HIV-1始祖病毒Vpu和Vif拮抗宿主限制因子的能力

黃宇明，趙建元，岑山，魏濤

HIV-1始祖病毒Vpu和Vif拮抗宿主限制因子的能力

黃宇明*，趙建元*，岑山，魏濤

目的研究始祖病毒的生物學(xué)和早期進(jìn)化特征，有助于闡明HIV-1 建立感染的關(guān)鍵因素。

方法以過表達(dá)的方法比較了始祖病毒和同一亞型的慢性感染病毒 Vpu 蛋白降解宿主限制因子 BST-2 的能力，利用流式細(xì)胞術(shù)檢測兩者對內(nèi)源性 BST-2 細(xì)胞表面水平的影響。利用已構(gòu)建的含熒光素酶報(bào)告基因的單循環(huán)感染始祖病毒表達(dá)質(zhì)粒，比較了始祖病毒與同一亞型的慢性感染株下調(diào)BST-2 的能力。用過表達(dá)的方法檢測了 Vif 蛋白拮抗宿主限制因子 hA3G 的能力。

結(jié)果對過表達(dá)以及細(xì)胞表面內(nèi)源性 BST-2，始祖病毒Vpu 蛋白降解宿主限制因子 BST-2 的能力均顯著高于同一亞型的慢性感染病毒。但在始祖病毒拮抗 BST-2 抗病毒活性的能力分析中，盡管始祖病毒 Vpu 表現(xiàn)出較強(qiáng)的下調(diào)BST-2 的能力，仍然不足以拮抗外源過量表達(dá)的 BST-2 的抗病毒活性。在 Vif 降解 hA3G 的實(shí)驗(yàn)中，始祖病毒 Vif降解 hA3G 的能力弱于慢性感染病毒 pMJ4 或與之類似。

結(jié)論始祖病毒具有更高的拮抗宿主天然免疫的能力，有助于其建立早期感染。

vpu 基因產(chǎn)物，人免疫缺陷病毒； vif 基因產(chǎn)物，人免疫缺陷病毒； HIV-1 始祖病毒

www.cmbp.net.cn 中國醫(yī)藥生物技術(shù), 2017, 12(4):303-309

艾滋病（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS）是由人免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染所導(dǎo)致[1]。根據(jù)血清學(xué)反應(yīng)和病毒核酸序列測定可分為 HIV-1 和HIV-2 兩種亞型。HIV-1 在感染人數(shù)上占有絕對優(yōu)勢，是引起艾滋病全球流行的主要亞型。HIV-1 基因組由兩條單股正鏈 RNA 組成，每個基因組長度約為 9.8 kb，結(jié)構(gòu)上包括 LTR、結(jié)構(gòu)蛋白編碼區(qū)（gag）、多種酶活性的蛋白編碼區(qū)（pol）、外膜蛋白編碼區(qū)（env）以及 6 個調(diào)節(jié)基因（vif、vpr、rev、vpu、tat和nef）。HIV-1 調(diào)節(jié)基因編碼的輔助蛋白在病毒的生活周期中起到至關(guān)重要的作用，特別是在拮抗宿主限制因子的抑制作用，保證病毒逃避宿主天然免疫的過程中發(fā)揮重要生物學(xué)功能[2]。

