江門地區(qū)老年性白內(nèi)障患者結(jié)膜囊?guī)Ь鸂顩r的調(diào)查

葉群如　黎小妮　高麗麗

【摘要】 目的：了解江門地區(qū)50歲以上老年性白內(nèi)障患者結(jié)膜囊?guī)Ь鸂顩r，分析細(xì)菌構(gòu)成和對(duì)藥物的敏感性。方法：選擇2016年6-10月在本院住院的50歲以上的老年性白內(nèi)障患者707例1414眼，在結(jié)膜囊無(wú)菌化準(zhǔn)備前，采集結(jié)膜囊標(biāo)本做細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)。結(jié)果：送檢1414份標(biāo)本中，有菌生長(zhǎng)106眼（7.5%），其中91眼（6.4%）有細(xì)菌生長(zhǎng)，15眼（1.1%）有真菌生長(zhǎng)。不同性別、眼別、年齡，結(jié)膜囊細(xì)菌檢出率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。不同月份、不同居住地的結(jié)膜囊細(xì)菌檢出率比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。陽(yáng)性標(biāo)本中各菌種的構(gòu)成比為，G+球菌75.5%（80/106），G+桿菌7.5%（8/106），G-桿菌1.9%（2/106），G-球菌0.9%（1/106），真菌14.2%（15/106）。藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果顯示，大多數(shù)G+球菌對(duì)克林霉素、妥布霉素、萬(wàn)古霉素敏感，對(duì)林可霉素和諾氟沙星耐藥。整體而言，萬(wàn)古霉素、左氧氟沙星的耐藥率較低。結(jié)論：江門地區(qū)50歲以上老年性白內(nèi)障患者結(jié)膜囊可能帶有病原菌，并以G+球菌為主。大多數(shù)細(xì)菌對(duì)萬(wàn)古霉素和耐藥的左氧氟沙星敏感。

【關(guān)鍵詞】 結(jié)膜囊； 細(xì)菌培養(yǎng)； 藥物敏感試驗(yàn)

Investigation Bacterial Species of Conjunctiva Sacs of Patients with Senile Cataract in Jiangmen District/YE Qun-ru，LI Xiao-ni，GAO Li-li. //Medical Innovation of China，2017，14（17）：071-074

【Abstract】 Objective：To analyze the situation of conjunctival sac carrier in patients over 50 years old with senile cataract in the area of Jiangmen Method：A total of 707 patients of 1414 eyes with senile cataract aged over 50 years who admitted to our hospital from June to October in 2016 were selected. Before the preparation of conjunctival sac， specimens of conjunctival sac were collected for bacterial culture and drug sensitivity test.Result：Among 1414 pieces of inspected specimens， 106 eyes（7.5%） were bacterial growth.Among them，

91 eyes（6.4%） were bacterial growth bacteria and 15 eyes（1.1%） were fungal growth.There had no significant differences in the comparison regarding different sex，eyes，ages，and the detection rate of conjunctival sac bacteria（P>0.05）.The bacterial detection rate of conjunctival sac in different months and different places were statistically significant（P<0.05）.The constituent ratios of different bacteria in the positive samples were G+ cocci 75.5%（80/106），G+ bacillus 7.5%（8/106），G- bacillus 1.9%（2/106），G- cocci 0.9%（1/106），and fungi 14.2%（15/106）.It can be seen from the drug sensitivity test that most G+ coccus was sensitive to Clindamycin，Tobramycin，and Vancomycin and most G+ coccus was drug resistive to Lincomycin and Norfloxacin.Overall，the rates of drug resistance to Vancomycin and Levofloxacin were low.Conclusion：Pathogenic bacteria may be found in conjunctiva sacs among patients with senile catarace aged over 50 years in Jiangmeng District.The dominant bacteria are G+ coccus.Most of bacterias are sensitive to Vancomycin and Levofloxacin.

