茴香提取液對(duì)酒精性胃黏膜損傷的保護(hù)作用

韓光順+梁華益+馮潔+楊敏+莫庸+黃繼杰+方曉燕+黃麗娟

【摘要】 目的 探究茴香對(duì)小鼠酒精性胃黏膜損傷的保護(hù)作用。

方法 用56°北京紅星二鍋頭白酒建立小鼠酒精性胃黏膜損傷模型，用茴香進(jìn)行干預(yù)，30天后，眼球采血測血清超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平；觀察胃黏膜損傷指數(shù)，HE染色，觀察胃黏膜組織形態(tài)學(xué)的改變。

結(jié)果 與正常組相比，模型組胃黏膜損傷指數(shù)、MDA水平明顯升高（P<0.01），SOD活性明顯降低（P<0.01）；胃黏膜表層大部分腺體形態(tài)及結(jié)構(gòu)不完整，可見大量腺體結(jié)構(gòu)破壞、脫落。與模型組相比，茴香高劑量組和西咪替丁組胃黏膜損傷指數(shù)、MDA水平均明顯降低（P<0.05或0.01），SOD活性顯著升高（P<0.05），茴香中劑量組MDA水平明顯降低（P<0.01）；茴香中劑量組和高劑量組胃黏膜表層腺體結(jié)構(gòu)較完整，茴香高劑量組細(xì)胞壞死較少。

結(jié)論 茴香可能通過降低脂質(zhì)過氧化、增加機(jī)體氧化應(yīng)激能力對(duì)酒精胃黏膜損傷進(jìn)行保護(hù)。

【關(guān)鍵詞】 茴香；酒精；胃黏膜損傷；氧化應(yīng)激；超氧化物歧化酶；丙二醛

中圖分類號(hào)：R573；R965 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2017.03.003

【Abstract】 Objective To explore the protective effects of fennel on alcoholic gastric injury in mice.

Methods The model of alcoholic gastric mucosa injury was established by 56°Beijing Red Star Erguotou Wine and intervened with fennel for 30 days，and then，blood from eyeball was collected to test serum superoxide dismutase （SOD） activity and malondialdehyde （MDA） levels.In addition，the gastric mucosal injury index and HE staining as well as the morphological changes of gastric mucosa were observed.

Results Compared with normal group，gastric mucosal injury index and the level of MDA in model group increased significantly（P<0.01），but the activity of SOD decreased obviously （P<0.01）.The morphology and structure of most glands in the surface of gastric mucosa were incomplete，and it could be seen that a large number of gland structures were damaged and detached.Compared with the model group，gastric mucosal injury index and the level of MDA in fennel high dose group and cimetidine group decreased obviously（P<0.05 or 0.01），but the activity of SOD increased significantly（P<0.05）.The level of MDA in fennel medium dose group decreased significantly（P<0.01）.The structure of glands in the surface of gastric mucosa in the fennel high dose group and the fennel medium dose group were complete，and the fennel high dose group showed less necrosis.

Conclusion Fennel can protect against gastric mucosal damage by reducing lipid peroxidation and increasing oxidative stress in the body.

【Key words】 fennel；alcohol；gastric mucosa injury；oxidative stress；SOD；MDA

隨著生活水平的不斷提高，人們飲酒的問題越來越嚴(yán)重，同時(shí)過量飲酒造成的消化系統(tǒng)問題也越來越受到人們關(guān)注。文獻(xiàn)報(bào)道長期過量飲酒可以引起胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍等[1]。酒精是一種有機(jī)溶劑，高濃度的酒精可以使胃黏膜上皮細(xì)胞發(fā)生壞死，從而破壞胃黏膜的防御系統(tǒng)，使胃黏膜容易受到各種損傷因子的侵襲而受到損害[2]。傘形科植物茴香是我國傳統(tǒng)中藥，主要有散寒止痛、和胃理氣的功效，其果實(shí)、根、莖和葉均可供藥用，主要成分含有脂肪油、氨基酸、揮發(fā)油、黃酮、糖苷、甾醇及生物堿等多種類型的化合物，具有抗氧化的作用[3～4]。本實(shí)驗(yàn)探討茴香對(duì)酒精性胃黏膜損傷的保護(hù)作用，為茴香的開發(fā)利用提供參考資料。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物

