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      菟絲子總黃酮不同提取方法比較

      2017-07-13 05:28:16秦晶晶錢慧琴趙媛
      安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2017年34期
      關(guān)鍵詞:總黃酮菟絲子

      秦晶晶 錢慧琴 趙媛

      摘要 [目的]篩選菟絲子總黃酮的提取方法,為充分利用開(kāi)發(fā)菟絲子總黃酮資源提供科學(xué)依據(jù)。[方法]采用回流提取法、冷浸法、超聲提取法、微波輔助萃取法、索氏提取法5種方法提取菟絲子中總黃酮含量,以蘆丁為對(duì)照品,通過(guò)紫外分光光度法對(duì)總黃酮的含量進(jìn)行精密測(cè)定,對(duì)提取效率進(jìn)行綜合比較。[結(jié)果]5種提取方法所得總黃酮含量從大到小依次為回流提取法(31.24 mg/g)、微波輔助萃取法(16.84 mg/g)、索氏提取法(12.82 mg/g)、超聲提取法(9.74 mg/g)、冷浸法(8.88 mg/g),回流提取法所得總黃酮含量最高。[結(jié)論]回流提取法應(yīng)用于菟絲子總黃酮的提取,具有提取速度快、提取效率高的優(yōu)點(diǎn)。

      關(guān)鍵詞 菟絲子;總黃酮;回流提取法;超聲提取法;冷浸法;微波輔助萃取法;索氏提取法

      中圖分類號(hào) S567.21 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611(2017)34-0114-03

      Abstract [Objective] The research aimed to screen the extraction methods of total flavonoids in Cuscuta chinesis,and provide scientific basis for the development of total flavones resources in Cuscuta chinesis.[Method]Five kinds of extraction methods:reflux extraction method,cold maceration method,ultrasonic extraction method,microwave assisted extraction method and Soxhlet extraction method were used to extrant the content of total flavonoids in Cuscuta chinesis,rutin as a reference substance,the content of total flavonoids was determined by UV spectrophotometry,and the extraction efficiency was compared comprehensively.[Result]The content of total flavoniods gained by five kinds of extraction method was followed by:refluxing extraction method (31.24 mg/g)>microwave assisted extraction method (16.84 mg/g)> Soxhlet extraction method (12.82 mg/g)>ultrasonic extraction method (9.74 mg/g)>cold maceration method (8.88 mg/g),the content of total flavonoids was the highest by refluxing extraction method.

      [Conclusion]The refluxing extraction method is applied to the extraction of Cuscuta chinesis total flavonoids,which has the advantage of extraction speed and high extraction effciency.

      Key words Cuscuta chinesis;Total flavonoids;Refluxing extraction method;Ultrasonic extraction method;Cold maceration method;Microwave assisted extraction method;Soxhlet extraction method

      菟絲子為旋花科植物南方菟絲子(Cuscuta australis R.Br.)或菟絲子(Cuscuta chinesis Lam.)的干燥成熟種子,味辛、甘,平,歸腎、肝、脾經(jīng),具有補(bǔ)益肝腎、固精縮尿、安胎明目、止瀉的功效[1]。經(jīng)現(xiàn)代研究表明,菟絲子含黃酮類、多糖、木脂素等化學(xué)成分,其中主要為黃酮類成分[2-3]。有研究表明,菟絲子提取物在抗炎、抗腫瘤、抗衰老、調(diào)節(jié)免疫、壯陽(yáng)等方面具有重要的藥理活性[4-7]。近年來(lái)對(duì)菟絲子總黃酮提取工藝的研究有一些報(bào)道,一般采用回流提取法、超聲提取法、冷浸法、微波輔助萃取法、索氏提取法、閃式提取等方法提取菟絲子中總黃酮[8-11]。筆者在前人研究的基礎(chǔ)上,分別采用回流提取法、超聲提取法、冷浸法、微波輔助提取法、索氏提取法5種方法來(lái)提取菟絲子中總黃酮,以蘆丁為對(duì)照品,采用紫外分光光度法(UV)測(cè)定菟絲子的總黃酮含量,以菟絲子總黃酮含量為指標(biāo),確定其最佳提取方法,為菟絲子中黃酮類化合物的提取提供理論依據(jù)。

