重樓同屬植物南重樓的藥理研究

李洪梅 孫建輝 康利平 霍海如 李小芹 黃圓圓 陳敏 黃璐琦

[摘要]重樓為常用中藥材，目前資源緊缺，除法定品種云南重樓和七葉一枝花外，同屬多種近緣植物均被收購作為重樓入藥。該研究比較了重樓同屬植物南重樓和藥典收載的云南重樓、七葉一枝花在抗炎、止血、改善血流變方面的藥理活性，以其擴大重樓藥用資源范圍，保護重樓野生資源，滿足市場需求。研究表明云南重樓、七葉一枝花、南重樓具有抗炎、止血和改善血流變作用，可明顯抑制角叉菜膠致足腫脹，縮短小鼠出血時間和凝血時間，明顯降低大鼠急性血瘀模型各切變率下的全血黏度；云南重樓、南重樓可明顯抑制小鼠腹腔毛細血管通透性的增高。

[關鍵詞]南重樓； 抗炎； 止血； 改善血流變

Pharmacodynamics study on Paris vietnamensis

LI Hongmei1， SUN Jianhui1， KANG Liping2， HUO Hairu1， LI Xiaoqin1，

HUANG Yuanyuan2， CHEN Min 2*， HUANG Luqi2*

（1. Institute of Chinese Materia Medica， China Academy of Chinese Medical Sciences， Beijing 100700， China；

2. State Key Laboratory of Daodi Herbs， National Resource Center For Materia Medica， China Academy of

Chinese Medical Sciences， Beijing 100700， China）

[Abstract]Paris is commonly used in traditional Chinese medicine and its resource is in shortage， a variety of related plants are acquired as Paris. This study compared pharmacological activity in antiinflammatory and hemostatic and blood rheology of P. vietnamensis with pharmacopoeial Paridis Rhizoma to expand its range of Paris medicinal resources and protect wild resources of Paris and meet market demand. The experimental study showed that P. vietnamensis and P. polyphylla var. yunnanensis and P. polyphylla var. chinensis had antiinflammatory and hemostatic effect and improved blood rheolog. They can significantly inhibit rat foot swelling induced by carrageenan and short the bleeding time and clotting time and reduce the blood viscosity in rats with acute blood stasis model， P. vietnamensis and P. polyphylla var. yunnanensis can inhibit mice capillary permeability induced by acetic acid.

[Key words]Paris vietnamensis； antiinflammatory； hemostatic effect； improve blood rheolog

重樓為常用中藥材，目前國內市場以重樓藥材為組方的中成藥品種有60余種，如云南白藥、宮血寧、熱毒清、復方蛇膽川貝散等，重樓供應主要依賴野生資源，由于需求巨大，加之人工栽培再生周期長， 重樓資源緊缺。除法定品種云南重樓和七葉一枝花外，同屬多種近緣植物均被收購作為重樓入藥。按照李恒老師分類系統(tǒng)，我國有19 種重樓屬植物[1]，包括南重樓Paris vietnamensis （Takht）HLi、長柱重樓P forrestii （Takht） HLi等。本研究在前期文獻調研、資源調查、化學成分研究基礎上，比較了重樓同屬植物南重樓和藥典收載的云南重樓、七葉一枝花在抗炎、止血、改善血流變方面的藥理活性，以其擴大藥用重樓資源范圍，保護重樓野生資源，滿足市場需求。

1材料

11受試藥物云南重樓水提物，含生藥083 g·mL-1；七葉一枝花水提物，含生藥047 g·mL-1；南重樓水提物，含生藥097 g·mL-1，由中國中醫(yī)科學院中藥資源中心提供。云南白藥，云南白藥集團股份有限公司產品（批號 ZAA1522）。

12動物ICR小鼠，SPF級，體質量18～22 g，雌雄各半；SD大鼠，SPF級，體質量180～200 g，雄性，均由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供[動物生產許可證號 SCXK（京）20120001]。小鼠和大鼠飼育在屏障環(huán)境下[實驗動物使用許可證號 SYXK（京）20130035]。

