基于中西醫(yī)臨床病癥特點(diǎn)的短暫性腦缺血發(fā)作的動物模型分析

項(xiàng)麗玲　苗明三　王燦　張夢飛　方曉艷

[摘要]基于短暫性腦缺血發(fā)作的中醫(yī)、西醫(yī)臨床病癥特點(diǎn)，對目前現(xiàn)有的短暫性腦缺血發(fā)作模型進(jìn)行總結(jié)歸納，通過整理分析短暫性腦缺血發(fā)作各個動物模型的優(yōu)缺點(diǎn)、中西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)以及臨床癥狀吻合度，進(jìn)一步提出相應(yīng)動物模型的評價思路及改進(jìn)方法。而且還發(fā)現(xiàn)短暫性腦缺血發(fā)作動物模型雖然造模方法比較多，但不能很好地反映該病的短暫性、可逆性、反復(fù)發(fā)作性等典型特征，與臨床病癥特點(diǎn)差異較大，且缺少對該動物模型造模成功與否的合理的量化標(biāo)準(zhǔn)。通過利用現(xiàn)有的單因素動物模型相結(jié)合，建立與臨床病癥相結(jié)合的、更接近人類短暫性腦缺血發(fā)作典型癥狀的復(fù)合動物模型，復(fù)制出能更加吻合臨床病癥特點(diǎn)的動物模型。建立合理的模型量化標(biāo)準(zhǔn)，體現(xiàn)其中西醫(yī)病因，完善一套系統(tǒng)完整的模型評價方法，是短暫性腦缺血發(fā)作動物模型未來的發(fā)展方向。

[關(guān)鍵詞]短暫性腦缺血發(fā)作； 臨床病癥； 動物模型

[Abstract]Based on the clinical symptom characteristics of transient ischemic attack in Chinese and Western medicines， the existing models of transient ischemic attack were summarized and analyzed Then the advantages and disadvantages of each model， the diagnostic criteria of traditional Chinese and Western medicine and clinical symptoms compliance were analyzed to put forward the evaluation method and improvement method of the corresponding animal models It was found that there were many modeling methods of transient ischemic attack， but they can not reflect the transience， reversibility， recurrence and other typical characteristics of the disease， with significant differences with clinical symptoms Moreover， there is lack of reasonable quantitative criteria for the success of the animal model By combining the existing single factor animal models， a composite animal model that was more closely related to the clinical symptoms of transient ischemic attack was established to replicate an animal model that was more compatible with the characteristics of clinical symptoms It is the future development directions of the transient ischemic attack animal models to establish reasonable quantitative standards， reflect the causes of Chinese and Western medicine symptoms and improving a series of systematic and complete model evaluation methods

[Key words]transient ischemic attack； clinical symptom； animal models

短暫性腦缺血發(fā)作（transient ischemic attack，TIA）是臨床常見的、可以控制的缺血性腦血管病，由顱內(nèi)血管病變引起的一過性或短暫性、局灶性腦或視網(wǎng)膜功能障礙。一直以來有關(guān)TIA的定義不斷在變化，傳統(tǒng)TIA的定義是指短暫的、可逆的、局部的腦血液循環(huán)障礙，癥狀和體征在24 h內(nèi)完全消失。2002年Albers等[1]提出新定義：臨床癥狀持續(xù)時間小于1 h，且無急性腦梗死證據(jù)。2009年修訂后的新的TIA定義為：腦、脊髓或視網(wǎng)膜局灶性缺血引起，未伴急性梗死的短暫性神經(jīng)功能障礙[2]。TIA新診斷標(biāo)準(zhǔn)更強(qiáng)調(diào)神經(jīng)影像學(xué)檢查，不再強(qiáng)調(diào)缺血癥狀的持續(xù)時間。具有敏感性高、特異性強(qiáng)，臨床價值大的特點(diǎn)，有利于臨床腦血管病的診斷及治療[3]。

1短暫性腦缺血發(fā)作的病因病機(jī)

11西醫(yī)病因病機(jī)目前有關(guān)TIA的病因、發(fā)病機(jī)制尚不清楚，主要有微栓子學(xué)說及血流動力學(xué)異常學(xué)說、腦血管痙攣學(xué)說、血液學(xué)異常學(xué)說、血管的機(jī)械梗阻等，TIA機(jī)制中最常見的主要是微栓子學(xué)說及血流動力學(xué)異常學(xué)說[4]。以上幾種機(jī)制往往同時起作用，血管痙攣可使血管狹窄，從而導(dǎo)致狹窄遠(yuǎn)端的血流動力學(xué)變化，腦血流量下降，在病變血管的供血區(qū)，出現(xiàn)神經(jīng)功能缺損的表現(xiàn)[5]。血液學(xué)的異常導(dǎo)致血液黏稠度增高，可以增加血流的阻力，其中微栓子堵塞血管及動脈血管壁病變導(dǎo)致血管狹窄或梗阻是最直接的機(jī)制，其結(jié)果是導(dǎo)致病變血管遠(yuǎn)端血流量下降甚至血流中斷[6]。

