15%阿維·螺蟲(chóng)懸浮劑高效液相色譜分析

陶 婧，王金芳，徐 妍，潘 靜，高敬雨，劉潤(rùn)峰，東 琴

（1.北京明德立達(dá)農(nóng)業(yè)科技有限公司，北京 102206；2.北京明農(nóng)心農(nóng)產(chǎn)品分析檢測(cè)技術(shù)有限公司，北京 102206)

◆農(nóng)藥分析◆

15%阿維·螺蟲(chóng)懸浮劑高效液相色譜分析

陶 婧1，王金芳2，徐 妍1，潘 靜1，高敬雨1，劉潤(rùn)峰1，東 琴1

（1.北京明德立達(dá)農(nóng)業(yè)科技有限公司，北京 102206；2.北京明農(nóng)心農(nóng)產(chǎn)品分析檢測(cè)技術(shù)有限公司，北京 102206)

采用高效液相色譜法，以乙腈和水為流動(dòng)相，選用ZORBAX SB-C18反相柱和紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器，對(duì)15%阿維·螺蟲(chóng)懸浮劑中有效成分進(jìn)行分離和定量分析。結(jié)果表明，阿維菌素和螺蟲(chóng)乙酯標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.084和0.180，變異系數(shù)分別為2.69%和1.46%，平均回收率分別為99.58%和99.72%。該方法操作簡(jiǎn)便，分離效果好，精密度與準(zhǔn)確度高，可同時(shí)快速測(cè)定阿維菌素和螺蟲(chóng)乙酯含量。

阿維菌素；螺蟲(chóng)乙酯；高效液相色譜；分析

Abstract:A method for separation and quantitative analysis of abamectin+spirotetramat 15%SC was described by HPLC,using acetonitrile and water as the mobile phase,on ZORBAX SB C18column and UV detector.The results showed that the standard deviation,variation coefficient and average recovery of abamectin were 0.084,2.69%,99.58%.The standard deviation,variation coefficient and average recovery of spirotetramat were 0.180,1.46%,99.72%,respectively.The method was simple,convenient,and had good separating effect,high precision and accuracy.It could be used in simultaneous determination of abamectin and spirotetramat.

Key words:abamectin;spirotetramat;HPLC;analysis

阿維菌素（abamectin）是由美國(guó)Merck公司開(kāi)發(fā)的十六元大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑，具有觸殺和胃毒作用，且對(duì)葉片有較強(qiáng)的滲透作用，可殺死表皮下的害蟲(chóng)[1]。螺蟲(chóng)乙酯（spirotetramat）是拜耳公司繼螺螨酯、螺甲螨酯之后開(kāi)發(fā)的又一個(gè)螺環(huán)季酮酸類(lèi)殺蟲(chóng)劑，通過(guò)干擾害蟲(chóng)脂肪合成，阻斷能量代謝而起效。其高效、廣譜，具有雙向內(nèi)吸傳導(dǎo)性能，可通過(guò)植物木質(zhì)部和韌皮部向頂傳導(dǎo)，也可在植株內(nèi)由上而下傳導(dǎo)，且持效期長(zhǎng)[2-3]。阿維菌素和螺蟲(chóng)乙酯二者復(fù)配有較好的增效作用，具有觸殺、胃毒、內(nèi)吸、葉片滲透?jìng)鲗?dǎo)活性，對(duì)柑橘樹(shù)紅蜘蛛、介殼蟲(chóng)等高效，且持效期長(zhǎng)，在推薦劑量下對(duì)作物安全。目前關(guān)于阿維菌素、螺蟲(chóng)乙酯同柱分析的高效液相色譜分析方法尚未見(jiàn)公開(kāi)報(bào)道。

