p53和NM23聯(lián)合CERBB－2基因表達(dá)及微淋巴管密度對(duì)乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌預(yù)后的臨床研究

李軼

（平?jīng)鍪械诙嗣襻t(yī)院，甘肅平?jīng)?44000）

p53和NM23聯(lián)合CERBB－2基因表達(dá)及微淋巴管密度對(duì)乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌預(yù)后的臨床研究

李軼

（平?jīng)鍪械诙嗣襻t(yī)院，甘肅平?jīng)?44000）

目的探討p53和NM23聯(lián)合CERBB－2基因表達(dá)及微淋巴管密度對(duì)乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌預(yù)后的臨床意義。方法采用免疫組化S－P法檢測(cè)p53和NM23聯(lián)合CERBB－2基因的表達(dá)，分析p53、NM23、CERBB－2基因表達(dá)與乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌臨床預(yù)后的關(guān)系及檢測(cè)微淋巴管密度在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中的意義。結(jié)果148例患者組織學(xué)分級(jí)中I級(jí)36例、Ⅱ級(jí)64例、Ⅲ級(jí)48例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者48例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者100例；p53陽性表達(dá)率為30．41%，CERBB－2陽性表達(dá)率為51．35%，NM23陽性表達(dá)率為18．24%。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者p53和CERBB－2的陽性表達(dá)率明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（P＜0．05），有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者NM23陽性表達(dá)率低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（P＜0．05）；p53和CERBB－2陽性表達(dá)率隨著組織分級(jí)的升高呈現(xiàn)上升趨勢(shì)（P＜0．05），NM23陽性表達(dá)率隨著組織分級(jí)的升高呈現(xiàn)下降趨勢(shì)（P＜0．05）。結(jié)論聯(lián)合檢測(cè)p53、CERBB－2、NM23基因的表達(dá)及測(cè)定微淋巴管密度對(duì)評(píng)價(jià)乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者的預(yù)后有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。

乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌；p53；NM23；CERBB－2；微淋巴管密度

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一，且發(fā)病率隨著年齡的增長(zhǎng)呈上升趨勢(shì)。近年來，雖然在乳腺癌早期診斷和治療方面取得了一些進(jìn)展，但死亡率仍較高。乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌又是最常見的組織學(xué)類型，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況直接關(guān)系到乳腺癌的治療及預(yù)后，而且乳腺癌的發(fā)生和轉(zhuǎn)移為多基因參與、共同作用的結(jié)果。為了探討p53和NM23聯(lián)合CERBB－2基因表達(dá)及微淋巴管密度對(duì)乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌預(yù)后的臨床意義，我們進(jìn)行了相關(guān)研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

取2010年1月—2015年12月進(jìn)行治療的148例乳腺癌患者，術(shù)后病理診斷為乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌，所有患者均為女性，年齡36～72歲，術(shù)前未做任何治療，全部患者均采用手術(shù)切除根治術(shù)。

1.2 方法

采用福州邁新生物有限公司生產(chǎn)的試劑。標(biāo)本采用10%甲醛固定、石蠟包埋、HE染色、常規(guī)4μm連續(xù)切片，然后使用SP法免疫組化染色。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn)

（1）組織學(xué)分級(jí)。將腺管的形成、核的多形性及核分裂象計(jì)數(shù)3項(xiàng)作為指標(biāo)進(jìn)行評(píng)分：①腺管形成：＞75%為1分，10%～75%為2分，＜10%為3分；②核的多形性：核輕度多形性為1分，中度多形性為2分，重度多形性為3分；③核分裂象計(jì)數(shù)：在細(xì)胞生長(zhǎng)活躍區(qū)域，計(jì)數(shù)20個(gè)高倍視野（×400），計(jì)算其核分裂象，0～1個(gè)為1分，2～3個(gè)為2分，＞3個(gè)為3分。總分3～5分為I級(jí)，總分6～7分為II級(jí)，總分8～9分為III級(jí)。（2）免疫組化判定方法。p53及NM23為胞核著色，CERBB－2為胞膜／胞漿著色，陽性細(xì)胞為細(xì)胞漿或細(xì)胞核有棕黃色顆粒沉著。無陽性細(xì)胞或陽性細(xì)胞＜10%為（－），陽性細(xì)胞＞10%為（+）；0～1分為（－），2～3分為（+），4～5分為（++），＞5分為（+++）。（3）淋巴管的計(jì)數(shù)方法。D2－40為淋巴管的特異性標(biāo)記物，根據(jù)其對(duì)乳腺癌組織和癌旁正常乳腺組織MLD（微淋巴管密度）計(jì)數(shù)，把D2－40染色呈陽性著色的單個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞簇計(jì)為一個(gè)陽性微淋巴管。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS17．0分析數(shù)據(jù)，采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 入選患者分級(jí)情況

