中生：新型疫苗技術(shù)平臺(tái)促生EV71疫苗新藥

李秀玲，張?jiān)茲鶗?huì)杰，陳曉琦，段凱，沈心亮

1.國藥中生生物技術(shù)研究院有限公司，北京 101111 2.中國生物技術(shù)股份有限公司，北京 100029 3.武漢生物制品研究所有限責(zé)任公司，武漢 430207

企業(yè)研發(fā)

中生：新型疫苗技術(shù)平臺(tái)促生EV71疫苗新藥

李秀玲1，張?jiān)茲?，郭會(huì)杰1，陳曉琦3，段凱3，沈心亮1

1.國藥中生生物技術(shù)研究院有限公司，北京 101111 2.中國生物技術(shù)股份有限公司，北京 100029 3.武漢生物制品研究所有限責(zé)任公司，武漢 430207

疫苗對(duì)于預(yù)防和控制疾病發(fā)揮著重要作用，疫苗產(chǎn)業(yè)對(duì)于防治傳染病、推動(dòng)我國公共衛(wèi)生事業(yè)具有重要意義。中生以關(guān)愛生命、呵護(hù)健康為宗旨，進(jìn)行科研資源的全面整合，全力打造疫苗產(chǎn)業(yè)技術(shù)平臺(tái)。中生所屬國藥中生生物技術(shù)研究院有限公司利用先進(jìn)的新型疫苗技術(shù)平臺(tái)的優(yōu)勢(shì)，牽頭承擔(dān)了EV71疫苗的研發(fā)課題，歷時(shí)9年完成了國家一類新藥的臨床前研究、臨床研究，并獲得新藥證書和生產(chǎn)注冊(cè)批件。項(xiàng)目實(shí)施過程中，新型疫苗技術(shù)平臺(tái)吸引、培養(yǎng)了一批疫苗專業(yè)優(yōu)秀人才，提高了疫苗研發(fā)生產(chǎn)水平和快速應(yīng)對(duì)突發(fā)性傳染病事件能力。

新型疫苗技術(shù)平臺(tái)；腸道病毒71型；新藥證書

1 我國疫苗發(fā)展的現(xiàn)狀

1796年英國醫(yī)生琴納利用牛痘使人預(yù)防天花，天花從不治之癥，到人痘預(yù)防，說明接種疫苗對(duì)于預(yù)防和控制疾病的發(fā)生是一個(gè)有效的途徑。在過去的70年中，多種疫苗已為人類健康做出了重要貢獻(xiàn)，病毒學(xué)和免疫學(xué)基礎(chǔ)研究的發(fā)展為人類在21世紀(jì)征服病毒性疾病提供了美好前景。我國是人口大國，也是全球疫苗產(chǎn)品的最大生產(chǎn)國和使用國，每年出生嬰兒超過1500萬，存在著巨大的兒童免疫接種需求。雖然我國的疫苗產(chǎn)業(yè)在疫苗品種數(shù)量上與發(fā)達(dá)國家差距較小，但在某些疫苗品種的產(chǎn)能、關(guān)鍵生產(chǎn)工藝，以及部分疫苗的質(zhì)量上與發(fā)達(dá)國家還有一定差距。尤其是我國在許多疫苗品種的研發(fā)能力、產(chǎn)能方面嚴(yán)重不足，生產(chǎn)技術(shù)急需提升。

2 中生的發(fā)展歷程

中生承擔(dān)著預(yù)防、控制、消滅傳染病用生物制品的研制、生產(chǎn)、供應(yīng)任務(wù)，先后研制生產(chǎn)了牛痘、霍亂、傷寒、狂犬病疫苗及白喉抗毒素等制品，并分離出青霉素菌種，為我國消滅天花，消除脊髓灰質(zhì)炎，控制麻疹、白喉、百日咳、流行性乙型腦炎、流行性腦髓膜炎、乙型肝炎等傳染病，做出了重要貢獻(xiàn)。

中生所屬的國藥中生生物技術(shù)研究院有限公司（北京生物制品研究所有限責(zé)任公司）主要從事研發(fā)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的新型疫苗，研發(fā)建立了一批科學(xué)化、現(xiàn)代化、產(chǎn)業(yè)化的生物技術(shù)平臺(tái)，包括哺乳動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)平臺(tái)、反向疫苗學(xué)技術(shù)平臺(tái)、新型疫苗佐劑平臺(tái)、多糖蛋白結(jié)合疫苗技術(shù)平臺(tái)、聯(lián)合疫苗和基因工程疫苗平臺(tái)、治療性疫苗技術(shù)平臺(tái)等。