【Key words】 Conjunctival sac； Bacterial culture； Drug susceptibility test

First-authors address：Jiangmen Xinhui New Hope Eye Hospital，Jiangmen 529100，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.17.018

江門地區(qū)地處南亞熱帶季風(fēng)氣候，高溫多雨，夏季可長(zhǎng)達(dá)七八個(gè)月。高溫高濕的氣候環(huán)境為病原菌的生長(zhǎng)繁殖提供了有利的條件[1]。同時(shí)，因日照時(shí)間長(zhǎng)，廣東地區(qū)老年性白內(nèi)障發(fā)病率很高，每年都有數(shù)以萬(wàn)計(jì)的患者接受手術(shù)治療。一般認(rèn)為，正常人結(jié)膜囊均不同程度存在病原微生物，主要是條件致病菌[2]。已有研究表明這些細(xì)菌是引起手術(shù)后感染的主要病原體[3-4]。因此，了解本地區(qū)結(jié)膜囊細(xì)菌分布，對(duì)指導(dǎo)本地區(qū)白內(nèi)障圍手術(shù)期用藥、術(shù)前結(jié)膜囊無(wú)菌化準(zhǔn)備及預(yù)防術(shù)后眼內(nèi)炎的發(fā)生，具有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義。本院就2016年6-10月江門地區(qū)50歲以上老年性白內(nèi)障患者707例1414眼取結(jié)膜囊拭子做細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 2016年6-10月江門地區(qū)（蓬江區(qū)、新會(huì)區(qū)、鶴山、開平）50歲以上老年性白內(nèi)障患者707例1414眼。年齡50～95歲，平均（72.5±7.3）歲，中位年齡73歲。其中男318例636眼，女389例778眼。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者年齡均在50歲以上，經(jīng)檢查符合臨床白內(nèi)障診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，無(wú)言語(yǔ)障礙、手術(shù)禁忌證及用藥禁忌證、資料不全者，術(shù)前經(jīng)患者簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：患者經(jīng)檢查發(fā)現(xiàn)內(nèi)分泌疾病、身體重要器官功能性障礙，精神疾病史以及感染性眼病（包括結(jié)膜炎、淚腺炎、角膜炎等）。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采樣 患者取坐位，頭向后仰，眼向上方注視，充分暴露下穹隆部，將蘸有生理鹽水的棉拭子放置于下穹隆中外1/3交界部，向內(nèi)眥部旋轉(zhuǎn)擦拭，避免接觸睫毛和瞼緣造成污染。

1.2.2 細(xì)菌培養(yǎng)、鑒定 將采集有結(jié)膜囊標(biāo)本的棉拭子涂布于培養(yǎng)基上，立即送微生物劃線接種培養(yǎng)。在37 ℃含5%CO2恒溫孵箱中進(jìn)行孵育2 d，觀察并記錄細(xì)菌生長(zhǎng)情況。如72 h無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)者為陰性，如發(fā)現(xiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)，則將出現(xiàn)菌種的標(biāo)本接種于另一塊血瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)行分離[6]。本次培養(yǎng)操作均嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》要求進(jìn)行培養(yǎng)，后行菌種鑒定及藥敏試驗(yàn)。使用全自動(dòng)細(xì)菌分析儀（型號(hào)Vitek2-compact 30生物梅里埃公司有限股份公司法國(guó)），以及VITEK32鑒定卡進(jìn)行鑒定。使用藥敏卡（AST-GN13）對(duì)病菌進(jìn)行藥敏分析，本次檢測(cè)所有操作且質(zhì)控結(jié)果需符合國(guó)際臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（CLSI）標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.3 抗菌藥物 本次對(duì)菌種進(jìn)行藥敏試驗(yàn)使用的常規(guī)抗菌藥物，包括克林霉素、頭孢他啶、林可霉素、諾氟沙星、萬(wàn)古霉素、左氧氟沙星、妥布霉素。

1.2.4 治療方法 在了解患者菌種類型以及藥敏試驗(yàn)后，為確保淚道通暢，術(shù)前以生理鹽水沖洗淚道，清除分泌物，并在術(shù)前1 d使用左氧氟沙星眼液，1次/h滴于患眼，同時(shí)對(duì)眼周皮膚、瞼緣以5%聚維酮碘消毒，以0.5%聚維酮碘消毒結(jié)膜囊。