148例乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者中，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者48例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者100例；組織學(xué)分級(jí)I級(jí)36例，Ⅱ級(jí)64例，Ⅲ級(jí)48例；p53陽性表達(dá)率為30．41%，CERBB－2陽性表達(dá)率為51．35%，NM23陽性表達(dá)率為18．24%。

2.2 基因陽性表達(dá)與淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移的關(guān)系

有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者p53和CERBB－2的陽性表達(dá)率明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（P＜0．05），有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者NM23的陽性表達(dá)率低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（P＜0．05），見表1。

表1 基因陽性表達(dá)與淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移的關(guān)系[n（%）]

2.3 基因陽性表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)的關(guān)系

p53和CERBB－2的陽性表達(dá)率隨著組織分級(jí)的升高呈現(xiàn)上升趨勢(shì)（P＜0．05），NM23的陽性表達(dá)率隨著組織分級(jí)的升高呈現(xiàn)下降趨勢(shì)（P＜0．05），見表2。

表2 基因陽性表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)的關(guān)系[n（%）]

3 討論

抑癌基因p53分為正常野生型和突變型，野生型p53不僅在細(xì)胞周期調(diào)控中起關(guān)鍵作用，而且在細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)中也起著重要作用，可刺激和促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)。突變型p53沒有抑制癌細(xì)胞的功能，卻能抑制野生型p53的活性，從而引起細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，促進(jìn)細(xì)胞癌變。乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌的發(fā)生，一方面，可能由于突變型p53的高表達(dá)，抑制了野生型p53的活性，從而引起細(xì)胞轉(zhuǎn)化，促進(jìn)細(xì)胞癌變；另一方面，可能由于突變型p53的高表達(dá)，使其刺激和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的作用增強(qiáng)，使腫瘤細(xì)胞旺盛增生[1－2]。CERBB－2基因與乳腺癌發(fā)生密切相關(guān)，參與腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)調(diào)控、增殖與分化。有學(xué)者認(rèn)為，其過度表達(dá)常提示該原癌基因存在擴(kuò)增，并促進(jìn)癌細(xì)胞運(yùn)動(dòng)加速，從而導(dǎo)致癌瘤深部浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移，腫瘤惡性程度高，臨床預(yù)后差[3]。腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因（NM23）是一種具有二磷酸核苷激酶功能的基因，通過直接影響微管、微絲等細(xì)胞骨架蛋白的生物學(xué)活動(dòng)來參與調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)微管系統(tǒng)的狀態(tài)而抑制癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。NM23是獨(dú)立預(yù)后指標(biāo)，其水平降低將提高腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高、組織分級(jí)增高則預(yù)后差，NM23高表達(dá)者的預(yù)后明顯好于低表達(dá)者。因此，檢測(cè)NM23基因表達(dá)可作為臨床預(yù)測(cè)乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移趨勢(shì)的重要參考指標(biāo)之一，對(duì)判斷預(yù)后和制訂治療方案具有重要的參考價(jià)值。表1～2也顯示，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者p53和CERBB－2的陽性表達(dá)率明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（P＜0．05），有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者NM23的陽性表達(dá)率低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（P＜0．05），p53和CERBB－2的陽性表達(dá)率隨著組織分級(jí)的升高呈現(xiàn)上升趨勢(shì)（P＜0．05），NM23的陽性表達(dá)率隨著組織分級(jí)的升高呈現(xiàn)下降趨勢(shì)（P＜0．05），充分證明了上述觀點(diǎn)。腫瘤生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移依賴于微淋巴管的生長(zhǎng)，因此檢測(cè)腫瘤內(nèi)和周圍微淋巴管密度是判斷乳腺癌預(yù)后的有效手段。

綜上所述，聯(lián)合檢測(cè)p53、CERBB－2、NM23及微淋巴管密度測(cè)定對(duì)評(píng)價(jià)乳腺癌患者的預(yù)后有重要臨床應(yīng)用價(jià)值。

[1]夏同禮．腫瘤實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)[M]．北京：北京科學(xué)技術(shù)出版社，2005．

[2]馬捷．p53基因與乳腺癌的相關(guān)性[J]．醫(yī)學(xué)綜述，2005，11（2）：112．

[3]詹彥平，呂新玲，葉爾布拉提．微淋巴管密度與乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究[J]．醫(yī)學(xué)綜述，2011，17（8）：1246－1249．

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1671－1246（2017）18－0149－02