白花泡桐優(yōu)樹組織培養(yǎng)及產(chǎn)業(yè)化快繁技術(shù)

蘇江　冼康華　付傳明　黃寧珍　黃惠錦　何金祥

摘要： 以自選育的白花泡桐優(yōu)樹莖段為外植體，進(jìn)行種苗組培快繁技術(shù)研究。結(jié)果表明：其最佳的外植體滅菌方法是以0.1%升汞處理7 min；合適的初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6BA 2.0 mg·L1+IBA 0.2 mg·L1+糖30 g·L1+瓊脂3.5 g·L1（pH 5.8），培養(yǎng)30 d，芽誘導(dǎo)率70%；合適的繼代增殖方法為在高濃度植物生長物質(zhì)培養(yǎng)基MS+6BA 4.0 mg·L1+IBA 0.4 mg·L1+蔗糖30 g·L1+瓊脂3.5 g·L1（pH 5.8）和低濃度植物生長物質(zhì)培養(yǎng)基MS+6BA 0.4 mg·L1+IBA 0.04 mg·L1+蔗糖30 g·L1+瓊脂3.5 g·L1（pH 5.8）中交替培養(yǎng)，獲得的叢生芽長勢良好，玻璃化率低于5%，增殖系數(shù)大于6.0/25 d；最適的生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0.2 mg·L1+蔗糖20 g·L1+卡拉膠3.4 g·L1（pH 5.8），培養(yǎng)14 d，得到白花泡桐生根苗，每株長根5～10條，根長3～5 cm，生根率98%，根系潔白、根毛少而短，易于清洗。將生根苗按照常規(guī)方法煉苗后移栽于溫室大棚中，50 d后即可出圃，此時(shí)平均苗高1.0 m、地徑1.0～2.0 cm，成活率在90%以上。

關(guān)鍵詞： 白花泡桐， 組織培養(yǎng)， 快繁技術(shù)， 培養(yǎng)基

中圖分類號： Q943.1， Q813.1

文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A

文章編號： 10003142（2017）11138609

Abstract： Using excellent stem segments of Paulownia fortunei as explants， tissue culture and rapid propagation technique for P. fortunei were studied in this paper. The results showed that the optimal sterilization time of 0.1% HgCl2 was 7 m； the suitable primary induction medium was MS+ 6BA 2.0 mg·L1 + IBA 0.2 mg·L1+ sucrose 30 g·L1+ agar 3.5 g·L1 （pH 5.8）， 30 d later， bud induction rate was 70%； the suitable method for multiplication culture was MS+ 6BA 4.0 mg·L1+ IBA 0.4 mg·L1+ sucrose 30 g·L1+ agar 3.5 g·L1 （pH 5.8） and MS+ 6BA 0.4 mg·L1+ IBA 0.04 mg·L1+ sucrose 30 g·L1+ agar 3.5 g·L1 （pH 5.8） alternately，

health and vitrification multiple shoots with this method was lower than 5%， multiplication factor was higher than 6.0/25 d ； the optimal medium for rooting was 1/2MS + NAA 0.2 mg·L1+ sucrose 20 g·L1+ carrageenan 3.4 g·L1 （pH 5.8）， 14 d later， the rooting seedlings were obtained， rooting number were 5-10， root length was 3-5 cm， the rooting rate was 98% and whose roots were white， with less and short hair， easy to clean. Through acclimatization， the rooting seedlings were transplanted in the greenhouse， 50 d later， whose average height was 1.0 m， ground diameter was 1.0-2.0 cm， and survival rate was above 90%.

