不同亞型HPV感染與女性宮頸疾病的相關(guān)性

梁艷華畢超★梁景耀唐明珠王煥麗鄧斌宋衛(wèi)忠

不同亞型HPV感染與女性宮頸疾病的相關(guān)性

梁艷華1畢超1★梁景耀1唐明珠2王煥麗1鄧斌1宋衛(wèi)忠1

目的 探討不同亞型HPV感染與女性宮頸疾病的相關(guān)性。 方法 選取本所2015年3月至2016年4月的2 360例宮頸疾病患者進(jìn)行21種亞型HPV檢測(cè)，其中包括5種低危亞型（LR-HPV）和16種高危亞型（HR-HPV），同時(shí)根據(jù)宮頸病病理活檢結(jié)果將宮頸疾病患者分為3組，宮頸炎組217例，宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）組118例，宮頸癌組36例。比較不同亞型HPV感染與女性宮頸疾病發(fā)病的關(guān)系。 結(jié)果 本研究中的2 360例宮頸疾病患者中檢測(cè)到HPV陽性患者371例，陽性率為15.7%，其中HPV單一感染203例（54.7%），多重感染168例（45.3%）。宮頸炎患者組HPV感染以HPV16（68.7%），HPV 52（13.0%），HPV31（5.2%），HPV11（3.5%）亞型為主，CIN組HPV感染以HPV6（69.2%），HPV33（6.2%），HPV52（6.2%），HPV58（6.2%）亞型為主，宮頸癌組HPV感染以HPV 16（65.2%），HPV53（13.0%），HPV58 （8.7%），HPV56（8.7%）亞型為主；HPV16型感染和HPV11型感染為導(dǎo)致宮頸炎發(fā)生的危險(xiǎn)因素（P＜0.01），HPV6型感染和HPV52型感染為導(dǎo)致CIN發(fā)生的危險(xiǎn)因素（P＜0.01），HPV16型感染和HPV58型感染為導(dǎo)致宮頸癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素（P＜0.01）。 結(jié)論 高危型HPV是導(dǎo)致宮頸癌，宮頸炎發(fā)生的危險(xiǎn)因素，低危型HPV是導(dǎo)致CIN發(fā)生的危險(xiǎn)因素，HPV分型與宮頸疾病的發(fā)生具有密切相關(guān)性。

亞型；HPV；宮頸病變；人乳頭癌病毒

人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是一種屬于乳頭多瘤空泡病毒科的乳頭瘤病毒A屬的雙鏈DNA病毒［1］。這種病毒可侵犯皮膚以及黏膜鱗狀上皮，感染HPV會(huì)導(dǎo)致多種宮頸疾病的發(fā)生，包括宮頸炎、宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）、宮頸癌等眾多危害女性健康的疾病，其中宮頸癌也是婦科最常見的惡性腫瘤之一［2-4］。HPV感染是導(dǎo)致這些疾病的重要因素，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了多種HPV的亞型，根據(jù)其危險(xiǎn)程度不同可分為高危型和低危型，不同亞型HPV感染可導(dǎo)致不同的女性宮頸疾病，且不同亞型HPV感染存在地域差異［5］。不同的亞型對(duì)宮頸疾病發(fā)病造成的影響不同，而且不同學(xué)者研究的結(jié)果存在一定的差異，因此有必要進(jìn)行本次研究，探討哪種亞型對(duì)宮頸疾病的發(fā)生占主導(dǎo)因素。本研究針對(duì)本所收集的病例進(jìn)行研究，研究不同亞型HPV感染與女性宮頸疾病的關(guān)系，為深入的研究提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1.1 一般資料

