荷葉中生物堿提取及純化工藝研究

薛巖

摘 要：目的：通過分析整理近年來國內(nèi)外關(guān)于荷葉的研究成果，對荷葉中生物堿類、黃酮類成分的提取純化工藝做以研究。方法：從化學(xué)成分、提取分離、質(zhì)量評價方法和藥理活性等多個方面對荷葉的研究現(xiàn)狀進(jìn)行了論述。結(jié)果：荷葉中有效成分的提取純化研究、質(zhì)量控制方法的研究和基于主要藥理活性的相關(guān)作用靶點(diǎn)確定等方面的研究都有待于加強(qiáng)，以期對荷葉植物資源進(jìn)行深入研究和合理開發(fā)利用。

關(guān)鍵詞：荷葉；生物堿；提??；純化

荷葉為睡蓮科多年生水生植物蓮（Nelumbo nucifera）的新鮮或干燥葉片，夏、秋二季采收，是一種常見的藥食兩用藥材。荷葉廣泛分布于長江、黃河和珠江三大流域，在我國有著悠久的種植和應(yīng)用歷史。我國歷史上有很多文人雅士寫下了關(guān)于蓮的詩詞，可見中國人對蓮的喜愛。在《神農(nóng)本草經(jīng)》當(dāng)中也有關(guān)于荷葉、蓮子、藕節(jié)、蓮子心、蓮須的記載，其中荷葉的主要活性成分為黃酮類和生物堿類物質(zhì)。隨著現(xiàn)代社會的發(fā)展，對中藥材荷葉的研究也在逐漸深入，荷葉中黃酮類成分多為槲皮素、異槲皮素、山柰酚以及其他苷元的單糖或多糖苷類化合物[1]。荷葉的藥理作用廣泛且毒副作用小，具有較大的研究潛力?，F(xiàn)代研究表明荷葉具有降脂減肥、抗氧化、抗癌和治療心血管疾病等多種生物活性，具有較好的藥用價值[2]。本文作者通過分析整理近年來國內(nèi)外關(guān)于荷葉中生物堿的提取及純化工藝的研究成果，對荷葉中生物堿類、黃酮類成分的相關(guān)研究做以下總結(jié)。

1 化學(xué)成分研究

荷葉中的生物堿研究始于公元十九世紀(jì)，日本科學(xué)家自福田真雄[3]等從荷葉中分離出荷葉堿，O-去甲基荷葉堿以及蓮堿 3個成分以來，荷葉生物堿的提取分離受到越來越多人的關(guān)注。國內(nèi)外學(xué)者先后從荷葉中分離得到二十多種生物堿類成分[4]，主要分為以下幾種：單芐基異喹啉類生物堿 6 種；阿樸啡類生物堿 6 種；氧 化 阿 樸 啡 類 2 種；去氫阿樸啡類生物堿 4 種；原阿樸啡類生物堿以及雙芐基異喹啉類生物堿3種。

2 提取與分離研究

荷葉中生物堿的堿性較弱，不能直接溶于水。目前，從荷葉中提取生物堿的方法主要有酸提堿沉結(jié)合有機(jī)溶劑萃取法、連續(xù)加熱回流提取法、微波提取法、超聲提取法等?，F(xiàn)在的荷葉提取方法被廣泛應(yīng)用于生物堿的提取與分離技術(shù)中，并進(jìn)一步結(jié)合正交設(shè)計的方法優(yōu)化荷葉中生物堿類成分的提取效率。李耀中等[5]采用罐組逆流提取技術(shù)提取荷葉中的生物堿，并使用正交設(shè)計實驗得出荷葉生物堿的最佳提取條件為：80攝氏度，提取25分鐘，固液比例1：50，提取溶劑為75%的乙醇。該方法優(yōu)點(diǎn)在于可以保持固液兩相較高的濃度差，進(jìn)而提高提取效率，縮短提取時間。

3 質(zhì)量評價研究

荷葉中黃酮和生物堿類成分的定量研究以比色法和高效液相色譜法為主要手段，液質(zhì)聯(lián)用法定性定量分析也在逐步推廣使用中。馬亞瓊等[6]研究方法同時鑒別了蓮屬不同組織中的花青素類成分和非花青素類的黃酮成分。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，葉肉、葉脈和葉莖中的黃酮種類一致，但葉肉中的黃酮含量要遠(yuǎn)高于葉脈和葉莖中黃酮含量。葉肉中 3 種主要的槲皮素類糖苷占所有被檢測到的黃酮含量70% 以上。

