APOA5基因多態(tài)性與血脂水平及冠心病易感性的研究

張京苗，劉小銳，黃宇玲*

（1.華北理工大學(xué)研究生學(xué)院，河北 唐山 063009；2.河北大學(xué)附屬醫(yī)院胃腸外科，河北 保定 071028；3.華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院心內(nèi)科，河北 唐山 063000）

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APOA5基因多態(tài)性與血脂水平及冠心病易感性的研究

張京苗1，劉小銳2，黃宇玲3*

（1.華北理工大學(xué)研究生學(xué)院，河北 唐山 063009；2.河北大學(xué)附屬醫(yī)院胃腸外科，河北 保定 071028；3.華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院心內(nèi)科，河北 唐山 063000）

目的探究冠心病易感性與載脂蛋白A5（APOA5）基因-1131T＞C以及c.553G＞T多態(tài)性位點(diǎn)基因型間的關(guān)聯(lián)性。方法研究對(duì)象包括165例滿足冠心病患者（冠心病組）和165例健康人（對(duì)照組）。測定兩組受試者APOA5基因-1131T＞C以及c.553G＞T多態(tài)性位點(diǎn)的基因型并計(jì)算相應(yīng)的等位基因型頻率；分析APOA5基因c.553T多態(tài)性基因型頻率與冠心病患者冠狀動(dòng)脈病變程度的關(guān)聯(lián)。結(jié)果冠心病組中APOA5基因-1131多態(tài)性位點(diǎn)CC基因型的空腹血糖濃度水平高于TC基因型。APOA5基因-1131多態(tài)性位點(diǎn)CC基因型的血清中總膽固醇水平高于TT基因型；TC、CC基因型的甘油三酯水平高于TT基因型。冠心病組受試者APOA5基因c.553位點(diǎn)的T等位基因頻率（8.59%）高于正常對(duì)照組；APOA5基因c.553多態(tài)性位點(diǎn)（GT +TT）基因型的甘油三酯水平高于GG基因型。結(jié)論APOA5基因-1131多態(tài)性位點(diǎn)的C等位基因以及c.553多態(tài)性位點(diǎn)的T等位基因與我國漢族人群冠心病患者血清中甘油三脂濃度水平增加具有一定關(guān)聯(lián)性。

APOA5；基因多態(tài)性；血脂水平；冠心?。灰赘行?/p>

載脂蛋白A5（apolipoprotein A5，APOA5）基因在體內(nèi)脂類的轉(zhuǎn)運(yùn)過程中扮演著重要角色。載脂蛋白以及脂蛋白功能出現(xiàn)障礙將會(huì)直接導(dǎo)致血脂的異常[1]，血清中甘油三酯的濃度與載脂蛋白A5基因之間的關(guān)系為負(fù)相關(guān)[2]。APOA5基因的-1131T/C以及c.553G＞T多態(tài)性位點(diǎn)可能與血清中甘油三酯的濃度水平存在關(guān)聯(lián)性[3]。本研究通過比較我國漢族人群中冠心病患者與正常對(duì)照人群之間APOA5基因-1131T/ C以及c.553G＞T多態(tài)性位點(diǎn)的基因型頻率，分析我國漢族人群冠心病易感性與APOA5基因-1131T/C以及c.553G＞T多態(tài)性間的關(guān)聯(lián)性。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

本文研究對(duì)象包括165例滿足世界衛(wèi)生組織制定的冠心病的定義以及診斷標(biāo)準(zhǔn)的冠心病患者（冠心病組），以及165例健康人（對(duì)照組）。

1.2 冠心病的主要相關(guān)因素與指標(biāo)調(diào)查

冠心病的主要相關(guān)因素與指標(biāo)包括糖尿病、高血壓、血清總膽固醇水平、甘油三酯水平、高密度脂蛋白膽固醇以及低密度脂蛋白膽固醇以及吸煙及飲酒情況等。