在生物進(jìn)化的漫長過程中，宿主細(xì)胞會形成針對 HIV-1 的固有免疫體系，其中最有代表性的是 HIV-1 宿主限制因子載脂蛋白 B mRNA 編輯酶催化多肽 3G（human protein apoliprotein B mRNA-editing enzyme-catalytic polypeptide-like-3G，hA3G）和病毒蛋白骨髓基質(zhì)細(xì)胞抗原 2（bone marrow stromal cell antigen 2，BST-2，又名Tetherin/HM1.24/CD317）。hA3G 是在人的淋巴細(xì)胞中表達(dá)的一種 RNA/DNA 編輯酶，歸屬于APOBEC 蛋白超家族。hA3G 可以將病毒的單鏈DNA 上的脫氧胞嘧啶殘基脫氨形成脫氧尿嘧啶，導(dǎo)致 HIV-1 病毒基因組的 GA 超突變，從而高效抑制病毒的復(fù)制，或通過非脫氨基抗病毒機(jī)制特異性地抑制病毒逆轉(zhuǎn)錄。BST-2 屬 II 型單跨膜整合膜蛋白[3-4]，可以阻止新生的成熟 HIV-1 病毒從細(xì)胞膜表面釋放。作為病毒的拮抗手段，HIV-1 的 Vif蛋白可以特異性地結(jié)合 hA3G，通過泛素介導(dǎo)的蛋白酶體降解途徑降解 hA3G，從而阻斷了宿主細(xì)胞hA3G 抗病毒系統(tǒng)對 HIV-1 病毒復(fù)制的抑制作用。與之類似，HIV-1 Vpu 特異性地結(jié)合 BST-2，通過泛素化介導(dǎo)的溶酶體降解途徑，下調(diào)細(xì)胞表面的 BST-2，提高病毒釋放[5]。

在 HIV-1 黏膜傳播過程中，病毒的遺傳多樣性是顯著減少的，表現(xiàn)出嚴(yán)重的“遺傳瓶頸”效應(yīng)和有限的早期進(jìn)化。研究發(fā)現(xiàn)，只有少數(shù)的一株或幾株 HIV-1 病毒可以建立有效感染，這種病毒被稱為始祖病毒（transmitted/founder virus）[6]。研究始祖病毒的生物學(xué)和早期進(jìn)化特征，有助于闡明HIV-1 建立感染的關(guān)鍵因素。目前，對始祖病毒的研究多側(cè)重于包膜蛋白的進(jìn)化特征[7-8]。始祖病毒是否在拮抗宿主限制因子能力上具有一定的優(yōu)勢，并進(jìn)而協(xié)助其建立感染，目前尚未報(bào)道。在本研究中，我們比較了始祖病毒和慢性感染病毒的 Vpu 和Vif 拮抗 BST-2 和 hA3G 的能力，發(fā)現(xiàn)始祖病毒Vpu 蛋白降解宿主限制因子 BST-2 的能力顯著高于同一亞型的慢性感染病毒。這一結(jié)果提示始祖病毒具有更高的拮抗宿主天然免疫的能力，有助于其建立早期感染。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 細(xì)胞株 人胚腎上皮細(xì)胞 HEK293T 和人宮頸癌細(xì)胞 HeLa 均為本實(shí)驗(yàn)室自有，用含 10%FBS 的 DMEM 培養(yǎng)基傳代培養(yǎng)。人 T 淋巴細(xì)胞SupT1 用含 10% FBS 的 RPMI1640 培養(yǎng)基傳代培養(yǎng)。

1.1.2 質(zhì)粒 pZM246F-10 和 pZM247Fv1 為編碼 C 亞型 HIV-1 始祖病毒基因組的質(zhì)粒，由美國國立衛(wèi)生研究院（NIH）惠贈；pIndie-C1 質(zhì)粒由加拿大麥吉爾大學(xué)梁臣教授惠贈；含熒光素酶報(bào)告基因的單循環(huán)感染質(zhì)粒 pIndie-C1(Luc)、pZM246(Luc) 和 pZM247(Luc) 為本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建；pcDNA4TM/TO/myc-His B 表達(dá)載體購自美國Invitrogen 公司；質(zhì)粒 pcDNA3.1 購自美國 Life Technologies 公司；表達(dá) C 端含有 HA 標(biāo)簽BST-2 的質(zhì)粒 pcDNA-BST-2 由美國 Paul D Bieniasz 教授提供；pNL-Luc-E-、pHCMV-G（VSV-G）和 pcDNA-hA3G-HA 為本實(shí)驗(yàn)室保存；pMJ4-Vpu 和 pMJ4-Vif 是根據(jù) pMJ4 的全基因序列，由蘇州金唯智生物科技有限公司合成。