作為新型疫苗國家工程研究中心的實(shí)體單位，國藥中生生物技術(shù)研究院有限公司的各項(xiàng)設(shè)施建設(shè)均以符合中國、歐盟、美國GMP、GLP及生物安全等標(biāo)準(zhǔn)為指導(dǎo)原則，集中了多項(xiàng)國際先進(jìn)技術(shù)和工藝，可承擔(dān)國家及地方重大項(xiàng)目的工程化研發(fā)及技術(shù)支持。新型疫苗國家工程研究中心將建設(shè)符合歐盟GMP標(biāo)準(zhǔn)的5條中試生產(chǎn)單元（含3個(gè)生物安全二級(jí)BSL-2級(jí)區(qū)域），包括病毒活苗生產(chǎn)單元、病毒滅活苗生產(chǎn)單元、細(xì)菌疫苗生產(chǎn)單元、基因工程生產(chǎn)單元及昆蟲細(xì)胞生產(chǎn)單元；4個(gè)專業(yè)實(shí)驗(yàn)室（含2個(gè)生物安全二級(jí)BSL-2級(jí)實(shí)驗(yàn)室），包括病毒實(shí)驗(yàn)室、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室、基因工程實(shí)驗(yàn)室及QC實(shí)驗(yàn)室；2條分裝單元（活苗及滅活苗）、包裝區(qū)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房等配套設(shè)施。

3 EV71疫苗的研發(fā)歷程及競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)

2008年，我國EV71（腸道病毒71型）疫情嚴(yán)峻，科學(xué)技術(shù)部組織緊急立項(xiàng)，擁有雄厚研發(fā)實(shí)力和設(shè)施的國藥中生生物技術(shù)研究院有限公司作為課題牽頭單位進(jìn)行EV71疫苗的研發(fā)。公司利用先進(jìn)的疫苗株篩選平臺(tái)、病毒大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)平臺(tái)、疫苗純化工藝技術(shù)平臺(tái)等新型疫苗工程化技術(shù)平臺(tái)的優(yōu)勢(shì)，有力促進(jìn)了該疫苗的研發(fā)進(jìn)程。2008～2010年完成了臨床前研究，形成的關(guān)鍵技術(shù)包括：疫苗生產(chǎn)用毒株篩選技術(shù)、大規(guī)模哺乳動(dòng)物培養(yǎng)技術(shù)、疫苗柱層析純化技術(shù)、用于疫苗效果評(píng)價(jià)的EV71感染性動(dòng)物模型的建立、EV71疫苗臨床研究評(píng)價(jià)技術(shù)體系。該平臺(tái)技術(shù)擁有完全自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)，申請(qǐng)并獲得發(fā)明專利兩項(xiàng)。2010年12月23日獲得國家食品藥品監(jiān)督管理局簽發(fā)的一類新藥臨床研究批件，分別于2011年5月完成Ⅰ期、2011年11月完成Ⅱ期臨床試驗(yàn)研究。

2010年12月中生召開了轉(zhuǎn)產(chǎn)啟動(dòng)會(huì)，國藥中生生物技術(shù)研究院有限公司對(duì)武漢公司進(jìn)行了全套的技術(shù)資料轉(zhuǎn)移和技術(shù)交接，按照GMP要求，建立了整套疫苗質(zhì)量管理體系，包括文件管理體系、質(zhì)量控制體系、驗(yàn)證管理體系、產(chǎn)品監(jiān)控體系、質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理體系、臨床試驗(yàn)管理體系等，并指導(dǎo)武漢公司在符合GMP要求的生產(chǎn)車間內(nèi)按照生產(chǎn)規(guī)模（120L）完成了Ⅲ期臨床樣品的制備和檢定，獲得中國食品藥品檢定研究院檢定合格報(bào)告，順利用于Ⅲ期臨床試驗(yàn)研究。2013年3月完成Ⅲ期臨床試驗(yàn)研究并進(jìn)行新藥證書和生產(chǎn)文號(hào)的申報(bào)，2016年12月13日獲得新藥證書和生產(chǎn)注冊(cè)批件，2016年12月29日獲得GMP證書。課題研究期間在Lancet、Hum Vaccin Immunother等雜志發(fā)表多篇研究論文。

EV71滅活疫苗作為新型疫苗平臺(tái)的研發(fā)成果，獲得了國家1類新藥，具有完全自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)，具有以下優(yōu)勢(shì)。

① 工藝先進(jìn)。采用目前國際先進(jìn)的生物反應(yīng)器病毒培養(yǎng)、柱層析純化工藝，可獲得高純度、高比活的疫苗原液，產(chǎn)品比活可達(dá)800以上。

② 劑量科學(xué)。采用流行的EV71 C4基因型毒株作為攻擊毒株建立了具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的EV71感染小鼠模型及動(dòng)物保護(hù)性抗體水平研究，并利用該模型及保護(hù)性抗體水平對(duì)疫苗保護(hù)效果進(jìn)行評(píng)價(jià)，確定了臨床擬用疫苗劑量和劑型。

