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    濱州市沾化冬棗核中活性多糖的提取

    2016-12-27 18:10朱華劉香紅趙娜王滕方菁菁
    綠色科技 2016年20期
    關(guān)鍵詞:提取

    朱華+劉香紅+趙娜+王滕+方菁菁

    摘要:利用沾化冬棗核為試驗(yàn)材料,進(jìn)行了冬棗核多糖的提取分離研究。通過(guò)單因素試驗(yàn)確定冬棗核中多糖的含量 ,進(jìn)一步通過(guò)正交試驗(yàn)確定了多糖的較優(yōu)提取條件。結(jié)果表明:各因素對(duì)棗核多糖提取效果的影響程度從高到低依次為浸提溫度>浸提時(shí)間>料液比。綜合考慮提取效果與生產(chǎn)成本,對(duì)提取條件進(jìn)行優(yōu)化,確定了適宜的提取條件:料液比1∶20、浸提溫度90 ℃、浸提時(shí)間4 h。以期為冬棗的綜合加工利用、為從廢棄植物材料中提取生物活性成分提供參考。

    關(guān)鍵詞:冬棗核;活性物質(zhì);提取

    中圖分類號(hào):TS255.4

    文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1674-9944(2016)20-0117-03

    1 引言

    沾化冬棗(Zyzyhpus jujuha dates)是鼠李科棗屬的植物,是一種晚熟、鮮食、優(yōu)質(zhì)棗類種質(zhì)資源[1]。冬棗富含19種人體所需的氨基酸和多種維生素,有很高的食療價(jià)值和多種保健功效[2]。

    目前,多糖廣泛分布于自然界中,有研究顯示具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗衰老、降血糖等多種功效[3]。常見(jiàn)的多糖的提取方法有浸提法、超聲提取法、微波法、超高壓等方法[4],而浸提法又是一種最常見(jiàn)的提取方法。超聲提取法[5,6]和微波提取法[7,8]是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的提取方法,具有選擇性高、能耗低、效率高等優(yōu)點(diǎn),已被廣泛應(yīng)用于多糖的提取。

    對(duì)沾化冬棗的開(kāi)發(fā)利用研究主要集中在冬棗果肉果皮中活性物質(zhì)的提取,但是對(duì)冬棗核活性物質(zhì)的提取沒(méi)有進(jìn)行深入探討。冬棗采后不僅可以鮮食,而且可以用于加工各種飲料,營(yíng)養(yǎng)保健品。但加工過(guò)程中棗核往往被廢棄掉,因此,對(duì)冬棗核中活性物質(zhì)提取的探究,將有助于棗核的開(kāi)發(fā)利用。

    2 材料與方法

    2.1 材料的來(lái)源

    從市場(chǎng)上采購(gòu)濱州沾化冬棗,取出棗核,烘干至恒重后用微型試樣粉碎機(jī)粉粹,過(guò)篩,置于棕色瓶中并低溫保存,備用。

    2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與藥品試劑

    2.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器

    所用實(shí)驗(yàn)儀器如表1所示。

    2.2.2 實(shí)驗(yàn)藥品及試劑

    實(shí)驗(yàn)藥品及試劑葡萄糖,濃硫酸,苯酚,無(wú)水乙醇,氫氧化鈉,乙醚,丙酮,氯仿,30%過(guò)氧化氫。

    2.3 實(shí)驗(yàn)方法

    2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

    采用硫酸——苯酚法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,可以得到回歸方程[5]?;貧w方程為A=0.00927x+0.00353,線性系數(shù)R2=0.99917。

    2.3.2 多糖的提取

    采用微波輔助浸提法提取多糖,每次稱取冬棗棗核粉4 g,按一定的料液比混合成溶液,微波處理后濃縮至原體積的1/4,再經(jīng)過(guò)離心、去雜蛋白、真空干燥、脫色、乙醇沉淀等步驟得到多糖浸提液。研究分熱水浸提法條件優(yōu)化和乙醇沉淀多糖工藝條件優(yōu)化2項(xiàng)試驗(yàn)進(jìn)行。均以棗核多糖的提取率為浸提條件的優(yōu)化指標(biāo),篩選最佳水平的組合。