1.1.3 試劑 DMEM、RPMI1640 培養(yǎng)基和胎牛血清（FBS）購自美國 Gibco 公司；含 EDTA 的0.25% 胰酶購自美國 Hyclone 公司；限制性內(nèi)切酶和 T4 DNA 連接酶購自日本 Takara 公司；PCR擴(kuò)增酶 Easypfu PCR SuperMix、DNA 分子量marker、大腸桿菌感受態(tài) DH5α 購自北京全式金生物技術(shù)有限公司；PVDF 膜、0.22 μm 濾膜購自美國 Millipore 公司；5 × 蛋白上樣緩沖液、脫脂奶粉購自北京普利萊基因技術(shù)有限公司；DNA 轉(zhuǎn)染試劑 Lipofectamine2000 購自美國 Invitrogen 公司；HA-probe 鼠單克隆抗體（sc-7392）購自美國Santa Cruz 公司；Anti-c-myc 兔單克隆抗體購自美國 Sigma 公司；Vif 抗體（#2221）由 NIH AIDS research and reference reagent program 提供；β-actin鼠單克隆抗體購自英國 Abcam 公司；HRP 標(biāo)記山羊抗兔抗體和 HRP 標(biāo)記山羊抗小鼠抗體均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司；熒光二抗 Infrared IRDye?labeled secondary antibodies（LI-COR）驢抗兔或抗小鼠購自香港基因有限公司。

1.2 方法

1.2.1Vpu和Vif表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建 以始祖病毒株 ZM246F-10 和 ZM247Fv1 的基因組為模板，利用 PCR 擴(kuò)增Vpu基因片段并連接到pcDNA4TM/TO/myc-His B 表達(dá)載體，得到帶有c-myc-標(biāo)簽的Vpu表達(dá)質(zhì)粒 pZM246-Vpu、pZM247FV1-Vpu，并通過測序驗(yàn)證。Vpu基因擴(kuò)增引物序列：

同Vpu的構(gòu)建方法類似，Vif基因擴(kuò)增引物：

pZM247-Vif 基因擴(kuò)增引物序列同 pZM246-Vif相同。

1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染 HEK293T 和 HeLa 細(xì)胞培養(yǎng)于含 10% FBS 的 DMEM 培養(yǎng)基中，分別采用 Lipofectamine2000 和 Transeasy，按產(chǎn)品說明書方法轉(zhuǎn)染相應(yīng)的表達(dá)質(zhì)粒。

1.2.3 Western blot 檢測 轉(zhuǎn)染 48 h 后收獲細(xì)胞，加入 RIPA 裂解細(xì)胞，然后加入蛋白上樣緩沖液。樣品經(jīng)聚丙烯酰胺蛋白電泳分離和轉(zhuǎn)膜后，先后加入一抗 anti-c-myc（1∶3000）、β-actin（1∶5000）、anti-Vif（1∶5000）。二抗為山羊抗兔或山羊抗小鼠IgG（1∶5000），進(jìn)行 Western blot 分析。

1.2.4 流式細(xì)胞儀分析 細(xì)胞經(jīng)含 2% BSA 的PBS 清洗，用 70% 乙醇 4 ℃ 固定 24 h 以上。加入 anti-myc-（1∶800）或 anti-BST-2（1∶800），冰上孵育 60 min。PBS 清洗細(xì)胞后，加入 FITC 標(biāo)記山羊抗兔抗體（1∶200）或 TRITC 標(biāo)記山羊抗鼠抗體（1∶200），然后用流式細(xì)胞儀檢測。

