22%螺蟲乙酯·噻蟲啉懸浮劑分析方法研究

黃 亮，金 立

(安徽豐樂農(nóng)化有限責任公司，安徽 合肥 231600)

螺蟲乙酯(Spirotetramat)是季酮酸類化合物，有獨特的作用特征，是迄今具有雙向內(nèi)吸傳導性能的現(xiàn)代殺蟲劑之一。該化合物可以在整個植物體內(nèi)向上向下移動，抵達葉面和樹皮，從而防治如生菜和白菜內(nèi)葉上，及果樹皮上的害蟲。這種獨特的內(nèi)吸性能可以保護新生莖、葉和根部，防止害蟲的卵和幼蟲生長。其另一個特點是持效期長，可提供長達8周的有效防治[1]。

噻蟲啉(Thiacloprid)原藥由德國拜耳農(nóng)化公司和日本拜耳農(nóng)化公司合作開發(fā)，是新型氯代煙堿類殺蟲劑。主要作用于昆蟲神經(jīng)接合后膜，通過與煙堿乙酰膽堿受體結(jié)合，干擾昆蟲神經(jīng)系統(tǒng)正常傳導，引起神經(jīng)通道的阻塞，造成乙酰膽堿的大量積累，從而使昆蟲異常興奮，全身痙攣、麻痹而死。具有較強的內(nèi)吸、觸殺和胃毒作用[2]。

關于螺蟲乙酯和噻蟲啉的檢測方法已有報道[3-5]。但螺蟲乙酯和噻蟲啉在同一色譜條件同時分析的方法還尚未見報道。由于22%螺蟲乙酯·噻蟲啉懸浮劑為復配制劑，在實際生產(chǎn)中，如果兩個組分單獨測定易耗費時間。經(jīng)過試驗，摸索出一個在同一條件同時測定螺蟲乙酯和噻蟲啉的分析方法。經(jīng)過實驗驗證，此分析方法具有較好的準確度和精確度。

1 材料儀器

1.1 樣品和試劑 甲醇：色譜純；水：新蒸二次蒸餾水，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾；螺蟲乙酯標樣：已知準確質(zhì)量分數(shù)，≥99.0%；噻蟲啉標樣：已知準確質(zhì)量分數(shù)，≥99.0%，國家農(nóng)藥質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心(沈陽)。

1.2 儀器 島津高效液相色譜儀LC-20A，具有二極管陣列檢測器；色譜數(shù)據(jù)處理工作站；色譜柱：250mm×4.6(id)mm不銹鋼柱，內(nèi)裝InertsilODS-SP填充物，粒徑5μm；超聲波清洗器；自動進樣器；微孔過濾器：濾膜孔徑約0.45μm。

1.3 高效液相色譜操作條件 流動相：ψ(甲醇+水)=75+25(V+V)，經(jīng)過濾膜過濾，并進行脫氣；流速：1.0mL/min；檢測波長：254nm；柱溫：室溫；進樣體積：5μL；保留時間：噻蟲啉約4.0min，螺蟲乙酯約8.1min；上述操作參數(shù)是典型的，可根據(jù)儀器的特點，對給定的操作參數(shù)做適當調(diào)整，以期獲得最佳效果，典型的螺蟲乙酯(噻蟲啉)高效液相色譜圖(圖1)。

圖1 22%螺蟲乙酯·噻蟲啉懸浮劑高效液相色譜圖注：1-噻蟲啉，2-螺蟲乙酯

2 實驗方法

2.1 標樣溶液的配置 稱取螺蟲乙酯(噻蟲啉)標樣各0.05g(精確至0.000 2g)，置于100mL容量瓶中，加入適量甲醇，超聲3min使之溶解，冷卻至室溫，用甲醇定容，搖勻、過濾備用。

2.2 試樣溶液的配置 稱取約0.45g(精確至0.000 2g)的試樣，置于100mL容量瓶中，加入適量甲醇，超聲3min使之溶解，冷卻至室溫，用甲醇定容，搖勻、過濾備用。

2.3 試樣的測定 在上述高效液相色譜操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，注入數(shù)針標樣溶液，待相鄰2針螺蟲乙酯(噻蟲啉)的峰面積相對響應值變化<1.5%后，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。

2.4 試樣中有效含量的計算 將測得的兩針試樣溶液以及試樣前后2針標樣溶液中螺蟲乙酯(噻蟲啉)峰面積分別進行平均，試樣中螺蟲乙酯(噻蟲啉)的質(zhì)量分數(shù)X1(%)，按式(1)計算：

(1)