Key words： Paulownia fortunei， tissue culture， rapid propagation technique， medium

我國是木材需求大國，自1999年以來，我國進(jìn)口木材及其制品耗匯每年均在100億美元以上（馬花如，2011）。隨著人類對環(huán)境保護(hù)意識的增強(qiáng)，我國對生態(tài)脆弱區(qū)的天然林實(shí)行了商品性禁伐，對國有林區(qū)實(shí)行了減產(chǎn)限伐，進(jìn)一步減少了我國木材供給，加劇了木材供需矛盾（馬花如，2011）。盡管自2002年以來，我國把發(fā)展速生豐產(chǎn)林納入林業(yè)六大工程，在一定程度上促進(jìn)速生豐產(chǎn)林的進(jìn)一步發(fā)展，但據(jù)統(tǒng)計(jì)，2003—2009年間，我國營造速生豐產(chǎn)用材林平均生長量為9～12 m3·hm-2·a1，水平遠(yuǎn)低于新西蘭、瑞典、巴西等國家的30 m3·hm-2·a1（陳桂英和吳宣明，2007）。因此，發(fā)展適合我國立地條件的速生豐產(chǎn)林樹種，充分挖掘我國林地供給潛力，提高我國速生豐產(chǎn)用材林木材的產(chǎn)量和質(zhì)量，對我國林業(yè)工程及經(jīng)濟(jì)發(fā)展具有重要意義。

泡桐為玄參科泡桐屬（Paulownia）多年生落葉喬木，在我國分布較廣（邢雅麗等，2013）。泡桐為良好的用材林樹種，其材質(zhì)輕軟，易加工和干燥，尺寸穩(wěn)定性好，很少開裂和變形，材質(zhì)淺白，具有獨(dú)特的絲絹光澤（邱乾棟等，2014）。白花泡桐是玄參科泡桐屬的一個(gè)種，樹高可達(dá)20 m，生長快，抗性強(qiáng)，材質(zhì)優(yōu)良，是我國重要的速生用材和生態(tài)防護(hù)樹種，在我國南方泡桐產(chǎn)區(qū)占有十分重要的地位（曲金柱等，2006；李芳東等，2010）。白花泡桐也是泡桐屬內(nèi)分布區(qū)域最為廣泛的樹種，由于悠久的栽培歷史和分布區(qū)域內(nèi)多變的生態(tài)條件，其種內(nèi)變異十分豐富（羅江華等，2010）。由于泡桐屬種間可天然雜交，自然形成的種子變異的可能性較大，為保證母本的優(yōu)良性狀，埋根、埋條和組培等無性繁殖是泡桐優(yōu)株繁殖的主要方式，但是埋根和埋條繁殖速度慢且需要較大的人力及占地面積，而通過組培快繁，既能夠加快繁殖速度，又能夠減少人力物力輸出。本文的研究對象是從桂北地區(qū)自選育的一個(gè)白花泡桐優(yōu)良株系，其突出的特點(diǎn)是（1）抗逆性好、適應(yīng)性強(qiáng)、長江流域以南均可種植；（2）桿形好，定植頭1～2 a內(nèi)分枝少；（3）生長速度快、5～6 a即可采伐、平均胸徑42 cm、平均畝產(chǎn)量33 m3；（4）材質(zhì)輕、韌性好、密度低、強(qiáng)度及抗彎強(qiáng)度大，經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高。

雖然白花泡桐的種苗脫毒快繁技術(shù)目前已有報(bào)道，但不同的白花泡桐優(yōu)良單株，其最優(yōu)的組培脫毒技術(shù)和方法不同（李芳東等，2010）。本研究在參照前人研究成果、開展白花泡桐優(yōu)良無性系種苗組培快繁研究中，發(fā)現(xiàn)仍存在一些需要解決的技術(shù)問題：一是在高濃度植物生長物質(zhì)培養(yǎng)基上多次繼代后，材料容易玻璃化，玻璃化率隨著繼代次數(shù)的增加而升高，大幅影響種苗質(zhì)量、繁殖率、生根率和成活率；二是在低濃度植物生長物質(zhì)增殖培養(yǎng)基上多次繼代后，玻璃化率雖然降低，但繁殖速度慢，生長緩慢；三是組培苗在瓊脂為支撐物的培養(yǎng)基上生根時(shí)，根系表面長出大量的長約5 mm的細(xì)絨毛，吸附大量的培養(yǎng)基，洗苗費(fèi)工費(fèi)時(shí)，且在洗苗時(shí)容易對種苗造成損傷，影響洗苗效率和移栽成活率。