1.3 觀察指標(biāo) 由專業(yè)人員制定統(tǒng)一問(wèn)卷對(duì)調(diào)查對(duì)象一般資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，內(nèi)容包括性別、居住地區(qū)、民族、職業(yè)、發(fā)病月份、發(fā)病眼睛、年齡、病史以及生活習(xí)慣、環(huán)境等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 全部數(shù)據(jù)錄入計(jì)算機(jī)，采用SPSS 20.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用 字2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 結(jié)膜囊細(xì)菌陽(yáng)性率影響因素 送檢1414份標(biāo)本中，共培養(yǎng)出陽(yáng)性細(xì)菌91份，陽(yáng)性率為6.4%（91/1414）；真菌15份，陽(yáng)性率為1.1%（15/1414）。總陽(yáng)性率為7.5%（106/1414）。細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果顯示，細(xì)菌陽(yáng)性率與性別、眼別、年齡無(wú)關(guān)，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），結(jié)膜囊細(xì)菌陽(yáng)性率與患者居住地、檢查月份有關(guān)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2.2 結(jié)膜囊細(xì)菌中菌種構(gòu)成 106份陽(yáng)性標(biāo)本中，陽(yáng)性率最高的是G+球菌（75.5%），其中表皮葡萄球菌檢出率最高為55.7%，其次為微球菌屬檢出率為9.4%；真菌陽(yáng)性率為（14.2%）、G+桿菌（7.5%），其中棒狀桿菌檢出率較高為4.7%，G-菌檢出率較低，G-桿菌陽(yáng)性率為1.8%、G-球菌陽(yáng)性率為0.9%。

2.3 結(jié)膜囊細(xì)菌對(duì)常見抗菌藥敏感情況統(tǒng)計(jì) 藥物敏感性試驗(yàn)表明，大多數(shù)G+球菌對(duì)克林霉素、妥布霉素、萬(wàn)古霉素敏感，對(duì)林可霉素和諾氟沙星耐藥。整體而言，萬(wàn)古霉素、左氧氟沙星的耐藥率較低，見表3、4。

3 討論

隨著白內(nèi)障疾病發(fā)病率逐年上升，每年行白內(nèi)障手術(shù)治療者不斷增加，導(dǎo)致術(shù)后感染情況發(fā)生幾率增加，有研究表明，患者主要致病菌為結(jié)膜囊存在的病原微生物，因此為減少術(shù)后感染發(fā)生，了解本地區(qū)結(jié)膜囊細(xì)菌分布，對(duì)術(shù)前結(jié)膜囊無(wú)菌化準(zhǔn)備以及術(shù)后眼內(nèi)炎預(yù)防有重要意義[7-9]。既往研究顯示，結(jié)膜囊?guī)Ь?、?xì)菌種類和耐藥性受到性別、年齡、局部或系統(tǒng)性疾病、抗生素的使用、居住地，甚至季節(jié)等多重因素的影響，但隨著抗生素的廣泛應(yīng)用，結(jié)膜囊?guī)Ь试诮档停N、耐藥性也在變化[10]。

本次研究通過(guò)抽取不同地區(qū)老年性白內(nèi)障患者進(jìn)行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)結(jié)膜囊細(xì)菌陽(yáng)性率不同，結(jié)膜囊細(xì)菌陽(yáng)性率與患者性別無(wú)關(guān)，這與部分文獻(xiàn)報(bào)道不同，但有文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)膜囊細(xì)菌檢出率隨年齡增加[11-12]。本次調(diào)查對(duì)象為50～95歲老年性白內(nèi)障患者，但結(jié)果表明結(jié)膜囊細(xì)菌陽(yáng)性率與患者年齡無(wú)明顯關(guān)系，但數(shù)據(jù)顯示患者隨年齡增加結(jié)膜囊細(xì)菌陽(yáng)性率有增加的趨勢(shì)。人體眼部由于有結(jié)膜、角膜上皮保護(hù)，同時(shí)有溶菌酶的水解以及角結(jié)膜表層淚液沖洗等，正常情況不易受到病菌感染，但老年者感染率歲年齡增加有上升趨勢(shì)，我們推測(cè)可能與老年人隨著年齡增長(zhǎng)抵抗力下降、普遍淚膜穩(wěn)定性變差，結(jié)膜囊自潔能力的減弱以及淚液中各種抗體、補(bǔ)體、乳鐵蛋白等防御性功能降低有關(guān)[13-14]。且老年者隨著年齡增加會(huì)有行動(dòng)不便情況，因此有可能在衛(wèi)生清潔這方面較差，淚道阻塞等外眼疾病發(fā)病率較高，造成老年者易受到感染。同時(shí)白內(nèi)障疾病主要行手術(shù)治療，而這些手術(shù)需通過(guò)結(jié)膜囊徑路，一旦細(xì)菌通過(guò)房水進(jìn)入眼內(nèi)，而機(jī)體無(wú)法抵抗，就會(huì)造成免疫失衡，引發(fā)炎癥疾病。因此對(duì)老年患者，內(nèi)眼手術(shù)前結(jié)膜囊的無(wú)菌化準(zhǔn)備應(yīng)引起高度重視，尤其在開展大規(guī)模防盲治盲白內(nèi)障手術(shù)時(shí)，要特別關(guān)注老年人結(jié)膜囊?guī)Ь鸂顩r，并給予適當(dāng)?shù)母深A(yù)，不僅如此在白內(nèi)障治療術(shù)中、術(shù)后各個(gè)環(huán)節(jié)也要做好預(yù)防措施，減少術(shù)后眼內(nèi)炎發(fā)生。