12中醫(yī)病因病機(jī)中醫(yī)學(xué)認(rèn)為TIA多是在內(nèi)傷積損的基礎(chǔ)上，復(fù)因勞逸失度、情志不遂、飲食失節(jié)、或外邪侵襲等觸發(fā)，引起臟腑陰陽失調(diào)，內(nèi)風(fēng)旋動，夾痰夾風(fēng)，橫竄經(jīng)脈，從而反復(fù)出現(xiàn)短暫性或一過性的半身不遂、偏身麻木、言語謇澀，目偏不瞬等癥狀[7]，并最終導(dǎo)致中風(fēng)病的發(fā)生?！端貑枴ぴu熱病論》曰：“正氣存內(nèi)，邪不可干，邪之所湊，其氣必虛?！贝硕我鉃闅馓?、腎虛等正氣虧虛是中風(fēng)病的主要病因病機(jī)。從古至今各醫(yī)家所對于短暫性腦缺血發(fā)作病理基礎(chǔ)的認(rèn)識大體是以為本虛標(biāo)實(shí)，肝腎虧虛、氣虛血少為致病之本，風(fēng)、火、痰、氣、瘀為發(fā)病之標(biāo)，兩者互為因果。

2短暫性腦缺血發(fā)作的臨床特點(diǎn)分析

21西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)TIA核心癥狀主要包括：發(fā)病突然，無

預(yù)兆；患者腦部或視網(wǎng)膜出現(xiàn)局部缺血現(xiàn)象；發(fā)病持續(xù)時間一般不會超過24 h；發(fā)作后恢復(fù)完全，無任何的遺留癥狀；病情反復(fù)發(fā)作[89]。以下癥狀單獨(dú)出現(xiàn)不能診斷為TIA，2個以上同時出現(xiàn)或合并有上述①～⑥的癥狀時可認(rèn)為是TIA。除以下常見癥狀外，頸內(nèi)動脈系統(tǒng)及椎基底動脈系統(tǒng)TIA還可表現(xiàn)有精神、意識障礙、偏身投擲或偏身舞蹈樣動作等臨床表現(xiàn)[10]。以下參照《中華醫(yī)學(xué)會缺血性腦卒中和TIA中國診斷及治療指南2010》，見表1。

22中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)中醫(yī)沒有短暫性腦缺血發(fā)作的病名，該病歸屬于中醫(yī)學(xué)“眩暈”、“中風(fēng)先兆”、“頭痛”、“目?！钡炔∽C范疇[11]，目前對該病的辨證分型及診斷標(biāo)準(zhǔn)研究甚少，多屬于屬定性判斷。肝腎陰虛為致病之本，風(fēng)、火、痰、氣、瘀為致病之標(biāo)。所有辯證分型是依據(jù)其中醫(yī)病機(jī)來分。TIA存在氣虛、氣滯、痰濁、血瘀、陰虛和火熱等證候要素，有單一證候要素、2個或3個、及3個以上證候要素組合類型[12]。中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)參照國家中醫(yī)藥管理局中醫(yī)腦病急癥協(xié)作組《中風(fēng)病中醫(yī)診斷與療效評定標(biāo)準(zhǔn)》。具體辨證分型見表2，結(jié)合證候臨床表現(xiàn)，擬定短暫性腦缺血發(fā)作診斷標(biāo)準(zhǔn)，見表3。

3短暫性腦缺血發(fā)作動物模型分析研究現(xiàn)狀

31模型動物的選擇常用于TIA模型的一般選用與人體結(jié)構(gòu)、功能、代謝及疾病特征相似的動物，有大鼠、小鼠、沙土鼠、家兔、樹鼩、貓、狗、豬、獼猴、松鼠猴、短尾猿、狒狒、猩猩等[13]。其中大鼠、小鼠、沙土鼠應(yīng)用最多，一般選擇雄性動物。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室選擇嚙齒類動物作為研究對象，鼠的腦血管解剖接近人類，血管性損傷部位恒定，存活率高，重復(fù)性好，更經(jīng)濟(jì)。常用品系Wistar大鼠，SpragueDawley大鼠，F(xiàn)ischer334等；沙土鼠缺乏后交通動脈及基底動脈環(huán)，兩側(cè)大腦供血相對獨(dú)立，阻斷一側(cè)或兩側(cè)頸總動脈即可復(fù)制效果明顯的同側(cè)或雙側(cè)腦缺血模型。

32造模方法及臨床吻合度現(xiàn)代TIA模型造模方法多采用有創(chuàng)性阻斷腦血流，造成全腦缺血或局灶性腦缺血，再回復(fù)灌注。目前現(xiàn)有的TIA動物模型復(fù)制方法比較少，基于上述學(xué)說研究已有的動物模型見表4。

