腎康注射液聯(lián)合前列地爾注射液治療早期糖尿病腎病的臨床效果及其對(duì)免疫功能的影響

李敏　郭毅飛　汪嘵芬

[摘要] 目的 觀察腎康注射液聯(lián)合前列地爾注射液治療早期糖尿病腎病的臨床效果及其對(duì)免疫功能的影響。 方法 將2015年7月～2016年7月湖北省十堰市太和醫(yī)院收治的120例早期糖尿病腎病患者按隨機(jī)、對(duì)照、雙盲臨床試驗(yàn)原則分為觀察組和對(duì)照組，各60例。兩組患者均使用胰島素降糖治療，觀察組在此基礎(chǔ)上給予腎康注射液聯(lián)合前列地爾注射液治療，總療程2周。治療前后比較兩組患者血肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）、尿白蛋白排泄率（UAER）、尿β2-微球蛋白（β2-MG）、T細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）、炎癥指標(biāo)[白細(xì)胞介素（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）]水平。 結(jié)果 兩組治療后Cr、BUN、UAER、β2-MG、TNF-α、IL-6和hs-CRP水平均較治療前降低（P < 0.05）。觀察組治療后UAER、β2-MG、IL-6、TNF-α和hs-CRP水平較對(duì)照組降低更加顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。兩組治療后CD8+較治療前升高（P < 0.05），CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較治療前降低（P < 0.05）；觀察組治療后CD4+、CD8+、CD4+/CD8+較對(duì)照組改善顯著（P < 0.05）。 結(jié)論 腎康注射液聯(lián)合前列地爾注射液治療早期糖尿病腎病可有效減輕炎性反應(yīng)，改善細(xì)胞免疫功能，控制尿蛋白。

[關(guān)鍵詞] 腎康注射液；前列地爾注射液；糖尿病腎??；免疫功能

[中圖分類號(hào)] R587.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2016）12（c）-0157-04

[Abstract] Objective To observe clinical effect of Shenkang Injection combined with Alprostadil Injection in the treatment of early diabetic nephropathy （DN） and its effect on immune function. Methods From July 2015 to July 2016， 120 patients with early DN in Taihe Hospital of Shiyan City in Hubei Province were divided into observation group and control group according to randomized， controlled， double-blind clinical trial principles， 60 cases in each group. All the patients in two groups were given insulin for blood sugar control， and patients in observation group were added Shenkang Injection combined with Alprostadil Injection， the course of treatment was 2 weeks. Blood serum creatinine （Cr）， urea nitrogen （BUN）， urinary albumin excretion rate （UAER）， β2-microglobulin （β2-MG）， T lymphocyte subsets （CD3+， CD4+， CD8+， CD4+/CD8+）， inflamatory indexes （IL-6， TNF-α， hs-CRP） between two groups were compared before and after treatment. Results Cr， BUN， UAER， β2-MG， TNF-α， IL-6， hs-CRP levels of two groups after treatment were lower than before treatment （P < 0.05）. UAER， β2-MG， IL-6， TNF-α， hs-CRP levels of observation group after treatment were significantly lower than those of control group， with statistical differences （P < 0.05）. CD8+ of two groups after treatment was higher than before treatment （P < 0.05）， CD3+， CD4+， CD4+/CD8+ of two groups after treatment were lower than before treatment （P < 0.05）. CD4+， CD8+， CD4+/CD8+ of observation group after treatment were significantly better than those of control group （P < 0.05）. Conclusion Shenkang Injection combined with Alprostadil Injection in the treatment of early DN can effectively reduce the inflammatory response， enhance cellular immune function， and control urine protein.

[Key words] Shenkang Injection； Alprostadil Injection； Diabetic nephropathy； Immune function

糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN）是糖尿病的主要慢性并發(fā)癥，常隱匿起病，卻是糖尿病患者終末期腎?。╡nd stage renal disease，ESRD）及導(dǎo)致患者終末期死亡的主要病因[1]。研究表明，DN患者機(jī)體微炎癥狀態(tài)及細(xì)胞免疫系統(tǒng)功能障礙可能參與疾病的發(fā)生、發(fā)展[2-3]。本研究通過(guò)使用腎康注射液聯(lián)合前列地爾注射液治療早期DN，觀察患者腎功能、尿蛋白、炎癥因子及免疫功能指標(biāo)的變化，探討兩種藥物聯(lián)合治療DN的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年7月～2016年7月在湖北省十堰市太和醫(yī)院內(nèi)分泌風(fēng)濕病科住院及門診患者120例，其中男69例，女51例；年齡46～66歲，平均（52.3±9.6）歲，病程2.4～7.1年，平均（4.6±2.2）年。入選患者均符合1999年世界衛(wèi)生組織（WHO）制訂的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，按Mogensen的DN分期標(biāo)準(zhǔn)診斷為DN微量白蛋白尿期，納入時(shí)患者尿白蛋白排泄率（urinary albumin excretionrate，UAER）為30～300 mg/24 h，持續(xù)時(shí)間超過(guò)半年。納入患者排除高血壓、心功能不全、嚴(yán)重肝腎功能異常及合并腫瘤者；排除發(fā)熱、感染、自身免疫性疾病及其他急慢性腎炎患者。治療期間不使用其他改善微循環(huán)的藥物及可能影響療效評(píng)價(jià)的藥物。按隨機(jī)、對(duì)照及雙盲臨床試驗(yàn)原則將入選的120例患者分為對(duì)照組和觀察組，對(duì)照組60例，其中男35例，女25例；年齡46～65歲，平均（56.4±8.5）歲；病程2.6～6.6年，平均（4.7±2.1）年。觀察組60例，其中男34例，女26例；年齡45～66歲，平均（53.4±10.5）歲；病程3.1～7.4年，平均（5.2±2.1）年。兩組患者性別、年齡及病程比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。

1.2 治療方法

對(duì)照組患者常規(guī)行降糖治療（諾和靈30R針，丹麥諾和諾德公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)：2015032872，30～60 U/d，分兩次餐前皮內(nèi)注射）；觀察組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上加用腎康注射液（西安嘉惠藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)：201506042）80 mL溶于0.9%氯化鈉注射液中靜脈滴注，1次/d，聯(lián)合使用前列地爾注射液（吉林省育華藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)：15010540）10 μg，溶解在100 mL 0.9%氯化鈉注射液中靜脈滴注，1次/d。兩組患者總療程均為14 d。

1.3 觀察指標(biāo)

血肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）檢測(cè)采用全自動(dòng)生化分析儀；尿白蛋白定量檢測(cè)采用雙縮脲法；尿β2-微球蛋白（β2-MG）檢測(cè)采用散射比濁法；尿微量白蛋白測(cè)定采用放射免疫法，計(jì)算UAER。外周血T淋巴細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）細(xì)胞的檢測(cè)采用流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)，流式細(xì)胞儀及配套試劑由普瑞麥迪實(shí)驗(yàn)室技術(shù)有限公司提供。炎癥細(xì)胞因子[白細(xì)胞介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）]檢測(cè)采用雙抗體夾心ELISA，試劑盒由武漢優(yōu)爾生生物科技有限公司提供；超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）檢測(cè)采用膠乳增強(qiáng)的免疫比濁法。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后腎功能和尿蛋白相關(guān)指標(biāo)比較

治療前，兩組患者Cr、BUN、UAER、β2-MG水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）；治療后，兩組患者Cr、BUN、UAER、β2-MG均較治療前降低，觀察組UAER、β2-MG較對(duì)照組降低更加顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 兩組患者治療前后血清TNF-α、IL-6、hs-CRP水平比較

治療前，兩組患者血清TNF-α、IL-6、hs-CRP水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）；治療后，兩組患者血清TNF-α、IL-6、hs-CRP均較治療前降低，觀察組較對(duì)照組降低更加顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 兩組患者治療前后外周血T細(xì)胞亞群比較

治療前，兩組患者外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）；治療后，兩組患者CD8+較治療前升高（P < 0.05），而CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較治療前降低（P < 0.05），觀察組CD4+、CD8+、CD4+/CD8+較對(duì)照組改善顯著（P < 0.05）。見(jiàn)表3。

3 討論

DN的發(fā)病機(jī)制涉及遺傳因素、代謝紊亂、血管內(nèi)皮功能障礙、氧化應(yīng)激和炎癥損傷等多個(gè)環(huán)節(jié)。較多研究提示2型糖尿病（T2DM）患者體內(nèi)不同程度存在炎癥因子IL-6、TNF-α及hs-CRP水平增加，并與脂肪細(xì)胞因子、內(nèi)分泌系統(tǒng)和氧化應(yīng)激效應(yīng)相互作用，誘發(fā)或加重胰島素抵抗，導(dǎo)致代謝紊亂和血管內(nèi)皮功能障礙，引起微血管病變，促進(jìn)DN的發(fā)生[4-5]。此外，T2DM患者的“微炎癥”狀態(tài)可能通過(guò)刺激機(jī)體免疫功能的活化，促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖，導(dǎo)致機(jī)體免疫平衡被破壞，通過(guò)細(xì)胞介導(dǎo)免疫損傷，加速早期DN腎臟損害[6]。