13試劑角叉菜膠，Sigma公司產品（批號 021M0038V）；伊文思蘭，Solarbio公司（批號50813022）；冰醋酸，北京化工廠（批20100603）；鹽酸腎上腺素注射液，天津金耀藥業(yè)有限公司（批號 1412021）。endprint

14儀器PV200足趾容積測量儀，成都泰盟科技有限公司產品；AVE型半自動生化分析儀，愛威科技實業(yè)有限公司產品；SA5000自動血流變測試儀，北京賽科希德科技發(fā)展有限公司產品。

2方法

21對角叉菜膠致大鼠足腫脹的影響[2]分組：選取健康SD大鼠，SPF級，雄性，體質量180～200 g，將大鼠按體質量隨機分組，分別為模型對照組、云南重樓、七葉一枝花、南重樓水提物（162 g·kg-1）和云南白藥組，每組10只。

給藥：各組分別灌胃給予相應藥物，模型對照組給予相同體積的蒸餾水（10 mL·kg-1），每天1次，連續(xù)給藥2 d。

觀察指標：試驗當天先用足趾容積測定儀測定大鼠右后足跖容積為基礎值，末次藥后于大鼠右后足跖中央皮內注射1%角叉菜膠溶液致炎01 mL，測定致炎后1，2，4 h的腫脹值（致炎后與致炎前足趾容積之差）。

22對醋酸致小鼠腹腔毛細血管通透性增高的影響[3]分組：選取健康ICR小鼠，SPF級，體質量18～20 g，將小鼠按體質量隨機分組，分別為模型對照組、云南重樓、七葉一枝花、南重樓水提物各高、中劑量組（330，165 g·kg-1）和云南白藥組，每組10只，雌雄各半。

給藥：各組分別灌胃給予相應藥物，模型對照組給予相同體積的蒸餾水（20 mL·kg-1），每日1次，連續(xù)給藥3 d。

觀察指標：末次藥后1 h，尾靜脈注射05%依文思蘭液（10 mL·kg-1），10 min后腹腔注射07%醋酸（10 mL·kg-1），再10 min后腹腔注射5 mL生理鹽水注射液，處死小鼠，輕揉腹部50次，剪開皮膚，用吸管吸取腹腔液，離心，取上清在波長590 nm下測吸光度。

23對出血時間的影響[4]分組、給藥同22。觀察指標：末次藥后1 h，采用剪尾法，將小鼠固定，以利剪將小鼠尾尖3 mm處剪斷，待血液自行流出開始計時，此后每隔30 s用濾紙吸去血滴1次，至血液自然停止為止，即為出血時間。

24對凝血時間的影響[4]分組、給藥同22。觀察指標：末次藥后1 h，采用玻片法，摘去一側眼球即有血液流出，于載玻片兩端各滴1滴血，血滴直徑約5～10 mm，立即開始記時，此后每隔30 s用干燥針頭自血滴邊緣向里輕輕挑動1次，至針頭能挑起纖維蛋白絲為止，即為凝血時間。

25對急性血瘀模型血液流變性的影響[5]分組：選取健康SD大鼠，SPF級，雄性，體質量180～200 g，將大鼠按體質量隨機分組，分別為模型對照組、云南重樓、七葉一枝花、南重樓水提物（162 g·kg-1）和云南白藥組，每組10只。各組分別灌胃給予相應藥物，模型對照組給予相同體積的蒸餾水（10 mL·kg-1），每天1次，連續(xù)給藥7 d。采用注射腎上腺素結合冰水浸泡致大鼠急性血瘀模型，測定1，5，50，100，200 s-1切變率下的全血黏度。

26統(tǒng)計分析實驗數(shù)據(jù)均以±s表示，應用SPSS 170統(tǒng)計軟件進行分析，t檢驗進行組間比較，P<005時為顯著差異。

3結果

31對角叉菜膠致大鼠足腫脹的影響云南重樓、七葉一枝花、云南白藥在致炎后1～4 h均可明顯抑制角叉菜膠致足腫脹，南重樓在致炎后4 h可明顯抑制角叉菜膠致大鼠足腫脹，與模型對照組相比具有顯著性差異，表明云南重樓、七葉一枝花、南重樓水提物均具有抗炎作用（表1）。