33觀察指標(biāo)TIA動物模型觀察的指標(biāo)通常有以下幾類：第一，腦部平均血流灌注量：造模后由于腦部短暫性缺血，平均血流灌注量顯著下降。通過檢測缺血前后腦膜微循環(huán)平均灌注量，計(jì)算灌注量下降百分比。第二，血液流變學(xué)：TIA模型造模成功后，全血黏度、血漿黏度、血細(xì)胞比容、纖維蛋白原及血小板聚集率等指標(biāo)有所升高。第三，生化指標(biāo)：①炎癥因子：IL1β，TNFα，IL6，IL8，IL10，NO及NOS等；②神經(jīng)營養(yǎng)因子：GDNF，BDNF等；③能量代謝：ATP；④細(xì)胞

4討論

在近年來的動物實(shí)驗(yàn)當(dāng)中，由于TIA典型的臨床病發(fā)特征大多都是短暫性的、可逆的、局部的腦血液循環(huán)障礙，反復(fù)發(fā)作的，這些都是腦梗死的前兆[19]?，F(xiàn)有的TIA 動物模型造模方法多種多樣，無法準(zhǔn)確揭示人類TIA的病因，病理生理及生化等方面的變化，仍與臨床中的多種類型的病癥存在著較大的差距。并不能很好地反映這些典型癥狀，只能單方面體現(xiàn)出TIA某一個類型的臨床病癥。短暫性全腦缺血模型是根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)動物的腦血管解剖生理學(xué)特點(diǎn)，反復(fù)短暫性夾閉相應(yīng)腦動脈造成短暫性全腦缺血。但這種暫時缺血模型廣泛地影響各個腦區(qū)，并不是真正意義上的局灶性、短暫性和反復(fù)發(fā)作性的TIA模型。局灶性短暫性腦缺血模型與全腦缺血模型相比，局灶性腦缺血模型較為接近人TIA的發(fā)病情況。由于MCA是人類TIA高頻病發(fā)部位，因此阻斷MCA造成的腦缺血模型被認(rèn)為是一種理想的腦缺血動物模型。其中開顱法與人類缺血性卒中的病理學(xué)改變較為接近，但開顱手術(shù)創(chuàng)傷較大，難以制作較長時間的反復(fù)TIA模型，雖然在理論上可用此方法制作TIA模型，但目前幾乎不用開顱法制作TIA模型。過氧化物誘導(dǎo)法具有非侵入性、易重復(fù)，更接近于人類缺血性卒中的病理生理學(xué)改變，對研究腦缺血的病因和病理學(xué)改變之間的聯(lián)系具有重大意義。

線栓法已在研究領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用，是目前最好的一種無需開顱即可觀察再灌注損傷的急、慢性局灶性腦缺血模型，在一定程度上能夠體現(xiàn)出臨床癥狀變化，但手術(shù)技術(shù)要求極高，且該模型實(shí)質(zhì)上是一種栓塞性卒中，與人類常見的血栓形成性卒中仍存在差異。以上所述的各類型的模型均存在一定的優(yōu)勢和一定的局限性。

在研究TIA動物實(shí)驗(yàn)時，應(yīng)選擇比較符合臨床病癥的模型，并制定出一套完整的評價體系，這樣才能盡可能地利用動物模型判定某些治療方法和藥物的效應(yīng)。理想的TIA模型應(yīng)該具有無創(chuàng)性、局灶性、短暫性神經(jīng)功能障礙癥狀反復(fù)發(fā)作等特點(diǎn)，并且應(yīng)該可靠、簡便和可控，與人TIA相似。在今后的TIA模型造模方法中，應(yīng)注意外觀指標(biāo)和病理、生化指標(biāo)的結(jié)合。TIA動物模型多采用單一因素造模為主，而人體疾病是在內(nèi)外環(huán)境、飲食、情志等諸因素作用下，發(fā)生病理改變而出現(xiàn)的以某一臟腑組織病變?yōu)橹鞯木C合證候群，因此可以利用現(xiàn)有的單因素的動物模型相結(jié)合，結(jié)合臨床病癥，建立與臨床病癥相結(jié)合的更能反應(yīng)人類TIA各種癥狀的復(fù)合動物模型，進(jìn)而建立與動物模型相適應(yīng)的評價指標(biāo)體系，以及建立合理的量化標(biāo)準(zhǔn)。今后的TIA模型造模方法也可以向中醫(yī)領(lǐng)域進(jìn)行擴(kuò)展，開發(fā)出符合臨床各種證候特點(diǎn)的某一證型模型，如血瘀合并短暫性腦缺血模型，此模型是在中醫(yī)理論基礎(chǔ)上創(chuàng)建與臨床復(fù)合病癥有高吻合度的優(yōu)勢，充分認(rèn)清TIA的中醫(yī)“血瘀證”病因病機(jī)并利用現(xiàn)代醫(yī)學(xué)方法創(chuàng)新復(fù)合模型。

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[責(zé)任編輯張寧寧]