1.2.5 近紅外雙激光成像系統(tǒng)分析 蛋白樣品經(jīng)SDS-PAGE 分離并轉(zhuǎn)膜，先后與一抗和二抗孵育。一抗使用 myc-Vpu（1∶5000）、HA-BST-2（1∶5000）、β-actin（1∶5000）。熒光二抗使用驢抗兔（1:10000）、驢抗小鼠（1∶10000）抗體。應(yīng)用近紅外雙色激光成像系統(tǒng)檢測。

1.2.6 HIV-1 始祖病毒 Vpu 蛋白下調(diào)細(xì)胞表面內(nèi)源性 BST-2 的能力 首先用 200、400 和 800 ng的 pMJ4-Vpu、pZM246-Vpu 和 pZM247-Vpu 轉(zhuǎn)染內(nèi)源性表達(dá) BST-2 的 HeLa 細(xì)胞。48 h 后收取樣品，用 FACS 測定細(xì)胞表面的 BST-2 水平。

1.2.7 HIV-1 始祖病毒下調(diào) BST-2 的能力分析 HEK293T 細(xì)胞通過共轉(zhuǎn)染始祖病毒pZM246(Luc) 或 pZM247(Luc) 以及 VSV-G 質(zhì)粒，同時在對照組中共轉(zhuǎn)染 pIndie-C1(Luc) 和VSV-G。轉(zhuǎn)染 48 h 后，收集細(xì)胞培養(yǎng)上清中的假型始祖病毒和慢性感染病毒，并以等量病毒（同一p24 水平）感染 HeLa 細(xì)胞。利用 Western blot 測定感染細(xì)胞中 BST-2 水平。

1.2.8 HIV-1 始祖病毒拮抗 BST-2 抗病毒活性的能力分析 HEK293T 細(xì)胞中共表達(dá)單循環(huán)感染的始祖病毒或慢性感染病毒表達(dá)載體和 VSV-G表達(dá)質(zhì)粒，同時轉(zhuǎn)染梯度增加（50、100 和 300 ng）的 BST-2 表達(dá)質(zhì)粒。然后，應(yīng)用等體積的含假型病毒細(xì)胞上清感染 SupT1 細(xì)胞，測定感染細(xì)胞中假型病毒報(bào)告基因熒光素酶的活性，分析不同表達(dá)水平 BST-2 對病毒感染性的影響。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用±s表示，顯著性分析采用excel 軟件中的數(shù)據(jù)分析工具進(jìn)行t檢驗(yàn)，所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù) n ≥ 3。

2 結(jié)果

2.1 HIV-1 始祖病毒 Vpu 蛋白下調(diào) BST-2 的活性研究

我們首先分別以慢性感染病毒 pMJ4、始祖病毒 pZM246 和 pZM247 為模板，構(gòu)建了相應(yīng)的Vpu 表達(dá)載體 pMJ4-Vpu、pZM246-Vpu 和pZM247-Vpu。然后，分別將不同量的 Vpu 表達(dá)質(zhì)粒與 BST-2 表達(dá)質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染 293T 細(xì)胞，通過Western blot（圖 1A 和 1C）和近紅外雙色激光成像定量（圖 1B和 1D）兩種手段，研究不同 Vpu 對外源表達(dá)的 BST-2 水平的影響。結(jié)果顯示，伴隨著 Vpu 表達(dá)質(zhì)粒用量（300 ng、500 ng 和 1 μg）的提高，BST-2 水平逐漸下降（圖 1E）。在不同劑量組內(nèi)，始祖病毒 pZM246 和 pZM247 的 Vpu下調(diào) BST-2 的能力均強(qiáng)于慢性感染病毒 pMJ4 的Vpu。在最高劑量組（1 μg Vpu 表達(dá)質(zhì)粒）中，盡管 pMJ4-Vpu 的表達(dá)水平甚至強(qiáng)于 pZM246-Vpu和 pZM247-Vpu，但其下調(diào) BST-2 僅 30% 左右，明顯低于 pZM246-Vpu 和 pZM247-Vpu 的 68%和 75%。該研究結(jié)果表明，始祖病毒 Vpu 下調(diào)BST-2 的能力明顯強(qiáng)于慢性感染病毒。