32對醋酸致小鼠腹腔毛細血管通透性增高的影響云南重樓（330，165 g·kg-1）、南重樓（330 g·kg-1）及云南白藥可明顯抑制小鼠腹腔毛細血管通透性的增高，其平均吸光度明顯低于模型對照組，與模型對照組相比具有顯著性差異，表明云南重樓和南重樓具有抗炎作用（表2）。

33對出血時間和凝血時間的影響云南重樓、七葉一枝花、南重樓（330，165 g·kg-1）及云南白藥均可明顯縮短小鼠出血時間和凝血時間，與模型對照組相比具有顯著性差異，表明云南重樓、七葉一枝花、南重樓具有止血作用（表3）。

34對急性血瘀模型血液流變性的影響注射腎上腺素結合冰水浸泡可導致大鼠急性血瘀模型，模型組1，5，50，100，200 s-1切變率下的全血黏度較正常組明顯增高，云南重樓、七葉一枝花、南重樓及云南白藥可明顯降低各切變率下（1，5，50，100，200 s-1切變率下）的全血黏度，與模型對照組相比具有顯著性差異（表4）。

4討論

重樓為常用中藥材，目前資源緊缺，同屬多種近緣植物均被收購作為重樓入藥。王艷芳等[6]對重樓屬植物滇重樓和南重樓2個種進行顯微結構鑒別，研究表明滇重樓和南重樓這2個種的根、根莖、莖、葉顯微結構相似；段志剛等[7]采取原植物、性狀、顯微結構、理化鑒定方法，對南重樓進行了系統(tǒng)的生藥學研究；黃蕓[8]等從南重樓分離到11種甾體皂苷類化合物，體外篩選出部分甾體皂苷類化合物具有細胞毒作用?，F(xiàn)代藥理研究表明重樓具有抗腫瘤、消炎、抑菌、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、止血等作用等多種藥理作用[9]。本實驗采用抗炎、止血、血液流變學實驗比較了重樓同屬植物南重樓和藥典收載重樓的藥理活性差異。研究表明云南重樓、七葉一枝花、南重樓具有抗炎、止血和改善血流變學作用，可明顯抑制角叉菜膠致足腫脹，縮短小鼠出血時間和凝血時間，明顯降低大鼠急性血瘀模型各切變率下的全血黏度；云南重樓、南重樓可明顯抑制小鼠腹腔毛細血管通透性的增高。因此，在進一步化學成分、臨床研究基礎上，南重樓有望被收載作為正品重樓使用。

[參考文獻]

[1]李恒. 重樓屬植物[M]. 北京： 科學出版社，2013： 7.

[2]李儀奎. 中藥藥理實驗方法學[M]. 上海：上?？萍汲霭嫔纾?991：299.

[3]陳奇. 中藥藥理研究方法學[M]. 北京：人民衛(wèi)生出版社，1993： 305.

[4]劉彬，張海濤，劉慧明，等. 鱟素對小鼠出血時間和凝血時間的影響[J]. 廣東醫(yī)學院學報，2015，33（1）：49.

[5]李偉霞，黃美艷，唐于平，等. 大鼠急性血瘀模型造模方法的研究與評價[J]. 中國藥理學通報，2011，27（2）：1761.

[6]王艷芳，唐玲，李榮英，等. 滇重樓和南重樓的顯微結構研究[J]. 云南中醫(yī)學院學報，2012，35（4）：40.

[7]段志剛，劉江，夏從龍. 南重樓的生藥學研究[J]. 大理大學學報，2016，1（4）：29.

[8]黃蕓，崔力劍，王強，等. 南重樓Paris vietnamensis活性物質的分離與鑒定[J]. 藥學學報，2006，41（4）：361.

[9]何明生，李秀. 重樓藥理作用的研究進展[J]. 世界中醫(yī)藥，2012，7 （6）：579.

[責任編輯呂冬梅]endprint