針對上述問題，本研究以自選育的白花泡桐優(yōu)良株系為對象，研究并完善其種苗組培快繁技術(shù)，為泡桐種苗的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)提供技術(shù)支撐。

1材料與方法

1.1 植物材料

2015年5—6月份，從桂林植物園白花泡桐（Paulownia fortunei）優(yōu)樹種質(zhì)園中，采集當(dāng)年生嫩枝為外植體材料。

1.2 白花泡桐消毒、接種及初代培養(yǎng)

將白花泡桐當(dāng)年生枝條置于質(zhì)量濃度為1%的洗潔精水溶液中浸泡15 min，取出后用流水沖洗干凈，再置于超凈工作臺上用體積濃度為 70%的乙醇浸泡60 s，取出后再置于質(zhì)量濃度為0.1%的HgCl2中浸泡滅菌，滅菌時(shí)間分別為5、6、7和8 min，取出后用無菌水清洗 3～5 次。將經(jīng)過消毒處理的白花泡桐枝條剪切成含有1或2個(gè)腋芽的莖段，將莖段接種到初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，每個(gè)處理30瓶，每瓶接種外植體1個(gè)，重復(fù)3次，兩周后進(jìn)行觀測。

白花泡桐初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6BA 1.0～3.0 mg·L1+IBA 0.2 mg·L1+蔗糖30 g·L1+瓊脂3.5 g·L1（pH 5.8），6BA取1.0、2.0、3.0 mg·L1 三個(gè)水平，共設(shè)計(jì)3個(gè)處理，接種時(shí)每個(gè)處理60瓶，每瓶接種白花泡桐莖段1個(gè)，重復(fù)3次；之后，置于溫度（26 ± 3）℃、光照時(shí)間10～12 h·d1、光照強(qiáng)度40 μmol·m2·s1的條件下培養(yǎng)，每隔3～5 d觀測記錄材料的生長情況，及時(shí)清理污染材料，30 d后觀察記錄幼苗生長狀態(tài)及誘導(dǎo)率。

1.3 白花泡桐增殖培養(yǎng)

將初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基中獲得的無菌幼苗剪成帶有1～2個(gè)腋芽的莖段，接種于白花泡桐增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖培養(yǎng)。

初步繼代增殖培養(yǎng)試驗(yàn)設(shè)計(jì)：培養(yǎng)基為MS+6BA 3.0～5.0 mg·L1+IBA 0.3～0.5 mg·L1+蔗糖30 g·L1+瓊脂3.5 g·L1（pH5.8），6BA取3.0、4.0、5.0 mg·L1三個(gè)水平，IBA取0.3、0.4、0.5 mg·L1三個(gè)水平，共設(shè)計(jì)9個(gè)處理，3次重復(fù)；篩選出適合的6BA和IBA的濃度和配比。

后續(xù)的繼代增殖培養(yǎng)試驗(yàn)設(shè)計(jì)：根據(jù)初篩實(shí)驗(yàn)，獲得適合的6BA和IBA的濃度和配比，但在這一條件下連續(xù)培養(yǎng)5代后，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生較多的玻璃化材料，因此，保持6BA與IBA濃度比例不變，降低二者的濃度進(jìn)行后續(xù)的繼代增殖培養(yǎng)試驗(yàn)。所采用的培養(yǎng)基為MS+6BA 0.2～4.0 mg·L1+IBA 0.02～0.4 mg·L1+蔗糖30 g·L1+瓊脂3.5 g·L1（pH 5.8），其中，6BA和IBA的濃度組合分別為0.2和0.02、0.4和0.04、2.0和0.02、4.0和0.4 mg·L1，共設(shè)計(jì)4個(gè)處理，三次重復(fù)。上述每個(gè)處理10瓶，每瓶6個(gè)接種點(diǎn)，接種后置于溫度（26 ± 3） ℃、光照時(shí)間10～12 h·d1、光照強(qiáng)度40 μmol·m2·s1的條件下培養(yǎng)。每25 d為一代，連續(xù)進(jìn)行6次繼代。統(tǒng)計(jì)各個(gè)處理每一代的增殖系數(shù)、長勢（葉片顏色、苗高及莖桿的粗細(xì)等）和玻璃化率等，分析植物生長物質(zhì)濃度和繼代次數(shù)對白花泡桐增殖培養(yǎng)的影響。