隨機(jī)選取本所2015年3月至2016年4月的2 360例宮頸疾病患者進(jìn)行研究，經(jīng)嚴(yán)格病理組織學(xué)檢測(cè)證實(shí)，其中HPV感染陽性婦女371例，將HPV檢測(cè)結(jié)果為陽性的樣本根據(jù)病理結(jié)果分為3組，其中為宮頸炎組217例，年齡20～70歲，平均（40.71±8.86）歲；宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）組118例，年齡21～65歲，平均（40.56±7.81）歲；宮頸癌組36例，年齡22～68歲，平均（40.76±7.90）歲。3組患者的年齡相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。病人納入標(biāo)準(zhǔn)：無HPV感染治療病史；無其他影響HPV檢測(cè)的病癥；未進(jìn)行過宮頸和盆腔治療；患者完全知情，并簽署知情同意書。排除妊娠期孕婦、正處于月經(jīng)期的宮頸疾病患者和存在心肝腎等器官嚴(yán)重疾病患者。

1.1.2 試劑

HPV檢測(cè)試劑盒購(gòu)自廣東凱普生物科技股份有限公司。

1.2 方法

1.2.1 采集標(biāo)本

HPV檢測(cè)前，所有患者在24 h內(nèi)不能進(jìn)行性生活，在窺陰鏡的觀察下將患者的宮頸充分暴露，然后用干棉簽將患者宮頸口的分泌物擦干凈，用標(biāo)本毛刷收集宮頸口脫落的細(xì)胞，將收集的樣本置于4℃的冰箱內(nèi)備用［6］。

1.2.2 HPV分型檢測(cè)

HPV分型檢測(cè)采用導(dǎo)流雜交HPV DNA檢測(cè)法［7］進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)21種HPV亞型，包括16種高危亞型：HPV 16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、HPV52（MM4）亞型，5種低危亞型：HPV 6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV44。

1.2.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)［8］

通過觀察芯片薄膜（在芯片薄膜的質(zhì)控點(diǎn)正常的基礎(chǔ)上）HPV亞型分布的相應(yīng)著色點(diǎn)獲得研究結(jié)果，呈現(xiàn)清晰的藍(lán)紫色圓點(diǎn)可判斷檢測(cè)結(jié)果為陽性點(diǎn)。判斷陽性點(diǎn)為何種HPV亞型。一種HPV亞型感染的為單一感染，兩種及兩種以上HPV亞型感染的為多重感染。

1.2.4 宮頸疾病病理學(xué)活檢

由具有經(jīng)驗(yàn)且專業(yè)的婦產(chǎn)科醫(yī)師負(fù)責(zé)陰道鏡下宮頸疾病的病理學(xué)活檢，患者需排空膀胱以窺陰器充分暴露宮頸。將陰道內(nèi)過多分泌物用干棉簽拭去，調(diào)整好陰道鏡的距離、焦距和放大倍數(shù)，先肉眼觀察宮頸有無糜爛、出血、贅生物等病變。然后用3%醋酸涂于宮頸行醋酸試驗(yàn)，異常者攝像保存。再用1%碘溶液涂于宮頸行碘試驗(yàn)，觀察發(fā)生病變的周圍邊界及表面形態(tài)，對(duì)碘試驗(yàn)異常區(qū)域行多點(diǎn)可疑處活檢。填寫患者基本信息，標(biāo)本置于10%福爾馬林固定后送病理科登記檢査。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)結(jié)果用n%進(jìn)行表示，組間比較采用兩組獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，方差齊用方差分析，方差不齊用秩和檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，回歸分析采用單因素非條件Logistic回歸檢驗(yàn)方法，以α= 0.05為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，OR＞1為危險(xiǎn)因素，OR＜1為保護(hù)因素。

2 結(jié)果

2.1 宮頸病變嚴(yán)重程度與感染分型比較

2 360例宮頸疾病患者中檢測(cè)到HPV陽性患者371例，陽性率為15.7%，其中單一感染203例（54.7%），多重感染168例（45.3%），見表1。宮頸炎組和宮頸癌組主要為高危型HPV感染，CIN組主要為低危型HPV感染，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。具體見表2。

表1 各組患者HPV感染比較［n（%）］Table 1 Comparison of HPV infection in each group ［n（%）］

表2 各組患者HPV感染分型比較［n（%）］Table 2 Comparison of positive rate of HPV infection in each group［n（%）］

