回、漢族非小細胞肺癌EGFR突變差異與臨床病理特征分析

袁立志，周 瑋，孟凡珍

回、漢族非小細胞肺癌EGFR突變差異與臨床病理特征分析

袁立志，周 瑋，孟凡珍

目的 探討回、漢族肺癌患者EGFR(Epidermal growth factor recepor)突變差異與臨床病理特征的相關性。方法 收集確診非小細胞肺癌(NSCLC)并且具備完整的臨床資料，通過組織活檢、淋巴結穿刺、惡性胸腔積液離心等方式獲取標本完成基因檢測的NSCLC患者218例，統(tǒng)計分析NSCLC患者EGFR基因突變在回、漢族2個民族間及不同病理類型與臨床特征的相關性。結果 218例NSCLC患者中，回族突變率為21.53%，漢族為40.52%，2個民族間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。漢族組中，女性EGFR基因突變率為48.49%，明顯高于男性的34.48%；非吸煙患者EGFR突變率為55.88%,高于吸煙患者的28.24%；腺癌患者EGFR突變率為51.22%，高于非腺癌的28.17%，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。65例回族肺癌患者中腺癌EGFR基因突變率為26.32%，非腺癌突變率為14.81%，腺癌組高于非腺癌組(P<0.05)?；刈錘SCLC患者EGFR基因突變率與年齡、性別及吸煙史無相關性。結論 漢族EGFR患者基因突變率高于回族；EGFR基因在漢族組患者中，女性、非吸煙和腺癌患者突變率較高；在回族組患者中，腺癌EGFR突變率高于非腺癌，但與年齡、吸煙史、性別無相關性。

非小細胞肺癌；表皮生長因子受體；TKI；回族

近年來，表皮生長因子受體-酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKI)對EGFR基因突變肺癌患者的顯著療效，將肺癌治療帶上了一個新的高度，為晚期非小細胞肺癌(NSCLC)患者帶來了新的希望，它們使EGFR基因突變陽性的非小細胞肺癌患者顯著獲益[1-2]。多項研究表明，對TKI治療敏感的NSCLC患者具有一定的臨床特征，如女性、腺癌、不吸煙[3]。我國是一個多民族組成的國家，寧夏是少數(shù)民族回族的主要居住地，近幾年觀察到回族肺癌患者發(fā)病率逐年提高，但EGFR基因突變率在回族肺癌患者的分布特點目前仍未見報道。為明確 EGFR基因在回族肺癌患者的突變特點，進一步對患者有針對性地制定個體化治療方案提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料：收集2011年9月-2015年9月我院經病理學或細胞學明確診斷為NSCLC，并且具備完整臨床資料的肺癌患者218例。漢族患者153例中，年齡<60歲65例，≥60歲88例；男性87例，女性66例；有吸煙史85例，無吸煙史68例；腺癌82例，非腺癌71例?；刈?5例患者中，年齡<60歲28例，≥60歲37例；男性29例，女性36例；有吸煙史12例，無吸煙史53例；腺癌38例，非腺癌27例。

1.2 方法

1.2.1 取材：所選218例肺癌患者均具備完整的臨床資料，通過電子支氣管鏡對腫瘤組織進行活檢、刷檢、外科手術腫瘤切除、轉移淋巴組織針吸活檢、胸腔積液離心沉淀獲取腫瘤細胞等方式獲取檢測標本。將檢測標本放入專用標本容器，用甲醛液進行固定，由專一人員負責送往外地生物檢測中心進行基因檢測。檢測中心統(tǒng)一采用探針擴增阻滯突變系統(tǒng)(ARMS)，檢測NSCLC的EGFR基因突變狀態(tài)。

1.2.2 基因檢測：檢測目標為EGFR-TKI編碼區(qū)基因18-21外顯子，利用TaqDNA聚合酶缺乏3’→5’外切酶活性，該聚合酶如果進行復制擴增，其PCR引物的3’末端堿基必須具備與其互補的模板DNA，根據已經獲得的不同類型的突變序列，設計與之相匹配對應的“引物”片段用以檢測NSCLC患者EGFR基因突變狀態(tài)。反應載體共設計了8管PCR反應條，將DNA樣品、特異性PCR引物、雙環(huán)探針及氯化鎂、硫酸銨等化學物質放入每個反應體系管內，通過凝膠電泳或實時熒光定量PCR(real-time PCR)對復制擴增產生的PCR產物進行分析[4]。

1.3 觀察指標：EGFR基因突變結果的判斷，即：陽性為8個反應體系管中1個或1個以上突變陽性或弱陽性；陰性為8個 PCR反應體系管中，7管突變反應均為陰性。

1.4 統(tǒng)計學方法：應用SPSS 17.0統(tǒng)計學件，計數(shù)資料采用χ2檢驗，分析回、漢族2組間EGFR基因突變的差異，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 漢族NSCLC患者EGFR 基因突變檢測結果:本研究153例漢族NSCLC患者中，62例存在EGFR突變(40.52%，62/153)，包括第19號外顯子突變27例，第21號外顯子突變 24 例，第18號外顯子突變7例，第20號外顯子T790M突變患者4例。