交替繼代增殖培養(yǎng)試驗(yàn)設(shè)計(jì)：前述的繼代增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，不論在高6BA和IBA濃度或低6BA和IBA濃度的培養(yǎng)基上進(jìn)行連續(xù)繼代，均無法達(dá)到理想的增殖效果，還需對繼代培養(yǎng)方案進(jìn)行進(jìn)一步改善。根據(jù)前述的繼代實(shí)驗(yàn)結(jié)果，以高濃度植物生長物質(zhì)增殖培養(yǎng)基MS+6BA 4.0 mg·L1+IBA 0.4 mg·L1+蔗糖30 g·L1和低濃度植物生長物質(zhì)增殖培養(yǎng)基MS+6BA 0.4 mg·L1+IBA 0.04 mg·L1+蔗糖30 g·L1進(jìn)行交替繼代，每25 d為一代，連續(xù)6個(gè)世代，統(tǒng)計(jì)各個(gè)處理每一代的增殖系數(shù)、長勢（葉片顏色、苗高及莖桿的粗細(xì)等）和玻璃化率等，以確定白花泡桐繼代增殖培養(yǎng)方案。

1.4 白花泡桐組培苗生根培養(yǎng)及煉苗移栽

選擇高濃度植物生長物質(zhì)增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)所得的株高4 cm以上、植株正常粗壯的芽苗為生根材料，轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)。生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0.1～0.3 mg·L1+蔗糖20 g·L1+瓊脂/卡拉膠3.4 g·L1（pH5.8），NAA取0.1、0.2、0.3 mg·L1三個(gè)水平，以瓊脂和卡拉膠分為兩個(gè)組，每組設(shè)計(jì)6個(gè)處理，每個(gè)處理10瓶，每瓶接種白花泡桐無根苗6株，重復(fù)3次。接種后，將材料置于溫度（26 ± 3）℃、光照時(shí)間10～12 h·d1、光照強(qiáng)度40 μmol·m2·s1的培養(yǎng)室中培養(yǎng)；每隔3～5 d觀測植株的生根情況，培養(yǎng)14 d后，觀測統(tǒng)計(jì)各處理幼苗的根數(shù)、根長、根毛、生根率及植株長勢等。將所得的生根苗置于70%遮陰度的大棚中煉苗5～7 d后，取出并洗凈根部培養(yǎng)基，移栽于裝有消過毒的移栽基質(zhì)（紅壤土∶泥碳土=2∶1）的營養(yǎng)杯（12 cm × 12 cm）中，每個(gè)處理移栽30株、重復(fù)3次，在溫室大棚培養(yǎng)50 d后，對比觀察株高、地徑及成活率等。

將低濃度植物生長物質(zhì)增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)所得的株高4 cm以上、植株正常粗壯的芽苗為生根材料，按照上述方法，同時(shí)進(jìn)行生根培養(yǎng)和煉苗移栽實(shí)驗(yàn)，以比較不同的繼代增殖培養(yǎng)方式對白花泡桐組培苗生根和移栽的影響。

2結(jié)果與分析

2.1 白花泡桐消毒、接種與初代培養(yǎng)

