高效液相色譜法測定復(fù)方鋅布顆粒劑中馬來酸氯苯那敏的含量及含量均勻度

馮璐

（江蘇省泰州市食品藥品檢驗(yàn)所，江蘇 泰州 225300）

·檢驗(yàn)檢測·

高效液相色譜法測定復(fù)方鋅布顆粒劑中馬來酸氯苯那敏的含量及含量均勻度

馮璐

（江蘇省泰州市食品藥品檢驗(yàn)所，江蘇 泰州 225300）

目的 建立測定復(fù)方鋅布顆粒劑中馬來酸氯苯那敏含量及含量均勻度的高效液相色譜（HPLC）法。方法 色譜柱采用 Capcell PAK C18柱（250 mm×4.6 mm，5 m），流動(dòng)相為0.05 mol／L KH2PO4（含0.1%三乙胺，以磷酸調(diào)節(jié) pH至2.5）－乙腈（80∶20），流速為1.0 mL／min，柱溫為35℃，檢測波長為263 nm。結(jié)果 馬來酸氯苯那敏質(zhì)量濃度在0.006 356～0.203 4 g／L（r＝1.000 0）范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，平均回收率為100.17%，RSD為0.97%（n＝9）。結(jié)論 該方法簡便、快捷，可有效、準(zhǔn)確地測定馬來酸氯苯那敏的含量及含量均勻度，可用于復(fù)方鋅布顆粒劑的質(zhì)量控制。

高效液相色譜法；馬來酸氯苯那敏；含量均勻度

復(fù)方鋅布顆粒劑為兒童用感冒藥，用于緩解普通感冒或流行性感冒引發(fā)的發(fā)熱、頭痛、四肢酸痛、鼻塞、流涕、打噴嚏等癥狀[1－2]，主要成分包括葡萄糖酸鋅、布洛芬及馬來酸氯苯那敏。目前，《中國藥典》尚未收載該品種，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)采用紫外－可見分光光度法測定馬來酸氯苯那敏的含量[3]。2015年版《中國藥典（二部）》中收錄的馬來酸氯苯那敏采用高氯酸滴定法測定含量?，F(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中，測定方法涉及使用有毒試劑苯，其具有揮發(fā)性、高毒性與致癌性；藥典中，涉及使用腐蝕性強(qiáng)的高氯酸。試驗(yàn)流程均復(fù)雜，結(jié)果偏差大。此外，復(fù)方鋅布顆粒劑中馬來酸氯苯那敏規(guī)格僅為2 mg，用量極少，不易分散均勻，過量使用可能出現(xiàn)泌尿系統(tǒng)不良反應(yīng)和精神癥狀[4]。馬來酸氯苯那敏存在一定的紫外吸收，參考文獻(xiàn)[5－11]，本研究中通過優(yōu)化色譜條件，采用高效液相色譜法測定馬來酸氯苯那敏的含量及含量均勻度，方法簡便、快速、靈敏度高、誤差小、重復(fù)性好、專屬性強(qiáng)、結(jié)果準(zhǔn)確，可用于該產(chǎn)品的質(zhì)量控制?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Waters e2695／2996型高效液相色譜儀(日本島津公司)；S20型精密pH計(jì)（梅特勒－托利多儀器上海有限公司）；XS105DU型電子天平(梅特勒－托利多公司)。

1.2 試藥

馬來酸氯苯那敏對(duì)照品（中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)為 100047－201507）；乙腈為色譜純（Scharlab S.L.）；水為自制超純水；其余試劑均為分析純；復(fù)方鋅布顆粒劑均為市售品，系7個(gè)廠家共8批次樣品（批號(hào)分別為20160827，20160527，20160219，20160905，20161103，20150106，20150212，20150309），其中葡萄糖酸鋅、布洛芬、馬來酸氯苯那敏的規(guī)格分別為100 mg，150 mg，2 mg。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Capcell PAK C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：0.05 mol／L KH2PO4（含0.1%三乙胺，以磷酸調(diào)節(jié)pH至2.5）－乙腈（80∶20)；流速:1.0 mL／min；柱溫：35℃；檢測波長：263 nm；進(jìn)樣量:20 μL。

2.2 溶液制備

對(duì)照品溶液：取干燥至恒重的馬來酸氯苯那敏對(duì)照品適量，精密稱定，置容量瓶中，加流動(dòng)相適量，使馬來酸氯苯那敏溶解，再用流動(dòng)相稀釋至刻度，得質(zhì)量濃度為1.0 g／L的馬來酸氯苯那敏對(duì)照品貯備液。精密量取1 mL馬來酸氯苯那敏對(duì)照品貯備液，置25 mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得。

供試品溶液：精密稱取供試品適量（約相當(dāng)于馬來酸氯苯那敏2 mg），置50 mL容量瓶中，加入適量流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，混合，搖勻，過濾，取續(xù)濾液，即得。

陰性對(duì)照品溶液：按復(fù)方鋅布顆粒劑的處方，制備缺馬來酸氯苯那敏的樣品，按供試品溶液的制備方法制備成陰性對(duì)照溶液。

2.3 方法學(xué)考察

系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：按擬訂色譜條件，分別精密量取對(duì)照品溶液、供試品溶液以及陰性對(duì)照品溶液各20 μL，注入液相色譜儀，記錄圖譜，見圖1。馬來酸氯苯那敏的保留時(shí)間為9.1min，理論板數(shù)按馬來酸氯苯那敏峰計(jì)為10 000。

圖1 高效液相色譜圖

檢測波長選擇：取馬來酸氯苯那敏對(duì)照品溶液，于200～400 nm波長范圍內(nèi)掃描，結(jié)果在263 nm波長處有最大吸收，詳見圖2。故選擇263 nm作為測定波長。

