組比,A組非常顯著性升高(P<0.01);與A組比,AE組非常顯著性降低(P<0.01)。上述實驗結(jié)果表明,有氧運動可下調(diào)大鼠海馬中PDE-4基因表達(dá),也可產(chǎn)生與PDE-4抑制劑相同的效應(yīng)。相關(guān)分析結(jié)果顯示,Syp的IOD值與PDE-4 mRNA呈非常顯著性負(fù)相關(guān)(P<0.01),與PDE-4蛋白表達(dá)呈顯著性負(fù)相關(guān)(P<0.05);mGluR1的IOD值與PDE-4mRNA及蛋白表達(dá)呈顯著性負(fù)相關(guān)(P<0.05)。PDE-4的表達(dá)水平可準(zhǔn)確地反映海馬突觸可塑性,推測有氧運動可以通過下調(diào)PDE-4的表達(dá)水平,進(jìn)而提高海馬突觸可塑性,改善神經(jīng)系統(tǒng)能力,最終起到延緩衰老的作用。

    5 結(jié)論

    (1)衰老過程中進(jìn)行有氧運動干預(yù)可以修復(fù)海馬神經(jīng)元的形態(tài)結(jié)構(gòu),使Syp和mGluR1數(shù)量和密度保持在一定水平上,以維持突觸可塑性,進(jìn)而改善腦功能,延緩腦衰老。

    (2)運動可能通過下調(diào)PDE-4基因表達(dá)影響腦功能。

    猜你喜歡
    可塑性有氧海馬
    老人鍛煉,力量、有氧、平衡都需要
    中老年保健(2022年3期)2022-11-21 09:40:36
    有氧運動與老年認(rèn)知障礙
    中老年保健(2022年2期)2022-08-24 03:21:54
    如何從零基礎(chǔ)開始有氧運動
    中老年保健(2022年4期)2022-08-22 03:01:18
    海馬
    甲基苯丙胺改變成癮小鼠突觸可塑性基因的甲基化修飾
    內(nèi)源性NO介導(dǎo)的Stargazin亞硝基化修飾在腦缺血再灌注后突觸可塑性中的作用及機制
    超聲刺激小鼠伏隔核后c-Fos蛋白及結(jié)構(gòu)可塑性改變的實驗
    海馬
    “海馬”自述
    轉(zhuǎn)GDNF基因的BMSCs移植對大鼠腦出血突觸可塑性的影響
    国产精品不卡视频一区二区 | a级毛片免费高清观看在线播放| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 99久国产av精品| 一本一本综合久久| 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲最大成人av| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产91精品成人一区二区三区| 国产极品精品免费视频能看的| 亚洲欧美日韩东京热| 中文字幕av成人在线电影| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 又粗又爽又猛毛片免费看| 99视频精品全部免费 在线| 国内精品久久久久久久电影| 变态另类丝袜制服| 国产真实伦视频高清在线观看 | 一级黄片播放器| 老师上课跳d突然被开到最大视频 久久午夜综合久久蜜桃 | 国产精品不卡视频一区二区 | 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲av二区三区四区| 成熟少妇高潮喷水视频| 亚洲黑人精品在线| 露出奶头的视频| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 亚洲一区二区三区不卡视频| 国产综合懂色| 九色国产91popny在线| 国产成人a区在线观看| 热99re8久久精品国产| 天美传媒精品一区二区| 亚洲黑人精品在线| 亚洲成人久久性| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 久久久久久久精品吃奶| 亚洲国产精品999在线| av福利片在线观看| 91麻豆av在线| 99热6这里只有精品| 1024手机看黄色片| 国产麻豆成人av免费视频| 能在线免费观看的黄片| 69人妻影院| 波多野结衣高清作品| 欧美日本亚洲视频在线播放| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 国产美女午夜福利| x7x7x7水蜜桃| 日本三级黄在线观看| 中文字幕av在线有码专区| 国产午夜精品论理片| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 露出奶头的视频| АⅤ资源中文在线天堂| 日本免费一区二区三区高清不卡| 嫩草影视91久久| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 精品福利观看| www日本黄色视频网| 日韩欧美免费精品| 超碰av人人做人人爽久久| 日本免费a在线| 国产精品,欧美在线| 97碰自拍视频| 日韩欧美 国产精品| 国产乱人伦免费视频| 亚洲无线观看免费| 