消毒滅菌試驗(yàn)表明，隨著殺菌時(shí)間的延長，污染率逐漸降低，成活率先提高后下降，其中消毒7 min效果較好，成活率為26.7%（表1）。

白花泡桐初代誘導(dǎo)的目的是利用白花泡桐莖段腋芽抽生出健康幼苗，初代誘導(dǎo)結(jié)果表明，6BA濃度為2.0 mg·L1 和IBA濃度為0.2 mg·L1的組合誘導(dǎo)效果較好（表2，圖1：A），誘導(dǎo)出的芽苗健壯，誘導(dǎo)率達(dá)到70%， 能夠滿足繼代增殖的需求。

6BA和IBA濃度過低，生長慢、芽誘導(dǎo)率低；濃度過高，則產(chǎn)生大量的愈傷組織，芽誘導(dǎo)在一定程度上受到抑制。

2.2 白花泡桐增殖培養(yǎng)

初步的增殖培養(yǎng)研究表明，不同濃度組合的6BA和IBA對白花泡桐生長和增殖的影響明顯不同（表3）。其中，當(dāng)6BA濃度為4.0 mg·L1 、IBA濃度為0.4 mg·L1時(shí)，白花泡桐增殖系數(shù)達(dá)到最大值（7.0/25 d），所培養(yǎng)出的材料較好，頂枯、死亡或玻璃化苗很少，而且所得幼苗均勻健壯，葉片鮮綠，莖稈相對較粗，苗高達(dá)到8.1 cm，是較為適宜的白花泡桐增殖培養(yǎng)基；在6BA和IBA濃度配比失當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上，不僅增殖系數(shù)變低，還會出現(xiàn)一定數(shù)量的死亡和頂枯材料，且植株高矮不齊、長勢比較凌亂；在6BA和IBA配比合適但濃度較低或較高的培養(yǎng)基上，芽生長較慢，增殖系數(shù)低。因此，白花泡桐繼代增殖培養(yǎng)基中6BA 和IBA的合適比例為10∶1，兩者初始的最佳濃度組合為6BA 4.0 mg·L1+IBA 0.4 mg·L1。

然而，進(jìn)一步的繼代培養(yǎng)研究（表4）發(fā)現(xiàn)， 在保持6BA 和IBA的比例（10∶1）不變的前提下，當(dāng)白花泡桐在6BA 2.0～4.0 mg·L1、IBA 0.2～ 0.4 mg·L1濃度下連續(xù)繼代多代，玻璃化率隨著繼代次數(shù)的增加而增高，到第5代時(shí)玻璃化率超過20%；同時(shí)，由于玻璃化產(chǎn)生大量的無效材料，增殖系數(shù)則隨著繼代次數(shù)的增加而降低。在6BA 0.2～0.4 mg·L1、IBA 0.02～0.04 mg·L1的濃度下連續(xù)培養(yǎng)多代，玻璃化率普遍較低（低于2.0%），未隨繼代次數(shù)的增加而產(chǎn)生改變；增殖系數(shù)除了第1～2代較高外，后續(xù)世代均比較低。因此，不論在高6BA和IBA濃度或低6BA和IBA濃度的培養(yǎng)基上進(jìn)行連續(xù)繼代，均無法達(dá)到理想的增殖效果，因此，還需對白花泡桐繼代培養(yǎng)方案進(jìn)行進(jìn)一步改善。

在高濃度植物生長物質(zhì)培養(yǎng)基MS+6BA 4.0 mg·L1+IBA 0.4 mg·L1+蔗糖30 g·L1+瓊脂3.5 g·L1（pH 5.8）和低濃度植物生長物質(zhì)培養(yǎng)基MS+6BA 0.4 mg·L1+IBA 0.04 mg·L1+蔗糖30 g·L1+瓊脂3.5 g·L1（pH 5.8）交替培養(yǎng)（表5）結(jié)果顯示，通過多次交替繼代培養(yǎng)后， 材料玻璃化率沒有明顯升高，每一代的玻璃化率都在5%以下；增殖系數(shù)在高濃度植物生長物質(zhì)培養(yǎng)基中保持在7.0左右（圖1：B），在低濃度植物生長物質(zhì)培養(yǎng)基中為5.8左右（圖1：C），每兩代取平均值在6.0以上?？梢?，此方案在降低玻璃化率的同時(shí)維持較高的增殖系數(shù)，因此是較為適用的白花泡桐繼代增殖培養(yǎng)方法。