③ 安全性好。臨床前安全性評(píng)價(jià)研究結(jié)果表明，該疫苗在豚鼠、小鼠、大鼠、食蟹猴中均表現(xiàn)出較好的安全性，未見與疫苗接種相關(guān)的副反應(yīng)，未見抗核抗體的產(chǎn)生。組織結(jié)合試驗(yàn)研究顯示，疫苗免疫后產(chǎn)生的抗EV71陽性血清與30余種人體組織無特異性結(jié)合，提示該疫苗不會(huì)誘導(dǎo)免疫病理的發(fā)生。

④ 工藝穩(wěn)定、可控、產(chǎn)能高。產(chǎn)品采用生物反應(yīng)器進(jìn)行細(xì)胞及病毒培養(yǎng)，這也是國際先進(jìn)的疫苗制備工藝，如法國巴斯德的狂苗、滅活I(lǐng)PV疫苗，GSK的IPV疫苗等均使用生物反應(yīng)器培養(yǎng)模式，工藝穩(wěn)定，易于擴(kuò)大培養(yǎng)規(guī)模、提高產(chǎn)能。生物反應(yīng)器生產(chǎn)過程全程采用自動(dòng)系統(tǒng)控制，培養(yǎng)條件穩(wěn)定可控、批間差異小，同時(shí)生產(chǎn)過程采用全封閉的管道系統(tǒng)降低風(fēng)險(xiǎn)。

⑤ 臨床方案及結(jié)果系統(tǒng)科學(xué)，獲得國際認(rèn)可和好評(píng)。一是嚴(yán)格按照國際藥物臨床試驗(yàn)研究規(guī)范要求，根據(jù)Ⅰ期臨床試驗(yàn)研究結(jié)果確定Ⅱ期臨床試驗(yàn)方案，根據(jù)Ⅱ期臨床試驗(yàn)結(jié)果確定Ⅲ期臨床研究劑量。二是在Ⅲ期臨床試驗(yàn)中的疫苗三批一致性研究現(xiàn)場(chǎng)與受試人群和保護(hù)性效果研究為相同現(xiàn)場(chǎng)與人群，一致性研究更科學(xué)合理。三是試驗(yàn)疫苗對(duì)EV71感染所致手足口病住院病例保護(hù)率為100.00%、對(duì)EV71感染所致手足口病保護(hù)率90.93%，保護(hù)效果與被保護(hù)疾病癥狀、程度相關(guān)性符合科學(xué)規(guī)律，結(jié)果真實(shí)可信；四是Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期臨床試驗(yàn)研究方法和結(jié)果均已在國際期刊上公開發(fā)表，其中Ⅱ期和Ⅲ期臨床試驗(yàn)研究結(jié)果發(fā)表在Lancet上，獲得世界同行認(rèn)可，有專家在Lancet上專門對(duì)該產(chǎn)品臨床研究結(jié)果進(jìn)行了述評(píng)。五是免疫原性及免疫持久性好。該疫苗免疫后56天、8個(gè)月、14個(gè)月中和抗體GMT分別為325.3、187.3、191.9。

通過項(xiàng)目實(shí)施，國藥中生生物技術(shù)研究院有限公司進(jìn)一步完善了新型疫苗工程化技術(shù)平臺(tái)的建設(shè)，吸引、培養(yǎng)了一批疫苗專業(yè)優(yōu)秀人才，提高了疫苗研發(fā)生產(chǎn)水平和快速應(yīng)對(duì)突發(fā)性傳染病事件能力。

4 中生的理念

中生人背負(fù)著為了實(shí)現(xiàn)目標(biāo)而不遺余力的責(zé)任，為了讓更多的疾病遠(yuǎn)離人類，讓更多的生命享有健康，中生 人將盡最大努力保證每一只產(chǎn)品的安全、有效，這也是銘刻在每一位中生人心中永遠(yuǎn)不變的唯一選擇。

CNBG: new vaccine manufacturing platform inspires EV71 vaccine

LI Xiuling1，ZHANG Yuntao2，GUO Huijie1，CHEN Xiaoqi3，DUAN Kai3，SHEN Xinliang1
1. National Vaccine and Serum Institute, Beijing 101111, China 2. China National Biotiec Group Co., Ltd., Beijing 100029, China 3. Wuhan Institute of Biological Products Co., Ltd., Wuhan 430207, China

Vaccines play an important role in the prevention and control of diseases. The vaccine industry is of great significance for the prevention and control of infectious diseases and the promotion of public health. With the aim of“Caring For Life, Attending To Health”, China National Biotiec Group Company（CNBG）has completed a integration of scienti fi c research resources and built a new vaccine manufacturing platform. With the advantage of advanced new vaccine manufacturing platform, National Vaccine and Serum Institute has completed the research and development of EV71 vaccine. It took 9 years to complete the preclinical and clinical research, and obtain a new drug certificate and production licenses. At the same time, the platform attracted and trained a number of excellent talents, improved the level of vaccine research and development, and the ability to deal with sudden infectious diseases.

new vaccine manufacturing platform; EV71; new drug certi fi cate

10.3969/j.issn.1674-0319.2017.05.003