亚洲第一电影网av| 婷婷精品国产亚洲av| 亚洲国产精品sss在线观看| 免费av毛片视频| 88av欧美| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 日日夜夜操网爽| 一进一出抽搐动态| 18美女黄网站色大片免费观看| 性色av乱码一区二区三区2| 我要看日韩黄色一级片| 国产美女午夜福利| 日本在线视频免费播放| 午夜精品一区二区三区免费看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 男女做爰动态图高潮gif福利片| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 国产精品永久免费网站| av黄色大香蕉| 18+在线观看网站| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产不卡一卡二| 欧美在线一区亚洲| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 免费无遮挡裸体视频| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 日本黄色视频三级网站网址| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| bbb黄色大片| 99在线视频只有这里精品首页| 亚洲成人久久爱视频| 精品欧美国产一区二区三| 国产视频内射| 91九色精品人成在线观看| 亚洲精品在线观看二区| 91麻豆精品激情在线观看国产| 欧美性猛交黑人性爽| 一级a爱片免费观看的视频| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 午夜福利高清视频| 少妇高潮的动态图| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 亚洲人成网站高清观看| 国产欧美日韩精品一区二区| 久久久久亚洲av毛片大全| 国产一区二区激情短视频| 欧美成人性av电影在线观看| 一级作爱视频免费观看| 欧美黄色片欧美黄色片| 婷婷精品国产亚洲av在线| 国产男靠女视频免费网站| 不卡一级毛片| 神马国产精品三级电影在线观看| 此物有八面人人有两片| 亚洲美女黄片视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产精品一区二区免费欧美| 99视频精品全部免费 在线| 村上凉子中文字幕在线| 五月伊人婷婷丁香| 99国产极品粉嫩在线观看| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| a级一级毛片免费在线观看| 国产在线男女| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 国产日本99.免费观看| 欧美色视频一区免费| 免费在线观看成人毛片| 久久久久久久久久成人| 嫩草影视91久久| 国产成年人精品一区二区| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产真实伦视频高清在线观看 | 18禁黄网站禁片午夜丰满| 中国美女看黄片| 性色av乱码一区二区三区2| 99国产综合亚洲精品| 亚洲人与动物交配视频| 黄色日韩在线| 综合色av麻豆| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲不卡免费看| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 日韩av在线大香蕉| 久久久久久久精品吃奶| 久久久久久大精品| 精品久久久久久,| 精品一区二区免费观看| 国产精品久久视频播放| netflix在线观看网站| 久久精品国产自在天天线| 久久久久久久精品吃奶| 欧美丝袜亚洲另类 | 俄罗斯特黄特色一大片| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| a级毛片a级免费在线| 精品免费久久久久久久清纯| 超碰av人人做人人爽久久| 亚洲av一区综合| 久久久久久久精品吃奶| 中文在线观看免费www的网站| 日韩人妻高清精品专区| 黄色视频,在线免费观看| 国产成人aa在线观看| 麻豆av噜噜一区二区三区| 午夜老司机福利剧场| 欧美日韩福利视频一区二区| 麻豆av噜噜一区二区三区| 简卡轻食公司| 久久草成人影院| 欧美中文日本在线观看视频| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 免费观看的影片在线观看| 国产精品电影一区二区三区| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 国产免费一级a男人的天堂| www.