6 W齡健康雄性SPF級(jí)小白鼠60只（生產(chǎn)許可證號(hào)scxk桂2012-0003，生產(chǎn)批號(hào)0007545），體重（22±2）g，由右江民族醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，自由飲食。

1.1.2 試劑與藥品

西咪替丁（廣東臺(tái)城制藥股份有限公司，批號(hào)：20160206）；56°北京二鍋頭（北京紅星股份有限公司，20160410）；超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）檢測試劑盒均購自南京建成生物工程研究所（批號(hào)分別為20160607，20160606）；茴香莖葉部分（廣西百色市出售，曬干備用）。

1.1.3 主要儀器

日立全自動(dòng)生化分析儀（株式會(huì)社日立高新技術(shù)公司產(chǎn)品）；722型分光光度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 分組與造模

適應(yīng)性飼養(yǎng)后，按體重隨機(jī)分為：正常對(duì)照組（蒸餾水）、模型組（蒸餾水+56°白酒）、西咪替丁組（25 mg/kg西咪替丁+56°白酒）、茴香提取液低劑量組（2.5 g/kg茴香+56°白酒）、茴香提取液中劑量組（5.0 g/kg茴香+56°白酒）、茴香提取液高劑量組（10.0 g/kg茴香+56°白酒），每組10只小白鼠。各組給予相應(yīng)的藥物干預(yù)和56°白酒灌胃，藥物和蒸餾水均按0.1 ml/10 g量給予，白酒按（0.13 ml/10 g）給予。先給予藥物，1小時(shí)后給予白酒，藥物每天一次，白酒分2次給予，共30天。

1.2.2 茴香水提取液的提取

取茴香莖葉粉碎，用4倍水浸泡40 min，盛于玻璃容器內(nèi)，微波處理后，用10倍水分2次浸提，共1個(gè)小時(shí)，濃縮至每ml含生藥1 g（1.0 g/ml）。冰箱冷藏， 按相應(yīng)濃度用原液1.0 g/ml及分別稀釋為0.5 g/ml和0.25 g/ml。

1.2.3 指標(biāo)檢測 末次給藥后，禁食不禁水12小時(shí)，行眼球采血，收集血液按說明書用分光光度計(jì)測定并計(jì)算MDA水平、SOD活性；取胃組織，記錄胃黏膜損傷指數(shù)（胃黏膜損傷程度參照Kitagawa等[5]方法用損傷指數(shù)表示，按黏膜損傷的長度評(píng)分并計(jì)算損傷指數(shù)：≤1.0 mm為1分，>1.0 mm且≤2.0 mm為2分，依此類推；全胃評(píng)分的總和為該小鼠的胃黏膜損傷指數(shù)）。取胃組織甲醛固定、脫水、石蠟包埋、HE染色，光鏡觀察胃黏膜病理組織學(xué)變化。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（±s）表示，組間比較采用單因素方差分析，兩兩組間比較采用q檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)：α=0.05，雙側(cè)檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 茴香提取液對(duì)小鼠酒精性胃黏膜組織損傷指數(shù)的影響

正常組、模型組、茴香低劑量組、茴香中劑量組、茴香高劑量組、西咪替丁組這六組胃黏膜損傷指數(shù)比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=2.834，P=0.024）。經(jīng)采用LSD分析進(jìn)行兩兩比較得出結(jié)果：與正常組相比，模型組胃黏膜損傷指數(shù)顯著升高（P=0.003）；與模型組相比，茴香高劑量組和西咪替丁組胃黏膜損傷指數(shù)顯著降低，差異有統(tǒng)學(xué)意義（P值分別為0.024，0.009）。見表1。