該實(shí)驗(yàn)建立一種高效液相色譜分析方法，使用ZORBAX SB-C18柱和紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器，以乙腈＋水溶液為流動(dòng)相，采用外標(biāo)法對(duì)15%阿維·螺蟲(chóng)懸浮劑中有效成分進(jìn)行分析和定量。該方法同時(shí)適用于阿維菌素和螺蟲(chóng)乙酯原藥及制劑的分析。方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，分離效果好，適用于產(chǎn)品質(zhì)量的檢測(cè)分析。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

Agilent 1260高效液相色譜儀，具有紫外檢測(cè)器和自動(dòng)進(jìn)樣器；Agilent色譜工作站。乙腈為色譜純；水為新蒸2次蒸餾水；阿維菌素B1標(biāo)準(zhǔn)品（質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.0%）、螺蟲(chóng)乙酯標(biāo)準(zhǔn)品（質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.0%），中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院提供；15%阿維·螺蟲(chóng)懸浮劑（3%阿維菌素＋12%螺蟲(chóng)乙酯）試樣，江蘇明德立達(dá)作物科技有限公司提供。

1.2 色譜條件

Agilent ZORBAX SB-C18不銹鋼柱：150 mm×4.6 mm（i.d.）；檢測(cè)波長(zhǎng)：245 nm；流動(dòng)相：乙腈＋水（體積比75∶25）；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：10 μL；柱溫：25℃。螺蟲(chóng)乙酯的保留時(shí)間約為2.6 min，阿維菌素B1b的保留時(shí)間約為8.7 min，阿維菌素B1a保留時(shí)間約為11.8 min。典型液相色譜分離圖見(jiàn)圖1、圖2。

圖1 螺蟲(chóng)乙酯、阿維菌素B1標(biāo)樣液相色譜圖

圖2 15%阿維·螺蟲(chóng)懸浮劑試樣液相色譜圖

1.3 分析步驟

1.3.1 標(biāo)樣溶液的配制

準(zhǔn)確稱(chēng)取阿維菌素B1標(biāo)準(zhǔn)品約10 mg、螺蟲(chóng)乙酯標(biāo)準(zhǔn)品約40 mg（精確至0.000 2 g）于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解、定容，搖勻后備用。

1.3.2 試樣溶液的配制

準(zhǔn)確稱(chēng)取試樣約330 mg（精確至0.000 2 g）于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解、定容，搖勻后離心，取上清液備用。

1.3.3 測(cè)定

在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，計(jì)算各針相對(duì)響應(yīng)值，直至相鄰2針阿維菌素B1（或螺蟲(chóng)乙酯）響應(yīng)值相對(duì)變化小于1.5%時(shí)，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

1.3.4 計(jì)算

將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中的阿維菌素B1（或螺蟲(chóng)乙酯）峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中阿維菌素B1（或螺蟲(chóng)乙酯）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w（%）按式（1）計(jì)算。

式中：A1—標(biāo)樣溶液中阿維菌素B1（或螺蟲(chóng)乙酯）峰面積平均值；A2—試樣溶液中阿維菌素B1（或螺蟲(chóng)乙酯）峰面積平均值；m1—阿維菌素B1（或螺蟲(chóng)乙酯）標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量，g；m2—試樣的質(zhì)量，g；P—標(biāo)準(zhǔn)品中阿維菌素B1（或螺蟲(chóng)乙酯）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

2.1.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

對(duì)阿維菌素B1（或螺蟲(chóng)乙酯）標(biāo)樣溶液分別進(jìn)行紫外掃描，得相應(yīng)的吸收波長(zhǎng)與響應(yīng)值的紫外吸收光譜圖。當(dāng)選用245 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)時(shí)，阿維菌素B1和螺蟲(chóng)乙酯均有較強(qiáng)吸收峰，同時(shí)雜質(zhì)響應(yīng)值小，流動(dòng)相無(wú)吸收。因此，為兼顧兩者均有較好吸收，將檢測(cè)波長(zhǎng)選為245 nm。

