雍 燕 , 方炳虎 , 劉國昌 , 謝郁超 , 喬妍紅 , 溫敏捷
(1.廣東溫氏大華農(nóng)生物科技有限公司 , 廣東云浮527400 ; 2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院 , 廣東廣州510642)
幾種中藥復(fù)方制劑對(duì)鴨傳染性漿膜炎的防治效果觀察
雍 燕1, 方炳虎2, 劉國昌1, 謝郁超2, 喬妍紅1, 溫敏捷1
(1.廣東溫氏大華農(nóng)生物科技有限公司 , 廣東云浮527400 ; 2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院 , 廣東廣州510642)
鴨傳染性漿膜炎是由鴨疫里默菌(Riemerellaanatipestifer,RA)引起的一種主要侵害雛鴨、鵝等多種禽類的急性或慢性、敗血性、接觸性傳染病。該病多發(fā)于1~8 周齡的雛鴨,廣泛分布于世界各養(yǎng)鴨國家,臨床癥狀主要表現(xiàn)為頭頸歪斜、癱瘓、角弓反張、綠色下痢,剖檢主要以纖維素性心包炎、肝周炎、氣囊炎、腦膜炎等為特征,與大腸桿菌病的典型區(qū)別在于肝周包膜易剝離,且大腸桿菌病患鴨在剖檢時(shí)非常臭。該病死亡率較高,可達(dá)10%~90%,耐過鴨生長性能、飼料報(bào)酬低下,已成為我國乃至世界養(yǎng)鴨業(yè)危害最嚴(yán)重的疾病之一。
鴨疫里默菌血清型眾多,目前為止,世界上報(bào)道的公認(rèn)的血清型共有21 個(gè),即血清1~21型。據(jù)報(bào)道我國至少存在1、2、5、6、10、11、13和14等多個(gè)血清型,其中以1、2、10型為主型[1-2]。鴨疫里默菌不同血清型之間無交叉保護(hù),而且同一地區(qū)不同養(yǎng)殖場的主要血清型差異較大[3],這給疫苗的研制和使用帶來極大的困難,因此疫苗也很難在鴨傳染性漿膜炎的預(yù)防中發(fā)揮理想作用。長期以來,臨床上主要靠化學(xué)藥物預(yù)防和治療鴨傳染性漿膜炎,但長期不正確的使用化學(xué)藥物導(dǎo)致鴨疫里默菌對(duì)越來越多的藥物表現(xiàn)出不同程度的耐藥。面對(duì)如此嚴(yán)峻的形勢(shì),采用中藥來預(yù)防鴨傳染性漿膜炎將是鴨病防治的新方向。本試驗(yàn)中,選用3個(gè)不同的中藥復(fù)方制劑,通過人工感染鴨疫里默菌,考察其對(duì)鴨傳染性漿膜炎的防治效果,以期為臨床上對(duì)該病的防治提供正確的指導(dǎo)。
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 健康2 日齡雛番鴨共410 只,購自廣東溫氏食品集團(tuán)股份有限公司。
1.2 試驗(yàn)藥品 鴨為先,主要成分為蒼術(shù)、甘草、白術(shù)、金銀花、楊樹花等,由廣東溫氏大華農(nóng)生物科技有限公司生產(chǎn);清瘟解毒口服液,主要成分為地黃、梔子、黃芩、板藍(lán)根等,由廣東溫氏大華農(nóng)生物科技有限公司生產(chǎn);金葉清瘟散,主要成分為金銀花、大青葉、蒲公英、板藍(lán)根等,由本研究室按照獸藥國家標(biāo)準(zhǔn)制備;大華農(nóng)氟爾欣,通用名為20% 氟苯尼考可溶性粉,由廣東溫氏大華農(nóng)生物科技有限公司生產(chǎn)。
1.3 試驗(yàn)細(xì)菌 為前期從臨床發(fā)病鴨腦中分離并鑒定為鴨疫里默菌的菌株,細(xì)菌分離鑒定見參考文獻(xiàn)[4]。
1.4 鴨疫里默菌半數(shù)致死量(LD50)的測(cè)定 取前期從臨床上分離并鑒定為鴨疫里默菌的細(xì)菌凍存液,先用TSA培養(yǎng)基(含5%胎牛血清)涂板復(fù)蘇培養(yǎng)后,挑取典型的菌落接種于TSB(含5%胎牛血清)肉湯中,37 ℃搖床培養(yǎng)16~18 h后,離心取菌體,再用生理鹽水制成5麥?zhǔn)蠞岫鹊木鷳乙海? ℃保存?zhèn)溆?,臨用前用生理鹽水分別稀釋成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5的菌懸液。健康15 日齡雛番鴨共50 只,平均分成5 組,每組分別注射不同稀釋倍數(shù)的菌懸液0.2 mL,觀察5 d并記錄各組的死亡情況,計(jì)算鴨疫里默菌的LD50。
1.5 防治試驗(yàn)方法 健康2 日齡雛番鴨共360 只,購回后于實(shí)驗(yàn)條件下飼養(yǎng)1 周,隨機(jī)分為6 組,每組60 只。空白對(duì)照組不進(jìn)行任何藥物防治;陽性對(duì)照組人工感染細(xì)菌,不用藥物進(jìn)行防治;各試驗(yàn)組在人工感染細(xì)菌前一周按不同的給藥方案給予不同的藥物,見表1。
人工感染細(xì)菌方法:各試驗(yàn)組與陽性對(duì)照組所有鴨腿部肌肉注射0.2 mL半數(shù)致死量的菌懸液,空白對(duì)照組注射0.2 mL生理鹽水。