    2.3.3 多糖含量的測(cè)定

    精密吸取多糖浸提溶液1 mL,置于試管中,加入6%的苯酚1.0 mL,混勻,迅速加入濃硫酸5 mL,混合均勻,靜置10 min,置于沸水浴中加熱25 min,于490 nm處比色法測(cè)定吸光值,將所測(cè)吸光值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線的多糖含量。

    提取率(%)=m2/m1×100;

    m2=CV×10-3

    式中:m1為棗核核粉的質(zhì)量(g),m2為粗多糖的質(zhì)量(g),C為提取液的濃度(mg/L),V為提取液的體積(L)。

    2.3.4 多糖提取的單因素實(shí)驗(yàn)

    采用乙醇水溶液作為浸提溶劑提取棗核中多糖,分別考查時(shí)間、溫度、料液比對(duì)多糖提取率的影響。

    (1)浸提時(shí)間對(duì)多糖得率的影響。

    準(zhǔn)確稱取4 g棗核粉3份,按 1∶15(g/mL)料液比加入60%乙醇溶液于 80℃條件下分別加熱 2、3、4 h,測(cè)定各提取液的吸光度,計(jì)算得出多糖得率。

    (2)溫度對(duì)多糖得率的影響。

    準(zhǔn)確稱取4 g棗核粉3份,按1∶15(g/mL)料液比加入60%乙醇溶液在提取2h的條件下,分別在80℃、90℃和100℃下加熱提取,測(cè)定各提取液的吸光度,計(jì)算得出多糖得率。

    (3) 料液比對(duì)多糖得率的影響。

    準(zhǔn)確稱取4 g棗核粉3份,加入60%乙醇溶液在90℃的條件下提取2 h,分別以1∶10(g/mL)、1∶15(g/mL)和1∶20(g/mL)的料液比,測(cè)定各提取液的吸光度,計(jì)算。

    3 結(jié)果與分析

    3.1 棗核中粗多糖的微波輔助提取工藝工藝單因素試驗(yàn)

    3.1.1 熱水浴時(shí)間對(duì)棗核多糖提取率的影響

    由圖1得對(duì)多糖提取率的影響:固定乙醇60%,料液比1∶15,溫度80 ℃水浴鍋水浴時(shí)間對(duì)提取率的影響較大,有正反兩個(gè)方面的影響,在提取初期,增加熱水浴時(shí)間有利于活性物質(zhì)的提取,當(dāng)熱水浴時(shí)間超過(guò)一定的時(shí)間后,活性物質(zhì)的得率明顯下降,這是由于熱水浴加熱一定時(shí)間內(nèi)對(duì)植物細(xì)胞的破壞有利于植物活性物質(zhì)的溶出,而過(guò)長(zhǎng)時(shí)間使得溶劑的溫度過(guò)高,一部分溶劑被蒸發(fā),導(dǎo)致活性成分的有效成分被破壞,溶質(zhì)濃度過(guò)高不利于傳質(zhì)過(guò)程。

    由圖 1可知,隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng),多糖得率不斷降低,又考慮能源和時(shí)間成本,因此選擇熱水浴時(shí)間為2 h。

    3.1.2 水料比對(duì)棗核多糖提取率的影響

    由圖2得料液比對(duì)多糖提取率的影響:固定乙醇60%,提取溫度90 ℃,提取時(shí)間2 h,經(jīng)實(shí)驗(yàn)得,料液比對(duì)活性物質(zhì)得率有一定的影響,當(dāng)溶劑用量較少時(shí),增加溶劑的量能明顯的提高活性物質(zhì)的得率,而溶劑用量增加到80 mL時(shí)活性物質(zhì)的得率變化不明顯??紤]成本問(wèn)題,料液比選擇1∶15。

