張京霞 鄭紅琴
(登封市婦幼保健院檢驗科,河南 登封 452470)
不同抗凝劑濃度及最佳抗凝劑不同放置時間對血細胞參數(shù)的影響
張京霞 鄭紅琴
(登封市婦幼保健院檢驗科,河南 登封 452470)
目的:探討不同抗凝劑濃度及最佳抗凝劑不同放置時間對血細胞參數(shù)的影響。方法:選擇2015年12月于我院行健康體檢的35例健康成年人的靜脈血為研究標本,分別制成抗凝濃度為2.4 mg·mL-1、3.6 mg·mL-1、4.8 mg·mL-1的A、B、C三組血液檢測標本。采用全自動血細胞分析儀進行檢測,其中B組放置時間延長至15 min再次檢測。比較三組血細胞參數(shù)變化情況,分析不同放置時間血細胞參數(shù)。結(jié)果:A組、B組、C組以及B組不同放置時間血細胞參數(shù)之間均無明顯差異(P>0.05)。結(jié)論:EDTA-K2濃度在接近標準濃度時,或放置時間在15 min以內(nèi),抗凝劑的使用濃度與放置時間對血細胞參數(shù)均無明顯影響。
抗凝劑;放置時間;血細胞參數(shù)
血液分析是臨床醫(yī)學常規(guī)檢驗項目之一,在評估機體健康狀態(tài)、診斷疾病方面具有重要意義[1]。由于客觀因素的影響,不少患者標本無法得到及時檢查,故臨床普遍應(yīng)用抗凝劑以確保檢驗結(jié)果[2]。乙二胺四乙酸鹽(Ethylene diamine tetraacetie acid,EDTA-K2)是臨床公認為抗凝效果佳、對血細胞參數(shù)影響較小的一種抗凝劑。但抗凝劑濃度及放置時間等因素可能對血細胞檢驗結(jié)果造成不同的影響[3]。因此,本研究采用全血細胞分析儀對EDTA-K2抗凝標本進行檢驗,探討抗凝劑濃度及放置時間對血細胞參數(shù)的影響,現(xiàn)報道如下。
1.1 一般資料
選擇2015年12月于我院行健康體檢者35例,男19例,女16例;年齡20-58歲,平均年齡41.52±3.83歲。所有受檢者均知曉本研究,并自愿接受研究內(nèi)容,均于入組后簽署知情同意書。排除患有影響血液循環(huán)及相關(guān)性疾病者。
1.2 方法
1.2.1 儀器
選用產(chǎn)自日本的希森美康XT-1800血細胞分析儀以及希森美康配套試劑、定標液、質(zhì)控物等。
1.2.2 制備抗凝劑
分別稱量240 mg、360 mg、480 mg EDTA-K2,將不同劑量EDTA-K2各自加至5 mL蒸餾水內(nèi),從而制成濃度為48 mg·mL-1、72 mg·mL-1、96 mg·mL-1的EDTA-K2溶液。所有患者均抽取6 mL靜脈血,分別置入A組、B組、C組試管,各2 mL。三組試管均含有100 μL的EDTA-K2溶液,其中A組試管內(nèi)EDTA-K2濃度為48 mg·mL-1、B組為72 mg·mL-1、C組為96 mg·mL-1,最終A組試管內(nèi)EDTA-K2抗凝濃度為2.4 mg·mL-1、B組為3.6 mg·mL-1、C組為4.8 mg·mL-1。3組標本均放置5 min時采用全血細胞分析儀進行檢測,另選B組標本于放置15 min時再次檢測,詳細記錄測定結(jié)果。
1.3 觀察指標
采用電阻抗法檢測白細胞(White blood cell,WBC)、紅細胞(Red blood cell,RBC)、血紅蛋白(Hemoglobin,HGB)、血小板(Platelet,PLT)、淋巴細胞(Lymphocyte,LYM)等血細胞參數(shù),具體方法如下:采用等滲電解質(zhì)溶液對細胞懸液進行稀釋,后加入不導電容器內(nèi),插入小孔管,小孔管內(nèi)外各有一個電極,接通電源產(chǎn)生穩(wěn)定電流,細胞懸液經(jīng)小孔管外側(cè)流向小孔管內(nèi)部,增高小孔感應(yīng)區(qū)電阻,改變瞬間電壓,產(chǎn)生脈沖信號。脈沖振幅與細胞體積正相關(guān),脈沖數(shù)量則反映細胞數(shù)量,進而獲得血細胞參數(shù)。
1.4 統(tǒng)計學方法
2.1 三組血細胞參數(shù)比較
三組間血細胞參數(shù)相比,無顯著差異(P>0.05),見表1。
2.2B組不同時間血細胞參數(shù)比較
最佳濃度抗凝劑不同時間放置時間血細胞參數(shù)相比,無明顯差異(P>0.05),見表2。
表1 三組血細胞參數(shù)比較
表2 B組不同時間血細胞參數(shù)比較±s)
血液分析作為臨床常規(guī)的一項檢測環(huán)節(jié),其檢測結(jié)果的準確性與患者及時診斷與治療緊密相關(guān)。樣本分析的質(zhì)量把控是減少檢測誤差的重要保證,故如何控制好樣本分析前階段質(zhì)量已成為臨床關(guān)注的重點[4]。EDTA-K2與血液中鈣離子親和力較強,結(jié)合鈣離子后,可經(jīng)膜離子通道到達血小板膜內(nèi),阻止凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶,最終達到血液抗凝的目的[5-6]。本研究即通過觀察EDTA-K2不同濃度及不同放置時間對血細胞參數(shù)的影響,探討檢驗血液指標最佳的抗凝劑濃度及放置時間。