2.1.2 流動(dòng)相的選擇

根據(jù)阿維菌素B1和螺蟲(chóng)乙酯的特點(diǎn)，以不同比例的甲醇＋水、乙腈＋水作為流動(dòng)相對(duì)試樣進(jìn)行分離檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，以乙腈＋水（體積比為75∶25）為流動(dòng)相，分離效果好，峰形對(duì)稱(chēng)，出峰時(shí)間短，而且基線平穩(wěn)。

2.2 線性相關(guān)性測(cè)定

配制一系列不同質(zhì)量濃度的阿維菌素B1（或螺蟲(chóng)乙酯）標(biāo)樣溶液，按上述色譜操作條件測(cè)定相應(yīng)響應(yīng)值。以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到阿維菌素B1和螺蟲(chóng)乙酯的線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)。阿維菌素B1線性方程為y=21.630 3 x＋11.856 4，相關(guān)系數(shù)0.999 5；螺蟲(chóng)乙酯線性方程為y=10.440 0 x-37.838 0，相關(guān)系數(shù)0.999 2。

2.3 方法精密度測(cè)定

在上述色譜操作條件下，對(duì)同一15%阿維·螺蟲(chóng)懸浮劑平行測(cè)定5次。測(cè)得阿維菌素B1的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.084，變異系數(shù)為2.69%；螺蟲(chóng)乙酯的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.180，變異系數(shù)為1.46%（見(jiàn)表1）。結(jié)果表明，該方法精密度較高，方法可行。

表1 高效液相色譜測(cè)定法精密度情況

2.4 方法準(zhǔn)確度測(cè)定

采用標(biāo)準(zhǔn)品添加法，在已知含量的15%阿維·螺蟲(chóng)懸浮劑中加入一定量的阿維菌素B1、螺蟲(chóng)乙酯標(biāo)準(zhǔn)品，按上述色譜操作條件分析，重復(fù)5次，計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 高效液相色譜測(cè)定法準(zhǔn)確度情況

測(cè)得阿維菌素B1的平均回收率為99.58%，螺蟲(chóng)乙酯的平均回收率為99.72%。該方法準(zhǔn)確度較高，可準(zhǔn)確定量。

3 結(jié)論

綜上所述，實(shí)驗(yàn)建立的15%阿維·螺蟲(chóng)懸浮劑中有效成分質(zhì)量分?jǐn)?shù)高效液相色譜分析方法，線性關(guān)系良好，精密度和準(zhǔn)確度較高，具有操作簡(jiǎn)便、快速，分離效果好的優(yōu)點(diǎn)，可用于產(chǎn)品質(zhì)量的檢驗(yàn)。

[1]何煥君,邱麗娜,姚偉芳,等.阿維菌素的研究進(jìn)展[J].生物技術(shù),2006,16(6):84-85.

[2]仇是勝,柏亞羅.螺環(huán)季酮酸類(lèi)殺蟲(chóng)殺螨劑的研究與開(kāi)發(fā)(Ⅰ)[J].現(xiàn)代農(nóng)藥,2013,12(3):1-6.

[3]王小麗,陳鐵春,李友順,等.螺蟲(chóng)乙酯240 g/L懸浮劑高效液相色譜分析方法研究[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理,2009,30(1):8-10.

（責(zé)任編輯：柏亞羅）

Analysis of Abamectin＋Spirotetramat 15%SC by HPLC

TAO Jing1,WANG Jin-fang2,XU Yan1,PAN Jing1,GAO Jing-yu1,LIU Run-feng1,DONG Qin1
(1.Beijing Mindleader Agroscience Co.,Ltd.,Beijing 102206,China;2.Beijing Mirrosyn Agricultural Products Test Co.,Ltd.,Beijing 102206,China)

TQ 450.7

A

10.3969/j.issn.1671-5284.2017.05.008

2017-05-03

陶婧（1987—），女，石家莊市人，碩士，主要從事農(nóng)藥劑型加工及使用技術(shù)研究。E-mail：taojing@mdldagro.com