2.2 漢族NSCLC患者EGFR 基因突變率與臨床特征及病理類型之間的關系:本研究漢族NSCLC患者中，男、女2組EGFR 基因突變率分別為34.48%(30/87)、48.49%(32/66),兩者比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；有吸煙史患者 EGFR 突變率為 28.24%(24/85),無吸煙史EGFR 突變率為 55.88%(38/68)，兩者比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；腺癌與非腺癌患者EGFR 基因突變率分別為 51.22%(42/82)、28.17%(20/71)，兩者比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。漢族NSCLC患者EGFR 基因突變率與年齡分布無相關性(P>0.05),見表1。

表1 漢族NSCLC患者EGFR突變率與臨床特征及病理類型的關系

2.3 回族NSCLC患者EGFR基因突變檢測結果:65例回族NSCLC患者有14例EGFR 基因突變陽性(21.54%，14/65)，其中6例為外顯子19的缺失突變，7例為21外顯子L858R 點突變；第18號外顯子突變1例，未檢測到20 外顯子突變。

2.4 回族NSCLC患者EGFR 基因突變率與臨床特征及病理類型之間的關系:腺癌患者EGFR基因的突變率為26.32%(10/38)，非腺癌患者突變率為14.81%(4/27)，兩者比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。回族患者組中，EGFR 基因的突變與性別(P>0.05)、年齡(P>0.05)、有無吸煙史(P>0.05)無相關性,見表2。

表2 回族NSCLC患者EGFR突變率與臨床特征及病理類型的關系

2.5 漢、回族NSCLC患者EGFR基因突變差異:218例晚期NSCLC患者中，漢族患者153例，EGFR 基因突變率為40.52%(62/153)；回族患者65例，EGFR 基因突變率為 21.53%(14/65)，兩者比較差異有統(tǒng)計學意義(χ2=7.240，P<0.05)。

3 討論

近幾年，EGFR在國內外肺癌治療研究領域得到了廣泛關注，EGFR基因突變可以增加表皮生長因子受體的活性，隨后導致其下游信號通道被高度激活，從而促進了腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。Lynch等首次報道了EGFR酪氨酸激酶編碼區(qū)基因突變是靶向藥物治療是否有效的一個重要條件[5]。通過對肺癌患者EGFR基因突變狀態(tài)的確定，用以指導肺癌患者是否接受TKI靶向治療已成為肺癌治療領域臨床醫(yī)師的共識。我國是一個多民族組成的國家，地域廣闊，不同地區(qū)、不同民族居民的生活方式有所不同。根據國內相關文獻所述，EGFR基因突變率在我國不同區(qū)域有著顯著不同，如廣東地區(qū)以19外顯子缺失突變?yōu)橹鱗6]，北京地區(qū)19及21外顯子突變的檢出率大致相同[7]，廣西非小細胞肺癌患者 EGFR 突變率僅為 3.9%[8]，不同民族的EGFR基因突變率同樣存在差異，維吾爾族突變率(11.8%)低于漢族平均水平[9-10]。目前，大多數(shù)研究數(shù)據集中在亞洲及歐美人群，很少有數(shù)據對中東及中亞地區(qū)人群EGFR突變狀態(tài)進行報道。寧夏回族自治區(qū)統(tǒng)計局2015年2月發(fā)布了寧夏人口統(tǒng)計相關數(shù)據，即2014年底，寧夏常住人口數(shù)為661.54萬，其中回族236.14萬，占總人口35.7%，是全國所有省市、自治區(qū)中回族人口比例最多的區(qū)域，占全國回族人口超過1/5。因此，了解回族肺癌患者EGFR基因突變狀態(tài)，明確回、漢族患者基因突變差異，為寧夏地區(qū)肺癌患者提供個體化治療方案意義重大。