2.2 HPV亞型在不同宮頸疾病中的分布狀況

HPV亞型在不同宮頸病變中的分布狀況（以單一感染數(shù)統(tǒng)計(jì)）見表2，由表2可以看出，宮頸炎患者組HPV感染以HPV 16（65.5%），HPV 52 （12.2%），HPV31（6.8%），HPV11（3.4%）亞型為主，CIN組 HPV感染以 HPV 6（63.3%），HPV33 （6.7%），HPV52（6.7%），HPV58（6.7%）亞型為主，宮頸癌組HPV感染以HPV 16（64.0%），HPV53 （12.0%），HPV58（8.0%），HPV56（8.0%）亞型為主。

2.3 不同亞型HPV感染與宮頸癌的相關(guān)性

根據(jù)單因素分析中占的比例比較高的HPV16、HPV53、HPV58、HPV56亞型得到的結(jié)果進(jìn)行Logistic回歸模型分析，結(jié)果顯示HPV16型感染和HPV58型感染是導(dǎo)致宮頸癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素（P＜0.01），見表4。

表3 HPV亞型在不同宮頸疾病中的分布狀況［n（%）］Table 3 Ddistribution of HPV subtypes in different cervical diseases［n（%）］

表4HPV感染與宮頸癌的相關(guān)性Table 4 Correlation between HPV infection and cervical cancer

2.4 不同亞型HPV感染與CIN的相關(guān)性

根據(jù)單因素分析中占的比例比較高的HPV6、HPV33、HPV52、HPV58結(jié)果進(jìn)行Logistic回歸模型分析，結(jié)果顯示HPV6型感染及HPV52型感染是導(dǎo)致CIN發(fā)生的危險(xiǎn)因素（P＜0.01），具體結(jié)果見表5。

2.5 不同亞型HPV感染與宮頸炎的相關(guān)性

根據(jù)單因素分析中占的比例比較高的HPV16、HPV52、HPV31、HPV11結(jié)果進(jìn)行Logistic回歸模型的分析，結(jié)果顯示，HPV16型感染及HPV11型感染是導(dǎo)致宮頸炎發(fā)生的危險(xiǎn)因素（P＜0.01），具體結(jié)果見表5。

表5HPV感染與CIN的相關(guān)性Table 5 Correlation between HPV infection and CIN

表6HPV感染與宮頸炎的相關(guān)性Table 6 Correlation between HPV infection and cervicitis

3 討論

`宮頸疾病是危害女性的重要疾病，其中宮頸炎、宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌是常見的幾種宮頸疾?。?］，HPV感染能夠引起主要的生殖系統(tǒng)疾病，HPV在癌癥發(fā)展中的作用已被廣泛研究［10］。有研究［11］報(bào)道宮頸癌中不同HPV亞型中的高危型的陽性率比較高，而低危型的陽性率比較低?？梢姼呶Ｐ虷PV是宮頸癌的發(fā)病的主要因素。宮頸疾病中的宮頸炎也與HPV感染有關(guān)，研究認(rèn)為高危型的HPV感染對(duì)宮頸炎的發(fā)生起到關(guān)鍵作用［12］。本研究的結(jié)果也表明宮頸癌和宮頸炎患者的發(fā)病原因主要是因?yàn)楦呶Ｐ虷PV感染，這也和前人的研究基本吻合［13］。

宮頸上皮內(nèi)瘤變是癌前病變的總稱，主要包括宮頸不典型增生和宮頸原位癌，是發(fā)展到宮頸癌的一系列變化的過程。宮頸上皮內(nèi)瘤變的發(fā)病與HPV感染有關(guān)，而有研究［12］認(rèn)為低危型HPV感染是導(dǎo)致該病發(fā)生的原因，可能的原因是不同的疾病發(fā)病程度對(duì)不同亞型的HPV感染具有一定影響，而且也與患者的體質(zhì)有一定的關(guān)系。但也有學(xué)者［14］認(rèn)為高危型HPV感染的影響比較大，本研究結(jié)果顯示高危型HPV感染的比例為52.8%（196/371）略高于低危型47.2%（175/371），與此研究報(bào)道一致。