2.2 HIV-1 始祖病毒 Vpu 蛋白下調(diào)細(xì)胞表面內(nèi)源性 BST-2 的能力

BST-2 通過細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)定位于細(xì)胞表面，進(jìn)而阻止新生 HIV-1 病毒的釋放。為了進(jìn)一步明確始祖病毒 Vpu 拮抗 BST-2 抗病毒活性的能力，我們利用流式細(xì)胞術(shù)（FACS）研究了其對內(nèi)源性BST-2 細(xì)胞表面水平的影響。結(jié)果顯示，始祖病毒Vpu 下調(diào)細(xì)胞表面的 BST-2 均強(qiáng)于慢性感染病毒的 Vpu（圖 2），但兩者之間的差異并未像對胞內(nèi)總 BST-2 水平（圖 1）影響那么明顯。

2.3 HIV-1 始祖病毒下調(diào) BST-2 的能力分析

為了明確在病毒感染情況下，始祖病毒是否具有優(yōu)于慢性感染病毒的下調(diào) BST-2 的能力，我們利用已構(gòu)建的含熒光素酶報(bào)告基因的單循環(huán)感染始祖病毒表達(dá)質(zhì)粒，比較了始祖病毒與同一亞型的慢性感染株 pIndie-C1(Luc) 下調(diào) BST-2 的能力。如圖 3 所示，與空質(zhì)粒對照相比，始祖病毒可下調(diào) BST-2 約 60%，而同一亞型的慢性感染株pIndie-C1(Luc) 表達(dá)僅降低 25% 左右的 BST-2。該結(jié)果表明始祖病毒可下調(diào) BST-2 的能力明顯高于慢性感染株，且與單獨(dú)表達(dá)相應(yīng) Vpu 的結(jié)果（圖 1）十分類似，這也提示始祖病毒較強(qiáng)的下調(diào)BST-2 能力源于其 Vpu 的特性。

2.4 HIV-1 始祖病毒拮抗 BST-2 抗病毒活性的能力分析

始祖病毒較強(qiáng)的下調(diào) BST-2 能力提示其對于BST-2 的抑制病毒復(fù)制活性具有較好的抗性。如圖 4A 所示，低水平表達(dá) BST-2（50 和 100 ng BST-2 質(zhì)粒）對產(chǎn)毒細(xì)胞 HEK293T 中始祖病毒和慢性感染病毒的表達(dá)均無明顯影響。盡管伴隨著HEK293T 細(xì)胞中外源 BST-2 表達(dá)量的上升，病毒的感染性逐漸下降，但始祖病毒和慢性感染病毒之間并無明顯區(qū)別（圖 4B）。上述結(jié)果表明，盡管始祖病毒 Vpu 表現(xiàn)出較強(qiáng)的下調(diào) BST-2 的能力，但仍然不足以拮抗外源過量表達(dá)的 BST-2 的抗病毒活性。

圖1 HIV-1 始祖病毒 Vpu 降解 BST-2 活性（A：pZM246-Vpu 細(xì)胞蛋白免疫印跡分析；B：pZM246-Vpu細(xì)胞蛋白近紅外雙色激光成像分析；C：pZM247-Vpu 細(xì)胞蛋白免疫印跡分析；D：pZM247-Vpu 細(xì)胞蛋白近紅外雙色激光成像分析；E：定量分析結(jié)果）Figure 1 Effect of Vpu from HIV-1 founder virus on the levels of BST-2 (A: Western blot analysis of pZM246-Vpu; B: Odyssey analysis of pZM246-Vpu; C: Western blot analysis of pZM247-Vpu; D: Odyssey analysis of pZM247-Vpu; E: Quantification analysis of B and D)

