地中海貧血兒童體內(nèi)微量元素的探討

劉冰 饒雪飛 曾赤佳

地中海貧血兒童體內(nèi)微量元素的探討

劉冰 饒雪飛 曾赤佳★

目的 探討地中海貧血兒童全血中鈣、銅、鐵、鎂、鋅、鎘、鉛元素含量，為營養(yǎng)膳食提供依據(jù)。 方法 選取2015年1～12月在佛山市禪城區(qū)中心醫(yī)院門診兒童333例，其中疾病組133例，對照組200例。采用廣東凱普生物科技股份有限公司α和β地中海貧血基因檢測試劑盒進行診斷，采用北京博暉創(chuàng)新光電技術(shù)股份有限公司的BH5100T型與H100T型微量元素分析儀測定微量元素含量。 結(jié)果 疾病組與對照組微量元素Ca、Fe、Mg、Pb、Zn呈正態(tài)分布，而Cd、Cu呈偏態(tài)分布。疾病組兒童全血中Ca、Cu、Zn含量明顯高于對照組，而Fe、Mg含量則低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。Cd、Pb含量無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。 結(jié)論 地中海貧血兒童微量元素鈣、鋅及銅與正常對照相比升高，鐵、鎂降低，提示地中海貧血兒童體內(nèi)微量元素分布異常，臨床需采取干預(yù)措施，避免微量元素異常引發(fā)疾病。

兒童；地中海貧血；微量元素

地中海貧血（簡稱地貧）是危害極大的遺傳性溶血性貧血之一，在我國南方特別是廣西、廣東、海南、云南、貴州等地區(qū)高發(fā)［1］，區(qū)域性流行病學調(diào)查顯示，兩廣地區(qū)地中海貧血病例數(shù)占全國的40%以上。由于貧血，地貧患兒生長發(fā)育遲緩是常見的并發(fā)癥之一［2］，微量元素雖然在人體內(nèi)的含量不多，但與生存和健康息息相關(guān)，攝入過量、不足、不平衡或缺乏都會不同程度地引起人體生理的異?；虬l(fā)生疾病，嚴重者可導(dǎo)致智力低下或發(fā)育異常［3］。因此，地中海貧血患兒全血微量元素水平的檢測可以及時發(fā)現(xiàn)其異常，通過采取干預(yù)措施，可有效避免微量元素異常引發(fā)的各類疾病。

1 資料與方法

1.1 研究對象

疾病組：根據(jù)《兒科學》（第7版）關(guān)于地中海貧血的診斷標準［4］，選取本院2015年1～12月兒保體檢確診為地中海貧血的兒童133例，年齡4～12個月，所有確診為地中海貧血的患兒均無輸血史。對照組：選取本院2015年1～12月兒保體檢年齡介于4～12個月的兒童，按照體檢日期，選取每月就診的前15名兒童，2015年12月選取當月就診的前35名兒童，共200例，該組兒童血常規(guī)、生化常規(guī)、小便常規(guī)均在正常參考范圍，研究對象基本資料見表1。

表1 333例研究對象基本資料Table 1 The basic data of 333 subjects in the study

1.2 方法

1.2.1 地中海貧血基因檢測

采集EDTA抗凝靜脈血2 mL，采用廣東凱普生物科技股份有限公司的α和β地中海貧血基因檢測試劑盒進行檢測?？蓹z測中國人常見的3種缺失型α地貧（--SEA、-α3.7和-α4.2），2種突變型α地貧（CS、QS）及11種突變型β地貧（CD41-42、CD43、IVS-II-654、CD17、CD14-15、-28、-29、CD71-72、βE、IVS I-1、CD27-28）。

1.2.2 微量元素檢測

采集肝素鈉抗凝靜脈血2 mL，全血鐵、鈣、鋅、鎂和銅采用BH5100T型北京博暉全血多元素分析儀測定；鉛、鎘元素采用BH2100T型北京博暉鎢舟元素分析儀測定，北京博暉生物有限公司提供配套試劑盒。

