探討抗癆膠囊劑體內(nèi)外抗肺結(jié)核作用

張麗麗

【中圖分類號】R512.62 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B 【文章編號】2095-6851（2017）04-0-01

肺結(jié)核（pulmonary tubereulosis）是由結(jié)核桿菌引起的慢性肺部感染，常在機體抵抗力降低和細(xì)胞介導(dǎo)的變態(tài)反應(yīng)性增高時發(fā)病。目前全球已有1/3人口約17億人感染結(jié)核病，現(xiàn)有結(jié)核患者2000萬。每年發(fā)生新患者約800萬，每年死于結(jié)核病者約300萬人。我國三次肺結(jié)核流行病學(xué)抽樣調(diào)查表明，活動性肺結(jié)核患病率：1979年為717/10萬，1984年為550/10萬，1990年為523/10萬[1]。近年來，由于耐藥菌株的增加，許多以前能有效防治結(jié)核的西藥的療效受到了很大的限制，肺結(jié)核已經(jīng)成為一種引起國際上高度重視的傳染病。中醫(yī)認(rèn)為本病歸屬“肺癆”范疇，是由于癆蟲侵蝕肺葉引起的一種具有傳染性的慢性衰弱性疾病。在治療上多采取扶正驅(qū)邪的方法，收到了較好的療效?？拱A膠囊由百部、黃芪等數(shù)味中藥組成，該方在臨床用于肺結(jié)核的輔助治療中取得了較好效果，本文擬報告該藥的部分實驗研究結(jié)果如下。

1.材料和方法

1.1 試驗藥品 抗癆膠囊劑：1g浸膏相當(dāng)于6.42g原生藥，由四川省中藥研究所藥化室提供。臨用前用蒸餾水配成所需濃度的混懸液備用，本實驗劑量按g原生藥/kg計算。

利福平（RPP）膠囊：0.15g×100粒，成都錦華藥業(yè)有限公司出品，批號為080912，有效期至2010-08，臨用前用0.5%CMC配成所需濃度的混懸液備用。

1.2 試驗菌株 H37RV標(biāo)準(zhǔn)菌（ATCC27294）：牛型分支桿菌；單耐RFP菌；單耐INH菌；單耐SM菌；耐INH+SM+RFP菌；均由中國疾病預(yù)防控制中心結(jié)核病預(yù)防控制分中心提供。

2.實驗動物

豚鼠：一級動物；雌雄各半，體重：300～320g。生產(chǎn)許可證號：15號，由四川省實驗動物研究所提供。

3.實驗環(huán)境

四川省中藥研究所藥理實驗室，清潔級動物使用環(huán)境，合格號為：醫(yī)動字第24103117號。

4.方法與結(jié)果

4.1 對細(xì)菌生長的影響

4.1.1 體外對結(jié)核菌生長的影響 最小抑菌濃度（MIC）的測定[2，3]：采用試管法，將藥物分別加入蘇通培養(yǎng)基內(nèi)后，加入定時的菌液（1mg/ml，每支接種0.1ml），經(jīng)37℃培養(yǎng)2周后，每支吸0.1ml轉(zhuǎn)種于2支改良羅氏（L-J）培養(yǎng)基斜面同時設(shè)空白對照管。在含藥蘇通培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)2周見細(xì)菌生長的最小濃度為最小抑菌濃度。

最小殺菌濃度（MBC）的測定：將在蘇通培養(yǎng)基內(nèi)未見細(xì)菌生長的培養(yǎng)物，分別吸取0.05ml接種于改良羅氏（L-J）斜面，經(jīng)37℃培養(yǎng)4周后，所接種的2支培養(yǎng)基斜面上的菌落數(shù)之和少于5個的最小稀釋度的藥物濃度為該藥的最小殺菌濃度。

4.1.2 體內(nèi)對結(jié)核感染豚鼠的作用 豚鼠經(jīng)PPD測試陰性后，隨機分組，分別灌胃抗癆膠囊20g/kg、10g/kg、5g/kg；利福平50mg/kg及等量蒸餾水，1次/d，連續(xù)45D。在給藥后2周，除對照組外，在各豚鼠蹊部皮下注射菌懸液0.5ml/只（將1mg/ml的菌懸液稀釋100倍）使動物感染結(jié)核桿菌。在末次給藥后24h處死動物，解剖肉眼計數(shù)每個臟器的結(jié)核結(jié)節(jié)，取肺臟、肝臟及脾臟稱濕重并計算其臟器指數(shù)，然后稱取一定量的組織做勻漿以便做結(jié)核菌培養(yǎng)，同時將各組織置于10%福爾馬林中固定并做切片以便做HE染色和Z-N染色彩。

取肝臟組織、脾臟組織和肺組織置于10%福爾馬林中固定后，用石蠟包埋，切片，進(jìn)行抗酸染色（即Z-N染色）以顯示組織中的結(jié)核菌數(shù)量，染色后讀片，并按下述標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行打分：0分，未見抗酸桿菌；1分：3～9條/100個視野；2分：1～10條以上/每視野，然后用秩和檢驗進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。，抗癆膠囊均有減少各臟器的抗酸桿菌數(shù)量的趨勢，但與模型組比較無統(tǒng)計學(xué)差異。

5.小結(jié)

我國是世界22個結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家之一，結(jié)核病患者數(shù)量居世界第2位。2000年第四次全國結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查顯示，全國活動性肺結(jié)核患者病率為367/10萬[4]。隨著結(jié)核病的高發(fā)，在抗結(jié)核治療過程中引起的藥物性肝損害也明顯增加，抗結(jié)核藥所致的肝損害已成為我國藥物性肝損害的重要原因[5]。目前抗結(jié)核治療方案仍以異煙肼、利福平及乙胺丁醇聯(lián)合應(yīng)用為主，這些藥物均可引起肝損害，甚至發(fā)生急性肝壞死致肝功能衰竭而死亡。因此從其他途徑尋找毒性小并能有效防治肺結(jié)核的藥物已是醫(yī)藥工作者主要研究課題之一。中藥的特點是成分復(fù)雜，能從多方面起作用，達(dá)到根治疾病的目的。本項目擬從中藥研究開發(fā)一個能有效防治肺結(jié)核的藥物，本研究結(jié)果顯示抗癆膠囊無論是體外或體內(nèi)均可顯著抑制結(jié)核菌的生長。現(xiàn)代研究表明百部有抑制結(jié)核桿菌生長的作用，而黃芪具有調(diào)節(jié)機體免疫功能的作用。其原因有待進(jìn)一步探討。

參考文獻(xiàn)

[1] 姚石安.中醫(yī)治療肺結(jié)核新方評析.浙江中醫(yī)雜志，1993，4：187.

[2] 徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實驗方法學(xué).人民衛(wèi)生出版社出版，2002：1712-1720.

[3] 盧潤生，劉傳金，漆浩珊，等.結(jié)核菌實驗動物模型探討.中國防癆通訊，1990，12（3）：118.

[4] 劉敬東.結(jié)核病的“復(fù)燃”及其防治對策.國外醫(yī)學(xué)流行病學(xué)傳染病學(xué)分冊，2004，31（6）：321.

[5] 吳苑珊，鄭金琨，黎月玲，等.509例藥源性肝損文獻(xiàn)分析.藥物不良反應(yīng)雜志，2002，4（6）：364.