感染細(xì)菌后,觀察并記錄各組試驗(yàn)動(dòng)物的發(fā)病情況。
發(fā)病判定:試驗(yàn)鴨出現(xiàn)食欲減退、精神沉郁、口鼻有分泌物、綠色下痢、頭頸歪斜、角弓反張等鴨傳染性漿膜炎典型癥狀。
表1 幾種藥物防治鴨傳染性漿膜炎的試驗(yàn)處理方法
2.1 鴨疫里默菌的半數(shù)致死量(LD50) 根據(jù)Reed和Muench法計(jì)算鴨疫里默菌的半數(shù)致死量LD50為10-2.2。故在進(jìn)行防治試驗(yàn)中,細(xì)菌制成5 麥?zhǔn)系木鷳乙海♂尦?0-2的菌懸液后,再進(jìn)行注射。
2.2 不同藥物對(duì)鴨傳染性漿膜炎的防治效果 陽性對(duì)照組鴨發(fā)病很急,在人工感染細(xì)菌后24 h,大部分發(fā)病,表現(xiàn)典型的鴨傳染性漿膜炎癥狀,并出現(xiàn)死亡。各給藥組的鴨發(fā)病較緩,3個(gè)中藥復(fù)方制劑組的鴨在人工感染細(xì)菌后36 h左右出現(xiàn)少量發(fā)病,48 h左右為發(fā)病高峰期,3 d后基本無新病例增加。大華農(nóng)氟爾欣組的發(fā)病高峰期在人工感染細(xì)菌后36 h左右,之后陸續(xù)有新增病例,5 d后無新增病例??瞻讓?duì)照組無發(fā)病。各組的發(fā)病和死亡情況見表2。
表2 各組試驗(yàn)動(dòng)物的發(fā)病與死亡情況
陽性對(duì)照組幾乎全部發(fā)病,可見人工感染的臨床分離菌具有很強(qiáng)的致病性,感染率高達(dá)96.67%,致死率可達(dá)75.00%。試驗(yàn)中選用的不同藥物均有較明顯的防治效果,各試驗(yàn)組的發(fā)病率與死亡率均明顯低于陽性對(duì)照組。由表2 可見,3種中藥復(fù)方制劑對(duì)鴨傳染性漿膜炎的防治效果均優(yōu)于目前臨床廣泛使用的氟苯尼考,其中鴨為先與清瘟解毒口服液的效果相當(dāng),可大大降低鴨傳染性漿膜炎的發(fā)病率與死亡率。
目前臨床上廣泛使用氟苯尼考、阿莫西林等化學(xué)藥物防治鴨傳染性漿膜炎,但化學(xué)藥物都是通過不同的殺菌或抑菌機(jī)制來控制疾病,即化學(xué)藥物重在疾病發(fā)生后的治療,而非發(fā)病前的預(yù)防。由于采用化學(xué)藥物預(yù)防疾病很難掌握正確的時(shí)機(jī),有些養(yǎng)鴨戶為了提高經(jīng)濟(jì)效益,通過長期添加化學(xué)藥物來預(yù)防鴨傳染性漿膜炎。長時(shí)間通過飼料或飲水添加化學(xué)藥物預(yù)防疾病,將會(huì)帶來一系列嚴(yán)重的后果,如藥物殘留于動(dòng)物性食品中,耐藥性的產(chǎn)生等。中藥防治鴨傳染性漿膜炎的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)日益凸顯,越來越多的研究表明,中藥對(duì)于鴨傳染性漿膜炎的防治有顯著效果[5-7],也有研究提出,中西結(jié)合將是今后臨床防治鴨傳染性漿膜炎的重要方向[8]。
中醫(yī)認(rèn)為鴨疫里默菌由衛(wèi)表侵入皮膚,如外衛(wèi)不固下陷進(jìn)入腠理進(jìn)入營血,再進(jìn)入臟腑及其他器官并在其中繁殖,機(jī)體正邪相搏,正固邪虛則為隱性,邪實(shí)正弱,正不抗邪,于是某臟腑失職造成病癥[9]。另有試驗(yàn)表明,多種中藥浸出液對(duì)鴨疫里默菌有較強(qiáng)的抑制作用,如黃連、大黃、黃柏、板藍(lán)根、石榴皮、薄公英等[10]。
本試驗(yàn)中選用的3種中藥復(fù)方制劑為清熱解毒、扶正祛邪的方劑。在細(xì)菌感染前通過混飼給藥,可以提高機(jī)體對(duì)外來病原的抵抗力。在細(xì)菌侵入機(jī)體后,這些中藥中的抗菌成分也發(fā)揮其效用而殺滅細(xì)菌或抑制其快速繁殖。試驗(yàn)結(jié)果表明,使用中藥復(fù)方制劑的3組試驗(yàn)動(dòng)物發(fā)病較晚,癥狀較輕,發(fā)病率和死亡率明顯低于陽性對(duì)照組,其防治效果也優(yōu)于氟苯尼考。同時(shí)由于發(fā)病晚,病情輕,臨床上可及時(shí)采取正確的治療措施,從而提高治愈率,減少經(jīng)濟(jì)損失。建議在鴨傳染性漿膜炎高發(fā)期,選用清瘟解毒口服液250 mL兌水150 kg,連用7 d,或者鴨為先100 g拌料40 kg,連用7 d進(jìn)行預(yù)防,可有效減少鴨傳染性漿膜炎的發(fā)生。
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2016-09-20
雍燕(1988-),女,碩士,主要從事動(dòng)物用化學(xué)藥物和中藥新制劑的研發(fā)工作,E-mail:xiaoyner@126.com
S858.32
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0529-6005(2017)07-0052-02