不同亞型HPV感染的基因型中比較常見的是高危型16個(gè)，低危型5個(gè)，不同的基因型也會(huì)對(duì)宮頸疾病的發(fā)生有不同的影響。研究［15］發(fā)現(xiàn)高危型中的HPV16對(duì)宮頸疾病的發(fā)生比較重要，尤其在宮頸癌和宮頸炎的發(fā)病中具有重要作用。本研究顯示宮頸炎組感染的主要HPV亞型是高危型HPV16、HPV52、HPV33和低危型HPV11，宮頸癌組感染的主要是高危型HPV16、HPV53、HPV58、HPV56，宮頸上皮內(nèi)瘤變的發(fā)生主要是低危型HPV6和高危型HPV33，HPV52，HPV58。本研究的結(jié)果和其他研究［16］的結(jié)果存在一定的差異，可能的原因是生殖道HPV感染有HPV亞型單一感染與HPV亞型多重感染。關(guān)于HPV亞型多重感染的比例方面，每個(gè)學(xué)者得到的結(jié)果也存在一定的差異，可能的原因是與研究對(duì)象及地域有一定關(guān)系，同時(shí)也有可能與不同檢測(cè)方法的有一定的關(guān)系［17］。本研究的結(jié)果顯示宮頸癌的發(fā)生與不同HPV感染的多因素分析中發(fā)現(xiàn)，宮頸上皮內(nèi)瘤變發(fā)生的危險(xiǎn)因素是HPV6和HPV52感染，宮頸癌的發(fā)生危險(xiǎn)因素是HPV16和HPV58感染，導(dǎo)致宮頸炎發(fā)生的危險(xiǎn)因素是HPV16型感染和HPV11型感染。由此可見，宮頸疾病的發(fā)生與多個(gè)不同亞型HPV感染有著密切的關(guān)系。

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Relationship between different subtypes of HPV infection and cervical disease in female

LIANG Yanhua1,BI Chao1★,LIANG Jingyao1,TANG Mingzhu2,WANG Huanli1,DENG Bin1,SONG Weizhong1
（1.Guangzhou Institute of Dermatology，Guangzhou，Guangdong，China，510000；2.Guangzhou DaAn Clinical Laboratory Center Co.Ltd.,Guangzhou,Guangdong,China,510000）

Objective To study the relationship between infection with the different subtypes of human papillomavirus(HPV)and cervical disease. Methods From March 2015 to April 2016,2 360 cases of cervical disease were studied.Twenty-one subtypes of HPV were detected,including 5 low-risk subtypes(LRHPV)and 16 high-risk subtypes(HR-HPV),according to cervical biopsy results HPV positive women were divided into 3 groups,cervicitis group was 217 cases,cervical intraepithelial neoplasia(CIN)group was 118 cases,cervical cancer group was 36 cases.The relationship between different subtypes of HPV infection and cervical disease was analyzed. Results In the 2 360 cases of cervical disease analyzed,371 patients were HPV positive,for a positive rate of 15.7%,of which 203 cases(54.7%)were of single-subtype infection,and multiple infection occurred in 168 cases(45.3%).In the patients with cervicitis,infection with HPV 16（68.7%），HPV52（13.0%），HPV31（5.2%），and HPV11（3.5%）were detected.In the cervical intraepithelial neoplasia patients,subtypes HPV6（69.2%），HPV33（6.2%），HPV52（6.2%），and HPV58（6.2%）were detected.Among the cervical cancer patients,infection with HPV 16（65.2%），HPV53（13.0%），HPV58（8.7%），and HPV56 （8.7%）subtypes were found.Subtype HPV6 and HPV52 infection are risk factors for CIN(P＜0.01)and type HPV16 infection and type HPV58 infection are risk factors that lead to the occurrence of cervical cancer(P＜0.01). Conclusion The high risk HPV subtypes are risk factors for cervical cancer and cervicitis,while the low risk HPV is a risk factor for CIN.HPV infection is closely related to the occurrence of cervical disease.

Subtype;HPV;Cervicitis;Cervical cancer

1.廣東省廣州市皮膚病防治所，廣東，廣州510095 2.廣州達(dá)安臨床檢驗(yàn)中心，廣東，廣州510000

★通訊作者：畢超，E-mail：biccc916@sina.com