2.5 HIV-1 始祖病毒 Vif 蛋白下調(diào) hA3G 的活性分析

為了考察是否始祖病毒的 Vif 蛋白下調(diào)hA3G 的能力與慢性感染病毒不同，我們首先分別以慢性感染病毒 pMJ4、始祖病毒 pZM246 和pZM247 為模板，構(gòu)建了相應(yīng)的 Vif 表達(dá)質(zhì)粒pMJ4-Vif、pZM246-Vif 和 pZM247-Vif。然后，分別將不同量的 Vif 表達(dá)質(zhì)粒與 hA3G 表達(dá)質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染 293T 細(xì)胞，通過 Western blot 檢測細(xì)胞內(nèi)hA3G 的水平。結(jié)果顯示，始祖病毒的 Vif 降解hA3G 的能力弱于慢性感染病毒 pMJ4 或與之類似（圖 5）。

2.6 始祖病毒 Vpu 和 MJ4 Vpu 氨基酸序列比對及突變位點(diǎn)分析

圖2 HIV-1 始祖病毒 Vpu 蛋白下調(diào)細(xì)胞表面內(nèi)源性 BST-2 的能力Figure 2 Down-regulation effect of Vpu from HIV-1 founder virus on the levels of endogenous BST-2 at cell surface

圖3 HIV-1 始祖病毒下調(diào) BST-2 的活性（A：細(xì)胞蛋白免疫印跡分析；B：定量分析）Figure 3 Effect of HIV-1 founder virus on the level of BST-2 (A: Western blot analysis of cellular protein; B: Quantification analysis of Western blot)

圖4 HIV-1 始祖病毒對 BST-2 的抗性（A：產(chǎn)出病毒感染性分析；B：病毒產(chǎn)生細(xì)胞的免疫印跡分析）Figure 4 The resistance of HIV-1 founder virus to antivial activity of BST-2 (A: The infectivity of viruses; B: Western blot analysis of virion-producing cell lysate)

圖5 始祖病毒 Vif 對細(xì)胞內(nèi) hA3G 的影響（A：pZM246；B：pZM247）Figure 5 Effect of Vif from founder virus on the level of hA3G (A: pZM246; B: pZM247)

圖6 始祖病毒 Vpu 和 MJ4 Vpu 氨基酸序列比對及突變位點(diǎn)分析Figure 6 The amino acid sequence alignments between founder virus Vpu and pMJ4 Vpu

對始祖病毒和慢性感染病毒 MJ4 Vpu 氨基酸序列進(jìn)行比對，結(jié)果（圖 6）顯示，始祖病毒 ZM246毒株的 Vpu 與 MJ4 的 Vpu 氨基酸相似度為78.2%，共發(fā)現(xiàn) L5M、A6I、K7D、V8L、I26V、L39V、R42S、L44I、D45N、V48I、V51I、D63E、66T、E76G、H77R、I78L、F81L 共 17 個點(diǎn)突變；而 ZM247 毒株的 Vpu 與 MJ4 的 Vpu 氨基酸相似度為 80.5%，其中包括 L2I、E3D、K7R、I8L、A9G、I10V、A11G、R38S、D41N、D59E、Q62T、H73R、I74L、G78D、A79V、I80N 共計(jì) 16 個點(diǎn)突變。對于影響 Vpu 與 BST-2 相互作用的一些關(guān)鍵位點(diǎn)，始祖病毒 Vpu 蛋白的一些關(guān)鍵氨基酸也存在相應(yīng)的點(diǎn)突變，但具體的發(fā)生機(jī)制還有待進(jìn)一步闡明。