4 藥理作用

荷葉具有抗氧化、降脂減肥、抗癌、保護(hù)肝臟和心血管等一系列藥理活性已經(jīng)得到專家學(xué)者的證實。其中主要的藥理學(xué)用有？抗氧化活性：荷葉中總生物堿對氧自由基是有清除作用的，荷葉水提液、荷葉醇提液及維生素 C 的抗氧化活性均明顯有效。？抗 HIV 活性 ：去甲烏藥堿和槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷具有抗 HIV 活性。在進(jìn)行構(gòu)效關(guān)系的試驗中發(fā)現(xiàn)3個雙芐基異喹啉類生物堿和1個阿樸菲類生物堿荷葉堿同樣具有抗HIV的活性，這些化合物可作為未來治療 AIDS的潛在前體藥物進(jìn)行進(jìn)一步的研發(fā)。？心血管保護(hù)活性：荷葉中的雙芐基異喹啉類生物堿如蓮心堿，異蓮心堿和甲基蓮心堿，具有十分顯著的抗心律失常作用。4 種藥物及冠動脈結(jié)扎的方法構(gòu)建動物心律失常模型，比較了異蓮心堿和陽性藥物奎尼丁的抗心律失常效果，研究表明異蓮心堿具有顯著的抗各種實驗性心律失常作用，且活性優(yōu)于奎尼丁，其抗心律失常機(jī)制可能與阻滯Ca2 +，Na+電流有關(guān)。

5 討論

隨著現(xiàn)代研究技術(shù)的發(fā)展，關(guān)于這兩類成分的研究也在不斷的深入。降脂減肥是目前荷葉的一類主要臨床應(yīng)用，大量研究數(shù)據(jù)也證明荷葉中黃酮和生物堿類物質(zhì)均具有良好的降脂減肥活性，但這兩類物質(zhì)在荷葉降脂減肥功效中發(fā)揮的作用以及兩類物質(zhì)間是否存在協(xié)同效應(yīng)仍需要進(jìn)一步研究。此外，荷葉中有效成分的提取純化研究，相關(guān)作用靶點(diǎn)的尋找，以及荷葉長期服用的毒副反應(yīng)研究都有待進(jìn)一步加強(qiáng)。從化學(xué)成分、提取分離、質(zhì)量評價方法和藥理活性等多個方面對荷葉的研究現(xiàn)狀進(jìn)行了綜述，希望能為荷葉相關(guān)的研究和生產(chǎn)提供科學(xué)方面的參考。結(jié)合目前研究狀況來看，荷葉中有效成分的提取純化研究、質(zhì)量控制方法的研究和基于主要藥理活性的相關(guān)作用靶點(diǎn)確定等方面的研究都有待于加強(qiáng)，以期對荷葉植物資源進(jìn)行深入研究和合理開發(fā)利用。

參考文獻(xiàn)：

[1]佟文娟， 張社兵，等. 荷葉生物堿下調(diào)THP-1源性巨噬細(xì)胞microRNA-33a-5p的表達(dá)及上調(diào)ABCA1/G1的表達(dá)[J]. 中國動脈硬化雜志， 2016， 24（12）：1219-1223.

[2]沈白， 張社兵，等. 荷葉生物堿對THP-1源性巨噬細(xì)胞CD36及PPARγ表達(dá)的影響[J]. 中國動脈硬化雜志， 2015， 23（8）：784-788.

[3]余里富， 余健. 一種荷葉生物堿提取方法及其應(yīng)用：， CN105395614A[P]. 2016.

[4]陳曦， 戚進(jìn). 荷葉中黃酮和生物堿的研究進(jìn)展[J]. 中國實驗方劑學(xué)雜志， 2015（18）：211-214.

[5]李耀中， 孟祥斌. 荷葉中總黃酮總生物堿及葉重變化規(guī)律的研究[J]. 中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用， 2015， 9（22）：278-279.

[6]馬亞瓊， 趙永強(qiáng)等.蓮屬不同組織中的花青素類成分和非花青素類的黃酮成分：， CN105254563A[P]. 2016.endprint