式中：

A1——標樣溶液中螺蟲乙酯(噻蟲啉)峰面積的平均值；

A2——試樣溶液中螺蟲乙酯(噻蟲啉)峰面積的平均值；

m1——螺蟲乙酯(噻蟲啉)標樣的質(zhì)量，g；

m2——試樣的質(zhì)量，g；

p1——標樣中螺蟲乙酯(噻蟲啉)的質(zhì)量分數(shù)，%。

3 結(jié)果與討論

3.1 分析方法的線性相關性實驗 配置5個不同濃度梯度的噻蟲啉、螺蟲乙酯標準溶液，按本標準規(guī)定的方法進樣，每個濃度分析兩次，求其峰面積平均值。以噻蟲啉、螺蟲乙酯的峰面積為縱坐標，以噻蟲啉、螺蟲乙酯的質(zhì)量濃度為橫坐標作圖，結(jié)果(表1)，(表1)可知，本標準方法在噻蟲啉為0.087～0.940mg/mL的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)、螺蟲乙酯為0.085～0.905mg/mL的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)均具有較好的線性相關性。

表1 噻蟲啉、螺蟲乙酯線性數(shù)據(jù)

3.2 分析方法的精密度實驗 按本標準規(guī)定的方法對同一樣品中的噻蟲啉、螺蟲乙酯的質(zhì)量分數(shù)進行五次平行測定，并進行標準偏差及變異系數(shù)的統(tǒng)計運算，結(jié)果(表2)。由(表2)得到，本方法對噻蟲啉分析的標準偏差為0.032%，變異系數(shù)為0.227%，對螺蟲乙酯分析的標準偏差為0.026%，變異系數(shù)為0.231%。

表2 螺蟲乙酯、噻蟲啉精密度測定

同時通過運用修改的Horwits公式對本產(chǎn)品中的噻蟲啉、螺蟲乙酯作理論上的變異系數(shù)(即理論RSD)的計算，結(jié)果(表3)，并與其實測的變異系數(shù)值(即實測的RSD)進行比較?？芍痉椒ǚ治鲟缦x啉、螺蟲乙酯的精密度較好，能對有效成分進行精確的分析。

表3 22%螺蟲乙酯噻蟲啉分析方法精密度評價

3.3 分析方法的準確度實驗 按配方比例要求，將除原藥以外的所有助劑混勻，作制劑空白，在制劑空白中加入5組已經(jīng)稱量好的噻蟲啉、螺蟲乙酯標準品適量。測定本標準方法的準確度，具體實驗數(shù)據(jù)(表4)，其對噻蟲啉分析的平均回收率99.83%，對螺蟲乙酯分析的平均回收率99.52%，可見本標準方法對噻蟲啉、螺蟲乙酯的準確度能滿足定量要求。

表4 準確度測定數(shù)據(jù)

3.4 非分析物干擾實驗 為確定本分析方法下助劑輔料和有效成分螺蟲乙酯，噻蟲啉有無明顯干擾，配制相應空白溶劑溶液、原藥溶液、標樣溶液以及制劑試樣，不含有助劑的螺蟲乙酯和噻蟲啉的原藥按照標準中規(guī)定的方法進行液相色譜的分析，不存在與有效成分的保留時間重合的非分析物。因此，按照標準中方法分析有效成分，無非分析物的干擾(圖2～5)。

圖3 不含有助劑的噻蟲啉、螺蟲乙酯原藥色譜圖

圖4 噻蟲啉、螺蟲乙酯標樣色譜圖

圖5 試樣中噻蟲啉、螺蟲乙酯色譜圖

所以，本分析方法下助劑輔料和螺蟲乙酯、噻蟲啉之間無明顯雜質(zhì)干擾。

3.5 分析方法的特異性 按照標準中噻蟲啉和螺蟲乙酯的含量配制一定濃度的噻蟲啉和螺蟲乙酯的標樣和試樣溶液，按標準中方法對標樣溶液進行液相色譜、全波段掃描，并對其色譜圖進行峰純度分析，其色譜圖(圖6～11)(同時對試樣也進行液相色譜、全波段掃描，并對其色譜圖進行峰純度分析)，(圖6～11)可見，在該色譜條件下，標樣和樣品的保留時間和峰趨勢基本一致，有效成分噻蟲啉和螺蟲乙酯均能得到很好的檢測，二者的分離度能達到100%，二者在同一檢測條件下無相互干擾，其它雜質(zhì)的峰面積干擾程度<3%。

圖6 螺蟲乙酯+噻蟲啉的標樣液相色譜圖

圖7 標樣噻蟲啉的吸收紫外光譜圖

圖8 標樣螺蟲乙酯的紫外吸收光譜圖

圖9 螺蟲乙酯+噻蟲啉的試樣液相色譜圖

圖10 試樣噻蟲啉的吸收紫外光譜圖

圖11 試樣螺蟲乙酯的吸收紫外光譜圖

4 結(jié)論

本文建立了22%螺蟲乙酯·噻蟲啉懸浮劑中有效成分的分析方法。該方法準確度和精密度較高，線性關系良好。由于一次即可測定螺蟲乙酯和噻蟲啉的含量，使得該方法快速、簡便，適合于產(chǎn)品的質(zhì)量檢測和控制。