3 討論

本研究對 C 亞型 HIV-1 始祖病毒株和慢性感染株 MJ4 的 Vpu 降解 BST-2 及 Vif 下調(diào)hA3G 的能力進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)始祖病毒 Vpu 下調(diào)BST-2 的能力顯著高于慢性感染株，但其 Vif 下調(diào)hA3G 的能力并無顯著差別。這一結(jié)果提示始祖病毒有可能通過早期進(jìn)化，提升其拮抗 BST-2 抗病毒活性的能力，促進(jìn) HIV-1 早期建立感染。盡管始祖病毒 Vpu 表現(xiàn)出較強(qiáng)的下調(diào) BST-2 的能力，但在外源過量表達(dá) BST-2 時，未表現(xiàn)出明顯的生長優(yōu)勢，說明其提升的下調(diào) BST-2 的能力仍不足以拮抗過量的 BST-2。考慮到內(nèi)源性 BST-2 水平遠(yuǎn)低于過表達(dá)，始祖病毒可能在正常生理水平的BST-2 下具有復(fù)制優(yōu)勢。

本研究推動了始祖病毒的早期進(jìn)化和生物學(xué)特征的研究，有助于進(jìn)一步闡明 HIV-1在新宿主內(nèi)成功復(fù)制的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，為有效阻斷新感染的防治策略發(fā)展提供了理論基礎(chǔ)。

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Abilities of HIV-1 founder virus Vpu and Vif to counteract host restriction factor

HUANG Yu-ming, ZHAO Jian-yuan, CEN Shan, WEI Tao

ObjectiveTo study the biology and early evolutionary characteristics of founder virus for better understanding of the key factors involved in establishment of new infection.

MethodsWith the methods of over-expression, we compared the ability of Vpu protein from transimitted/founder (T/F) virus and chronic strain to counteract host restriction factors BST-2 and the effect on endogenous BST-2 on the cell surface by flow cytometer.Using the constructed single-cycle infectious virus within luciferase reporter gene, we compared the ability of down-regulation of BST-2 in T/F virus and chronic virus.The ability of the Vif protein to antagonize the host restriction factor hA3G was also examined by overexpression.

ResultsThe results showed that Vpu of T/F virus exhibited significantly improved ability to reduce the level of BST-2, as compared with that of chronic strain, while no difference in the Vif-mediated hA3G degradation was observed.

ConclusionT/F virus may possess better ability to counteract with host innate immunity to facilitate the establishment of new infection.

vpu gene products, human immunodeficiency virus; vif gene products, human immunodeficiency virus; HIV-1 founder virus

WEI Tao, Email: weitao@buu.edu.cn

10.3969/j.issn.1673-713X.2017.04.003

國家自然科學(xué)基金（31470076、31470272）；國家重大科學(xué)研究計(jì)劃（2012CB911102)

100015 北京，首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院（黃宇明）；100050 北京，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所（趙建元、岑山）；100192 北京聯(lián)合大學(xué)生物化學(xué)工程學(xué)院（魏濤）

魏濤，Email：weitao@buu.edu.cn

2017-04-17

*同為第一作者

Author Affiliations:Beijing Ditan Hospital, Capital Medical University, Beijing 100015, China (HUANG Yu-ming); Institute of Medicinal Biotechnology, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Beijing 100050, China (ZHAO Jian-yuan, CEN Shan); College of Biochemical Engineering of Beijing Union University, Beijing 100192, China (WEI Tao)

www.cmbp.net.cn Chin Med Biotechnol, 2017, 12(4):303-309

協(xié)會第五屆第六次常務(wù)理事會在京召開2017年 6月 28日，中國醫(yī)藥生物技術(shù)協(xié)會第五屆第六次常務(wù)理事會在北京召開。李少麗副理事長主持會議，吳朝暉秘書長做 2017年上半年工作匯報(bào)。會議主要內(nèi)容還有：①通過了新分支機(jī)構(gòu)——慢病社區(qū)與家庭管理技術(shù)專業(yè)委員會的設(shè)立申請；②審定了章程修訂案和第五屆第二次全國委員代表大會召開方案；③審定了協(xié)會車輛置換申請和新申請入會單位名單；④聽取了第八屆中國醫(yī)藥生物技術(shù)論壇籌備情況匯報(bào)等。