      1 材料與方法

      1.1 材料

      1.1.1 試材。菟絲子,購(gòu)自安徽亳州市藥材總公司,于60 ℃烘至恒重,經(jīng)粉碎,過(guò)40目篩,備用。

      1.1.2 儀器。電子分析天平(上海象平儀器儀表有限公司)、SG-4054型數(shù)控精密恒溫水浴鍋(上海碩光電子科技有限公司)、KQ5200DE型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)、R206型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海申生科技有限公司)、SHZ-3型循環(huán)水式真空泵(鄭州杜甫儀器廠)、101-8型電熱鼓風(fēng)恒溫干燥箱(江蘇金壇市佳美儀器有限公司)、T6新世紀(jì)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)、WF-400 型微波快速反應(yīng)系統(tǒng)(上海屹堯分析儀器有限公司)。

      1.1.3 試劑。蘆丁對(duì)照品,購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院(批號(hào)100080-201408);95%乙醇、NaNO2、Al(NO3)3、NaOH等試劑購(gòu)于天津市德恩化學(xué)試劑有限公司,均為分析純。

      1.2 方法

      1.2.1 供試品制備。

      1.2.1.1 回流提取法。分別精密稱取3份菟絲子粉末,每份約10 g,各置于500 mL圓底燒瓶中, 加入95%乙醇200 mL,水浴回流提取2次,每次2 h,過(guò)濾,對(duì)濾液進(jìn)行合并,減壓濃縮至少量,用95%乙醇將其轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中,并定容至刻度。

      1.2.1.2 超聲提取法。分別精密稱取3份菟絲子粉末,每份約10 g,各置于三角瓶中,加入95%乙醇 200 mL,80 ℃超聲提取2次,每次30 min,過(guò)濾,對(duì)濾液進(jìn)行合并,減壓濃縮至少量,用95%乙醇將其轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中,并定容至刻度。

      1.2.1.3 冷浸法。分別精密稱取3份菟絲子粉末,每份約10 g,第1次加10倍量95%乙醇,冷浸24 h,第2次加8倍量95%乙醇,冷浸12 h,過(guò)濾,對(duì)濾液進(jìn)行合并,減壓濃縮至少量,用95%乙醇將其轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中,并定容至刻度。

      1.2.1.4 微波輔助萃取法。分別精密稱取3份菟絲子粉末,每份10 g,分別置于微波提取罐中,再各加入10倍量95%乙醇,80 ℃微波萃取2次,每次30 min,過(guò)濾,對(duì)濾液進(jìn)行合并,減壓濃縮至少量,用95%乙醇將其轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中,并定容至刻度。

      1.2.1.5 索氏提取法。分別精密稱取3份菟絲子粉末,每份約10 g,各置于濾紙筒中,放入250 mL 索氏提取器中,各加入10倍量95%乙醇,加熱提取4 h,過(guò)濾,對(duì)濾液進(jìn)行合并,減壓濃縮至少量,用95%乙醇將其轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中,并定容至刻度。

      1.2.2 不同提取方法中菟絲子總黃酮含量測(cè)定。

      1.2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。

      稱取在105 ℃下干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品25 mg,精密稱定,用95%乙醇溶解,在50 mL容量瓶中定容至刻度,配成5 mg/mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別精密吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL,各置于10 mL的具塞試管中,分別加水至 5.0 mL,然后再分別加入0.6 mL 5%亞硝酸鈉,搖勻,放置6 min, 加入10%硝酸鋁0.6 mL,搖勻后放置6 min,加入4%NaOH 3.0 mL,加水至刻度,搖勻后放置15 min。以第一管做空白對(duì)照,在波長(zhǎng)506 nm處測(cè)定其吸光度A,以蘆丁濃度 C (μg/mL) 為橫坐標(biāo)、吸光度A為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,進(jìn)行線性分析,求出回歸方程,計(jì)算R2。