目前,全血分析儀已廣泛應(yīng)用于臨床檢驗血液參數(shù),使血液分析的準確性得到顯著提升。但由于采血過程受護士主觀因素影響,采血量往往控制欠佳,過多的采血量容易導致EDTA-K2比例失調(diào),從而造成血液標本輕微凝血,嚴重者可堵塞分析儀管道或影響檢測結(jié)果的準確性。而采血量過少亦可因血液標本稀釋而降低檢驗結(jié)果準確性[7-8]。本研究中,A組、B組、C組試管分別采用不同濃度抗凝劑,三組間WBC、RBC、HGB、PLT等血細胞參數(shù)均無顯著差異,表明在濃度為1-3 mg·mL-1范圍內(nèi),EDTA-K2濃度的變化對血細胞參數(shù)并無明顯影響。本研究采用電阻抗法檢測血細胞參數(shù),其中PLT與RBC檢測時,二次稀釋檢測樣本后進入檢測單元,形成脈沖信號,而通過小孔的細胞數(shù)與脈沖數(shù)相近,細胞體積與脈沖幅度正相關(guān),故EDTA-K2濃度未低至造成細胞破裂時,PLT與RBC計數(shù)未受影響[9]。因此該法檢測結(jié)果具備良好的準確性,可避免因檢測方法的不同對血細胞水平造成影響。同時,由于血樣本量與抗凝劑相比為40:1,可忽略抗凝劑對血液的稀釋作用。另有研究顯示,EDTA加入血液后,可改變WBC形態(tài),隨著濃度的增加與放置時間的延長,可造成部分中性粒細胞腫脹、崩解,形成碎片。而本研究中不同濃度組間WBC計數(shù)無明顯差異,可能與研究中所采用的EDTA-K2濃度與標準濃度較為接近,且檢測時間較短,WBC的變化尚未顯現(xiàn)。另外,本研究尚對B組進行15 min的檢測,仍未發(fā)現(xiàn)血細胞參數(shù)存在明顯差異。表明在該時間內(nèi),適合檢測血細胞相關(guān)參數(shù)[10]。因此,抗凝劑濃度為2.4 mg·mL-1~4.8mg·mL-1,放置5-15 min時均可準確檢測血液參數(shù),從而獲得相對理想的檢測結(jié)果。由于本研究檢測條件受限,關(guān)于EDTA-K2濃度及放置時間對血細胞參數(shù)的影響仍需深入探討,后期研究中可適當增加抗凝劑濃度范圍,延長放置時間,以進一步完善研究結(jié)果。
綜上所述,EDTA-K2濃度在接近標準濃度時,其濃度的變化對血細胞參數(shù)無明顯影響,同時標準濃度下,放置15 min檢測對血細胞檢測結(jié)果的影響較小。
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Different anticoagulant concentration and anticoagulant effects of different placement time of blood cell parameters
Zhang Jing-xia, Zheng Hong-qin
(Laboratory of Dengfeng Maternal and Child Care Service Centre, Henan Dengfeng 452470)
Objective:To study the different anticoagulant concentration and anticoagulant effects of different placement time of blood cell parameters. Methods: The venous blood in 35 healthy adults in our hospital for health examination of December 2015 as study samples, were made from the anticoagulant concentration of 2.4 mg mL-1, 3.6mg mL-1, 4.8mg mL-1A, B, C three groups of blood samples. Automatic blood cell analyzer was used to detect the B group, and the time was extended to 15 min. The changes of blood cell parameters were compared between the three groups. Results: A group, B group, C group and B group had no significant difference in blood cell parameters (P<0.05). Conclusion: EDTA-K2 concentration towards the standard concentration, or placed in less than 15 min, use of anticoagulant concentration and keeping time on blood cell parameters were not significantly affected.
Anticoagulants; Time; Blood cell parameters
張京霞,女,主管技師,主要從事臨床檢驗工作,Email:dfzhangjingxia@126.com。
2017-3-7)