1.3 判讀標準

此次研究所用的試劑盒采用生物素標記的引物分別對α-珠蛋白基因缺失及基因突變區(qū)域和β-珠蛋白基因突變區(qū)域進行特異性擴增，將擴增產(chǎn)物與標記不同缺失或突變類型地中海貧血探針的尼龍膜特定位置上，制成檢測膜條，然后通過分子雜交反應(yīng)及顯色反應(yīng)，觀察檢測膜條上各位點信號的有無（信號為藍色斑點），判斷該探針是否與PCR產(chǎn)物雜交，從而確定待檢樣品基因型。

1.4 統(tǒng)計學處理

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行分析，微量元素結(jié)果以均值±標準差表示，用Kolmogorov-Smirnov法進行正常態(tài)性檢驗，正態(tài)分布數(shù)據(jù)采用t檢驗，偏態(tài)分布數(shù)據(jù)采用Mann-Whitney U檢驗，P＜0.05有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 地中海貧血基因類型分型

133例地貧有86例為α地貧，占64.66%，以東南亞缺失雜合子（--SEA/α α）為主；β地貧44例，占33.08%，以β41-42突變雜合子（β41-42/β）為主；α合并β地貧3例，占2.26%。地中海貧血基因類型及構(gòu)成比結(jié)果見表2。

2.2 地中海貧血兒童全血微量元素含量

對兩組兒童的微量元素結(jié)果進行正態(tài)性檢驗，顯示Ca、Fe、Mg、Pb、Zn呈正態(tài)分布，而Cd、Cu呈偏態(tài)分布。疾病組兒童Ca、Cu、Pb、Zn高于對照組，而Cd、Fe、Mg則低于對照組，兩組比較Ca、Cu、Fe、Mg、Zn，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），而Cd、Pb比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表3。

3 討論

地中海貧血是由于遺傳基因缺陷致使血紅蛋白中一種或一種以上珠蛋白鏈合成缺如或不足所導(dǎo)致的貧血或病理狀態(tài)，除了常見的Hb電泳的檢測方法，分子診斷技術(shù)對地中海貧血的診斷已十分成熟［5］。本研究通過基因檢測了133例地中海貧血標本，其中α地貧有86例，占64.66%；β地貧有44例，占33.08%；α合并β地貧3例，占2.26%，與林業(yè)輝等［6］研究結(jié)論相似。

本研究發(fā)現(xiàn)，地中海貧血兒童體內(nèi)微量元素含量的異常主要表現(xiàn)為鈣、銅、鋅元素升高，而鐵、鎂元素降低。其中，鐵、鈣、鎂、銅元素結(jié)論與李牡艷等［7］研究一致；鈣、鐵、鎂元素結(jié)論與王毅［8］、蔡敏敏等［9］研究一致。

表2 133例地中海貧血基因類型Table 2 The genotype of 133 patients with thalassemia

鐵元素在人體的功能表現(xiàn)有許多方面，鐵缺乏可引起兒童心理活動和智力發(fā)育的損害及行為改變，甚至可引起兒童不可逆的認知能力損害。本研究中地貧兒童鐵元素低于對照組（P＜0.05），可能與紅細胞血紅蛋白的珠蛋白肽鏈基因突變有關(guān)，導(dǎo)致珠蛋白肽鏈的合成抑制、失衡，引起無效造血和溶血性貧血，從而使地貧兒童對鐵的吸收量增多，由于鐵的利用率很低，因此造成貯存鐵增多而全血中鐵元素含量減少。輕型地貧兒童鐵負荷水平已有明顯升高，若長期不斷攝入鐵，必定會累積更高的鐵負荷，導(dǎo)致鐵在體內(nèi)的調(diào)節(jié)失代償［10］，但地貧患兒可能并發(fā)缺鐵，地貧并發(fā)缺鐵時，貧血的發(fā)生率會增高，且加重貧血的程度［11］。因此地貧兒童需密切關(guān)注體內(nèi)鐵負荷的狀態(tài)，選擇血清學相關(guān)的鐵代謝指標進行監(jiān)測。

鈣元素主要以骨鹽形式存在于骨骼和牙齒中，是神經(jīng)傳遞、肌肉收縮、血液凝結(jié)、激素釋放和乳汁分泌等所必需的元素，含量不足或過剩都會影響生長發(fā)育和健康。地貧兒童全血鈣元素含量高于正常對照組（P＜0.05），可能與兒童過量補鈣存在一定聯(lián)系，兒童多鈣使鐵鹽沉淀，妨礙鐵的吸收，引起血紅蛋白的合成減少，導(dǎo)致全血鐵下降，引發(fā)貧血［12］。