2.3 白花泡桐組培苗生根培養(yǎng)

通過生根培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果（表6）發(fā)現(xiàn)，白花泡桐比較容易生根，在所有的生根培養(yǎng)基中，生根率都在90%以上。生根率、生根條數(shù)和根長不受材料來源（不論原來是培養(yǎng)于高濃度或低濃度的6BA和IBA的繼代培養(yǎng)基中）、培養(yǎng)基中的固體支撐物種類（瓊脂或卡拉膠）所影響；同時(shí)，NAA濃度對根長和生根根條數(shù)也無明顯影響；但當(dāng)培養(yǎng)基中NAA濃度為 0.2 mg·L1時(shí)，生根率明顯高于其它處理，為98%。因此，確定NAA 0.2 mg·L1為較適宜白花泡桐組培苗生根的生長素濃度。

本研究還發(fā)現(xiàn)，以瓊脂為固體支撐物的生根培養(yǎng)基培養(yǎng)出的白花泡桐生根苗，根系上長有大量密集長約0.5 cm的絨毛，這些絨毛牢牢附著大量的培養(yǎng)基，洗苗時(shí)很難洗凈，移栽后組培苗很容易被污染而死亡；而利用卡拉膠作為生根培養(yǎng)基的固體支撐物，植株基部愈傷團(tuán)變小，根系上絨毛的生長受到抑制，絨毛少且短，生根苗清洗方便快捷，省時(shí)省工省力，更利于種苗的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)（圖1：D）。因此，白花泡桐適合的生根培養(yǎng)基配方為1/2MS+NAA 0.2 mg·L1+蔗糖20 g·L1+卡拉膠3.4 g·L1。

2.4 白花泡桐組培苗煉苗移栽

將不同生根培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)所得的生根苗，煉苗5～7 d后，移栽于溫室大棚中。50 d后觀測發(fā)現(xiàn)，所有生根苗（不論生根材料是來源于高濃度或低濃度植物生長物質(zhì)的繼代培養(yǎng)基中）的移栽成活率、株高和直徑增長均沒有明顯差別，它們的平均成活率均在90%以上，平均株高為1.10 m，平均地徑為1.4 cm （圖1：E）。

3討論與結(jié)論

白花泡桐種苗組培繁育研究已有零星報(bào)道。史保新（2005）在白花泡桐體細(xì)胞胚胎發(fā)生及植株再生的研究中發(fā)現(xiàn)，白花泡桐葉片和莖段胚性愈傷組織誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)基分別為MS+6BA 14.0 mg·L1+NAA 0.3 mg·L1和MS+6BA 8.0 mg·L1+NAA 0.3 mg·L1，葉片的體細(xì)胞胚胎發(fā)育能力均高于莖段。鄧建軍等（2011）在白花泡桐優(yōu)樹試管嫁接幼化及組培快繁技術(shù)研究中發(fā)現(xiàn)，所研究的白花泡桐優(yōu)樹組培快繁最佳繼代培養(yǎng)基為1/2 MS+6BA 6.0 mg·L1+NAA 0.3 mg·L1，繁殖系數(shù)4.65/25 d；最佳生根培養(yǎng)基為1/2 MS+ NAA 0.1 mg·L1，培養(yǎng)20 d生根率85%。李芳東等（2010）在對13個(gè)不同的白花泡桐優(yōu)樹進(jìn)行組培快繁研究中發(fā)現(xiàn)，白花泡桐最適繼代增殖培養(yǎng)基為1/2 MS+6BA 4.0 mg·L1+NAA 0.3 mg·L1，生根培養(yǎng)基為1/2 MS+ NAA 0.1 mg·L1；不同的優(yōu)樹在上述最適增殖培養(yǎng)基中增殖系數(shù)不同，變化幅度1.50～5.57/30 d。王和樂等（2003）通過研究提供了改良白花泡桐組培快繁的初代（MS+6BA 0.6～0.8 mg·L1+NAA 0.2 mg·L1）、增殖（MS+6BA 2.5～4.0 mg·L1+NAA 0.2 mg·L1）和生根培養(yǎng)基（1/2 MS+NAA 0.4 mg·L1或IBA 0.3～0.5），生根培養(yǎng)15～20 d，生根率100%，繁殖系數(shù)未明。上述這些研究各有側(cè)重點(diǎn)，所提供的數(shù)據(jù)和結(jié)果也不盡相同，未能對白花泡桐種苗組培快繁過程提供比較系統(tǒng)、詳細(xì)及完整的技術(shù)資料。