1.3 APOA5基因-1131T＞C和c.553G＞T多態(tài)性位點(diǎn)的檢測

①-11 3 1 T＞C 的P C R引物序列：正向序列：5’-GATTGATTCAAGATGCATTTAGGAC-3’；反向序列：5’-CCCCAGGAACTGGAGCGAAATT-3’。②c.5 5 3 G＞T的P C R引物序列：正向序列：5’-AGACACCAAGGCCCAGTTGCTGGG-3’；反向序列：5’-ATGCCGCTCACCAGGCTCTCGGCG-3’。③PCR反應(yīng)在PCR熱循環(huán)以上進(jìn)行，反應(yīng)體系保持于37℃的水浴過夜后將產(chǎn)物進(jìn)行經(jīng)瓊脂糖（濃度為3%）凝膠電泳，電壓為90V，時(shí)間為60min，電泳結(jié)束后采用紫外光凝膠成像系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

兩組受試者中等位基因頻率是否滿足群體代表性通過Hardy-Weinberg平衡來檢驗(yàn)；數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)分析軟件處理，采用方差分析計(jì)量數(shù)據(jù)，P＜0.05代表差異有意義。

2 結(jié) 果

2.1 冠心病組中APOA5基因c.553G＞T多態(tài)性位點(diǎn)各基因型中的血糖及血脂水平情況

冠心病組中APOA5基因c.553多態(tài)性位點(diǎn)GG基因型的空腹血糖濃度水平與（GT +TT）基因型不存在顯著差異（P＞0.05）。APOA5基因c.553多態(tài)性位點(diǎn)（GT +TT）基因型的甘油三酯水平高于GG基因型（P＜0.05）；GG基因型與（GT +TT）基因型在血清中總膽固醇水平、高密度脂蛋白膽固醇以及低密度脂蛋白膽固醇水平上不存在顯著差異（P＞0.05），見表1。

表1 GG基因型與（GT +TT）基因型中血糖及血脂水平比較

2.2 APOA5基因c.553T多態(tài)性基因型頻率與冠心病患者冠狀動(dòng)脈病變程度的關(guān)聯(lián)

冠心病患者GG基因型中發(fā)生單支病變、雙支病變以及三支病變的患者分別為68例、31例以及36例，（GT +TT）基因型中發(fā)生單支病變、雙支病變以及三支病變的患者分別為10例、8例以及9例，兩組基因型之前不存顯著差異（P＞0.05），見表2。

表2 基因型頻率與冠心病患者冠狀動(dòng)脈病變程度的關(guān)聯(lián)

3 討 論

APOA5基因位于染色體11q23位置，包含四個(gè)外顯子以及三個(gè)內(nèi)含子，全長約為1889bp，編碼氨基酸366個(gè)[4]。冠心病組受試者APOA5基因-1131位點(diǎn)的C等位基因頻率（36.06%）高于正常對(duì)照組（26.06%）。-1131位點(diǎn)位于APOA5基因的啟動(dòng)區(qū)，故而其對(duì)APOA5基因表達(dá)的影響可能是通過影響轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合而產(chǎn)生進(jìn)而對(duì)血漿中甘油三酯濃度水平造成影響而產(chǎn)生的[5]。-1131 T＞C多態(tài)性位點(diǎn)處在APOA5基因轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游600bp左右的位置，增強(qiáng)子等順勢作用元件可能處于該區(qū)域，-1131 T＞C多態(tài)性可能通過影響啟動(dòng)子區(qū)的蛋白因子以及增強(qiáng)子等順勢作用元件之間的相互作用進(jìn)而對(duì)啟動(dòng)子的起始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生影響，最終導(dǎo)致改變APOA5基因的表達(dá)水平發(fā)生變化，根據(jù)本研究結(jié)果可以推斷-1131位點(diǎn)的CC基因型可能增加冠心病的患病風(fēng)險(xiǎn)。