圖2 馬來酸氯苯那敏紫外掃描圖

線性關(guān)系考察：精密吸取2.2項(xiàng)下對(duì)照品貯備液，制備質(zhì)量濃度為0.006 25，0.0125，0.025，0.05，0.1，0.2 g／L的系列溶液，按擬訂色譜條件測定馬來酸氯苯那敏峰面積，以馬來酸氯苯那敏質(zhì)量濃度（X）為橫坐標(biāo)、峰面積（Y）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程 Y＝2.24×107X－9 401.70，r＝1.000 0(n＝6)。結(jié)果表明，馬來酸氯苯那敏質(zhì)量濃度在0.006 356～0.203 4 g／L范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。詳見圖3。

圖3 馬來酸氯苯那敏標(biāo)準(zhǔn)曲線

精密度試驗(yàn)：取2.2項(xiàng)下對(duì)照品溶液20 μL，連續(xù)進(jìn)樣6次，測得馬來酸氯苯那敏峰面積的 RSD為0.6%（n＝6），表明儀器精密度良好。

重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批供試品（批號(hào)為20160219），按2.2項(xiàng)下方法平行制備6份供試品溶液，依法進(jìn)樣測定。結(jié)果測得馬來酸氯苯那敏的含量為101.2%，RSD為1.5%（n＝6），表明方法重復(fù)性良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，分別于0，2，4，8，16，24 h時(shí)進(jìn)樣測定。結(jié)果峰面積值基本無變化，RSD為0.6%（n＝6），表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

檢測限與定量限測定：取20 μL馬來酸氯苯那敏對(duì)照品溶液注入液相色譜儀，計(jì)算信噪比(S／N)。結(jié)果馬來酸氯苯那敏的檢測限為2.59×10－4g／L（S／N＝3），定量限為9.38×10－4g／L（S／N＝10）。

表1 馬來酸氯苯那敏加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n＝9）

加樣回收試驗(yàn)：精密稱取已知含量的同一批供試品（批號(hào)為20160219）9份，置容量瓶中，分別加入對(duì)照品溶液適量，加入流動(dòng)相定容，過濾，取續(xù)濾液。按擬訂色譜條件進(jìn)樣測定。結(jié)果見表1。

2.4 樣品含量及含量均勻度測定

按2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，依次對(duì)8批次不同廠家不同批號(hào)的樣品進(jìn)行含量均勻度測定。由于藥品生產(chǎn)批號(hào)不同，相關(guān)公式分別參考2010年版《中國藥典》規(guī)定。結(jié)果見表2。

表2 8批樣品含量及含量均勻度測定結(jié)果

3 討論

3.1 流動(dòng)相選擇

嘗試采用不同比例0.05 mol／L KH2PO4－乙腈，最終采用了0.05 mol／L KH2PO4(加入0.1%的三乙胺，再用磷酸調(diào)pH至2.5)－乙腈（80∶20）作為流動(dòng)相，主峰出峰時(shí)間約為9 min，比較合適。曾適當(dāng)增加乙腈，結(jié)果發(fā)現(xiàn)出峰時(shí)間過快，且在使用流動(dòng)相作為溶劑制備供試品溶液時(shí)，可導(dǎo)致乙腈用量偏大，故最終確定比例為80∶20。三乙胺作為一種緩沖鹽和改性劑，可減少樣品中組分的峰拖尾現(xiàn)象，也可改善主峰拖尾的現(xiàn)象。

3.2 含量及含量均勻度測定結(jié)果

復(fù)方鋅布顆粒劑中對(duì)于馬來酸氯苯那敏含量的標(biāo)準(zhǔn)為標(biāo)示量的90.0%～110.0%，結(jié)果表明，此8批樣品測得的平均含量均符合規(guī)定。對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)中并未規(guī)定的含量均勻度，有2批次樣品的結(jié)果都在邊緣，有可能企業(yè)在生產(chǎn)投料過程中的準(zhǔn)確度及混料等過程中有一定問題，建議質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中增加對(duì)馬來酸氯苯那敏含量均勻度的檢查，可在一定程度上反映產(chǎn)品的質(zhì)量。

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Determination of Content and Content Uniformity of Chlorphenamine Maleate in Compound Zinc Gluconate and Ibuprofen Granules by HPLC

Feng Lu
(Taizhou Institute For Food and Drug Control,Taizhou,Jiangsu,China 225300)

Objective To establish an HPLC method for the determination of content and content uniformity of chlorphenamine maleate in Compound Zinc Gluconate and Ibuprofen Granules.Methods The Capcell PAK C18column(250 mm×4.6 mm,5 μm)was adopted,the mobile phase was 0.05 mol／L KH2PO4(containing 0.1% triethylamine three,pH was adjusted to 2.5 by phosphoric acid)－acetonitrile(80∶20),the flow rate was 1.0 mL／min,the column temperature was 35℃,the wavelength was 263 nm.Results There was a good linear relationship within the range of 0.006 356－0.203 4 g／L(r＝1.000 0).The average recovery was 100.17%,RSD was 0.97%(n＝9).Conclusion The method is convenient,rapid,effective and accurate for the determination of content and content uniformity of chlorphenamine maleate,which can be used in the quality control of Compound Zinc Gluconate and Ibuprofen Granules.

HPLC;chlorphenamine maleate;content uniformity

2017－04－10)

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.15.006

馮璐，女，碩士研究生，研究方向?yàn)樗幬锓治觯娮有畔洌﹚uyuyd＠163.com。

R927.2

A

1006－4931(2017)15－0020－03