    3.1.3 提取溫度對(duì)棗核多糖提取率的影響

    由圖3得對(duì)多糖提取率的影響:固定乙醇60%,料液比1∶15,提取時(shí)間2 h,經(jīng)實(shí)驗(yàn)得,提取溫度對(duì)活性物質(zhì)的得率有一定的影響,隨著提取溫度的升高,多糖得率呈先升高再下降的趨勢(shì)。溫度從80 ℃升高到90 ℃過(guò)程中,多糖得率不斷升高,當(dāng)提取溫度為90 ℃時(shí),多糖得率達(dá)到最高;繼續(xù)升溫,多糖得率略微下降,這可能和多糖遇高溫分解有關(guān)。因此,合理升溫有助于多糖的溶出,故選取90 ℃為適合溫度。

    3.2 多糖進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)

    對(duì)提取時(shí)間、提取溫度和料液比三個(gè)直接因素、三個(gè)水平進(jìn)行分析,以得出最佳提取條件(表2)。

    4 結(jié)論和展望

    4.1 結(jié)論

    相較而言,多糖的提取率較高,因此,選擇多糖進(jìn)行正交試驗(yàn),以探究多糖的最佳提取條件。結(jié)果表明,各因素對(duì)棗核多糖提取效果的影響程度從高到低依次為浸提時(shí)間>浸提溫度>料液比。綜合考慮提取效果與生產(chǎn)成本,對(duì)提取條件進(jìn)行了優(yōu)化,確定了適宜的提取條件為:料液比1∶20、浸提溫度90 ℃、浸提時(shí)間4 h。本研究為開(kāi)發(fā)和利用棗產(chǎn)品加工中的副產(chǎn)品提供了一個(gè)有效的途徑。

    4.2 展望

    本地有著豐富的沾化冬棗資源,充分考慮綜合利用,完善冬棗深加工產(chǎn)品的生產(chǎn)和應(yīng)用技術(shù),深入研究冬棗無(wú)廢棄生產(chǎn),尤其是進(jìn)一步改進(jìn)棗核多糖的提取和精制方法,能夠降低生產(chǎn)成本,提高經(jīng)濟(jì)效益。隨著新技術(shù)的迅速發(fā)展,多糖的價(jià)值逐漸被人們重視。充分利用我國(guó)冬棗核資源,深入研究棗核多糖,加快理論成果轉(zhuǎn)化,實(shí)現(xiàn)資源向產(chǎn)業(yè)化轉(zhuǎn)型,對(duì)推動(dòng)經(jīng)濟(jì)可持續(xù)發(fā)展具有重要的意義。

    參考文獻(xiàn):

    [1]于洪長(zhǎng),高新一.珍惜果品——沾化冬棗[J].植物雜志,1998(3):8~9.

    [2]王存龍,劉華峰,夏學(xué)齊,等.沾化冬棗產(chǎn)地土壤元素分布特征及其對(duì)冬棗品質(zhì)的影響[J].物探與化探,2012,36(4):641~650.

    [3]申利紅,王建森,李 雅,等.植物多糖的研究及應(yīng)用進(jìn)展[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2011,27(2):349~352.

    [4]賈亮亮,袁 丁,何毓敏,等.多糖提取分離及含量測(cè)定的研究進(jìn)展[J].食品研究與開(kāi)發(fā),2011,32(3):189~192.

    [5]魏然,陳義倫,鄒 輝,等.超聲波提取條件對(duì)圓鈴大棗多糖提取率的影響[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2013,39(11):253~257.

    [6]李進(jìn)偉,丁霄霖.超聲波提取金絲小棗多糖的工藝研究[J].林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè),2006,26(3):73~76.

    [7]李新明,張永茂,張俊,等.響應(yīng)面法優(yōu)化紅棗多糖的微波提取工藝研究[J].北方園藝,2011(9):49~52.

    [8]李粉玲,蔡漢權(quán),林澤鋒.橘紅皮多糖的微波提取研究[J].中國(guó)食品添加劑,2010(3):125~130.

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