色视频.com| 国产黄a三级三级三级人| 午夜福利免费观看在线| or卡值多少钱| 一级毛片久久久久久久久女| 成人性生交大片免费视频hd| 在线看三级毛片| 国产av一区在线观看免费| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 十八禁人妻一区二区| 亚洲在线自拍视频| 麻豆久久精品国产亚洲av| 午夜a级毛片| 最新中文字幕久久久久| 国产成年人精品一区二区| 欧美黑人欧美精品刺激| 欧美黑人巨大hd| 桃红色精品国产亚洲av| 欧美高清性xxxxhd video| 国产久久久一区二区三区| 可以在线观看毛片的网站| 精品人妻视频免费看| 午夜老司机福利剧场| 国产av麻豆久久久久久久| 永久网站在线| 久久国产乱子伦精品免费另类| av天堂在线播放| 人人妻人人澡欧美一区二区| 国产野战对白在线观看| 少妇的逼好多水| 丰满乱子伦码专区| 美女cb高潮喷水在线观看| 亚洲av电影不卡..在线观看| 99热这里只有是精品50| 亚洲成人精品中文字幕电影| 日韩 亚洲 欧美在线| 成年版毛片免费区| 免费高清视频大片| 日韩亚洲欧美综合| 日本三级黄在线观看| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 99视频精品全部免费 在线| 神马国产精品三级电影在线观看| 欧美黑人欧美精品刺激| 岛国在线免费视频观看| 久久久久九九精品影院| 成熟少妇高潮喷水视频| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲最大成人av| 九色国产91popny在线| 成人三级黄色视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产av一区在线观看免费| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 久久国产精品影院| 不卡一级毛片| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 黄色视频,在线免费观看| 可以在线观看的亚洲视频| 国产av一区在线观看免费| 国产毛片a区久久久久| www.色视频.com| 99热这里只有是精品在线观看 | 久久久色成人| 99精品在免费线老司机午夜| 国产极品精品免费视频能看的| 国产欧美日韩一区二区三| 免费看美女性在线毛片视频| 真人一进一出gif抽搐免费| 99久久成人亚洲精品观看| 欧美精品啪啪一区二区三区| 亚洲精品一区av在线观看| 乱人视频在线观看| 麻豆成人午夜福利视频| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 黄色日韩在线| 最好的美女福利视频网| 一个人免费在线观看电影| 国产成人aa在线观看| 欧美高清性xxxxhd video| 天天一区二区日本电影三级| 欧美又色又爽又黄视频| 国产精品爽爽va在线观看网站| 欧美丝袜亚洲另类 | 在线观看av片永久免费下载| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 亚洲国产精品成人综合色| 最后的刺客免费高清国语| 精品久久久久久成人av| 成人永久免费在线观看视频| 男人舔奶头视频| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲五月婷婷丁香| 久久国产精品人妻蜜桃| 免费无遮挡裸体视频| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 免费在线观看亚洲国产| ponron亚洲| 亚洲欧美清纯卡通| 国产精品亚洲美女久久久| 婷婷六月久久综合丁香| 性色avwww在线观看| 免费在线观看日本一区| 欧美激情国产日韩精品一区| 一进一出抽搐gif免费好疼| 免费av毛片视频| 给我免费播放毛片高清在线观看| 中出人妻视频一区二区| 又黄又爽又免费观看的视频| 久久国产乱子伦精品免费另类| 欧美一区二区亚洲| 国产欧美日韩精品一区二区| 哪里可以看免费的av片| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 嫁个100分男人电影在线观看| 精品国内亚洲2022精品成人| 亚洲电影在线观看av| 日韩成人在线观看一区二区三区| 男人舔奶头视频| 美女免费视频网站| 亚洲av第一区精品v没综合| 一边摸一边抽搐一进一小说| 精品人妻熟女av久视频| 真实男女啪啪啪动态图| av在线蜜桃| 国产精品日韩av在线免费观看| 免费在线观看成人毛片| 日韩国内少妇激情av| 一二三四社区在线视频社区8| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 精品久久久久久,| 国内精品久久久久久久电影| 精品人妻偷拍中文字幕| 亚洲国产色片| 国产老妇女一区| a级毛片免费高清观看在线播放| 亚洲欧美精品综合久久99| 欧美激情久久久久久爽电影| 久久久久亚洲av毛片大全| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 熟女人妻精品中文字幕| 午夜日韩欧美国产| 不卡一级毛片| 成人三级黄色视频| 亚洲av一区综合| 