表3 地中海貧血兒童全血微量元素含量Table 3 The level of trace elements in thalassemia children

本研究顯示，地貧兒童銅元素高于對照組（P＜0.01）。分析原因：第一，地貧在合并缺鐵狀態(tài)下，機體內(nèi)多種依賴銅的活性酶受抑制，反射性地促進其他部位的銅代謝釋放入血以維持重要酶的活性，從而導(dǎo)致血銅升高［12］；第二，銅元素參與多種酶及蛋白的合成，在鐵離子的氧化、運輸、利用及催化血紅蛋白合成方面發(fā)揮重要作用［13］，而地貧患者鐵吸收和紅血蛋白合成均是增加的，這導(dǎo)致對銅的吸收增加，最終導(dǎo)致全血銅升高；第三，地貧患者體內(nèi)存在氧化應(yīng)激反應(yīng)，可導(dǎo)致Cu、Zn、SOD代償性升高［13］。

本研究還顯示，地貧兒童鋅元素含量高于對照組（P＜0.05），與以往的研究（無統(tǒng)計學差異）結(jié)論［7-9］不一致，查找支持本結(jié)論的文獻結(jié)論有Kajanachumpol S［14］報道兒童地貧紅細胞鋅升高；人體內(nèi)鐵和鋅存在協(xié)同吸收效應(yīng)，地貧兒童鐵吸收增加，促進對鋅的吸收增強；地貧患者體內(nèi)存在氧化應(yīng)激反應(yīng)，可導(dǎo)致Cu、Zn、SOD代償性升高［13］。

地貧兒童鎂元素低于對照組（P＜0.05），原因可能為鎂元素同鐵元素均為二價陽離子，地貧兒童鐵元素吸收增加會干擾鎂元素的吸收，導(dǎo)致全血鎂降低。鎘、鉛元素均為有毒元素，危害極大，本次結(jié)果顯示地貧兒童與對照組鎘、鉛含量無明顯差異（P＞0.05）。

綜上所述，地貧兒童體內(nèi)微量元素與正常兒童之間存在明顯的差異，臨床在糾正貧血的同時還應(yīng)注意微量元素的情況，做到早期測定、合理指導(dǎo)膳食、持續(xù)監(jiān)測，最大程度提高地貧兒童的生存質(zhì)量。由于個別地中海貧血基因類型病例數(shù)量較少，我們將會在日后的工作積累中繼續(xù)深入研究地貧患兒不同基因類型分型與微量元素分布情況之間的關(guān)系，更加全面地為臨床醫(yī)生提供數(shù)據(jù)資料。

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Study on trace elements in thalassemia children

LIU Bing，RAO Xuefei，ZENG Chijia★
（Department of Clinical Laboratory，Chancheng Centre Hospital，The Affiliated of Guangdong Medical University，F(xiàn)oshan，Guangdong，China，528031）

Objective To study the contents of calcium,copper,iron,magnesium,zinc,cadmium in whole blood of children with thalassemia,and to provide the basis for a nutritional diet. Methods From January to December in 2015,333 outpatients in Central Hospital of Foshan Chancheng District were selected, which included 133 cases in the disease group and 200 cases in control group.The α-and β-thalassemia genetic test kit of Hybribio was used for the diagnosis,and trace element content was determined by BH5100T and H100 T trace element analyzer of BoHui. Results The contents of Ca,Fe,Mg,Pb and Zn in 333 subjects were normally distributed,while Cd and Cu were skewed.The levels of Ca,Cu and Zn in the disease group were higher than levels of those in the control group,while the contents of Fe and Mg were lower(P＜0.05).There were no significant differences in the contents of Cd and Pb between the two groups(P＞0.05). Conclusion The levels of calcium,zinc and copper were increased compared with normal elements in thalassemia children, iron and magnesium levels were decreased.It is suggested that the distribution of trace elements in children with thalassemia is abnormal,and clinical intervention measures should be taken to avoid the disease caused by trace elements.

Children;Thalassemia;Trace elements

廣東醫(yī)科大學附屬佛山禪城中心醫(yī)院檢驗科，廣東，佛山528031

★通訊作者：曾赤佳，E-mail：zcjiacy@126.com