本研究在前人的研究基礎(chǔ)上，從外植體消毒、初代培養(yǎng)、繼代增殖和生根培養(yǎng)四個(gè)與種苗快繁相關(guān)的環(huán)節(jié)，對自選育的白花泡桐優(yōu)樹進(jìn)行種苗組培快繁研究，獲得了與前人不同的研究經(jīng)驗(yàn)和結(jié)果。首先，在外植體消毒過程中發(fā)現(xiàn)，由于白花泡桐嫩枝莖節(jié)中空，消毒滅菌時(shí)升汞滲入莖桿內(nèi)部、從而對其造成傷害，導(dǎo)致污染率和死亡均比較高（江香梅等，2009）；采用從基部整枝切下、整枝消毒的方法，利用隔層將中空的內(nèi)腔與外部隔絕，避免了內(nèi)腔在消毒前后暴露于空氣、洗滌液和消毒液中，使得消毒成功率和成活率大大提高。

其次，在初代誘導(dǎo)培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基中6BA和IBA濃度過低，芽誘導(dǎo)率低、生長慢；濃度過高，則產(chǎn)生大量的愈傷組織，芽生長受到抑制；比較合適的6BA和IBA濃度為2.0和0.2 mg·L1。

第三，在繼代增殖培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)，在同一濃度植物生長物質(zhì)的培養(yǎng)基上長期繼代，如果植物生長物質(zhì)濃度偏高、則產(chǎn)生比較多的玻璃化材料，濃度偏低、則生長速度和繁殖速度下降；長期使用較高濃度的植物生長物質(zhì)可能是組織培養(yǎng)中玻璃化產(chǎn)生的一個(gè)主要原因（Kevers et al，1986；周音等，2000）；針對這一問題，采用植物生長物質(zhì)高濃度（6BA 4.0mg·L1、IBA0.4mg·L1）和低濃度（6BA 0.4 mg·L1、IBA 0.04 mg·L1）交替培養(yǎng)的方法，獲得了增殖系數(shù)大于6.0/25d的良好效果，在保證白花泡桐增殖效率的同時(shí)解決了白花泡桐組培苗玻璃化嚴(yán)重的問題；這一增殖效果與江香梅等（2009）相似，但高于曲金柱等 （2006）所得的增殖系數(shù)。

第四，在生根培養(yǎng)研究中發(fā)現(xiàn)，白花泡桐的最佳生根培養(yǎng)為1/2MS+NAA 0.2 mg·L1；但當(dāng)以瓊脂為支撐物時(shí)，苗基部會產(chǎn)生較大的愈傷團(tuán)，長成的根系上有很多根毛，附著較多培養(yǎng)基，極不容易清洗；而以卡拉膠作為培養(yǎng)基支撐物時(shí)，植株基部的愈傷團(tuán)變小，長成的根系根毛少且短，移栽時(shí)清洗容易，省工省時(shí)，降低了洗苗過程中的機(jī)械損傷，保證較高的移栽成活率。上述研究結(jié)果和經(jīng)驗(yàn)為該白花泡桐優(yōu)株種苗組培快繁產(chǎn)業(yè)化提供技術(shù)支撐，也為白花泡桐其它優(yōu)株和泡桐屬其它種的組培快繁研究提供參考。

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