本研究結果顯示，在寧夏地區(qū)漢族NSCLC患者EGFR基因突變的檢出率為40.52%，其中女性患者突變率為48.49%，男性為34.48%，女性患者高于男性；腺癌組與非腺癌組患者EGFR基因突變率分別為51.22%和28.17%，腺癌患者的突變率較非腺癌患者明顯較高，這與國內外研究報道較一致[11-12]。沒有吸煙史的NSCLC患者的突變率為55.88%，明顯高于有吸煙史患者突變率的28.24%。另外，本研究顯示，回族肺癌患者的EGFR基因突變率與漢族患者有著明顯差異。本研究所收集的病例資料顯示，在65例回族非小細胞肺癌患者中，EGFR基因總體突變率為21.53%，其中腺癌患者的突變率為26.32%(10/38)，非腺癌患者突變率為14.81%(4/27)，腺癌患者高于非腺癌患者(P<0.05)；但是回族患者EGFR基因的突變率與年齡、性別、有無吸煙史均無明顯相關性(P>0.05)。本研究中，回族患者EGFR基因突變率為21.53%，突變率較低，與目前相關文獻報道的亞洲肺癌人群EGFR高突變率不一致，接近于歐美非小細胞肺癌患者的突變水平，可能這也是相對于漢族肺癌患者回族患者經過靶向治療效果較差的原因之一。據文獻報道，除外種族差異，地域因素在EGFR基因突變的發(fā)生中也發(fā)揮著一定的作用，EGFR突變率在歐美地區(qū)高加索人群肺癌患者不到10%，但在東亞地區(qū)突變率高達50%左右，表明肺癌的發(fā)生受遺傳學背景和環(huán)境因素的影響[13]。寧夏回族自治區(qū)是以回族為主體的少數(shù)民族，回族總人數(shù)占到了全國回民總數(shù)的1/5左右，各民族之間在遺傳、人種、文化飲食、生活習慣、住所等各個方面存在差異。本研究結果顯示，漢族NSCLC患者EGFR基因突變率為40.52%，回族為21.53%，兩者比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。漢族肺癌患者突變率高于回族患者，這一結論在一定程度上可以解釋在臨床治療回族晚期非小細胞肺癌患者過程中，應用EGFR-TKI效果不明顯的原因。

EGFR基因突變在NSCLC治療中存在著重要的臨床意義，在對肺癌患者的治療過程中發(fā)現(xiàn)，靶向藥物在肺癌患者治療過程中的療效個體差異較大。本研究提供了回族NSCLC的EGFR突變率信息，可以為寧夏地區(qū)在腫瘤領域工作的醫(yī)護人員提供重要信息。寧夏回族自治區(qū)位于中國大陸西北部，經濟基礎仍相對落后，通過有效的方式篩選出不能從靶向治療獲益的肺癌患者，從而減輕該部分患者及其家庭的經濟負擔，節(jié)約醫(yī)療資源。

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關于撰稿的要求

來稿應具先進性、科學性和邏輯性。來搞應做到數(shù)據可靠、論點明確、結構嚴謹、文字通順。論著、實驗研究、臨床研究、調查研究等一般不少于6 000字(不包括圖表和參考文獻)，經驗交流不少于4 000字，綜述、講座等不少于5 000字，病例報告等一般不超過1 500字(包括圖表和參考文獻)。

An Analysis of EGFR Mutation and Clinicopathologic Characteristics in Hui and Han Patients with Non-small-cell Lung Cancer

YUANLizhi,ZHOUWei,MENGFanzhen.

DepartmentofRespiratoryDiseases,CardiovascularandCerebrovascularDiseaseHospitalofNingxiaMedicalUniversity,Yinchuan750002，China

ZHOUWei，Email：zhw0306@126.com

Objective To discuss the correlation of EGFR (epidermal growth factor recepor) mutation differences and clinicopathologic features between Hui and Han lung cancer patients.Methods Collect 218 cases of non-small cell lung cancer (NSCLC) patients with complete clinical data that were diagnosed from September，2011 to September，2015 in our hospital.These patients have been tested completely by the means of biopsy,lymph node biopsy,malignant pleural effusion centrifugation,etc.The correlation between EGFR gene mutation between Hui and Han nationalities as well as its relation with different clinical and pathological types were analyzed.Results Among the 218 cases,EGFR gene mutation of Han was 40.52%，while Hui was 21.53%.The difference was statistically significant (P<0.05).The EGFR gene mutation rate of Han female was 48.49%,which was higher than that of men which was 34.48%.The EGFR mutation rate of non-smoking patients was 55.88%,which was higher than that of smoking patients which was 28.24%.The EGFR mutation rate of adenocarcinoma patients was 51.22%,which was higher than that of non-adenocarcinoma which was 28.17%.All of these differences were statistically significant (P<0.05).Among the 65 cases of Hui patients,the EGFR gene mutation rate of those with adenocarcinoma was 26.32%,which was higher than that of non-adenocarcinoma patients which was 14.81%.The difference was statistically significant (P<0.05).Besides,the mutation rate of Hui cancer patients had no correlation with age,smoking history and gender.Conclusion The EGFR gene mutation rate was higher in women,non-smoking and adenocarcinoma cancer patients in Han.In Hui,the adenocarcinoma mutation rate was relatively high，but has no correlation with age,smoking history and gender.In conclusion，the EGFR mutation rate of Han was higher than that of Hui.

Non-smallcelllungcancer;EGFR;TKI;Hui

10.13621/j.1001-5949.2017.06.0484

寧夏醫(yī)科大學總醫(yī)院心腦血管病醫(yī)院，寧夏 銀川 750002

袁立志(1983-)，男，碩士研究生，主治醫(yī)師，從事呼吸系統(tǒng)相關疾病的診斷和治療研究方向。

周瑋，Email:zhw0306@126.com

http://kns.cnki.net/kcms/detail/64.1008.R.20170614.1314.006.html

R734.2

A

2016-05-05 [責任編輯]馬興忠