2.2 茴香提取液對(duì)酒精性胃黏膜損傷小鼠血液SOD、MDA的影響 正常組、模型組、茴香低劑量組、茴香中劑量組、茴香高劑量組、西咪替丁組這六組SOD、MDA比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（SOD：F=2.501，P=0.031；MDA：F=19.081，P<0.001）。經(jīng)采用q檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較得出結(jié)果：與正常組相比，模型組SOD活性顯著降低，MDA水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P值分別為0.003、<0.001）；與模型組相比，茴香高劑量組和西咪替丁組SOD活性顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P值分別為0.014、0.036）；茴香中劑量組、茴香高劑量組和西咪替丁組MDA水平明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P值分別為0.004、<0.001、0.013）。結(jié)果見表2。

2.3 茴香提取液對(duì)酒精性胃黏膜損傷小鼠胃組織病理變化的影響 正常組和西咪替丁組胃黏膜表層腺體形態(tài)及結(jié)構(gòu)完整。模型組胃黏膜表層大部分腺體形態(tài)及結(jié)構(gòu)不完整，可見大量腺體結(jié)構(gòu)破壞、脫落。茴香治療組胃黏膜損害有較大的改善，隨著濃度的增加，改善越明顯。結(jié)果見圖1。

3 討 論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，模型組胃黏膜損傷指數(shù)較正常組明顯增加，胃黏膜表層可見大量腺體結(jié)構(gòu)破壞、脫落。說明酒精對(duì)小鼠胃組織造成了損傷，經(jīng)過茴香治療后，胃黏膜損傷指數(shù)均有所降低，胃黏膜表層腺體結(jié)構(gòu)破壞及細(xì)胞壞死較少，以茴香高劑量最有效，說明茴香對(duì)酒精所致小鼠胃黏膜損傷有治療作用，具有明顯的量效關(guān)系。

有研究表明，乙醇對(duì)胃損傷的機(jī)制主要有以下幾種：氧自由基產(chǎn)生的增加、胃黏膜血流量減少，從而造成胃黏膜的微循環(huán)障礙、破壞胃黏膜機(jī)械屏障、降低胃酸的分泌，其中氧自由基的增多是乙醇對(duì)胃黏膜損傷最主要的機(jī)制[6]。研究表明酒精在小鼠體內(nèi)代謝也會(huì)引起脂質(zhì)的過氧化，從而引起胃黏膜細(xì)胞損傷[7]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，模型組MDA含量明顯比正常組增高，SOD明顯低于正常組，而經(jīng)過茴香治療后，MDA水平明顯降低，SOD明顯升高。機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的氧化自由基主要是由機(jī)體內(nèi)抗氧化酶系統(tǒng)進(jìn)行清理，而其中SOD就是體內(nèi)一種氧化酶，當(dāng)機(jī)體發(fā)生氧化應(yīng)激時(shí)，機(jī)體會(huì)增加SOD活性，清除產(chǎn)生過多的氧化自由基，從而減輕機(jī)體的氧化應(yīng)激損傷[8]。MDA是由脂類代謝所產(chǎn)生一種的氧化產(chǎn)物，其含量的高低主要反映機(jī)體自由基和脂質(zhì)過氧化的代謝水平[9]。而且有研究報(bào)道茴香提取液中的主要成分黃酮類化合物、揮發(fā)油等具有體外抗氧化作用[10～11]，由此推測茴香可能通過提取物中的抗氧化物質(zhì)降低小鼠酒精性胃黏膜損傷的氧化應(yīng)激和增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力對(duì)胃黏膜進(jìn)行保護(hù)。

綜上所述，茴香可能通過降低脂質(zhì)過氧化和增加機(jī)體氧化應(yīng)激能力，從而對(duì)酒精引起的胃黏膜損傷進(jìn)行保護(hù)。除此之外，是否還有其他保護(hù)作用途徑有待于進(jìn)一步研究。

參 考 文 獻(xiàn)

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（收稿日期：2017-04-26 修回日期：2017-05-22）

（編輯：潘明志）