老司机福利观看| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 最新中文字幕久久久久| 欧美中文日本在线观看视频| 村上凉子中文字幕在线| 久久草成人影院| 精品久久久久久,| 无人区码免费观看不卡| 国语自产精品视频在线第100页| 欧美在线黄色| 亚洲精品久久国产高清桃花| 欧美极品一区二区三区四区| 国产精品国产高清国产av| 一级a爱片免费观看的视频| 亚洲精华国产精华精| 亚洲天堂国产精品一区在线| 永久网站在线| 嫩草影院新地址| 美女高潮的动态| 亚洲av五月六月丁香网| 深夜精品福利| 免费在线观看日本一区| 久久久久久国产a免费观看| 国产欧美日韩精品一区二区| 午夜福利免费观看在线| 亚洲成av人片在线播放无| 亚洲无线在线观看| 国产在线男女| 长腿黑丝高跟| 亚洲男人的天堂狠狠| 在线天堂最新版资源| 免费电影在线观看免费观看| 两个人视频免费观看高清| 首页视频小说图片口味搜索| 色综合婷婷激情| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 国产三级中文精品| 啪啪无遮挡十八禁网站| 日韩欧美在线乱码| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 五月伊人婷婷丁香| 毛片女人毛片| 国内精品一区二区在线观看| 国产精品av视频在线免费观看| 嫩草影视91久久| 国产亚洲欧美在线一区二区| 91麻豆av在线| 熟女电影av网| 精品午夜福利在线看| 午夜激情欧美在线| 免费av不卡在线播放| 国产伦精品一区二区三区视频9| 嫁个100分男人电影在线观看| 国产亚洲精品av在线| 一进一出好大好爽视频| 99riav亚洲国产免费| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 国产一区二区激情短视频| 国产精品电影一区二区三区| 亚洲综合色惰| 99久久精品国产亚洲精品| 婷婷精品国产亚洲av| 99热只有精品国产| 最近在线观看免费完整版| 欧美高清成人免费视频www| 精品国产三级普通话版| 亚洲人成伊人成综合网2020| 亚洲国产精品合色在线| 九九热线精品视视频播放| 日本三级黄在线观看| 国产精品综合久久久久久久免费| 岛国在线免费视频观看| 欧美国产日韩亚洲一区| 两个人的视频大全免费| 国产高清有码在线观看视频| 天堂网av新在线| 一a级毛片在线观看| 一本久久中文字幕| 麻豆一二三区av精品| 丁香欧美五月| 男人和女人高潮做爰伦理| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国产单亲对白刺激| 国产精品av视频在线免费观看| 中文在线观看免费www的网站| 欧美黑人欧美精品刺激| 人人妻人人看人人澡| 免费观看人在逋| 国产精品国产高清国产av| 18美女黄网站色大片免费观看| 波野结衣二区三区在线| 国产黄色小视频在线观看| a级一级毛片免费在线观看| 美女黄网站色视频| 少妇人妻精品综合一区二区 | 老司机午夜福利在线观看视频| 国产视频一区二区在线看| av天堂在线播放| 桃红色精品国产亚洲av| 99久久99久久久精品蜜桃| 88av欧美| 又爽又黄a免费视频| 国产野战对白在线观看| 亚洲人成电影免费在线| 少妇高潮的动态图| 波多野结衣高清作品| 中文字幕免费在线视频6| 国内精品美女久久久久久| 99久久无色码亚洲精品果冻| av专区在线播放| 亚洲综合色惰| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 欧美+亚洲+日韩+国产| 99精品久久久久人妻精品| 亚洲精品在线观看二区| 亚洲avbb在线观看| 国产高清视频在线观看网站| 中文资源天堂在线| 亚洲国产精品成人综合色| 国产乱人伦免费视频| 两个人视频免费观看高清| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 国产高清视频在线观看网站| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 12—13女人毛片做爰片一| 色精品久久人妻99蜜桃| 欧美激情国产日韩精品一区| 露出奶头的视频| 99热精品在线国产| 国内揄拍国产精品人妻在线| 亚洲人成伊人成综合网2020| 999久久久精品免费观看国产| 岛国在线免费视频观看| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 亚洲自偷自拍三级| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 欧美在线黄色| 亚洲人成电影免费在线| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚洲人成网站在线播| 男女床上黄色一级片免费看| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 性插视频无遮挡在线免费观看| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 亚洲精品久久国产高清桃花| 波野结衣二区三区在线| 乱人视频在线观看| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲熟妇熟女久久| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产真实乱freesex| 永久网站在线| 一本久久中文字幕| .