冠心病組受試者APOA5基因c.553位點(diǎn)的T等位基因頻率（8.59%）高于正常對(duì)照組（3.33%）。c.553位于APOA5基因的編碼區(qū)，該位點(diǎn)基因型的變化可能導(dǎo)致使其編碼氨基酸發(fā)生變化，進(jìn)而對(duì)APOA5基因編碼的蛋白結(jié)構(gòu)與功能產(chǎn)生影響。APOA5基因-1131多態(tài)性位點(diǎn)的C等位基因以及c.553多態(tài)性位點(diǎn)的T等位基因與冠心病患者血清中甘油三脂濃度水平增加具有一定關(guān)聯(lián)性。此外，本研究中未發(fā)現(xiàn)血管病變支數(shù)與c.553T多態(tài)性位點(diǎn)的T等位基因之間的關(guān)聯(lián)性。

[1] 曲凌光,尚佳,魏述軍,等.回族和漢族冠心病患者發(fā)病影響因素及冠狀動(dòng)脈病變特點(diǎn)對(duì)比研究[J].中國全科醫(yī)學(xué),2013,16 (2):505-507.

[2] 徐莉,何濤.山東地區(qū)漢族人載脂蛋白A5 SNP3基因多態(tài)性與冠心病的關(guān)系[J].山東醫(yī)藥,2008,48( 46):1-3.

[3] 李向平,趙水平,轟賽.載脂蛋白A5-1131T＞C基因多態(tài)性與冠心病的關(guān)系[J].中國循環(huán)雜志,2007,22(1):4-8.

[4] Wong WM, Hawe E, Li LK, et al.Apolipoprotein AIV gene variant S347 is associated with increased risk of coronary heart disease and lower plasm a apolipoprotein AIV levels [J].Circ Res, 2003,92(9):969-975.

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本文編輯：李新剛

Association between Polymorphism of APOA5 Gene and Serum Lipids and Coronary Heart Disease

ZHANG Jing-miao1, LIU Xiao-rui2, HUANG Yu-ling3
(1.Faculty of Graduate Studies, North China University of Science and Technology, Hebei Tangshan 063009, China; 2.Department of Gastrointestinal surgery, Affiliated Hospital of Hebei University, Hebei Baoding 063000, China; 3.Internal Medicine-Cardiovascular Department, Affiliated Hospital of North China University of science and technology, Hebei Tangshan 063000, China)

ObjectiveTo investigate the association between susceptibility to coronary artery disease (CHD) and apolipoprotein A5 (APOA5) gene,-1131T＞C and c.553G＞T polymorphism loci.MethodsThe subjects included 165 patients with coronary artery disease (CHD group) and 165 healthy subjects (control group).Genotype of APOA5 gene,-1131T＞C and c.553G＞T polymorphism loci were measured in two groups of subjects and the corresponding allele frequencies were calculated.To analyze the association between the genotype frequency of APOA5 gene and the severity of coronary artery disease in patients with coronary heart disease (CHD) c.553T.ResultsThe fasting glucose concentration of APOA5 genotype,-1131 polymorphism and CC genotype in CHD group was higher than that in TC genotype.The total cholesterol level in the CC genotype of the-1131 genotype of APOA5 gene was higher than that in the TT genotype.The triglyceride levels of TC and CC genotypes were higher than those of TT genotype.The T allele frequency of APOA5 gene c.553 in CHD group was higher than that in normal control group (8.59%).The triglyceride level of the c.553 polymorphism (GT, +TT) genotype of the APOA5 gene is higher than that of the GG genotype.ConclusionThe C allele of the-1131 polymorphism of APOA5 gene and the T allele of the c.553 polymorphism site are related to the increase of serum glycerol three lipid concentration in patients with coronary heart disease (CHD) in Han population in china.

APOA5; gene polymorphism; Blood lipid levels; Coronary heart disease; Susceptibility

R541.4

A

ISSN.2095-8242.2017.026.4951.02

黃宇玲，E-mail：huangyulingts@126.com