石明華等[15]報(bào)道了不同季節(jié)結(jié)膜囊細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，以春夏季節(jié)細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率高。本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)在6-10月江門地區(qū)中老年人結(jié)膜囊細(xì)菌陽(yáng)性率不同，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），細(xì)菌檢出率以6月份最高，這可能與外部環(huán)境如氣溫、空氣濕度等影響有關(guān)。

一項(xiàng)關(guān)于中國(guó)人結(jié)膜囊細(xì)菌培養(yǎng)的Meta分析研究結(jié)果表明，G+球菌、G+桿菌、G-桿菌常見，其平均檢出率分別為27.90%、8.96%、2.70%，構(gòu)成比分別為70.59%、20.09%、7.17%[16]。G-球菌少見，偶見真菌[17]。本文細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果顯示，G+球菌是結(jié)膜囊內(nèi)的主要寄生菌，其檢出率為6.4%，構(gòu)成比為75.5%。排在第二位的是真菌，其檢出率為1.1%，構(gòu)成比達(dá)到14.2%。同時(shí)G+球菌中以表皮葡萄球菌檢出率最高為55.7%，其次為微球菌屬為9.4%，G+桿菌以棒狀桿菌檢出率較高為4.7%，宋林等[18]學(xué)者對(duì)新疆哈薩克族白內(nèi)障患者術(shù)前結(jié)膜囊細(xì)菌培養(yǎng)，結(jié)果G+球菌檢出率為88.3%，其中以葡萄球菌最多為66.4%，其次為微球菌屬9.8%。此次研究得出的結(jié)果低于文獻(xiàn)報(bào)道，這可能與氣候、采樣季節(jié)、環(huán)境衛(wèi)生、抽樣人群及檢查方法不同有關(guān)，但結(jié)果顯示白內(nèi)障致病菌以革蘭陽(yáng)性細(xì)菌為主，且表皮葡萄球菌為主要致病菌與本次研究結(jié)果相符。在本次菌種鑒定中存在致病菌如金黃色葡萄球菌，但多數(shù)細(xì)菌為正常菌種、條件致病菌（如表皮葡萄球菌、棒狀桿菌等），G+球菌一般情況下常見條件致病菌是無(wú)致病性，但近些年由于廣譜抗菌藥物濫用等情況，導(dǎo)致病菌致病力及種類發(fā)生變化，這些病菌可能隱藏域晶狀體囊袋中在手術(shù)中進(jìn)入玻璃體后繁殖引發(fā)炎癥，或因手術(shù)患者抵抗力下降、眼表微環(huán)境破壞后造成條件菌引發(fā)感染，因此術(shù)前無(wú)菌化準(zhǔn)備以及術(shù)后預(yù)防措施是有必要性的[19-20]。

本次對(duì)江門地區(qū)50歲以上老年性白內(nèi)障患者結(jié)膜囊?guī)Ь鸂顩r分析，發(fā)現(xiàn)50歲以上帶有病原菌可能較大，且以G+球菌為主，大多數(shù)細(xì)菌對(duì)萬(wàn)古霉素和耐藥的左氧氟沙星敏感，通過(guò)研究認(rèn)識(shí)結(jié)膜囊細(xì)菌分布，對(duì)于預(yù)防和治療眼部感染性疾病具有極其重要的意義。目前，由于地域、年齡、抗生素應(yīng)用情況的差異、納入標(biāo)準(zhǔn)及培養(yǎng)基的不同、取材部位和方法的多樣性、樣本數(shù)量的差異等因素的影響，使得培養(yǎng)結(jié)果之間存在較大差異。因此，有必要統(tǒng)一培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行多中心協(xié)作，全面持續(xù)地監(jiān)測(cè)結(jié)膜囊正常菌群的變遷。

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（收稿日期：2017-04-14） （本文編輯：程旭然）