      1.2.2.2 精密度試驗(yàn)。

      分別精密吸取6份對(duì)照品溶液0.6 mL,按照“1.2.2.1”項(xiàng)下方法,在506 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度A,計(jì)算RSD值。

      1.2.2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)。

      分別精密吸取6份回流提取法供試品溶液0.1 mL ,分別于0、2、4、6、8、10 h,按照“1.2.2.1”項(xiàng)下方法,在波長(zhǎng)506 nm處測(cè)定吸光度A,計(jì)算RSD值。

      1.2.2.4 重復(fù)性試驗(yàn)。

      分別精密吸取6份回流提取法供試品溶液0.1 mL ,按照“1.2.2.1”項(xiàng)下方法,在波長(zhǎng)506 nm處測(cè)定吸光度A,計(jì)算RSD值。

      1.2.2.5 加樣回收率試驗(yàn)。

      分別取“1.2.1.1”項(xiàng)下已知總黃酮含量 (31.14%) 的樣品6份,各精密稱取8 mg,按1∶1比例加入對(duì)照品,按照“1.2.2.1”項(xiàng)下方法,在506 nm波長(zhǎng)處測(cè)定光光度A,計(jì)算RSD值。

      1.2.2.6 樣品總黃酮含量測(cè)定。

      分別精密吸取“1.2.1.1”項(xiàng)下供試品溶液0.1 mL、“1.2.1.2”項(xiàng)下供試品溶液0.5 mL、“1.2.1.3”項(xiàng)下供試品溶液0.2 mL、“1.2.1.4”項(xiàng)下供試品溶液0.2 mL、“1.2.1.5”項(xiàng)下供試品溶液0.2 mL,置于10 mL具塞試管中,按照“1.2.2.1”項(xiàng)下方法,在波長(zhǎng)506 nm處測(cè)定吸光度A,根據(jù)回歸方程式計(jì)算出樣品溶液中總黃酮的含量 (mg/mL),再根據(jù)樣品的稀釋倍數(shù)及質(zhì)量換算出樣品中總黃酮的含量 (mg/mL)。

      1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)均為3次重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果的平均值,數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 11.5進(jìn)行,繪圖采用Microsoft Excel 2007進(jìn)行。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 方法學(xué)考察

      2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。以蘆丁濃度C(μg/mL ) 為橫坐標(biāo)、吸光度A為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖1),通過(guò)線性擬合得回歸方程為A=0.07C+0.000 7(R2=0.999 9),表明蘆丁濃度與吸光度具有良好的線性關(guān)系。

      2.1.2 精密度試驗(yàn)。

      按照“1.2.2.2”操作,測(cè)得6份蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品溶液的平均吸光度為0.415,計(jì)算RSD為0.44%(表1),表明該試驗(yàn)精密度良好。

      2.1.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)。

      按照“1.2.2.3”操作,6份菟絲子供試品溶液的平均吸光度為0.446,計(jì)算RSD為0.44%(表1),表明樣品在10 h內(nèi)穩(wěn)定。

      2.1.4 重復(fù)性試驗(yàn)。

      按照“1.2.2.4”操作,6份菟絲子供試品溶液的平均吸光度為0.448,計(jì)算RSD為0.69%(表1),表明該試驗(yàn)重復(fù)性良好。

      2.1.5 加樣回收率試驗(yàn)。

      菟絲子供試品溶液加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2,計(jì)算平均加樣回收率為99.25%,RSD為0.97% (n=6),表明該試驗(yàn)加樣回收率良好。

      2.2 不同提取方法中總黃酮的含量

      按照“1.2.2.1”項(xiàng)下方法對(duì)“1.2.1”項(xiàng)下供試品溶液進(jìn)行總黃酮含量測(cè)定,計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表3。由表3可知,5種不同提取方法中菟絲子總黃酮的提取率由高到低依次為回流提取法(31.24 mg/g)、微波輔助萃取法(16.84 mg/g)、索氏提取法(12.82 mg/g)、超聲提取法(9.74 mg/g)、冷浸法(8.88 mg/g)。由此可知,回流提取法的提取效率較高。