国产精品久久| 欧美在线一区亚洲| 少妇高潮的动态图| 午夜亚洲福利在线播放| 9191精品国产免费久久| 我要搜黄色片| 精品国内亚洲2022精品成人| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 久久精品国产亚洲av天美| 色噜噜av男人的天堂激情| 精品日产1卡2卡| 亚洲精品在线观看二区| 欧美乱妇无乱码| 三级国产精品欧美在线观看| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 欧美乱色亚洲激情| 成人特级av手机在线观看| 日韩大尺度精品在线看网址| 亚洲精品色激情综合| 十八禁国产超污无遮挡网站| 久久久成人免费电影| 亚洲天堂国产精品一区在线| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 窝窝影院91人妻| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 免费在线观看影片大全网站| 亚洲av不卡在线观看| 免费高清视频大片| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 久9热在线精品视频| 五月伊人婷婷丁香| 精品国内亚洲2022精品成人| 亚洲av熟女| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 国产美女午夜福利| 亚洲真实伦在线观看| 少妇人妻精品综合一区二区 | 老司机午夜福利在线观看视频| 午夜福利在线在线| 桃色一区二区三区在线观看| 亚洲美女黄片视频| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 老熟妇仑乱视频hdxx| 午夜激情欧美在线| 久久欧美精品欧美久久欧美| 99热6这里只有精品| 欧美+亚洲+日韩+国产| 夜夜夜夜夜久久久久| 精品久久久久久,| 国产久久久一区二区三区| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 婷婷精品国产亚洲av| 国产中年淑女户外野战色| .国产精品久久| 三级毛片av免费| 日本 av在线| 少妇的逼水好多| 日韩欧美精品免费久久 | 色av中文字幕| 长腿黑丝高跟| 看十八女毛片水多多多| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 丰满的人妻完整版| 国产伦在线观看视频一区| 久久九九热精品免费| 美女免费视频网站| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲精华国产精华精| 欧美又色又爽又黄视频| 九色国产91popny在线| 精品免费久久久久久久清纯| 一区二区三区激情视频| bbb黄色大片| 美女免费视频网站| av黄色大香蕉| 天堂√8在线中文| 免费观看精品视频网站| 久久精品综合一区二区三区| 欧美高清成人免费视频www| 免费大片18禁| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| a级毛片a级免费在线| 久久精品国产亚洲av涩爱 | a在线观看视频网站| 亚洲成人久久性| 51国产日韩欧美| 国产伦精品一区二区三区视频9| 99久久99久久久精品蜜桃| 美女cb高潮喷水在线观看| 精品久久久久久久久亚洲 | 国产精品影院久久| 男女那种视频在线观看| 欧美日韩乱码在线| 日韩免费av在线播放| 亚洲美女搞黄在线观看 | 少妇高潮的动态图| 日韩欧美精品免费久久 | 俺也久久电影网| 我的老师免费观看完整版| 欧美日韩福利视频一区二区| 91字幕亚洲| 99久久精品国产亚洲精品| 91av网一区二区| 久久伊人香网站| 国产高清视频在线观看网站| 麻豆一二三区av精品| 乱人视频在线观看| 白带黄色成豆腐渣| x7x7x7水蜜桃| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 亚洲经典国产精华液单 | 婷婷六月久久综合丁香| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 最近在线观看免费完整版| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 色5月婷婷丁香| 国模一区二区三区四区视频| 日本免费一区二区三区高清不卡| 精品午夜福利视频在线观看一区| 精品一区二区免费观看| 亚洲三级黄色毛片|