T淋巴細(xì)胞為異質(zhì)性免疫細(xì)胞群體，其介導(dǎo)的免疫應(yīng)答過(guò)程是機(jī)體細(xì)胞免疫的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。CD3分子構(gòu)成TCR/CD3復(fù)合體，為T細(xì)胞的特異性表面分子；CD4+T細(xì)胞識(shí)別MHCⅡ類分子所提呈的外源性抗原肽，活化后主要分化為T輔助細(xì)胞（Th）；CD8+T細(xì)胞識(shí)別MHCⅠ類分子所提呈的內(nèi)源性抗原肽，活化后主要分化為CTL，CD4+T細(xì)胞亞群是具有增強(qiáng)免疫反應(yīng)的作用[7]。CD8+T細(xì)胞亞群則具有免疫抑制作用，CD4+/CD8+比值是反映免疫調(diào)節(jié)的指標(biāo)[8]?？傊庵苎墒霻細(xì)胞在體內(nèi)進(jìn)行免疫應(yīng)答時(shí)互相協(xié)同，又相互拮抗以維持免疫應(yīng)答的相對(duì)平衡，當(dāng)免疫功能平衡失調(diào)時(shí)，可能產(chǎn)生一系列免疫損傷的病理變化，并導(dǎo)致DN病程的遷延、進(jìn)展[9-10]?；A(chǔ)研究表明，DN模型大鼠腎小球、腎間質(zhì)和腎小管等部位均可見(jiàn)CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞亞群分布異常，提示細(xì)胞免疫在DN發(fā)生的早期起重要的促進(jìn)作用[11]。吳曉燕等[12]研究提示，DN患者CD4+Th的Th1、Th2和Th0的數(shù)目和比例均存在病理性變化，這種免疫平衡的破壞與早期DN尿蛋白的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。

腎康注射液是由黃芪、大黃、丹參和紅花組成的成藥復(fù)合制劑，具有擴(kuò)張血管、活血祛瘀、祛濕熱毒等作用[13]。動(dòng)物研究表明，腎康注射液可有效改善DN大鼠腎臟炎性反應(yīng)，抑制腎小球基底膜增厚、纖維化[14]。此外，腎康注射液還可抑制系膜細(xì)胞肥大和增殖，減少細(xì)胞外基質(zhì)的堆積，改善腎臟微循環(huán)，減輕尿蛋白[15-16]。臨床研究則表明腎康注射液對(duì)DN患者氧化應(yīng)激損傷、脂代謝紊亂及高凝狀態(tài)等方面顯示出良好的治療作用[17]。前列地爾是一種前列腺素E1類似物，主要通過(guò)抑制血小板聚集，舒張血管平滑肌，抑制腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)活性，改善腎臟高灌注、高壓力及高濾過(guò)，故而被廣泛用于DN及糖尿病周圍血管病變等慢性并發(fā)癥的治療[18]。

本研究中，在胰島素降糖基礎(chǔ)上，兩組患者腎功能和尿蛋白指標(biāo)均有所改善，其治療作用可能與胰島素強(qiáng)化降糖后機(jī)體糖基化產(chǎn)物減少，胰島素抵抗減輕而產(chǎn)生的保護(hù)作用有關(guān)，提示胰島素降糖作為DN基礎(chǔ)治療的重要性[19-20]。與對(duì)照組比較，經(jīng)腎康注射液與前列地爾注射液聯(lián)合治療后，DN患者UAER、β2-MG顯著改善，結(jié)果與祁佳等[21]的報(bào)道相一致。兩組患者治療后體內(nèi)炎癥細(xì)胞因子TNF-α、IL-6和hs-CRP水平較治療前顯著降低，CD8+水平較治療前顯著增加，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較治療前顯著降低，且觀察組改善較對(duì)照組顯著，提示經(jīng)治療后DN患者機(jī)體炎癥狀態(tài)有所改善，且T淋巴細(xì)胞亞群分布更趨合理，免疫功能得以修復(fù)，其介導(dǎo)的免疫損傷效應(yīng)也相應(yīng)減弱。

綜上所述，腎康注射液聯(lián)合前列地爾注射液治療DN可能抑制機(jī)體炎性反應(yīng)，減少炎癥因子的生成，改善細(xì)胞免疫功能，減輕其介導(dǎo)的免疫應(yīng)答損傷，控制尿蛋白，改善腎功能，兩藥聯(lián)合治療早期DN，可能對(duì)疾病的發(fā)生、發(fā)展具有一定的防治作用，進(jìn)一步尚需通過(guò)更多的臨床與基礎(chǔ)研究證實(shí)。

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（收稿日期：2016-09-21 本文編輯：李亞聰）