      3 結(jié)論與討論

      采用5種不同的提取方法對(duì)菟絲子種子進(jìn)行提取,菟絲子總黃酮的提取率由高到低依次為回流提取法、微波輔助萃取法、索氏提取法、超聲提取法、冷浸法,可見(jiàn)回流提取法的提取效率較高。

      冷浸提取法有效避免了加熱過(guò)程,一定程度上保護(hù)菟絲子中的熱敏性黃酮類成分,但是提取時(shí)間較長(zhǎng),所用溶劑量大,同時(shí)試驗(yàn)步驟比較繁瑣。

      超聲提取法提取菟絲子中總黃酮,操作簡(jiǎn)單,提取工藝簡(jiǎn)單,試驗(yàn)條件易于控制,但是菟絲子中總黃酮提取率較低。

      索氏提取法雖然效果也較好,但提取耗時(shí),通常需要3~4 h ,而且長(zhǎng)時(shí)間提取的話會(huì)因受熱而容易導(dǎo)致樣品結(jié)構(gòu)破壞。

      微波輔助萃取法提取效率僅次于回流提取法,雖然微波輔助萃取法它能直接作用于被加熱物質(zhì), 加熱速度快, 時(shí)間較短,一般完成提取只需30 min 左右,另外其樣品分子結(jié)構(gòu)不會(huì)破壞,是中草藥有效成分提取的最佳方法。但設(shè)備昂貴,所需溶劑必須是有機(jī)溶劑,因此達(dá)不到經(jīng)濟(jì)節(jié)約的目的。

      結(jié)合5種方法綜合比較,回流提取法是菟絲子中總黃酮提取的最佳方法。該方法簡(jiǎn)便易行,且溶劑可回收利用,經(jīng)濟(jì)節(jié)約,提取率高,可適用于工業(yè)生產(chǎn)。

      參考文獻(xiàn)

      [1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥出版社,2015:309.

      [2] DONNAPEE S,LI J,YANG X,et al.Cuscuta chinensis Lam.:A systematic review on ethnopharmacology,phytochemistry and pharmacology of an important traditional herbal medicine [J].Jonaral of ethnopharmacol,2014,157 :292-308.

      [3] SHEKARCHI M,KONDORI B M,HAJIMEHDIPOOR H,et al.Finger printing and quantitative analysis of Cuscuta chinensis flavonoid contents from different hosts by RPHPLC[J].Food and nutrition science,2014,5 (10):914-921.

      [4] 王煥江,趙金娟,劉金賢,等.菟絲子的藥理作用及開(kāi)發(fā)前景[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2012,40(6):123-125.

      [5] LIN M K,YU Y L,CHEN K C,et al.Kaempferol from Semen cuscutae attenuates the immune function of dendritic cells [J].Immunobiology,2011,216(10):1103-1109.

      [6] LI C H,DENG H B,LI D D,et al.Advances and challenges in screening traditional Chinese antiaging materia medica [J].Chinese journal of integrative medicine,2013,19(4):243-252.

      [7] AHMED H M M,YEH J Y,TANG Y C,et al.Molecular screening of Chinese medicinal plants for progestogenic and antiprogestogenic activity [J].Joural of biosciences,2014,39(3):453-461.

      [8] 李真,韓麗麗,管任偉,等.正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選菟絲子總黃酮的提取工藝[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2011,22(5):1093-1094.

      [9] 林曉,練立婷,羅麗丹,等.菟絲子總黃酮超聲提取工藝的研究[J].廣州化工,2014,42(2):57-59.

      [10] 李健英,王連芝,閆廣利,等.菟絲子中總黃酮提取工藝研究[J].哈爾濱商業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2011,27(1):5-6,11.

      [11] 王剛.菟絲子總黃酮提取工藝研究[J].遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2009,32(4):181-183.

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